片劑微生物限度檢測(cè)方法驗(yàn)證試驗(yàn)報(bào)告

1、微生物限度檢測(cè)方法驗(yàn)證試驗(yàn)報(bào)告目的：確認(rèn)供試品的抑菌活性及測(cè)定方法的可靠性。二、內(nèi)容：細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)測(cè)定（即：對(duì)五株陽(yáng)性對(duì)照實(shí)菌株的回收逐一進(jìn)行驗(yàn)證）。三、菌種：枯草芽孢桿菌【CMC（ B）63501】、金黃色葡萄球菌【CMC（ B）26003】、大腸埃希菌【CMCQ F） 44102】、白色念珠菌【CMC（ F） 98001】、黑曲霉菌【CMCQF）98003】。四、方法： 常規(guī)法（）；培養(yǎng)基稀釋法（）；薄膜法（）；綜合法（）。依據(jù)中國(guó)藥典 2005年版二部微生物限度檢查方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。五、方法驗(yàn)證：細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)測(cè)定，進(jìn)行三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)，每次平行實(shí)驗(yàn)回收率為 70%A上。六、實(shí) 驗(yàn)

2、:(1)菌液 組 測(cè)定所加的試驗(yàn)菌數(shù)。（2）供試品對(duì)照組取1m供試液注入平皿中，立即傾入營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，做兩個(gè)平板，按平板菌落計(jì)數(shù)方法測(cè)定其菌落數(shù)。（3 ）試 驗(yàn) 組平皿法計(jì)數(shù)，取供試品10g（ ml）,加入PH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml（ 1： 10），作為供試液。取1ml供試液、1ml試驗(yàn)菌液（50100cfu/ml ）分別注入平皿中，立即傾入營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株菌做兩個(gè)平板，按平板菌落計(jì)數(shù)方法 測(cè)定其菌落數(shù)。（4）稀釋劑對(duì)照組試驗(yàn)時(shí)，可用相應(yīng)的稀釋劑替代供試品，加入1ml試驗(yàn)菌（50100cfu/ml ）,立即傾入營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株菌做兩個(gè)平板，按平板菌落計(jì)數(shù)方法測(cè)定其

3、菌落數(shù)。七、結(jié) 論：通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)證明， 采用常規(guī)法（）；培養(yǎng)基稀釋法（）；薄膜法（）；綜合法（），對(duì)5株陽(yáng)性代表菌株回收率均為70%以上。該方法適用于微生物限度檢查復(fù)核人：試驗(yàn)人:試驗(yàn)記錄（1）批號(hào)：驗(yàn)證日期：試驗(yàn)組及（1）菌液組（2）供試品（稀釋 劑）對(duì)照組(3)試 驗(yàn)組接種量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供試液（稀釋劑）1ml +菌液1ml /皿】驗(yàn)證菌金黃色枯草芽白色念金黃色枯草芽白色念及稀釋大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉細(xì)菌霉菌大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉倍數(shù)布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-培養(yǎng)時(shí) 間及溫CCCCCCCCCCCC

4、度小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)菌落數(shù)A、試驗(yàn)組回收率:【(3)-（2）】寧（1）X 100%AAAAAB、稀釋劑對(duì)照組回收率：(3)寧(1)x 100%BBBBB批號(hào):驗(yàn)證日期:試 驗(yàn)記 錄（1）年 月 日試驗(yàn)組及（1）菌液組（2）供試品（稀釋 劑）對(duì)照組(3)試 驗(yàn)組接種量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供試液（稀釋劑）1ml +菌液1ml /皿】驗(yàn)證菌金黃色枯草芽白色念金黃色枯草芽白色念及稀釋大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉細(xì)菌霉菌大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉倍數(shù)布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-培養(yǎng)時(shí) 間及溫CCCCCCC

5、CCCCC度小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)菌落數(shù)（供）（供）（稀）（?。〢、試驗(yàn)組回收率:【(3)-（2）】寧（1）X 100%AAAAAB、稀釋劑對(duì)照組回收率：(3)寧(1)x 100%BBBBB試驗(yàn)記錄（2驗(yàn)證日期:實(shí)批號(hào):年 月曰試驗(yàn)組及（1）菌液組（2）供試品（稀釋 劑）對(duì)照組(3)試 驗(yàn)組接種量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供試液（稀釋劑）1ml +菌液1ml /皿】驗(yàn)證菌金黃色枯草芽白色念金黃色枯草芽白色念及稀釋大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉細(xì)菌霉菌大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉倍數(shù)布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-

6、培養(yǎng)時(shí) 間及溫CCCCCCCCCCCC度小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)菌落數(shù)（供）（供）（?。ㄏ。〢、試驗(yàn)組回收率:【(3)-（2）】寧（1）X 100%AAAAAB、稀釋劑對(duì)照組回收率：(3)寧(1)x 100%BBBBB實(shí)驗(yàn)記錄 （3）試驗(yàn)組及（1）菌液組（2）供試品（稀釋 劑）對(duì)照組(3)試 驗(yàn)組接種量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供試液（稀釋劑）1ml +菌液1ml /皿】驗(yàn)證菌金黃色枯草芽白色念金黃色:枯草芽白色念及稀釋大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉細(xì)菌霉菌大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉倍數(shù)布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-培養(yǎng)時(shí) 間及溫CCCCCCCCCCCC度小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)小時(shí)菌落數(shù)（供）（供）（?。ㄏ。〢、試驗(yàn)組回收率:【(3)-（2）】寧（1）X 100%AAAAAB、稀釋