化療藥物體外誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的研究

1、    化療藥物體外誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的研究        【摘要】目的研究化療藥物誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的作用及其與Bcl-2表達(dá)、臨床預(yù)后指標(biāo)及臨床療效的關(guān)系。方法利用形態(tài)學(xué)觀察、DNA瓊脂糖凝膠電泳、凋亡指示抗體APO 2.7結(jié)合流式細(xì)胞儀檢測(cè)法，研究臨床治療相關(guān)劑量的化療藥物誘導(dǎo)急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)細(xì)胞、急性混合性白血病(HAL)細(xì)胞的凋亡及其Bcl-2表達(dá)率。結(jié)果(1)用臨床治療相關(guān)劑量的長(zhǎng)春新堿(VCR)、地塞米松(Dex)、柔紅霉素(DNR)、阿糖胞苷(Ar

2、a-C)作用2024 h后，多數(shù)患兒（分別為22/24、19/24、6/11、6/6）的白血病細(xì)胞可發(fā)生凋亡。但是DNR引起部分患兒（3/11）的白血病細(xì)胞發(fā)生壞死。(2)VCR組與Dex組以及Ara-C組與Dex組的誘導(dǎo)凋亡率呈高度正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.821(P<0.001)和0.994(P<0.001）。(3)新鮮離體白血病細(xì)胞的凋亡率為(3.2±1.9)%。ALL及HAL細(xì)胞體外培養(yǎng)24 h后的自發(fā)凋亡為(18.2±13.5)%，且與VCR，Dex及Ara-C的誘導(dǎo)凋亡率呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.878（P<0.001）、0.893（P<

3、;0.001）、0.882（P<0.05）。(4)CD34是影響白血病細(xì)胞凋亡率的獨(dú)立指標(biāo)。陽性組（CD3430%）的VCR、Dex誘導(dǎo)凋亡率及自發(fā)凋亡率明顯低于陰性組。(5)白血病細(xì)胞的Bcl-2表達(dá)率與藥物誘導(dǎo)凋亡率及自發(fā)凋亡率無負(fù)相關(guān)關(guān)系。結(jié)論誘導(dǎo)凋亡是臨床治療相關(guān)劑量的化療藥物殺傷白血病細(xì)胞的重要機(jī)制。【關(guān)鍵詞】脫噬作用；白血病；抗腫瘤藥 Apoptosis of leukemic cells induced by chemotherapeutic drugs in vitroCHENG Jinrong, ZHAO Xinmin, ZHENG Huyong（Beijing Chi

4、ldrens Hospital Affiliated to Capital University of Medical Sciences, Beijing 100045, China）【Abstract】ObjectiveTo study the ability of the chemotherapeutic drugs for inducing apoptosis and its relation to the Bcl-2 expression of leukemic cells, the prognostic factors and the efficacy of clinical tre

5、atment. MethodsThe morphologic study, agarose gel electrophoresis and flow cytometry were utilized to investigate the apoptosis of acute lymphoid leukemia (ALL) and hemoblastocy acute leukmia (HAL) cells induced by vincristine (VCR), dexamethasone (Dex), cytosine arabinoside (Ara-C) and daunorubicin

6、 (DNR) at clinically relevant dosage. The flow cytometry was also used to study the expression of Bcl-2 on leukemic cells.Results(1) Exposure of leukemic cells to clinically relevant concentrations of VCR, Dex, Ara-C and DNR for 2024 hours resulted in apoptosis in most patients (22/24, 19/24, 6/11 a

7、nd 6/6, respectively). Necrosis was found in leukemic cells of some patients (3/11) on DNR treatment. (2)The proportion of apoptotic cells induced by some chemotherapeutic drugs showed positive correlations with each other. The correlation coefficient of apoptotic rate in VCR group and Dex group was

8、 0.821 (P<0.001), in Ara-C group and Dex group was 0.994 (P<0.001). (3)The apoptotic rate of fresh leukemic cells was (3.2±1.9)%. ALL and HAL cells cultured for 24 hours in vitro would develop spontaneous apoptosis in (18.2±13.5)%. The spontaneous apoptosis rate correlated positively

