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文檔簡(jiǎn)介
1、水體自凈程度的指標(biāo)云南民族大學(xué)環(huán)境科學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心 王紅斌一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 掌握測(cè)定三氮的基本原理和方法。2. 解測(cè)定三氮對(duì)環(huán)境化學(xué)研究的作用和意義。二、實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)測(cè)定三氮的基本原理和方法,掌握三氮的指標(biāo)在水質(zhì)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)的應(yīng)用和意義。三、實(shí)驗(yàn)難點(diǎn)水樣在采集、保護(hù)及測(cè)定過(guò)程中的質(zhì)量控制。四、實(shí)驗(yàn)安排:1、實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí),提交預(yù)習(xí)報(bào)告;2、實(shí)驗(yàn)講解提問(wèn):通過(guò)互動(dòng)方式幫助學(xué)生更好地達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?;出?、在云南民族大學(xué)雨花校區(qū)中水站的進(jìn)水口、 出水品, 調(diào)節(jié)池的進(jìn)水口、 品 ,曝氣池的進(jìn)水口、出水品,每隔一個(gè)小時(shí)采樣一次,連續(xù)采 6個(gè)小時(shí)。4、學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作;5、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析, 并評(píng)價(jià)中水站各采樣點(diǎn)水體自凈
2、狀態(tài)及其水質(zhì)類別進(jìn)行初步 探討;6、學(xué)生提交實(shí)驗(yàn)報(bào)告。五、實(shí)驗(yàn)提問(wèn):(一)氨氮的測(cè)定納氏試劑比色法1、什么是納氏試劑?2、測(cè)定原理、測(cè)定波長(zhǎng)及檢出限為多少?3、不含氨的蒸餾水如何制備?4、酒石酸鉀鈉溶液的作用是什么?5、pH為7.4磷酸鹽緩沖溶液的作用是什么?(二)亞硝酸鹽氮的測(cè)定鹽酸萘乙二胺比色法1、測(cè)定原理、測(cè)定波長(zhǎng)及檢出限為多少?2、不含亞硝酸鹽的蒸餾水如何制備?3、水樣為什么要在冷藏及 24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分析?4、加入氯化汞的目的是什么?5、制備氫氧化鋁懸浮液的目的是什么?三)硝酸鹽氮的測(cè)定二磺酸酚比色法1、測(cè)定原理、測(cè)定波長(zhǎng)及檢出限為多少?2 、為什么在除去除去氯離子?如何操作3、水樣有
3、顏色或懸浮物進(jìn)行處理?4、加入乙二胺四乙酸二鈉溶液的目的是什么?5、如何扣除亞硝酸鹽氮對(duì)硝酸鹽氮的影響?六、思考題1. 如何通過(guò)測(cè)定三氮的含量來(lái)評(píng)價(jià)水體的 “自凈” 程度?如水體中僅含有 NO3-N, 而NH4+和NO2未檢出,說(shuō)明水體“自凈”作用進(jìn)行到什么階段?如水體中既有大量 N H 3- N ,又有大量 NO3-N ,水體污染和“自凈”狀況又如何?2. 用納氏比色法測(cè)定氨氮時(shí)主要有哪些干擾,如何消除?3. 在三氮測(cè)定時(shí),要求蒸餾水不含 NH3、NO2-、NOs-,如何檢驗(yàn)?4. 在蒸餾比色測(cè)定氨氮時(shí),為什么要調(diào)節(jié)水樣的pH在7.4作用? pH偏高或偏低對(duì) 測(cè)定結(jié)果有何影響?5. 在亞硝酸
