頭孢他啶誘導大腸埃希菌內毒素釋放及常用中藥注射劑抗內毒素作用

1、頭孢他啶誘導大腸埃希菌內毒素釋放及常用中藥注射劑抗內毒素作用         作者：司文秀 趙華 張征 楊繼章，王業(yè) 【摘要】 目的 探討頭孢他啶對不同濃度大腸埃希菌內毒素釋放的影響及常用清熱解毒中藥注射劑體外抗內毒素活性。方法 采用二倍稀釋法測定頭孢他啶對大腸埃希菌的MIC，并確定清開靈、雙黃連和喜炎平注射劑臨床常用劑量對MIC的影響；               

2、                 作者：司文秀 趙華 張征 楊繼章，王業(yè) 【摘要】  目的 探討頭孢他啶對不同濃度大腸埃希菌內毒素釋放的影響及常用清熱解毒中藥注射劑體外抗內毒素活性。方法 采用二倍稀釋法測定頭孢他啶對大腸埃希菌的MIC，并確定清開靈、雙黃連和喜炎平注射劑臨床常用劑量對MIC的影響；50×MIC頭孢他啶對處于對數生長期不同濃度大腸埃希菌內毒素產生的影響；清開靈、雙黃連和喜炎平注射劑與頭孢他啶聯

3、合應用時抗內毒素作用的研究。結果 頭孢他啶對大腸埃希菌的MIC為0.125g/ml，清開靈、喜炎平注射劑對頭孢他啶的MIC無影響，雙黃連注射劑可顯著提高頭孢他啶MIC；頭孢他啶于高菌液濃度時可誘導內毒素釋放，在低菌液濃度時抑制內毒素釋放；中藥注射劑與頭孢他啶聯合應用時，加藥順序對內毒素的產生有一定影響，當清開靈、喜炎平注射劑在頭孢他啶之后應用時，可顯著降低內毒素含量，喜炎平的效果優(yōu)于清開靈注射液。結論 頭孢他啶對大腸埃希菌內毒素釋放的影響與菌液濃度有關。清開靈、喜炎平注射劑具有抗內毒素作用，與頭孢他啶聯用時，用藥順序對內毒素的消除有一定影響。 【關鍵詞】  中藥注射劑； 頭孢他啶；

4、內毒素； 大腸埃希菌    ABSTRACT  Objective  To study the factors that influence the endotoxin release induced by ceftazidime in different Escherichia coli concentrations, and to explore the antiendotoxin effects of 3 kinds of Chinese medicine injections, namely Qingkailing injection,

5、 Shuanghuanglian injection and Xiyanping injection in vitro.  Methods  Twofold dilution to determine the MIC of ceftazidime, and determine if the MIC could be altered by 3 kinds of injections when used in routine dosages; to study if ceftazidime (at 50×MIC) could affect the production

6、 of endotoxin while added to different concentrations of Escherichia coli which in logarithm phase; to determine the antiendotoxin activity of the three injections when used concomitantly with ceftazidime. ResultsThe MIC of ceftazidime was 0.125 g/ml, Qingkailing injection and Xiyanping injection ha

7、d no effect on it, but Shuanghuanglian injection could lead it to increased; at high Escherichia coli concentrations (2.5×1042.5×105 CFU/ml), ceftazidime induced a great deal of endotoxin release, but at low concentrations (2.5×102.5×103 CFU/ml), ceftazidime inhibited endotoxin r

8、elease; the using sequence of Chinese medicine injections and ceftazidime could affect endotoxin release. When Qingkailing injection and Xiyanping injection used after giving ceftazidime, they showed antiendotoxin effect, and Xiyanping injection was the better.  Conclusion  The endotoxin r

9、eleasing activities of ceftazidime were not only related to the bacterial concentrations but also influenced by the sequence usage of Qinakailing or Xiyanpang injections.    KEY WORDS  Chinese medicine injections;  Ceftazidime;  Endotoxin;  Escherichia coli  內

10、毒素是眾多細胞因子誘導劑，可觸發(fā)炎癥級聯反應，其成分為革蘭陰性菌細胞壁外膜的脂多糖成分。有人認為1，革蘭陰性細菌所致的膿毒血癥至今死亡率居高不下，是由于抗菌藥物在殺滅細菌的同時伴隨著內毒素的釋放，產生高內毒素血癥所致。我們據此設計實驗，探討頭孢他啶在臨床用量下對細菌內毒素產生的影響。尋找有效、低毒的抗內毒素藥物一直是多年來的研究熱點，據文獻報道2，3，具有清熱解毒作用的中藥及其注射劑有抗內毒素作用，本文模擬臨床用藥劑量、順序及間隔時間，體外實驗考察了我院常用清熱解毒中藥注射劑清開靈、雙黃連和喜炎平分別與頭孢他啶聯合應用時對大腸埃希菌產生內毒素的影響，旨為臨床內毒素血癥的治療提供參考。 

11、;   1  材料與方法    1.1  材料    (1)菌種  大腸埃希菌ATCC25922，由河北醫(yī)科大學第一醫(yī)院檢驗科提供。    (2)培養(yǎng)基  改良型RPMI 1640(?？寺∩锘瘜W制品有限公司，批號NSG0059)。    (3)試劑  頭孢他啶(每支0.5g，石藥集團中諾藥業(yè)有限公司，批號07043001)；清開靈注射液(每支10ml，河北神威藥業(yè)有限公司，批號07032622)；雙黃連粉

12、針劑(每支600mg，哈藥集團中藥二廠，批號0611235)；喜炎平注射液(每支50mg，江西青峰藥業(yè)有限公司，批號0080313)；細菌內毒素工作標準品(每支140Eu，中國藥品生物制品檢定所，批號150601200758)；內毒素測定試劑盒(湛江安度斯生物公司，批號0609271)。    (4)儀器  B600A型低速離心機(白洋離心機廠)；BET32B細菌內毒素測定儀(天津大學無線電廠)。    1.2  方法4    (1)菌液配制  細菌接種于無抗生素的RPMI

13、1640培養(yǎng)液中，于37水浴中培養(yǎng)16h，作為細菌母液。    (2)頭孢他啶MIC的測定  采用2倍稀釋法于96孔板中測定頭孢他啶在空白液、清開靈(500倍稀釋液)、雙黃連(0.36mg/ml)及喜炎平(0.01mg/ml)中對大腸埃希菌的MIC。終菌量為5×106CFU/ml左右，37保溫箱培養(yǎng)20h。    (3)頭孢他啶對大腸埃希菌內毒素含量測定  細菌母液臨用前配成約1×108CFU/ml，再分別以RPMI1640培養(yǎng)液稀釋成所需濃度備用。取5ml離心管若干，各加入2ml RPMI 1640培養(yǎng)液，37水浴預熱10min，加入備用菌液50l，使菌濃度分別為2.5×105、2.5×104、