9、 to the apoptosis rates induced by VCR, Dex and Ara-c, the relevant coefficients were 0.878 (P<0.001), 0.893 (P<0.001) and 0.882 (P<0.05), respectively. (4)CD34 was an independent factor influencing apoptotic rates, the apoptotic rate was significantly lower in CD34 positive group (CD3430%)

10、 than that in CD34 negative group. (5)There was no relationship between the expression of Bcl-2 and the apoptic rate of leukemic cells. ConclusionInducing apoptosis is an important mechanism of killing leukemic cells by chemotherapeutic drugs.【Key words】Apoptosis; Leukemial; Antineoplastic agents近年來

11、的研究發(fā)現(xiàn)白血病的發(fā)生和化療藥物導(dǎo)致的白血病細(xì)胞死亡，都與細(xì)胞凋亡有密切關(guān)系。細(xì)胞凋亡是基因控制下的細(xì)胞主動(dòng)死亡過程，現(xiàn)已證實(shí)幾乎所有化療藥物在體內(nèi)和體外都能通過細(xì)胞凋亡機(jī)制殺死白血病細(xì)胞1,2?；熕幬锏目拱┬Ч粌H取決于藥物對(duì)靶細(xì)胞的直接作用，更在于其誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的能力。我們研究了幾種常用化療藥物在臨床治療相關(guān)劑量下對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)細(xì)胞及急性混合性白血病(HAL)細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用及其與臨床預(yù)后因素的關(guān)系。對(duì)象及方法一、對(duì)象1.病例選擇：我院1997年10月1998年3月住院的初治ALL及HAL患兒共24例。男13例，女11例；年齡4個(gè)月13歲，平均年齡6歲7個(gè)月。根據(jù)F

12、AB標(biāo)準(zhǔn)，24例初治患兒全部為ALL，其中L1型 2例，L2型 18例，L3型 4例。23例初診時(shí)進(jìn)行免疫分型，其中B系19例，T系4例。依據(jù)Catovsky雙表型急性白血病積分法判定其中4例為HAL。2.正常對(duì)照：共10例，男5例，女5例；年齡110歲，平均年齡6歲7個(gè)月。骨髓取自骨科畸形矯形手術(shù)中的切除骨。二、主要試劑1.單克隆抗體: 標(biāo)記熒光素藻紅蛋白(PE)的APO 2.7及IgG1。純凈的APO 2.7，Bcl-2 (購自Immunotech公司，法國),標(biāo)記熒光素異硫氰酸熒光素(FITC)的羊抗鼠二抗 (購自Dako公司，丹麥)。2.DNA瓊脂糖凝膠電泳試劑：溶液1含10 mmol

13、/L的Tris-Cl (pH 7.6),10 mmol/L KCl,10 mmol/L 的MgCl2; 溶液2含10 mmol/L Tris-Cl (pH7.6), 10 mmol/L 的KCl,10 mmol/L 的MgCl2, 0.5 mol/L 的NaCl, 0.5%的SDS, 2 mmol/L 乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA); 5×TBE ,TE , 分子標(biāo)記物： DNA/EcoR I+Hind III(北京中山生物技術(shù)公司產(chǎn)品)。3.其他：毛地黃皂苷為Sigma產(chǎn)品；BFA膜處理劑含0.02 mol/L 的PBS （pH 7.2）45 ml、甲醛10 ml、丙酮45 ml；

14、淋巴細(xì)胞分層液（比重：1.077）。三、方法1.白血病患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞懸液制備及培養(yǎng)：取肝素抗凝的骨髓液23 ml，用淋巴細(xì)胞分層液常規(guī)分離單個(gè)核細(xì)胞，用含20%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)液約10 ml調(diào)整細(xì)胞濃度為3×105/ml，加入用生理鹽水配制的臨床治療相關(guān)劑量的化療藥物0.1 ml，使其終濃度分別為長(zhǎng)春新堿(VCR) 1.0 g/ml，地塞米松(Dex) 5.0 g/ml,柔紅霉素(DNR) 10 g/ml,阿糖胞苷(Ara-C) 50 g/ml；生理鹽水對(duì)照組(自發(fā)凋亡組)加入0.1 ml滅菌生理鹽水(NS),在37，5%CO2孵箱飽和濕度下培養(yǎng)3。2.形態(tài)學(xué)方法

