微生物學(xué)講義第十章

1、微生物是遺傳學(xué)研究的優(yōu)良材料：微生物是遺傳學(xué)研究的優(yōu)良材料：t 微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)簡單，營養(yǎng)體一般為單倍體，方便建立純系。微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)簡單，營養(yǎng)體一般為單倍體，方便建立純系。t易于人工培養(yǎng)，快速、大量生長繁殖易于人工培養(yǎng)，快速、大量生長繁殖。t 對環(huán)境因素的作用敏感，易于獲得各類突變株，操作性強(qiáng)。對環(huán)境因素的作用敏感，易于獲得各類突變株，操作性強(qiáng)。第一節(jié) 遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)一、DNA作為遺傳物質(zhì)二、RNA作為遺傳物質(zhì)三、朊病毒的發(fā)現(xiàn)與思考3、 T2噬菌體感染實(shí)驗(yàn)（噬菌體感染實(shí)驗(yàn)（1952年）年）1、 Griffith轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（1928年）年）2、 Avery進(jìn)一步證明進(jìn)一步證明DNA為遺傳

2、物質(zhì)（為遺傳物質(zhì)（1944年）年）一、一、DNA作為遺傳物質(zhì)作為遺傳物質(zhì)第一節(jié) 遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)（參見（參見 P194）AveryAvery在四十年代以更精密的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)重復(fù)了以上實(shí)驗(yàn)在四十年代以更精密的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)重復(fù)了以上實(shí)驗(yàn)分別用降解分別用降解DNADNA、RNARNA、蛋白質(zhì)的酶蛋白質(zhì)的酶作用于有毒的作用于有毒的S S型菌細(xì)胞抽提物型菌細(xì)胞抽提物只有只有DNADNA被酶降解破壞的抽提物無轉(zhuǎn)化活性被酶降解破壞的抽提物無轉(zhuǎn)化活性DNADNA是轉(zhuǎn)化所必需的轉(zhuǎn)化因子是轉(zhuǎn)化所必需的轉(zhuǎn)化因子 滅活的滅活的S + 活的活的 R 型型 活的活的S （不致死（不致死 ） （不致死（不致死 ） （致死（致死 ）判

3、斷：滅活的判斷：滅活的S 中的遺傳物質(zhì)進(jìn)入活的中的遺傳物質(zhì)進(jìn)入活的 R 型菌并表達(dá)毒性型菌并表達(dá)毒性 Griffith（1928年）稱之為轉(zhuǎn)化現(xiàn)象年）稱之為轉(zhuǎn)化現(xiàn)象1、 Griffith轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（1928年）年）2、 Avery進(jìn)一步證明進(jìn)一步證明DNA為遺傳物質(zhì)（為遺傳物質(zhì)（1944年）年）只有只有DNADNA被酶降解破壞的被酶降解破壞的滅活滅活S的的抽提物無轉(zhuǎn)化活性抽提物無轉(zhuǎn)化活性分別用降解分別用降解DNADNA、RNARNA、蛋白質(zhì)的酶處理蛋白質(zhì)的酶處理滅活滅活S的的細(xì)胞抽提物細(xì)胞抽提物DNA為遺傳物質(zhì)為遺傳物質(zhì)3、 T2（Type 2）噬菌體感染實(shí)驗(yàn)（）噬菌體感染實(shí)驗(yàn)（195

4、2年）年）第一節(jié) 遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)（參見（參見 P195）二、二、RNA作為遺傳物質(zhì)作為遺傳物質(zhì)分別提取病毒（TMV）的蛋白質(zhì)外殼和病毒（HR）的核酸（RNA） 抗血清處理，證明雜種病毒的蛋白質(zhì)外殼來自病毒（TMV），而非病毒（HR）雜種病毒的后代的蛋白質(zhì)外殼表現(xiàn)為病毒（HR），而非病毒（TMV）遺傳物質(zhì)是核酸（RNA）而非蛋白質(zhì)HRHRTMVTMVHRTMV第一節(jié) 遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)三、朊病毒的發(fā)現(xiàn)與思考三、朊病毒的發(fā)現(xiàn)與思考（參見（參見 P191 和和 P195）亞病毒的一種：具有傳染性的蛋白質(zhì)致病因子，迄今為止尚未 發(fā)現(xiàn)該蛋白內(nèi)含有核酸。其致病作用是由于動(dòng)物體內(nèi)正常的蛋白質(zhì)PrP c改變折疊狀

5、態(tài)為PrP sc所致，而這二種蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)并沒有改變。人的庫魯病(kuru)、克雅氏病(Creutzfeldt Jakob disease, CJD)等羊搔癢癥(scrapie)牛海綿狀腦病(spongiform encephalopathy)Prusiner (1982)提出羊搔癢病因子是一種蛋白質(zhì)侵染顆粒（proteinaceous infectious particle），并將之稱做Prion或Virino。 -朊病毒1997年，Stanley B. Prusiner榮獲諾貝爾獎(jiǎng) 諾貝爾獎(jiǎng)（始于1901） 諾貝爾獎(jiǎng)包括金質(zhì)獎(jiǎng)?wù)?、證書和獎(jiǎng)金支票。諾貝爾獎(jiǎng)包括金質(zhì)獎(jiǎng)?wù)?、證書和獎(jiǎng)金支票。其

