第二章抗原抗體反應(yīng)

1、第二章第二章 抗原抗體反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)第一節(jié)第一節(jié) 抗原抗體反應(yīng)的原理抗原抗體反應(yīng)的原理抗原抗體反應(yīng)的原理抗原抗體反應(yīng)的原理抗原抗體反應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ)抗原抗體反應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ): : 抗原表位與抗體高變區(qū)間的互補結(jié)合抗原表位與抗體高變區(qū)間的互補結(jié)合 抗原表位與抗體高變區(qū)的溝槽分子表面的結(jié)合抗原表位與抗體高變區(qū)的溝槽分子表面的結(jié)合 抗原抗體之間的結(jié)合力抗原抗體之間的結(jié)合力 親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體抗原抗體反應(yīng)抗原抗體反應(yīng): :指抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。指抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。 靜電引力靜電引力 （electrostatic forceselectrostat

2、ic forces） 范德華引力范德華引力: :作用最小作用最小 （van der Waalsvan der Waals interactions interactions） 氫鍵氫鍵: :最具特異性最具特異性 （hydrogen bond hydrogen bond ） 疏水作用力疏水作用力: :作用最大作用最大 （hydrophobic interactionshydrophobic interactions） 抗原抗體結(jié)合力示意圖抗原抗體結(jié)合力示意圖抗原抗體反應(yīng)的原理抗原抗體反應(yīng)的原理抗原抗體結(jié)合力抗原抗體結(jié)合力抗原抗體反應(yīng)的親和性和親合力抗原抗體反應(yīng)的親和性和親合力抗體分子一個抗原結(jié)抗

3、體分子一個抗原結(jié)合部位與一個相應(yīng)抗合部位與一個相應(yīng)抗原表位之間的結(jié)合強原表位之間的結(jié)合強度度 ，取決于二者空，取決于二者空間構(gòu)型互補的程度間構(gòu)型互補的程度 親和性親和性(affinity)(affinity)抗原抗體的親和性示意圖抗原抗體的親和性示意圖抗原抗體反應(yīng)的親和性和親合力抗原抗體反應(yīng)的親和性和親合力一個完整抗體分子的一個完整抗體分子的抗原結(jié)合部位與若干抗原結(jié)合部位與若干相應(yīng)抗原表位之間的相應(yīng)抗原表位之間的結(jié)合強度結(jié)合強度 親合力親合力(avidity)(avidity)抗原抗體的親合力示意圖抗原抗體的親合力示意圖 抗原抗體反應(yīng)的原理抗原抗體反應(yīng)的原理親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體親水膠體轉(zhuǎn)化為

4、疏水膠體可見反應(yīng)可見反應(yīng)抗原抗體復(fù)合物抗原抗體復(fù)合物 ( (疏水膠體疏水膠體) )電解質(zhì)電解質(zhì) 抗原抗原( (親水膠體親水膠體) ) 抗體抗體( (親水膠體親水膠體) ) + +第二節(jié)第二節(jié) 抗原抗體反應(yīng)的特點抗原抗體反應(yīng)的特點v特異性特異性（specificityspecificity）v可逆性可逆性（reversibilityreversibility）v比例性比例性（proportionalityproportionality）抗原抗體反應(yīng)的特點抗原抗體反應(yīng)的特點特異性特異性: :抗原與抗體結(jié)合的專一性抗原與抗體結(jié)合的專一性抗原抗體反應(yīng)的特異性抗原抗體反應(yīng)的特異性抗原抗體反應(yīng)特異性示意圖

5、抗原抗體反應(yīng)特異性示意圖特異性特異性分子基礎(chǔ)分子基礎(chǔ): :抗原表位與抗體分子抗原表位與抗體分子高變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補性高變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補性 兩種抗原分子有部兩種抗原分子有部分相同或類似結(jié)構(gòu)分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原表位，可與的抗原表位，可與彼此相應(yīng)的抗血清彼此相應(yīng)的抗血清發(fā)生反應(yīng)發(fā)生反應(yīng) 抗原抗體反應(yīng)的特異性抗原抗體反應(yīng)的特異性交叉反應(yīng)交叉反應(yīng)（cross reactionscross reactions）抗原抗體交叉反應(yīng)示意圖抗原抗體交叉反應(yīng)示意圖可逆性可逆性: :抗原抗體為分子表面的非共價結(jié)合，抗原抗體為分子表面的非共價結(jié)合，形成的復(fù)合物不牢固，一定條件下可解離為形成的復(fù)合物不牢固，一