15、檢測(cè)凋亡：體外培養(yǎng)的白血病細(xì)胞經(jīng)姬姆薩染色和蘇木精染色后油鏡下觀察。3.DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)凋亡：生理鹽水對(duì)照組，VCR，Dex，Ara-C組白血病細(xì)胞體外培養(yǎng)4044 h和DNR組白血病細(xì)胞體外培養(yǎng)2024 h后收集細(xì)胞，提取DNA進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳觀察4。4.用流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡細(xì)胞的比例：在體外培養(yǎng)24 h的生理鹽水對(duì)照組、VCR、Dex、Ara-C組白血病細(xì)胞，新鮮白血病細(xì)胞和正常兒童單個(gè)核細(xì)胞用毛地黃皂苷破膜后以直接法標(biāo)記凋亡指示抗體APO 2.7，體外培養(yǎng)的DNR組白血病細(xì)胞用毛地黃皂苷破膜后以間接法標(biāo)記凋亡指示抗體APO 2.7(由于DNR有自發(fā)紅熒光)。最后用FACscan

16、流式細(xì)胞儀進(jìn)行數(shù)據(jù)分析5。5.白血病細(xì)胞和正常兒童骨髓單個(gè)核細(xì)胞Bcl-2的表達(dá)：在1×106細(xì)胞懸液0.1 ml中加入1%多聚甲醛0.5 ml及BFA膜處理劑各0.5 ml，室溫放置5 min后用間接法標(biāo)記Bcl-2單抗，然后用FACscan流式細(xì)胞儀檢測(cè)。四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，成組t檢驗(yàn)，方差分析，卡方檢驗(yàn)，秩和檢驗(yàn)，相關(guān)分析及多元逐步回歸分析。結(jié)果一、形態(tài)學(xué)表現(xiàn)光鏡下細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變主要是染色質(zhì)凝聚、核固縮斷裂、細(xì)胞漿濃縮，但細(xì)胞膜保持完整。隨化療藥物種類及作用時(shí)間的不同，細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變亦不完全相同，并呈階段性改變。用臨床治療相關(guān)劑量的

17、VCR、Dex、DNR、Ara-C作用2024 h 后，多數(shù)患兒（分別為 22/24、19/24、6/11、6/6）的白血病細(xì)胞可出現(xiàn)細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變，主要是早、中期凋亡細(xì)胞，而晚期凋亡細(xì)胞極少見。但部分患兒（3/11）的白血病細(xì)胞加入DNR培養(yǎng)2024 h即出現(xiàn)以細(xì)胞壞死為主的表現(xiàn)。二、DNA瓊脂糖凝膠電泳表現(xiàn)用臨床治療相關(guān)劑量的不同化療藥物作用于不同患兒的白血病細(xì)胞后，在瓊脂糖凝膠電泳上出現(xiàn)“梯狀”條帶(說明發(fā)生細(xì)胞凋亡)的時(shí)間和清晰度有很大差異。多數(shù)患兒（6/11）的白血病細(xì)胞用DNR作用2024 h后，凝膠電泳上可出現(xiàn)“梯狀”條帶，但少部分患兒 （3/11） 的白血病細(xì)胞，此時(shí)電泳

18、即出現(xiàn)彌漫膜狀條帶（說明發(fā)生細(xì)胞壞死）。而應(yīng)用VCR、Dex、Ara-C作用的白血病細(xì)胞約4044 h后才出現(xiàn)典型的“梯狀”條帶，且不如用DNR作用的白血病細(xì)胞的條帶清晰。三、凋亡指示抗體APO 2.7檢測(cè)細(xì)胞凋亡率單克隆抗體APO 2.7(anti-7A6)是一種新型的檢測(cè)早期凋亡的指示抗體5。新鮮離體的白血病細(xì)胞與正常兒童骨髓單個(gè)核細(xì)胞的凋亡率均在較低水平，分別為(3.2±1.9)%和(4.3±1.8)%。化療藥物處理白血病細(xì)胞1015 h后，用APO 2.7單抗結(jié)合流式細(xì)胞儀即可檢測(cè)出凋亡，而此時(shí)形態(tài)學(xué)及DNA瓊脂糖凝膠電泳均不能檢出明顯凋亡。白血病細(xì)胞在體外不加入化

