毛鉤藤葉對中樞抑制作用的初步研究

1、毛鉤藤葉對中樞抑制作用的初步研究                  作者：林曉亮，羅超華，莫志賢【摘要】   目的研究毛鉤藤葉對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥理作用。方法采用小動物自主活動測定儀測定小鼠的自主活動。采用戊巴比妥鈉閾下催眠實驗及戊巴比妥鈉閾劑量誘導小鼠睡眠時間實驗，觀察毛鉤藤葉的鎮(zhèn)靜催眠作用。結(jié)果鉤藤組(12 g/kg)與毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3個劑量組均能使小鼠自發(fā)活動減少，使戊

2、巴比妥鈉閾下睡眠劑量致小鼠入睡個數(shù)增多，并延長戊巴比妥鈉閾劑量睡眠時間，且以毛鉤藤葉高劑量組效果最為明顯。結(jié)論毛鉤藤葉具有顯著的中樞抑制作用。 【關(guān)鍵詞】   鉤藤; 毛鉤藤葉; 自主活動; 催眠作用Abstract：ObjectiveTo investigate the pharmacological action of the leaves of Uncaria hirsuta Havil. on CNS. MethodsThe sedative effect and hyponic action of the leaves of Uncaria hirsuta Havil. c

3、ould be examined through the mouse locomotor activity experiment, under pentobarbitol sodium threshold dosage-induced sleep experiment and pentobarbitol sodium threshold dosage-induced sleep time experiment.ResultsAfter treated with Uncaria rhyuchophylla.(12g/kg)and the low dose (6g/kg), middle dose

4、(9g/kg) and high dose (12g/kg)of the leaves of Uncaria hirsuta Havil. , mouse locomotor activity was reduced, the sleep number of mice which were induced by the sodium pentobabital threshold sleep dosage was incresed, and the sodium pentobarbital-induced sleep time of mice was extended,and the effec

5、t in high-dose of the leaves of Uncaria hirsuta Havil. was the most significant. ConclusionThe leaves of Uncaria hirsuta Havil. has significant inhibitory effect on CNS.Key words：Uncaria rhyuchophylla.; Leaves of ncaria hirsuta Havil; Locomotor activity; Hyponic action鉤藤具有清熱平肝、息風定驚之功效，是中醫(yī) 治療 肝風內(nèi)動，驚癇

6、抽搐的常用中藥。2005年版 中國 藥典規(guī)定中藥鉤藤為茜草科植物鉤藤Uncaria rhyuchophylla ( Miq. ) Jacks.，華鉤藤U. siueusis (Oliv. ) Havil.，大葉鉤藤U . macrophylla Wall.，毛鉤藤U. hirsute Havil.，無柄果鉤藤U. sessillfructus Roxb.的干燥帶鉤莖枝。鉤藤中含有多種吲哚類生物堿,主要有鉤藤堿,異鉤藤堿24。最近的研究發(fā)現(xiàn)鉤藤葉中也含有鉤藤堿和異鉤藤堿56。目前對鉤藤的研究多集中于該植物帶鉤的莖枝，而對于該植物的其他部位研究報道較少。為開發(fā)和利用鉤藤葉資源，本文對毛鉤藤葉的中樞

7、神經(jīng)系統(tǒng)作用進行初步的藥 研究。 1 材料與儀器 1.1 藥材 毛鉤藤嫩枝采自本校中藥圃，經(jīng)本校中藥鑒定教研室張宏偉副教授鑒定為茜草科植物毛鉤藤Uncaria hirsute Havil.。將毛鉤藤葉與帶鉤莖枝分別剪下，在60以下烘干，將兩種藥材分別用75%乙醇回流提取兩次，回收乙醇后，減壓濃縮制成11(1g/ml)醇提取液。放入4冰箱中保存?zhèn)溆?，使用前用蒸餾水配置成所需濃度。戊巴比妥鈉由中國醫(yī)藥集團上?；瘜W試劑公司生產(chǎn)，批號F20050405。95%乙醇、無水乙醇等試劑由廣東汕頭西隴化工廠生產(chǎn)。1.2 動物 SPF級昆明種小鼠, 雌雄各半, 體重2025 g, 由南方醫(yī)科大學實驗動物中心提供