6、定條件下可解離為游離抗原和抗體。游離抗原和抗體。抗原抗體反應(yīng)的可逆性抗原抗體反應(yīng)的可逆性抗原抗體反應(yīng)的可逆性抗原抗體反應(yīng)的可逆性 親合力：親合力越高，結(jié)合越牢固，越不易解離親合力：親合力越高，結(jié)合越牢固，越不易解離 環(huán)境因素環(huán)境因素:pH:pH、離子強度、離子強度 影響可逆性的因素影響可逆性的因素v 前帶前帶( (prezoneprezone) )：抗體過量抗體過量v 后帶后帶( (postzonepostzone) )：抗原過量抗原過量v 等價帶等價帶( (equivalence zone)equivalence zone)： 抗原抗體比例合適抗原抗體比例合適 抗原抗體反應(yīng)的比例性抗原抗體反

7、應(yīng)的比例性抗原抗體反應(yīng)比例性示意圖抗原抗體反應(yīng)比例性示意圖比例性：抗原與抗體發(fā)生可比例性：抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)遵循一定的量比關(guān)系見反應(yīng)遵循一定的量比關(guān)系v第一階段：特異性結(jié)合階段，反應(yīng)快，不可見第一階段：特異性結(jié)合階段，反應(yīng)快，不可見 v第二階段：反應(yīng)可見階段，反應(yīng)慢，出現(xiàn)凝集、第二階段：反應(yīng)可見階段，反應(yīng)慢，出現(xiàn)凝集、 沉淀和細(xì)胞溶解等現(xiàn)象沉淀和細(xì)胞溶解等現(xiàn)象 抗原抗體反應(yīng)的階段性抗原抗體反應(yīng)的階段性第三節(jié)第三節(jié) 抗原抗體反應(yīng)的影響因素抗原抗體反應(yīng)的影響因素反應(yīng)物自身因素反應(yīng)物自身因素抗原抗原: :理化性狀、表位種類和數(shù)目理化性狀、表位種類和數(shù)目抗體抗體: :來源、特異性、親和性、效價來源

8、、特異性、親和性、效價環(huán)境因素環(huán)境因素電解質(zhì)電解質(zhì): : 生理鹽水或緩沖液生理鹽水或緩沖液酸堿度酸堿度: pH6: pH69 9溫溫 度度: : 15-4015-40，3737最適最適抗原抗體反應(yīng)的影響因素抗原抗體反應(yīng)的影響因素第四節(jié)第四節(jié) 免疫學(xué)檢測技術(shù)的類型免疫學(xué)檢測技術(shù)的類型免疫學(xué)檢測技術(shù)的類型免疫學(xué)檢測技術(shù)的類型凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)（agglutinationagglutination）沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)(precipitation)(precipitation)補體參與的反應(yīng)補體參與的反應(yīng)中和反應(yīng)中和反應(yīng)標(biāo)記免疫反應(yīng)標(biāo)記免疫反應(yīng)反應(yīng)類型反應(yīng)類型免疫學(xué)檢測技術(shù)的類型免疫學(xué)檢測技術(shù)的類型 反應(yīng)

9、類型反應(yīng)類型實驗技術(shù)實驗技術(shù)結(jié)果判斷結(jié)果判斷凝集反應(yīng)直接凝集試驗觀察凝集現(xiàn)象間接凝集試驗同上抗球蛋白試驗同上沉淀反應(yīng)液相沉淀試驗觀察沉淀，檢測濁度免疫電泳技術(shù)觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補體參與的反應(yīng)補體溶血試驗觀察測定溶血現(xiàn)象補體結(jié)合試驗同上免疫學(xué)技術(shù)的類型免疫學(xué)技術(shù)的類型中和反應(yīng)病毒中和試驗檢測病毒感染性毒素中和試驗檢測外毒素毒性標(biāo)記免疫反應(yīng)熒光免疫技術(shù)檢測熒光現(xiàn)象放射免疫技術(shù)檢測放射性強度酶免疫技術(shù)檢測酶底物顯色發(fā)光免疫技術(shù)檢測發(fā)光強度金免疫技術(shù)檢測金顆粒沉淀免疫學(xué)檢測技術(shù)的類型免疫學(xué)檢測技術(shù)的類型按實際用途分為按實際用途分為: :免疫組織化學(xué)技術(shù)免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistoche

10、mistry(immunohistochemistry technique,IHCT) technique,IHCT)免疫測定免疫測定(immunoassay)(immunoassay)標(biāo)記免疫技術(shù)標(biāo)記免疫技術(shù)按檢測現(xiàn)象分為按檢測現(xiàn)象分為: : 放射免疫技術(shù)放射免疫技術(shù)熒光免疫技術(shù)熒光免疫技術(shù)酶免疫技術(shù)酶免疫技術(shù)化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)金免疫技術(shù)金免疫技術(shù) 按測定反應(yīng)體系的物理狀態(tài)分為按測定反應(yīng)體系的物理狀態(tài)分為: : 均相免疫測定均相免疫測定(homogenous immunoassay(homogenous immunoassay）非均相免疫測定非均相免疫測定(heterogenous(heterogen