19、療藥物培養(yǎng)也能發(fā)生自發(fā)凋亡，其與臨床治療相關(guān)劑量的VCR、Dex、Ara-C作用白血病細(xì)胞24 h后的誘導(dǎo)凋亡率呈正相關(guān)關(guān)系(表1）。表1不同化療藥物誘導(dǎo)白血病細(xì)胞的凋亡率與其相應(yīng)的自發(fā)凋亡率的關(guān)系化療藥物配對(duì)數(shù)細(xì)胞凋亡率(±s，%)配對(duì)比較P值兩組凋亡率相關(guān)系數(shù)r相關(guān)性檢驗(yàn)P值實(shí)驗(yàn)組生理鹽水對(duì)照組VCR2430.4±3.918.2±2.80.000*0.8780.000*Dex2430.7±5.118.2±2.80.000*0.8930.000*DNR1129.9±7.014.2±2.80.0570.1060.756Ara

20、-C621.5±6.012.1±2.20.0770.8820.020*注：*差異有極顯著性，* 差異有顯著性；生理鹽水對(duì)照組即自發(fā)凋亡組 VCR、Dex、Ara-C三者的凋亡誘導(dǎo)率呈高度正相關(guān)。VCR和Dex組（n=24）的相關(guān)系數(shù)為0.821 (P<0.001)，Ara-C和Dex組（n=6）的相關(guān)系數(shù)為0.994 (P<0.001)。根據(jù)流式細(xì)胞儀結(jié)合凋亡指示抗體APO 2.7檢測(cè)凋亡百分率（APO 2.7表達(dá)率）來判斷白血病細(xì)胞對(duì)藥物誘導(dǎo)凋亡的敏感性（表2），VCR與Dex組的凋亡敏感性也呈高度正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r為0.846 (P<0.001)。AL

21、L組與HAL組之間對(duì)化療藥物VCR及Dex的凋亡誘導(dǎo)率差異無顯著性,P值分別為0.345和0.569。表224例患兒白血病細(xì)胞對(duì)VCR和Dex誘導(dǎo)凋亡敏感性的對(duì)照（例數(shù)）VCR組敏感性Dex組敏感性合計(jì)不敏感低度敏感中度敏感高度敏感不敏感22低度敏感3328中度敏感415高度敏感189合計(jì)573924注：相關(guān)系數(shù)rs為0.846(P<0.001)；高度敏感：凋亡百分率30%；中度敏感：凋亡百分率20%29%；低度敏感：凋亡百分率10%19%；不敏感：凋亡百分率10% 結(jié)合細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察及DNA電泳檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)治療相關(guān)劑量的DNR對(duì)白血病細(xì)胞的作用機(jī)制與VCR、Dex、Ara-C的機(jī)制有所不

22、同，11例中6例患兒表現(xiàn)為誘導(dǎo)凋亡為主，3例表現(xiàn)為引起壞死為主，2例無明顯作用。三者的APO 2.7表達(dá)率差異有顯著性，平均秩次分別為8.3、3.7和2.5(P=0.035)。三者的錐蟲藍(lán)拒染率差異也有顯著性，平均秩次分別為6.8，2.3和9.0(P=0.043)?？梢姛o明顯作用的細(xì)胞最高，發(fā)生凋亡為主的細(xì)胞次之，發(fā)生壞死為主的細(xì)胞最低。四、影響白血病細(xì)胞凋亡的因素1.不同臨床預(yù)后指標(biāo)與化療藥物誘導(dǎo)凋亡及自發(fā)凋亡的關(guān)系（表3）：CD34陽性組（CD3430%）的VCR、Dex誘導(dǎo)凋亡率及自發(fā)凋亡率明顯低于陰性組（CD34<30%）。髓系抗原陰性ALL的VCR、Dex誘導(dǎo)凋亡率及自發(fā)凋亡率