6、中獎(jiǎng)金數(shù)視基金會(huì)的收入而定，獎(jiǎng)金的面其中獎(jiǎng)金數(shù)視基金會(huì)的收入而定，獎(jiǎng)金的面值由于通貨膨脹逐年有所提高：值由于通貨膨脹逐年有所提高： 最初：萬美元最初：萬美元 世紀(jì)年代：萬美元世紀(jì)年代：萬美元 年代：萬美元年代：萬美元 年代：萬美元年代：萬美元 年：萬美元。年：萬美元。 諾貝爾獎(jiǎng)的證書（諾貝爾獎(jiǎng)的證書（Diplomas）各具風(fēng)采，）各具風(fēng)采，是獨(dú)一無二的藝術(shù)品。左側(cè)是由藝術(shù)家是獨(dú)一無二的藝術(shù)品。左側(cè)是由藝術(shù)家根據(jù)各位諾貝爾獎(jiǎng)得主獲獎(jiǎng)工作的特質(zhì)根據(jù)各位諾貝爾獎(jiǎng)得主獲獎(jiǎng)工作的特質(zhì)為其創(chuàng)作的畫作，右側(cè)是書法家用瑞典為其創(chuàng)作的畫作，右側(cè)是書法家用瑞典文或挪威文書寫的、說明其獲獎(jiǎng)事宜的文或挪威文書寫的、說

7、明其獲獎(jiǎng)事宜的正文。設(shè)立物理、化學(xué)、生理與醫(yī)學(xué)、正文。設(shè)立物理、化學(xué)、生理與醫(yī)學(xué)、文學(xué)及和平、經(jīng)濟(jì)六種獎(jiǎng)項(xiàng)。文學(xué)及和平、經(jīng)濟(jì)六種獎(jiǎng)項(xiàng)。 物理學(xué)生理學(xué)、醫(yī)學(xué)經(jīng)濟(jì)學(xué)和平（Diplomas）化學(xué)文學(xué)第一節(jié) 遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)三、朊病毒的發(fā)現(xiàn)與思考三、朊病毒的發(fā)現(xiàn)與思考（參見（參見 P191 和和 P195）1）蛋白質(zhì)是否可以作為遺傳物質(zhì)？ prion是生命的一個(gè)特例？還是僅僅為表達(dá)調(diào)控的一種形式？2）蛋白質(zhì)折疊與功能的關(guān)系，是否存在折疊密碼？DNARNARNA肽鏈肽鏈蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)（參見（參見 P197）第二節(jié)第二節(jié) 微生物的基因組結(jié)構(gòu)微生物的基因組結(jié)構(gòu)一、概念一、概念基因組（基因組（genomegeno

8、me）：）：一個(gè)物種的單倍體的所有染色體及其所包含的遺傳信一個(gè)物種的單倍體的所有染色體及其所包含的遺傳信息的總稱。息的總稱。原核生物（如細(xì)菌），一般為單倍體，只有一條染色體原核生物（如細(xì)菌），一般為單倍體，只有一條染色體真核微生物：真核微生物：多為多為二倍體，有多條染色體，例如啤酒二倍體，有多條染色體，例如啤酒 酵母有酵母有1616條染色體，有時(shí)為雙倍體。條染色體，有時(shí)為雙倍體。（參見（參見 P197）第二節(jié) 微生物的基因組結(jié)構(gòu)二、微生物與人類基因組計(jì)劃二、微生物與人類基因組計(jì)劃人類基因組計(jì)劃 （Human Genome Project）1985年提出；年提出； 1990年正式開始實(shí)施；年正式

9、開始實(shí)施； 計(jì)劃計(jì)劃2005年年2月，測序工作完成月，測序工作完成后基因組時(shí)代（Postgenome Era）人類基因組計(jì)劃人類基因組計(jì)劃 （Human Genome Project） 人類基因組計(jì)劃是美國科學(xué)家于年率先提人類基因組計(jì)劃是美國科學(xué)家于年率先提出的，旨在闡明人類基因組堿基對的序列，發(fā)現(xiàn)所出的，旨在闡明人類基因組堿基對的序列，發(fā)現(xiàn)所有人類基因并搞清其在染色體上的位置，破譯人類有人類基因并搞清其在染色體上的位置，破譯人類全部遺傳信息，使人類第一次在分子水平上全面地全部遺傳信息，使人類第一次在分子水平上全面地認(rèn)識(shí)自我。計(jì)劃于年正式啟動(dòng)，原計(jì)劃于認(rèn)識(shí)自我。計(jì)劃于年正式啟動(dòng)，原計(jì)劃于年完成

10、。這一價(jià)值億美元的計(jì)劃的目年完成。這一價(jià)值億美元的計(jì)劃的目標(biāo)是，為億個(gè)堿基對構(gòu)成的人類基因組精確測標(biāo)是，為億個(gè)堿基對構(gòu)成的人類基因組精確測序，從而最終弄清楚每種基因制造的蛋白質(zhì)及其作序，從而最終弄清楚每種基因制造的蛋白質(zhì)及其作用。用。 我國是參與計(jì)劃的唯一發(fā)展中國家我國是參與計(jì)劃的唯一發(fā)展中國家 年，被譽(yù)為生命年，被譽(yù)為生命“登月計(jì)劃登月計(jì)劃”的國的國際人類基因組計(jì)劃啟動(dòng)。年月，際人類基因組計(jì)劃啟動(dòng)。年月，我國獲準(zhǔn)參與人類基因組計(jì)劃，負(fù)責(zé)測定人我國獲準(zhǔn)參與人類基因組計(jì)劃，負(fù)責(zé)測定人類基因組全部序列的，也就是號(hào)染色類基因組全部序列的，也就是號(hào)染色體上的萬個(gè)堿基對，我國因此成為體上的萬個(gè)堿基對，我