4、鹽氮分析過(guò)程中,水中的強(qiáng)氧化性物質(zhì)會(huì)干擾測(cè)定,如何確定并消除?附件:實(shí)驗(yàn)講義 (董德明 朱利中主編.環(huán)境化學(xué)實(shí)驗(yàn) .北京:高等教育出版社)實(shí)驗(yàn)二 水體自凈程度的指標(biāo)各種形態(tài)的氮相互轉(zhuǎn)化和氮循環(huán)的平衡變化是環(huán)境化學(xué)和生態(tài)系統(tǒng)研究的重 要內(nèi)容之一。水體中氮產(chǎn)物的主要來(lái)源是生活污水和某些工業(yè)廢水及農(nóng)業(yè)面源。當(dāng) 水體受到含氮有機(jī)物污染時(shí),其中的含氮化合物由于水中微生物和氧的作用,可以 逐步分解氧化為無(wú)機(jī)的氨 (NH 3)或銨 (NH 4+)、亞硝酸鹽 (NO 2-)、硝酸鹽 (NO 3-)等 簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)氮化物。氨和銨中的氮稱為氨氮;亞硝酸鹽中的氮稱為亞硝酸鹽氮;硝酸鹽中的氮稱為硝酸鹽氮。通常把氨氮、亞
5、硝酸鹽氮和硝酸鹽氮稱為三氮。這幾種 形態(tài)氮的含量都可以作為水質(zhì)指標(biāo), 分別代表有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)氮的各個(gè)不同階段。 在有氧條件下,氮產(chǎn)物的生物氧化分解一般按氨或銨、亞硝酸鹽、硝酸鹽的順序進(jìn) 行,硝酸鹽是氧化分解的最終產(chǎn)物。隨著含氮化合物的逐步氧化分解,水體中的細(xì) 菌和其它有機(jī)污染物也逐步分解破壞,因而達(dá)到水體的凈化作用。有機(jī)氮、氨氮、亞硝酸鹽氮和硝酸鹽氮的相對(duì)含量,在一定程度上可以反映含 氮有機(jī)物污染的時(shí)間長(zhǎng)短,對(duì)了解水體污染歷史以及分解趨勢(shì)和水體自凈狀況等有 很高的參考價(jià)值,見(jiàn)表 6-1。目前應(yīng)用較廣的測(cè)定三氮方法是比色法,其中最常用 的是:納氏試劑比色法測(cè)定氨氮,鹽酸萘乙二胺比色法測(cè)定亞硝酸
6、鹽氮,二磺酸酚 比色法測(cè)定硝酸鹽氮。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 掌握測(cè)定三氮的基本原理和方法。2. 解測(cè)定三氮對(duì)環(huán)境化學(xué)研究的作用和意義。二、儀器(1) 玻璃蒸餾裝置。(2) pH 計(jì)。(3) 恒溫水浴。(4) 分光光度計(jì)。(5) 電爐: 220V/1KW 。(6) 比色管: 50mL 。(7) 陶瓷蒸發(fā)皿: 100 或 200mL 。(8) 移液管:1mL、2mL、5mL。容量瓶:250mL。三、實(shí)驗(yàn)步驟(一) 氨氮的測(cè)定納氏試劑比色法1. 原理氨與納氏試劑反應(yīng)可生成黃色的絡(luò)合物, 其色度與氨的含量成正比, 可在 425nm 波長(zhǎng)下比色測(cè)定,檢出限為0.02 口 g/mL。如水樣污染嚴(yán)重,需在pH為7
7、.4的磷酸鹽緩沖溶液中預(yù)蒸餾分離。2. 試劑(1) 不含氨的蒸餾水:水樣稀釋及試劑配制均用無(wú)氨蒸餾水。配制方法包括蒸 餾法(每升蒸餾水中加入 0.1mL 濃硫酸,進(jìn)行重蒸餾,流出物接受于玻璃容器中) 和離子交換法(讓蒸餾水通過(guò)強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂來(lái)制備較大量的無(wú)氨水) 。(2) 磷酸鹽緩沖溶液( pH 為 7.4):稱 14.3g 磷酸二氫鉀和 68.8g 磷酸氫二鉀, 溶于水中并稀釋至1L。配制后用pH計(jì)測(cè)定其pH值,并用磷酸二氫鉀或磷酸氫二 鉀調(diào)至 pH 為 7.4。(3) 吸收液: 2%硼酸或 0.01mol/L 硫酸。 2%硼酸溶液:溶解 20g 硼酸于水中,稀釋至 1L。 0.01m
8、ol/L 硫酸:量取 20mL0.5mol/L 的硫酸,用水稀釋至 1L。(4) 納氏試劑: 稱取 5g 碘化鉀, 溶于 5mL 水中, 分別加入少量氯化汞 (HgCl2) 溶液(2.5 gHgCa溶于40mL水中,必要時(shí)可微熱溶解),不斷攪拌至微有朱紅色沉 淀為止。冷卻后加入氫氧化鉀溶液( 15g 氫氧化鉀溶于 30mL 水中),充分冷卻,加 水稀釋至100mL。靜置一天,取上層清液貯于塑料瓶中,蓋緊瓶蓋,可保存數(shù)月。(5) 酒石酸鉀鈉溶液:稱取 50g酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6 42O)溶于水中,加 熱煮沸以驅(qū)除氨,冷卻后稀釋至 100mL。(6) 氨標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取3.819 g無(wú)水氯