8、，動物合格證號: SCXK粵2006-0015。1.3 儀器 YLS-1A多功能小動物自主活動記錄儀，山東省 科學 院設(shè)備站提供。 2 方法 2.1 小鼠自發(fā)活動實驗 昆明種小鼠50只，雌雄各半，禁食12 h，飲水不限。將小鼠隨機分為5組，即空白對照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤(即毛鉤藤帶鉤莖枝，下同)組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。每組10只動物。將各組小鼠放入YLS-1A多功能小動物自主活動記錄儀中, 適應(yīng)5 min后，測定小鼠給藥前的自主活動次數(shù), 記錄時間為5 min。記錄時室內(nèi)保持安靜。然后按劑量給各組小鼠灌胃給藥(

9、ig)。分別于給藥后30，60 min各測定1次自發(fā)活動數(shù)，記錄5min內(nèi)各組小鼠的活動數(shù)。2.2 戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導小鼠入睡實驗 取昆明種小鼠50只，雌雄各半。將小鼠隨機分為5組，即空白對照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。按各組劑量給小鼠ig給藥， 藥后60 min后給每只小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg，以小鼠翻正反射消失1 min以上為入睡標準，記錄15 min內(nèi)各組小鼠的入睡個數(shù)。        

10、2.3 戊巴比妥鈉閾劑量誘導小鼠睡眠時間實驗 取昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組。將小鼠隨機分為5組，即空白對照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。按各組劑量給小鼠ig給藥，藥后60 min后給每只小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉50 mg/kg，然后記錄各組小鼠的睡眠時間(以給藥后小鼠翻正反射消失為入睡時間，翻正反射消失至恢復為睡眠時間)。2.4 學處理 實驗數(shù)據(jù)以±s表示，SPSS 13.0統(tǒng)計進行完全隨機設(shè)計資料的單因素方差分析或兩獨立樣本t檢驗，組間多重比較方差齊時用LSD方法，不齊時用

11、Games- Howell方法。P0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。計數(shù)資料采用2檢驗。 3 結(jié)果 3.2 藥物對戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量致小鼠入睡的影響 結(jié)果表明，空白組腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg后小鼠無一睡眠。鉤藤組和毛鉤藤葉低、中、高3個劑量組均有小鼠入睡，各組小鼠入睡個數(shù)經(jīng)2檢驗表明，2=16.586，=4，P=0.002(雙側(cè))，差異有顯著性意義，可認為5個實驗組之間的差異有顯著性意義，其中毛鉤藤葉高劑量組小鼠的入睡個數(shù)最多。見表23。表2 戊巴比妥鈉閾下劑量誘導睡眠的結(jié)果表3 戊巴比妥鈉閾下劑量誘導睡眠的統(tǒng)計結(jié)果 4 討論 本研究主要考察毛鉤藤葉對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制作用。采用了小

12、鼠自發(fā)活動實驗、戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導小鼠入睡實驗及戊巴比妥鈉閾劑量誘導小鼠睡眠時間實驗來評價毛鉤藤葉的鎮(zhèn)靜催眠作用，并與毛鉤藤帶鉤莖枝進行對比。從實驗結(jié)果可知，毛鉤藤葉低、中、高3個劑量組給藥后小鼠的自發(fā)活動明顯減少，鉤藤組和毛鉤藤葉中、高劑量組與空白組相比，差異非常顯著。毛鉤藤葉對小鼠自發(fā)活動的抑制隨劑量加大而加強，毛鉤藤葉高劑量組與鉤藤組比較有差異，表明毛鉤藤葉的鎮(zhèn)靜作用比鉤藤莖枝明顯。毛鉤藤葉高劑量組還能明顯增加戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導入睡的小鼠個數(shù)，并能明顯延長戊巴比妥鈉閾劑量的小鼠睡眠時間，與鉤藤組相比較有差異。提示高劑量的毛鉤藤葉對中樞的抑制作用較為顯著。實驗結(jié)果表明毛鉤藤葉具有明顯的鎮(zhèn)靜催眠作用，其作用強度與劑量有一定關(guān)系。但毛鉤藤葉抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機理仍有待深入研究?！?參考 文獻 】  國家藥典委員會. 中國 藥典，部S.北京: 化學 工業(yè) 出版社, 2005: 180.張 峻,楊成金,吳大剛. 鉤藤的化學成分研究() J.中草藥, 1998, 29(10): 649.張 峻,楊成金,吳大剛. 鉤藤的化學成分研究() J.中草藥, 1999, 30(1): 12.許丹丹,莫志賢. 鉤藤與絨毛鉤藤的化學成分及藥理作用J.中藥新藥與藥理, 2005,