11、國因此成為參與計(jì)劃的唯一發(fā)展中國家。我國參與計(jì)劃的唯一發(fā)展中國家。我國于年月日繪制完成年月日繪制完成“中國卷中國卷”。 人類基因組計(jì)劃的研究目標(biāo)已實(shí)現(xiàn)人類基因組計(jì)劃的研究目標(biāo)已實(shí)現(xiàn) 年月日，美國聯(lián)邦國家年月日，美國聯(lián)邦國家人類基因組研究項(xiàng)目負(fù)責(zé)人弗朗西斯人類基因組研究項(xiàng)目負(fù)責(zé)人弗朗西斯柯柯林斯博士在華盛頓宣布，美、英、日、林斯博士在華盛頓宣布，美、英、日、法、德和中國科學(xué)家經(jīng)過年努力共法、德和中國科學(xué)家經(jīng)過年努力共同繪制完成了人類基因組序列圖，人類同繪制完成了人類基因組序列圖，人類基因組計(jì)劃的目標(biāo)全部實(shí)現(xiàn)。基因組計(jì)劃的目標(biāo)全部實(shí)現(xiàn)。 結(jié)論 初步分析表明，人類基因組由初步分析表明，人類基因組由億

12、個(gè)堿基對組成，共有萬至萬個(gè)基億個(gè)堿基對組成，共有萬至萬個(gè)基因，比線蟲僅多萬個(gè)，比果蠅多萬個(gè)，因，比線蟲僅多萬個(gè)，比果蠅多萬個(gè)，遠(yuǎn)小于原先萬個(gè)基因的估計(jì)。另外，科遠(yuǎn)小于原先萬個(gè)基因的估計(jì)。另外，科學(xué)家還發(fā)現(xiàn)與蛋白質(zhì)合成有關(guān)的基因只占整學(xué)家還發(fā)現(xiàn)與蛋白質(zhì)合成有關(guān)的基因只占整個(gè)基因組的。個(gè)基因組的。 目前正在實(shí)施人類基因組單體型圖計(jì)劃目前正在實(shí)施人類基因組單體型圖計(jì)劃 繼人類基因組計(jì)劃之后，繼人類基因組計(jì)劃之后，美國美國、英國英國、日本日本、加拿大加拿大和中國科學(xué)家共同發(fā)起和和中國科學(xué)家共同發(fā)起和參與了人類基因組單體型圖計(jì)劃，旨在參與了人類基因組單體型圖計(jì)劃，旨在分析各主要人類群體的差異，并在此基分

13、析各主要人類群體的差異，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步分析所有與疾病相關(guān)的序列礎(chǔ)上進(jìn)一步分析所有與疾病相關(guān)的序列差異，為世紀(jì)的差異，為世紀(jì)的“個(gè)人醫(yī)學(xué)個(gè)人醫(yī)學(xué)”奠定奠定基礎(chǔ)，基礎(chǔ)，“只有在那個(gè)時(shí)候，人類基因組只有在那個(gè)時(shí)候，人類基因組計(jì)劃才能顯示出全部意義。計(jì)劃才能顯示出全部意義?！?中國承擔(dān)的任務(wù)中國承擔(dān)的任務(wù) 參與單體型圖個(gè)國家的任務(wù)已經(jīng)確定：參與單體型圖個(gè)國家的任務(wù)已經(jīng)確定：美國，日本，英國，美國，日本，英國，加拿大，中國。加拿大，中國。“中國卷中國卷”的具體內(nèi)容是構(gòu)建號(hào)、號(hào)染色體和的具體內(nèi)容是構(gòu)建號(hào)、號(hào)染色體和號(hào)染色體短臂的人類基因組單體型圖。號(hào)染色體短臂的人類基因組單體型圖。 （參見（參見 P1

14、97）第二節(jié) 微生物的基因組結(jié)構(gòu)二、微生物與人類基因組計(jì)劃被選擇進(jìn)行全基因組測序的微生物：被選擇進(jìn)行全基因組測序的微生物：1、人類基因組計(jì)劃中的模式生物、人類基因組計(jì)劃中的模式生物2、與人類生活關(guān)系密切的微生物、與人類生活關(guān)系密切的微生物重要的致病菌及一些工業(yè)生產(chǎn)菌：大腸桿菌、幽門螺桿菌、結(jié)核桿菌、梅毒螺旋體、流感病毒、大腸桿菌、幽門螺桿菌、結(jié)核桿菌、梅毒螺旋體、流感病毒、耐超高溫?zé)岚艟?、產(chǎn)氣莢膜梭菌耐超高溫?zé)岚艟?、產(chǎn)氣莢膜梭菌 3、對闡明生物學(xué)基本問題有價(jià)值的微生物、對闡明生物學(xué)基本問題有價(jià)值的微生物例如一些古生菌：如Methanococcus jannaschii (詹氏甲烷球菌)等啤酒酵

15、母1994年美國發(fā)起了微生物基因組研究計(jì)劃（年美國發(fā)起了微生物基因組研究計(jì)劃（MGP ）（參見（參見 P201）第二節(jié) 微生物的基因組結(jié)構(gòu)三、微生物基因組結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)三、微生物基因組結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)1、原核生物（細(xì)菌、古生菌）的基因組、原核生物（細(xì)菌、古生菌）的基因組1）細(xì)菌染色體為）細(xì)菌染色體為雙鏈環(huán)狀的雙鏈環(huán)狀的DNA分子（單倍體）；分子（單倍體）；（參見（參見 P197-200）第二節(jié)第二節(jié) 微生物的基因組結(jié)構(gòu)微生物的基因組結(jié)構(gòu)三、微生物基因組結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)三、微生物基因組結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)1、原核生物（細(xì)菌、古生菌）的基因組、原核生物（細(xì)菌、古生菌）的基因組1）染色體為）染色體為雙鏈環(huán)狀的雙鏈環(huán)狀的DNA

16、分子（單倍體）；分子（單倍體）；2）基因組上遺傳信息具有連續(xù)性；）基因組上遺傳信息具有連續(xù)性；基因數(shù)接近由它的基因組大小所估計(jì)的基因數(shù)參見表8-1（通常以1000bp1500bp為一個(gè)基因進(jìn)行計(jì)算）一般不含內(nèi)含子，遺傳信息是連續(xù)的而不是中斷的。（參見（參見 P197-200）第二節(jié)第二節(jié) 微生物的基因組結(jié)構(gòu)微生物的基因組結(jié)構(gòu)三、微生物基因組結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)三、微生物基因組結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)1、原核生物（細(xì)菌、古生菌）的基因組、原核生物（細(xì)菌、古生菌）的基因組1）染色體為）染色體為雙鏈環(huán)狀的雙鏈環(huán)狀的DNA分子（單倍體）；分子（單倍體）；2）基因組上遺傳信息具有連續(xù)性；）基因組上遺傳信息具有連續(xù)性；3）功能相