9、化銨(NH4CI)(預(yù)先在100C干燥至衡重),溶于水中,轉(zhuǎn)入 1000mL 容量瓶中,稀釋至刻度,即配得1.00mgNH3-N/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。取此溶液lO.OOmL稀釋至1000mL,即為10 口 g NHs-N/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。3. 步驟較清潔水樣可直接測(cè)定,如水樣受污染一般按下列步驟進(jìn)行。(1)水樣蒸餾:為保證蒸餾裝置不含氨,須先在蒸餾瓶中加 200mL 無(wú)氨水,加10mL 磷酸鹽緩沖溶液、幾粒玻璃珠,加熱蒸餾至流出液中不含氨為止(用納氏試 劑檢驗(yàn)),冷卻。然后將此蒸餾瓶中的蒸餾液傾出(但仍留下玻璃珠) ,量取水樣 200mL ,放入此蒸餾瓶中(如預(yù)先試驗(yàn)水樣含氨量較大,則取適量的
10、水樣,用無(wú)氨 水稀釋至 200mL ,然后加入 10mL 磷酸鹽緩沖液)。另準(zhǔn)備一只 250mL 的容量瓶, 移入 50 mL 吸收液(吸收液為 0.01 mol/L 硫酸或 2%硼酸溶液),然后將導(dǎo)管末端浸 入吸收液中,加熱蒸餾,蒸餾速度為每分鐘68mL,至少收集150mL餾出液,蒸餾至最后12min時(shí),把容量瓶放低,使吸收液的液面脫離冷凝管出口,再蒸餾幾 分鐘以洗凈冷凝管和導(dǎo)管,用無(wú)氨水稀釋至250mL,混勻,以備比色測(cè)定。(2)測(cè)定:如為較清潔的水樣, 直接取 50mL 澄清水樣置于 50mL 比色管中。 一般水樣則取用上述方法蒸餾出的水樣50mL,置于50mL比色管中。若氨氮含量太高可
11、酌情取適量水樣用無(wú)氨水稀釋至 50mL。另取8支50mL比色管,分別加入銨標(biāo)準(zhǔn)溶液(含氨氮10 口 g/mL) 0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00、10.00mL,加無(wú)氨水稀釋至刻度。在上述各比色管中,分別加入1.0mL酒石酸鉀鈉,搖勻,再加1.5mL納氏試劑, 搖勻放置 10min ,用 1cm 比色管,在波長(zhǎng) 425nm 處,以試劑空白為參比測(cè)定吸光度, 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得水樣中氨氮的含量(口g/mL )。(二)亞硝酸鹽氮的測(cè)定鹽酸萘乙二胺比色法原理在pH 2.02.5時(shí),水中亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸生成重氮鹽,再與鹽酸萘乙二胺偶聯(lián)生成紅色染料
12、,最大吸收波長(zhǎng)為543nm,其色度深淺與亞硝酸鹽含量成正比, 可用比色法測(cè)定,檢出限為 0.005 口 g/mL,測(cè)定上限為0.1 口 g/mL。1. 試劑(1)不含亞硝酸鹽的蒸餾水:蒸餾水中加入少量高錳酸鉀晶體,使呈紅色,再 加氫氧化鋇(或氫氧化鈣) ,使呈堿性,重蒸餾。棄去 50mL 初餾液,收集中間 70% 的無(wú)錳部分。 也可于每升蒸餾水中加入 1mL 濃硫酸和 0.2mL 硫酸錳溶液(每 100mL 蒸餾水中含有36.4g Mn SO 4 HO ),及13mL0.04%高錳酸鉀溶液使呈紅色,然后 重蒸餾。(2)亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:稱取 1.232g 亞硝酸鈉溶于水中,加入 1mL 氯仿
13、, 稀釋至1000mL。此溶液每毫升含亞硝酸鹽氮約為 0.25mg。由于亞硝酸鹽氮在濕空 氣中易被氧化,所以儲(chǔ)備液需標(biāo)定。標(biāo)定方法: 吸取 50.00mL 0.050mol/L 高錳酸鉀溶液, 加 5mL 濃硫酸及 50.00mL 亞硝酸鈉儲(chǔ)備液于 300mL 具塞錐型瓶中 (加亞硝酸鈉貯備液時(shí)需將吸管插入高錳酸 鉀溶液液面以下)混合均勻,置于水浴中加熱至7080C,按每次10.00mL的量加 入足夠的 0.050 mol/L 草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液, 使高錳酸鉀溶液褪色并過(guò)量, 記錄草酸鈉標(biāo) 準(zhǔn)溶液用量(V2);再高錳酸鉀溶液滴定過(guò)量的草酸鈉到溶液呈微紅色,記錄高錳 酸鉀溶液用量(V1)。用50mL