23、高于髓系抗原陽性ALL。肝臟肋緣下5 cm組的VCR、Dex誘導(dǎo)凋亡率及自發(fā)凋亡率高于無明顯肝臟腫大組。T系白血病的自發(fā)凋亡率高于B系白血病。外周血幼稚細(xì)胞0.30組的自發(fā)凋亡率高于外周血幼稚細(xì)胞<0.30組。而其他不良預(yù)后指標(biāo)如：年齡>10歲或2歲，病程3個(gè)月，淋巴結(jié)腫大(直徑2.5 cm)及脾臟腫大（肋下5 cm），外周血高白細(xì)胞（WBC25×109/L），骨髓FAB分型為L(zhǎng)3型等對(duì)藥物誘導(dǎo)凋亡率及自發(fā)凋亡率均無顯著意義。進(jìn)一步對(duì)上述5項(xiàng)陽性指標(biāo)進(jìn)行多元逐步回歸分析，發(fā)現(xiàn)僅有CD34這一個(gè)因素對(duì)藥物誘導(dǎo)凋亡率及自發(fā)凋亡率有影響。表3ALL及HAL患兒白血病細(xì)胞的藥物誘

24、導(dǎo)凋亡率及自發(fā)凋亡率與不同預(yù)后指標(biāo)的關(guān)系(±s，%)影響因素例數(shù)自發(fā)凋亡率均值顯著性檢驗(yàn)P值VCR誘導(dǎo)凋亡率均值顯著性檢驗(yàn)P值Des誘導(dǎo)凋亡率均值顯著性檢驗(yàn)P值CD34陽性(30%)1110±70.005*18±80.001*18±120.026*陰性(<30%)1225±1542±2041±23免疫分型B系1916±120.035*29±210.50525±240.087T系426±537±722±22肝臟肋緣下5cm826±120.044*43&

25、#177;220.017*45±220.039*<5cm1614±1324±1423±21外周血幼稚細(xì)胞0.301025±160.022*38±210.10642±250.057<0.301413±825±1622±22髓系抗原陰性ALL1126±1543±2242±24髓系抗原陽性ALL89±320±513±7急性混合性白血病414±1021±1128±36F值0.0220.0120.035P

26、值與0.1140.0820.507與0.006*0.010*0.004*與0.3660.8600.252* 差異有極顯著性，* 差異有顯著性 2.白血病細(xì)胞Bcl-2表達(dá)率與化療藥物誘導(dǎo)凋亡及自發(fā)凋亡的關(guān)系：初診ALL及HAL患兒(n=24)白血病細(xì)胞的Bcl-2 表達(dá)率明顯高于正常對(duì)照組兒童 (n=10) 骨髓的單個(gè)核細(xì)胞Bcl-2的表達(dá)率，平均秩次分別為22.5及5.5 (P<0.001)。但進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)白血病細(xì)胞的Bcl-2表達(dá)率與體外化療藥物VCR、Dex、DNR、Ara-C誘導(dǎo)凋亡率及自發(fā)凋亡率的相關(guān)系數(shù)分別為 -0.023(n=24)，0.071(n=24), 0.275

27、(n=11), 0.037 (n=6), -0.033 (n=24),它們之間無明顯負(fù)相關(guān)關(guān)系。討論應(yīng)用治療相關(guān)劑量的VCR、Dex、Ara-C、DNR，均可誘導(dǎo)敏感的ALL或HAL細(xì)胞發(fā)生凋亡，說明誘導(dǎo)凋亡是化療藥物殺傷白血病細(xì)胞的重要機(jī)制。幾種不同藥物的凋亡誘導(dǎo)率呈高度正相關(guān)，提示某些化療藥物可能有相似的凋亡誘導(dǎo)途徑。Muller等6發(fā)現(xiàn)以不同濃度的蒽環(huán)類藥物阿霉素作用于急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系Molt-4細(xì)胞，小劑量發(fā)生依賴于RNA合成的凋亡反應(yīng)，大劑量則不能誘導(dǎo)凋亡，且明顯抑制RNA合成。原癌基因Bcl-2被認(rèn)為是抑制細(xì)胞凋亡的重要基因。但是本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)ALL及HAL細(xì)胞的Bcl-2蛋白