17、關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)；）功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)；4）結(jié)構(gòu)基因的單拷貝及）結(jié)構(gòu)基因的單拷貝及rRNA基因的多拷貝；基因的多拷貝；5）基因組的重復(fù)序列少而短；）基因組的重復(fù)序列少而短；古生菌的基因組在結(jié)構(gòu)上類似于細(xì)菌。但是信息傳遞系統(tǒng)(復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯)則與細(xì)菌不同而類似于真核生物。操縱子（operon）：是一個(gè)結(jié)構(gòu)上、功能上協(xié)同作用的整體，受同一調(diào)節(jié)基因和啟動(dòng)區(qū)的調(diào)控，包括啟動(dòng)子、操作子和結(jié)構(gòu)基因。第二節(jié)第二節(jié) 微生物的基因組結(jié)構(gòu)微生物的基因組結(jié)構(gòu)三、微生物基因組結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)三、微生物基因組結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)（參見（參見 P197-200）2、真核微生物（啤酒酵母）的基因組、真核微生物（啤

18、酒酵母）的基因組1）典型的真核染色體結(jié)構(gòu)；）典型的真核染色體結(jié)構(gòu)；2）沒有明顯的操縱子結(jié)構(gòu)；）沒有明顯的操縱子結(jié)構(gòu)；啤酒酵母基因組大小為13.5106bp，分布在16條染色體中。3）有間隔區(qū)（即非編碼區(qū)）和內(nèi)含子序列；）有間隔區(qū)（即非編碼區(qū)）和內(nèi)含子序列；4）重復(fù)序列多。）重復(fù)序列多。 真核細(xì)胞中單拷貝順序和重復(fù)順序常常真核細(xì)胞中單拷貝順序和重復(fù)順序常常是間隔排列的。不僅如此，在一個(gè)基因是間隔排列的。不僅如此，在一個(gè)基因內(nèi)部往往被一個(gè)或幾個(gè)額外的順序分割內(nèi)部往往被一個(gè)或幾個(gè)額外的順序分割成若干片段，這種插入到基因內(nèi)部的順成若干片段，這種插入到基因內(nèi)部的順序稱為插入順序或內(nèi)含子（序稱為插入順序或

19、內(nèi)含子（intron）。內(nèi)）。內(nèi)含子是不編碼的順序，而編碼的堿基順含子是不編碼的順序，而編碼的堿基順序則稱為外顯子（序則稱為外顯子（exon）。插入順序是）。插入順序是真核細(xì)胞真核細(xì)胞DNA最主要的特征。最主要的特征。 第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子（參見（參見 P200）質(zhì)粒（質(zhì)粒（plasmid）：）：一種獨(dú)立于染色體外，能進(jìn)行自主復(fù)制的細(xì)胞質(zhì)遺傳一種獨(dú)立于染色體外，能進(jìn)行自主復(fù)制的細(xì)胞質(zhì)遺傳因子，主要存在于各種微生物細(xì)胞中。因子，主要存在于各種微生物細(xì)胞中。吖啶類染料、高溫、某些離子作用可消除質(zhì)粒。吖啶類染料、高溫、某些離子作用可消除質(zhì)粒。 轉(zhuǎn)座因子（轉(zhuǎn)座因子（transpo

20、sable element）：）：位于染色體或質(zhì)粒上的一段能改變自身位置的位于染色體或質(zhì)粒上的一段能改變自身位置的DNA序列，序列，廣泛分布于原核和真核細(xì)胞中。廣泛分布于原核和真核細(xì)胞中。質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子是細(xì)胞中除染色體以外的另外二類質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子是細(xì)胞中除染色體以外的另外二類遺傳因子遺傳因子第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子（參見（參見 P201）一、質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)一、質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)1、結(jié)構(gòu)通常以共價(jià)閉合環(huán)狀(covalently closed circle，簡稱CCC)的超螺旋雙鏈DNA分子存在于細(xì)胞中；也發(fā)現(xiàn)有線型雙鏈也發(fā)現(xiàn)有線型雙鏈DNA質(zhì)粒和質(zhì)粒和RNA質(zhì)粒；質(zhì)粒；質(zhì)粒分子的大小范圍從質(zhì)粒分子的大

21、小范圍從1kb左右到左右到1000kb；（細(xì)菌質(zhì)粒多在（細(xì)菌質(zhì)粒多在10kb以內(nèi)）以內(nèi)）第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子（參見（參見 P201）一、質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)一、質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)2、質(zhì)粒的檢測、質(zhì)粒的檢測t 提取所有胞內(nèi)提取所有胞內(nèi)DNA后電鏡觀察；后電鏡觀察；t 超速離心或瓊脂糖凝膠電泳與染色體超速離心或瓊脂糖凝膠電泳與染色體DNA分開后觀察分開后觀察；t 對于實(shí)驗(yàn)室常用菌，可用質(zhì)粒所帶的某些特點(diǎn)，對于實(shí)驗(yàn)室常用菌，可用質(zhì)粒所帶的某些特點(diǎn)， 如抗藥性初步判斷。如抗藥性初步判斷。第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子（參見（參見 P201）二、質(zhì)粒的主要類型二、質(zhì)粒的主要類型在