14、不含亞硝酸鹽的水代替亞硝酸鈉貯備液,如上操作,用草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定高錳酸鉀溶的濃度, 按下式計(jì)算高錳酸鉀溶液濃度 (mol/L): P1/5K MnO4 =0.0500*V 4/V3按下式計(jì)算亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的濃度:p亞硝酸鹽氮 =(V1* p/5KMnO4 -0.0500*V 2)*7.00*1000/50.00式中,p1/5KMnO4是經(jīng)標(biāo)定的高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,mol/L ; V1是滴定標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液時(shí),加入高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總量, mL; V2 是滴定亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液時(shí),加入草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液總量, mL;V3 是滴定水時(shí), 加入高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總量, mL; V4是滴定水時(shí),加入草
15、酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液總量,mL ; 7.00是亞硝酸鹽氮(1/2 N )的摩爾質(zhì)量, g/mol; 50.00是亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液取用量, mL; 0.0500是草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶 液濃度( 1/2 Na2C2O4, 0.0500mol/L)。(3) 亞硝酸鹽使用液:臨用時(shí)將標(biāo)準(zhǔn)貯備液配制成每毫升含1.0 口 g的亞硝酸鹽氮的標(biāo)準(zhǔn)使用液。(4) 草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(1/2 Na 2C2O4, 0.0500mol/L ):稱取 3.350g 經(jīng) 105C干燥2h 的優(yōu)級(jí)純無(wú)水草酸鈉溶于水中,轉(zhuǎn)入 1000mL 容量瓶中加水稀釋至刻度。(5) 高錳酸鉀溶液(1/5KMn0 4, 0.050mol/L ):溶解1.6
16、 g高錳酸鉀于約1.2L水中,煮沸0.5h至1h,使體積減小至1000mL左右,放置過(guò)夜,用 G3號(hào)熔結(jié)玻璃漏 斗過(guò)濾后,濾液貯于棕色試劑瓶中,用上述草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定其準(zhǔn)確濃度。(6) 氫氧化鋁懸浮液:溶解125g硫酸鋁鉀KAl(SO 4)2 122O或硫酸鋁銨NHaAI(SO4)2 122O于1 L水中,加熱到60C,在不斷攪拌下慢慢加入 55mL濃氨水,放 置約1h,轉(zhuǎn)入試劑瓶?jī)?nèi),用水反復(fù)洗滌沉淀,至洗液中不含氨、氯化物、硝酸鹽和 亞硝酸鹽為止。 澄清后,把上層清液盡量全部?jī)A出, 只留濃的懸浮物, 最后加 100mL 水。使用前應(yīng)振蕩均勻。(7) 鹽酸萘乙二胺顯色劑: 50mL 冰醋酸與
17、 900mL 水混合,加入 5.0g 對(duì)氨基苯 磺酸,加熱使其全部溶解,再加入0.05g鹽酸萘乙二胺,攪拌溶解后用水稀釋至1Lo 溶液無(wú)色, 貯存于棕色瓶中, 在冰箱中保存可穩(wěn)定一個(gè)月 (當(dāng)有顏色時(shí)應(yīng)重新配制) 。2. 步驟(1) 水樣如有顏色和懸浮物, 可在每 100mL 水樣中加入 2mL 氫氧化鋁懸浮液, 攪拌后,靜置過(guò)濾,棄去 25mL初濾液。取 50.00mL 澄清水樣于 50mL 比色管中(如亞硝酸鹽氮含量高,可酌情少取水樣,用無(wú)亞硝酸鹽蒸餾水稀釋至刻度) 。(3)取7支50mL比色管,分別加入含亞硝酸鹽氮1 口 g/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、
18、4.00、5.00mL,用水稀釋至刻度。(4)在上述各比色管中分別加入 2mL 顯色劑, 20 min 后在 540nm 處,用 2cm 比色皿,以試劑空白作參比測(cè)定其吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得水樣 中亞硝酸鹽氮的含量(口 g/mL)。(三)硝酸鹽氮的測(cè)定二磺酸酚比色法1 原理濃硫酸與酚作用生成二磺酸酚,在無(wú)水條件下二磺酸酚與硝酸鹽作用生成二磺 酸硝基酚,二磺酸硝基酚在堿性溶液中發(fā)生分子重排生成黃色化合物,最大吸收波 長(zhǎng)在 410nm 處,利用其色度和硝酸鹽含量成正比,可進(jìn)行比色測(cè)定。少量的氯化物 即能引起硝酸鹽的損失,使結(jié)果偏低??杉恿蛩徙y,使其形成氯化銀沉淀,過(guò)濾去 除,以消除