28、表達(dá)率與藥物誘導(dǎo)凋亡率及體外自發(fā)凋亡率無明顯負(fù)相關(guān)關(guān)系。Karawajew等7也發(fā)現(xiàn)，ALL中Bcl-2蛋白的表達(dá)與其體外培養(yǎng)自發(fā)凋亡率及CD95介導(dǎo)的凋亡無關(guān)。說明單靠Bcl-2蛋白并不能抑制所有細(xì)胞的凋亡。其活性也受其他一些蛋白，如p53、Raf-1等的調(diào)節(jié)。另外Bcl-2基因?qū)儆谕ㄟ^相互作用而調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的Bcl-2基因家族，他們之間的比例決定細(xì)胞是否發(fā)生凋亡。在各種預(yù)后指標(biāo)中，CD34是一個(gè)影響白血病細(xì)胞凋亡率的獨(dú)立指標(biāo)。研究發(fā)現(xiàn)多種生長(zhǎng)因子受體與CD34抗原共同表達(dá)，如蛋白酪氨酸激酶(PTK)家族成員c-kit和flt-3，在CD34陽性細(xì)胞的增殖及分化過程中起重要作用，且對(duì)化療藥物

29、誘導(dǎo)CD34陽性白血病細(xì)胞凋亡有影響8。另外CD34蛋白可能參與跨膜信號(hào)傳導(dǎo)，推測(cè)CD34分子可能通過影響細(xì)胞凋亡的信號(hào)傳導(dǎo)途徑而影響凋亡。新鮮離體的白血病細(xì)胞的凋亡率很低，但是在體外培養(yǎng)后可產(chǎn)生不同程度的自發(fā)凋亡。骨髓基質(zhì)細(xì)胞可以通過分泌某些抑制凋亡的細(xì)胞因子或直接接觸作用來阻止白血病細(xì)胞的自發(fā)凋亡。此外，部分白血病細(xì)胞自分泌細(xì)胞因子的功能對(duì)他的高度增殖和凋亡抑制也有重要意義9。另外白血病細(xì)胞的體外自發(fā)凋亡率與化療藥物誘導(dǎo)凋亡率呈正相關(guān)，這對(duì)我們預(yù)測(cè)臨床療效，指導(dǎo)治療起重要作用。我們發(fā)現(xiàn)白血病細(xì)胞對(duì)凋亡誘導(dǎo)的敏感性與臨床療效有關(guān)。1例T-ALL患兒的白血病細(xì)胞對(duì)VCR，Dex誘導(dǎo)凋亡均為高度

30、敏感，給予VP(長(zhǎng)春新堿、潑尼松)方案預(yù)處理的第2天外周血白細(xì)胞立即由260×109/L（幼稚細(xì)胞100%）降至2×109/L。部分患兒的白血病細(xì)胞對(duì)Dex誘導(dǎo)凋亡不敏感，臨床單用潑尼松治療后骨髓白血病細(xì)胞比例無明顯降低。大部分ALL及HAL患兒的白血病細(xì)胞對(duì)Ara-C誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡不敏感，但1例嬰兒白血病患兒對(duì)Ara-C誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡表現(xiàn)高度敏感。Barnedo等10曾報(bào)道以Ara-C等抗代謝藥為基礎(chǔ)的化療方案成功地使2例復(fù)發(fā)的白血病嬰兒再次獲得緩解且長(zhǎng)期存活。不同患兒的白血病細(xì)胞對(duì)不同化療藥物的敏感性差異很大，我們?cè)谂R床化療前進(jìn)行細(xì)胞凋亡等藥物敏感性試驗(yàn)將有助于個(gè)體化治

31、療，可進(jìn)一步提高白血病的治療效果。（本文編輯：滕淑英）作者單位：成金蓉(100045首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院)趙新民(100045首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院)鄭胡鏞(100045首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院)趙衛(wèi)紅(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院)參考文獻(xiàn)1，Hirt A, Leibundgut K, Annette RL, et al. Cell birth and death in childhood acute lymphoblastic leukemia: how fast does the neoplastic cell clone expand? Br J Hematol,1997, 98: 999-1001.2，Hickman JA. Apoptosis induced by anticancer drugs. Cancer Metast Rev, 1992,11: 121-139.3，張魯榕,孔憲濤,謝映華,等.白血病化療藥物體外敏感試驗(yàn)的臨床應(yīng)用.中華血液學(xué)雜志,1990,11:141-142.4，盧圣棟,主編.現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù).北京:高等教育出版社,1993.209-211.5，Zhang CH, Ao ZH, Seth A, et al. A mitochondrial membrane protein defined by a novel monocl