22、某些特殊條件下，質(zhì)粒有時(shí)能賦予宿主細(xì)胞以在某些特殊條件下，質(zhì)粒有時(shí)能賦予宿主細(xì)胞以特殊的機(jī)能，從而使宿主得到生長優(yōu)勢。特殊的機(jī)能，從而使宿主得到生長優(yōu)勢。質(zhì)粒所含的質(zhì)粒所含的基因基因?qū)λ拗骷?xì)胞一般是非必需的；對宿主細(xì)胞一般是非必需的；第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子（參見（參見 P202）二、質(zhì)粒的主要類型二、質(zhì)粒的主要類型質(zhì)粒所編碼的功能和賦予宿主的表型效應(yīng)致育因子（Fertility factor，F(xiàn)因子）抗性因子（Resistance factor，R因子）產(chǎn)細(xì)菌素的質(zhì)粒（Bacteriocin production plasmid）毒性質(zhì)粒（virulence plasmid

23、）代謝質(zhì)粒（Metabolic plasmid）隱秘質(zhì)粒（cryptic plasmid）第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子（參見（參見 P202）二、質(zhì)粒的主要類型1、致育因子致育因子(Fertility factor，F(xiàn)因子因子)又稱又稱F質(zhì)粒，其大小約質(zhì)粒，其大小約100kb，這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象（接合作用）有關(guān)的質(zhì)粒。的有性生殖現(xiàn)象（接合作用）有關(guān)的質(zhì)粒。攜帶攜帶F質(zhì)粒的菌株稱為質(zhì)粒的菌株稱為F+菌株菌株（相當(dāng)于雄性），無（相當(dāng)于雄性），無F質(zhì)粒的質(zhì)粒的菌株稱為菌株稱為F-菌株（相當(dāng)于雌性）。菌株（相當(dāng)于雌性）。第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)

24、粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子（參見（參見 P202）二、質(zhì)粒的主要類型2、抗性因子（Resistance factor，R因子）包括抗藥性和抗重金屬二大類，簡稱R質(zhì)粒。R1質(zhì)?？墒顾拗鲗ο铝兴幬锛爸亟饘倬哂锌剐裕汗╩ercuric ion ，mer）四環(huán)素（tetracycline，tet ）鏈霉素(Streptomycin, Str)、磺胺(Sulfonamide, Su)、氯霉素(Chlorampenicol, Cm)夫西地酸（fusidic acid，fus）這些抗性基因是成簇地存在于抗性質(zhì)粒上?？剐再|(zhì)粒在細(xì)菌間的傳遞是細(xì)菌產(chǎn)生抗藥性的重要原因之一。第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座

25、因子（參見（參見 P202）二、質(zhì)粒的主要類型3、產(chǎn)細(xì)菌素的質(zhì)粒（產(chǎn)細(xì)菌素的質(zhì)粒（Bacteriocin production plasmid） Col（產(chǎn)大腸桿菌素）質(zhì)粒（產(chǎn)大腸桿菌素）質(zhì)粒細(xì)菌素結(jié)構(gòu)基因、 涉及細(xì)菌素運(yùn)輸及發(fā)揮作用（processing）的蛋白質(zhì)的基因、 賦予宿主對該細(xì)菌素具有“免疫力”的相關(guān)產(chǎn)物的基因攜帶該質(zhì)粒的菌株，產(chǎn)生的細(xì)菌素?cái)y帶該質(zhì)粒的菌株，產(chǎn)生的細(xì)菌素(大腸菌素）大腸菌素）可以殺死周圍近源不攜帶該質(zhì)粒的菌株?？梢詺⑺乐車床粩y帶該質(zhì)粒的菌株。所編碼基因：所編碼基因：抑制近緣或同類菌株生長。抑制近緣或同類菌株生長。第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子（參見（

26、參見 P203）二、質(zhì)粒的主要類型4、毒性質(zhì)粒（virulence plasmid）許多致病菌的致病性是由其所攜帶的質(zhì)粒引起的，這些質(zhì)粒具有編碼毒素的基因，其產(chǎn)物對宿主（動(dòng)物、植物）造成傷害。產(chǎn)毒素大腸桿菌是引起人類和動(dòng)物腹瀉的主要病原菌之一，其中許多菌株含有為一種或多種腸毒素編碼的質(zhì)粒。蘇云金桿菌含有編碼內(nèi)毒素(伴孢晶體中)的質(zhì)粒根癌土壤桿菌所含Ti質(zhì)粒是引起雙子葉植物冠癭瘤的致病因子第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子（參見（參見 P203）二、質(zhì)粒的主要類型5、代謝質(zhì)粒（代謝質(zhì)粒（Metabolic plasmid）質(zhì)粒上攜帶有有利于微生物生存的基因，如能降解某些基質(zhì)的酶，進(jìn)行共生

27、固氮，或產(chǎn)生抗生素（某些放線菌）等。將復(fù)雜的有機(jī)化合物降解成能被其作為碳源和能源利用的簡單形式，環(huán)境保護(hù)方面具有重要的意義。假單胞菌：具有降解一些有毒化合物，如芳香簇化合物(苯)、農(nóng)藥(2,4dichlorophenoxyacetic acid)、辛烷和樟腦等的能力。降解質(zhì)粒：第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子（參見（參見 P203）二、質(zhì)粒的主要類型6、隱秘質(zhì)粒（隱秘質(zhì)粒（cryptic plasmid）隱秘質(zhì)粒不顯示任何表型效應(yīng)，它們的存在只有通過物理的方法，例如用凝膠電泳檢測細(xì)胞抽提液等方法才能發(fā)現(xiàn)。它們存在的生物學(xué)意義，目前幾乎不了解。在應(yīng)用上，很多（隱秘）質(zhì)粒被加以改造作為基