19、氯化物的干擾,(允許氯離子存在的最高濃度為10 口 g/mL,超過(guò)此濃度就要干擾測(cè)定)。亞硝酸鹽氮含量超過(guò) 0.2 口 g/mL時(shí),將使結(jié)果偏高,可用高錳酸 鉀將亞硝酸鹽氧化成硝酸鹽,再?gòu)臏y(cè)定結(jié)果中減去亞硝酸鹽的含量。本法的檢出限 為0.02 口 g/mL硝酸鹽氮,檢測(cè)上限為 2.0 口 g/mL。2試劑(1)二磺酸酚試劑:稱取 15g 精制苯酚,置于 250mL 三角燒瓶中,加入 100mL濃硫酸,瓶上放一個(gè)漏斗,置沸水浴內(nèi)加熱6h,試劑應(yīng)為淺棕色稠液,保存于棕色瓶?jī)?nèi)。(2)硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:稱取 0.7218g分析純硝酸鉀(經(jīng)105C烘4 h),溶于水 中,轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中,用水稀
20、釋至刻度。此溶液含硝酸鹽氮 100 口 g/mL。如 加入 2mL 氯仿保存,溶液可穩(wěn)定半年以上。(2) 硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確移取 100mL 硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,置于蒸發(fā)皿中,在 水浴上蒸干,然后加入 4.0mL 二磺酸酚,用玻棒磨擦蒸發(fā)皿內(nèi)壁,靜置10min ,加入少量蒸餾水,移入500mL容量瓶中,用蒸餾水稀釋至標(biāo)線,即為20 口 gNOs-N/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液(相當(dāng)于88.54 口 g NOf)。(3) 硫酸銀溶液:稱取 4.4g 硫酸銀,溶于水中,稀釋至 1L ,于棕色瓶中避光保 存。此溶液 1.0mL 相當(dāng)于 1.0mg 氯( Cl-)。(4) 高錳酸鉀溶液(1/5KMnO4,0.1
21、00 mol/L):稱取0.3g高錳酸鉀,溶于蒸餾 水中,并稀釋至 1L 。(5) 乙二胺四乙酸二鈉溶液:稱取 50g 乙二胺四乙酸二鈉,用 20mL 蒸餾水調(diào) 成糊狀,然后加入 60mL 濃氨水,充分混合,使之溶解。(6) 碳酸鈉溶液(1/2Na2CO3, 0.100mol/L):稱取5.3g無(wú)水碳酸鈉,溶于1L水 中。實(shí)驗(yàn)用水預(yù)先要加高錳酸鉀重蒸餾,或用去離子水。3. 步驟(1) 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制: 分別吸取硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.00、1.00、1.50、2.00、2.50、 3.00、4.00mL50mL 比色管中,加入 1.0mL 二磺酸酚,加入 3.0mL 濃氨水,用蒸餾 水稀釋至刻度
22、,搖勻。用 1mL 比色皿,以試劑空白作參比,于波長(zhǎng) 410nm 處測(cè)定 吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2) 樣品的測(cè)定脫色:污染嚴(yán)重或色澤較深的水樣 (即色度超過(guò) 10度),可在 100mL 水樣中加 入 2mL Al(OH) 3懸浮液。搖勻后,靜置數(shù)分鐘,澄清后過(guò)濾,棄去最初濾出的部分 溶液(510mL)。除去氯離子:先用硝酸銀滴定水樣中的氯離子含量,據(jù)此加入相當(dāng)量的硫酸銀溶液。當(dāng)氯離子含量小于 50mg/L 時(shí),加入固體硫酸銀。 1mg 氯離子可與 4.4 mg 硫 酸銀作用。取 50mL 水樣,加入一定量的硫酸銀溶液或硫酸銀固體,充分?jǐn)嚢韬蟆?再通過(guò)離心或過(guò)濾除去氯化銀沉淀, 濾液轉(zhuǎn)移至 100mL 的容量瓶中定容至刻度; 也 可在80C水浴中加熱水樣,搖動(dòng)三角燒瓶,使氯化銀沉淀凝聚,冷卻后用多層慢速 濾紙過(guò)濾至 100mL 容量瓶,定容至刻度??鄢齺喯跛猁}氮影響:如水樣中亞硝酸鹽氮含量超過(guò)0.2mg/L,可事先將其氧化為硝酸鹽氮。 具體方
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