28、因工程的載體在應(yīng)用上，很多（隱秘）質(zhì)粒被加以改造作為基因工程的載體（一般加上抗性基因）（一般加上抗性基因）重要性狀基因重要性狀基因 重組插入質(zhì)粒重組插入質(zhì)粒 整合到表達(dá)細(xì)胞的染色體上整合到表達(dá)細(xì)胞的染色體上病毒蛋白疫苗病毒蛋白疫苗三、轉(zhuǎn)座因子三、轉(zhuǎn)座因子 transposible element 位于染色體或質(zhì)粒上的一段能改變自身位置的位于染色體或質(zhì)粒上的一段能改變自身位置的DNA序列，序列，廣泛分布于原核和真核細(xì)胞中。廣泛分布于原核和真核細(xì)胞中。第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子原核生物轉(zhuǎn)座因子有三類：原核生物轉(zhuǎn)座因子有三類：插入序列插入序列 IS：最簡單，只含轉(zhuǎn)座酶基因，引起轉(zhuǎn)座效

29、應(yīng)，不：最簡單，只含轉(zhuǎn)座酶基因，引起轉(zhuǎn)座效應(yīng)，不 含其它基因。含其它基因。轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子 Tn ：含有幾個(gè)至十幾個(gè)具有遺傳特性的基因。：含有幾個(gè)至十幾個(gè)具有遺傳特性的基因。Mu噬菌體：最大，含有噬菌體：最大，含有20多個(gè)基因。多個(gè)基因。轉(zhuǎn)座因子是重要的遺傳學(xué)研究和基因工程研究工具轉(zhuǎn)座因子是重要的遺傳學(xué)研究和基因工程研究工具 通過轉(zhuǎn)座引起通過轉(zhuǎn)座引起插入突變插入突變第四節(jié)第四節(jié) 基因突變及修復(fù)基因突變及修復(fù)（參見（參見 P 206）一個(gè)基因內(nèi)部遺傳結(jié)構(gòu)或一個(gè)基因內(nèi)部遺傳結(jié)構(gòu)或DNA序列的任何改變序列的任何改變基因突變：第四節(jié)第四節(jié) 基因突變及修復(fù)基因突變及修復(fù)（參見（參見 P 206）一個(gè)基因內(nèi)部

30、遺傳結(jié)構(gòu)或一個(gè)基因內(nèi)部遺傳結(jié)構(gòu)或DNA序列的任何改變序列的任何改變基因突變：基因突變基因突變DNA損傷修復(fù)機(jī)制損傷修復(fù)機(jī)制突變突變自發(fā)突變誘變DNA復(fù)制過程中自發(fā)產(chǎn)生的突變，復(fù)制過程中自發(fā)產(chǎn)生的突變，頻率較低，通常為頻率較低，通常為10-6-10-9 。某些物理、化學(xué)因素對某些物理、化學(xué)因素對DNA直接直接作用產(chǎn)生的突變，頻率高作用產(chǎn)生的突變，頻率高。前突可以通過DNA復(fù)制而成為真正的突變，也可以重新變?yōu)樵瓉淼慕Y(jié)構(gòu)，這取決于修復(fù)作用和其它多種因素。1）非對應(yīng)性）非對應(yīng)性（突變與環(huán)境之間）（突變與環(huán)境之間）2）稀有性）稀有性（突變率）（突變率）3）規(guī)律性）規(guī)律性（特定性狀突變率）（特定性狀突變率

31、）4）獨(dú)立性）獨(dú)立性（各種性狀之間）（各種性狀之間）5）遺傳和回復(fù)性）遺傳和回復(fù)性（突變型與野生型）（突變型與野生型）6）可誘變性）可誘變性（提高突變率）（提高突變率）第四節(jié)第四節(jié) 基因突變及修復(fù)基因突變及修復(fù)一、自發(fā)突變一、自發(fā)突變（參見（參見 P 209）特點(diǎn)：特點(diǎn)： 誘變劑：誘變劑： 能提高突變率的物理、化學(xué)和生物因子。能提高突變率的物理、化學(xué)和生物因子。 P211 種類：種類： 1、堿基類似物：、堿基類似物： 替代堿基整合進(jìn)入替代堿基整合進(jìn)入DNA 異構(gòu)化異構(gòu)化 堿基錯(cuò)配（轉(zhuǎn)換）堿基錯(cuò)配（轉(zhuǎn)換） 2、插入染料（吖啶類）、插入染料（吖啶類） 插入堿基對之間使其分開插入堿基對之間使其分開

32、DNA復(fù)制滑動(dòng)復(fù)制滑動(dòng) 移碼移碼 3、反應(yīng)誘變劑、反應(yīng)誘變劑 亞硝酸、羥胺和各種烷化劑亞硝酸、羥胺和各種烷化劑 轉(zhuǎn)換、顛換、缺失轉(zhuǎn)換、顛換、缺失 4、輻射、熱、輻射、熱 堿基聚合堿基聚合 堿基錯(cuò)配（轉(zhuǎn)換）堿基錯(cuò)配（轉(zhuǎn)換） C 脫氨脫氨 U 5、生物誘變因子、生物誘變因子 轉(zhuǎn)座因子（轉(zhuǎn)座因子（Tn、Mu）插入序列）插入序列 移碼移碼 （一般攜帶可選擇標(biāo)記，如抗性基因）（一般攜帶可選擇標(biāo)記，如抗性基因） 第四節(jié)第四節(jié) 基因突變及修復(fù)基因突變及修復(fù)二、誘變突變二、誘變突變第四節(jié)第四節(jié) 基因突變及修復(fù)基因突變及修復(fù)三、常見的微生物突變類型三、常見的微生物突變類型（參見（參見 P 207-209）1）營

33、養(yǎng)缺陷型（）營養(yǎng)缺陷型（auxotroph）一種缺乏合成其生存所必須的營養(yǎng)物（一種缺乏合成其生存所必須的營養(yǎng)物（包括氨基酸、維生素包括氨基酸、維生素、堿基等、堿基等）的合成能力的突變型，只有從周圍環(huán)境獲得這些）的合成能力的突變型，只有從周圍環(huán)境獲得這些營養(yǎng)或其前體物才能生長。營養(yǎng)或其前體物才能生長。營養(yǎng)缺陷型是微生物遺傳學(xué)研究中重要的選擇標(biāo)記和營養(yǎng)缺陷型是微生物遺傳學(xué)研究中重要的選擇標(biāo)記和育種的重要手段育種的重要手段表型判斷的標(biāo)準(zhǔn)：在基本培養(yǎng)基上能否生長在基本培養(yǎng)基上能否生長第四節(jié)第四節(jié) 基因突變及修復(fù)基因突變及修復(fù)三、常見的微生物突變類型三、常見的微生物突變類型（參見（參見 P 207-20

34、9）1）營養(yǎng)缺陷型（）營養(yǎng)缺陷型（auxotroph）特點(diǎn)：在選擇培養(yǎng)基（一般為基本培養(yǎng)基）上不生長在選擇培養(yǎng)基（一般為基本培養(yǎng)基）上不生長負(fù)選擇標(biāo)記負(fù)選擇標(biāo)記突變株不能通過選擇平板直接獲得突變株不能通過選擇平板直接獲得1）營養(yǎng)缺陷型（auxotroph）實(shí)驗(yàn)步驟見 P 208影印平板（影印平板（Replica plating）法是法是LederbergLederberg夫婦在夫婦在19521952年建立年建立第四節(jié) 基因突變及修復(fù)三、常見的微生物突變類型三、常見的微生物突變類型（參見（參見 P 207-209）營養(yǎng)缺陷型的表示方法：營養(yǎng)缺陷型的表示方法：1）營養(yǎng)缺陷型（）營養(yǎng)缺陷型（auxo

35、troph）基因型：基因型：所需營養(yǎng)物的前三個(gè)英文小寫斜體字母表示：所需營養(yǎng)物的前三個(gè)英文小寫斜體字母表示：hisC（組氨酸缺陷型，其中的大寫字母組氨酸缺陷型，其中的大寫字母C表示突變的基因表示突變的基因）表型：表型：同上，但第一個(gè)字母大寫，且不用斜體：第一個(gè)字母大寫，且不用斜體：HisCHisC在具體使用時(shí)多用在具體使用時(shí)多用hisC-和和hisC+，分別表示缺陷型和野生型分別表示缺陷型和野生型。第四節(jié) 基因突變及修復(fù)三、常見的微生物突變類型三、常見的微生物突變類型（參見（參見 P 207-209）2）抗藥性突變型（）抗藥性突變型（resistant mutant）基因突變使菌株對某種或某幾

36、種藥物，特別是抗生素，產(chǎn)生抗性。基因突變使菌株對某種或某幾種藥物，特別是抗生素，產(chǎn)生抗性。特點(diǎn)：特點(diǎn)：正選擇標(biāo)記正選擇標(biāo)記（突變株可直接從抗性平板上獲得）（突變株可直接從抗性平板上獲得）表示方法：表示方法：所抗藥物的前三個(gè)小寫斜體英文字母加上所抗藥物的前三個(gè)小寫斜體英文字母加上“r”表示表示strr 和和 strs 分別表示對鏈霉素的抗性和敏感性分別表示對鏈霉素的抗性和敏感性第四節(jié) 基因突變及修復(fù)三、常見的微生物突變類型三、常見的微生物突變類型（參見（參見 P 207-209）3）條件致死突變型（）條件致死突變型（conditional lethal mutant） 在某一條件下具有致死效應(yīng)，

37、而在另一條件下沒有致死在某一條件下具有致死效應(yīng)，而在另一條件下沒有致死效應(yīng)的突變型。效應(yīng)的突變型。常用的條件致死突變是溫度敏感突變，用常用的條件致死突變是溫度敏感突變，用ts（temperaturesensitive）表示，這類突變在高溫下（如表示，這類突變在高溫下（如42）是致死的，在低溫（如）是致死的，在低溫（如25-30）下生長。下生長。特點(diǎn)：負(fù)選擇標(biāo)記負(fù)選擇標(biāo)記這類突變型常被用來分離生長繁殖必需的突變基因：耐高溫基因第四節(jié)第四節(jié) 基因突變及修復(fù)基因突變及修復(fù)二、常見的微生物突變類型二、常見的微生物突變類型（參見（參見 P 207-209）4）形態(tài)突變型（）形態(tài)突變型（morpholog

38、ical mutant）造成形態(tài)改變的突變型特點(diǎn)：非選擇性突變突變株和野生型菌株均可生長，但可從形態(tài)特征上進(jìn)行區(qū)分。舉例：產(chǎn)蛋白酶缺陷突變株的篩選菌落顏色變化形成芽孢缺陷菌株第四節(jié)第四節(jié) 基因突變及修復(fù)基因突變及修復(fù)四、誘變劑與致癌物質(zhì)四、誘變劑與致癌物質(zhì)Ames試驗(yàn)試驗(yàn)（參見（參見 P 212）“生物化學(xué)統(tǒng)一性生物化學(xué)統(tǒng)一性”法則：人和細(xì)菌在人和細(xì)菌在DNA的結(jié)構(gòu)及特性方面是一致的，的結(jié)構(gòu)及特性方面是一致的，能使微生物發(fā)生突變的誘變劑也會(huì)使人能使微生物發(fā)生突變的誘變劑也會(huì)使人DNA發(fā)發(fā)生突變。生突變?；貜?fù)突變回復(fù)突變(reverse mutation或或back mutation)：突變體失

39、去的野生型性狀，可以通過第二次突變突變體失去的野生型性狀，可以通過第二次突變得到恢復(fù)，這種第二次突變稱為回復(fù)突變得到恢復(fù)，這種第二次突變稱為回復(fù)突變美國加利福尼亞大學(xué)的美國加利福尼亞大學(xué)的Bruce Ames教授于教授于1966年發(fā)明，年發(fā)明，因此稱為因此稱為Ames試驗(yàn)試驗(yàn)具體操作：檢測具體操作：檢測鼠傷寒沙門氏菌鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhmurium)組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株( his - )的回復(fù)突變率的回復(fù)突變率Ames試驗(yàn)證明證明Ames試驗(yàn)重要性的應(yīng)用實(shí)例：試驗(yàn)重要性的應(yīng)用實(shí)例：在60-70年代十分流行“反應(yīng)?！?但隨后人們就發(fā)現(xiàn)畸形兒的出生率明

40、顯增高，后來采用Ames試驗(yàn)證明這種物質(zhì)的確具有很強(qiáng)的致突變作用，因此這種藥物被禁止使用但如果能在這種藥物上市之前就進(jìn)行Ames試驗(yàn)檢測，悲劇完全可以避免。第五節(jié)第五節(jié) 微生物育種微生物育種自發(fā)突變與育種自發(fā)突變與育種從生產(chǎn)中選育從生產(chǎn)中選育定向培育優(yōu)良品種定向培育優(yōu)良品種二、誘變育種二、誘變育種 1、誘變育種的基本環(huán)節(jié)、誘變育種的基本環(huán)節(jié) 2、誘變育種的原則、誘變育種的原則 3、篩選突變株的方法、篩選突變株的方法一、一、三、體內(nèi)基因重組三、體內(nèi)基因重組1、結(jié)合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、原生質(zhì)體融合、結(jié)合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、原生質(zhì)體融合2、雜交育種、雜交育種四、體外基因重組（四、體外基因重組（DNA Shuff

41、ling技術(shù)）技術(shù)）青霉素產(chǎn)量：青霉素產(chǎn)量：誘變育種的效果誘變育種的效果1945時(shí)間1943194319431947195519711977目前發(fā)酵單位(u/ml)10025050085085080002萬5萬510萬 效價(jià)：指有效成分的濃度。效價(jià)：指有效成分的濃度。1ug/ul稱為稱為1 單位單位一、誘變育種的基本環(huán)節(jié)一、誘變育種的基本環(huán)節(jié)出發(fā)菌株出發(fā)菌株計(jì)算出計(jì)算出誘變誘變大多死亡大多死亡少數(shù)存活少數(shù)存活存活率存活率多數(shù)未變多數(shù)未變少數(shù)突變少數(shù)突變突變率突變率多數(shù)負(fù)變多數(shù)負(fù)變少數(shù)正變少數(shù)正變正變率正變率多數(shù)幅度小多數(shù)幅度小少數(shù)幅度大少數(shù)幅度大高產(chǎn)率高產(chǎn)率投產(chǎn)率投產(chǎn)率多數(shù)不宜投產(chǎn)多數(shù)不宜投產(chǎn)

42、少數(shù)適宜投產(chǎn)少數(shù)適宜投產(chǎn) 選擇簡便有效的誘變劑選擇簡便有效的誘變劑：紫外線、烷化劑：紫外線、烷化劑選優(yōu)良的出發(fā)菌株選優(yōu)良的出發(fā)菌株：生產(chǎn)中優(yōu)良變異株：生產(chǎn)中優(yōu)良變異株處理單孢子（或單細(xì)胞）懸液處理單孢子（或單細(xì)胞）懸液：易于純化：易于純化選用最適劑量選用最適劑量：殺菌率為：殺菌率為40-70%為宜為宜利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)：兩中、多種誘變劑：兩中、多種誘變劑利用形態(tài)、生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)利用形態(tài)、生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)： 菌落形態(tài)、顏色、變色圈、抑制圈菌落形態(tài)、顏色、變色圈、抑制圈設(shè)計(jì)或采用高效篩選方案或方法：設(shè)計(jì)或采用高效篩選方案或方法：初篩、復(fù)篩初篩、復(fù)篩時(shí)期：對數(shù)

43、生長期時(shí)期：對數(shù)生長期二、誘變育種的原則二、誘變育種的原則三、篩選突變株的方法三、篩選突變株的方法1、高產(chǎn)突變、高產(chǎn)突變2、抗性突變、抗性突變3、營養(yǎng)缺陷型突變、營養(yǎng)缺陷型突變春日霉素產(chǎn)生春日霉素產(chǎn)生菌的孢子懸液菌的孢子懸液突變突變1 1、高高產(chǎn)產(chǎn)突突變變株株的的篩篩選選 含供試菌種含供試菌種（拮抗對象）（拮抗對象）的瓊脂平板的瓊脂平板培養(yǎng)基培養(yǎng)基( (含氯霉素含氯霉素) ) 接入接入解烴棒桿菌解烴棒桿菌（含抗性突變株）（含抗性突變株） 涂布涂布培養(yǎng)培養(yǎng)抗氯霉素的抗氯霉素的解烴棒桿菌解烴棒桿菌可篩選出可篩選出棒桿菌素高產(chǎn)菌棒桿菌素高產(chǎn)菌2、抗性突變的篩選、抗性突變的篩選 目的：目的：抗生素高產(chǎn)

44、菌抗生素高產(chǎn)菌 其它產(chǎn)物高產(chǎn)菌其它產(chǎn)物高產(chǎn)菌P233完全培養(yǎng)基完全培養(yǎng)基影印接種影印接種基本培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基營養(yǎng)缺陷型營養(yǎng)缺陷型3、營養(yǎng)缺陷型、營養(yǎng)缺陷型突變篩選突變篩選影印法影印法3、營養(yǎng)缺陷型、營養(yǎng)缺陷型突變篩選突變篩選限量補(bǔ)充培養(yǎng)法限量補(bǔ)充培養(yǎng)法P232圖圖 含微量蛋白質(zhì)的完全培養(yǎng)基上微量蛋白質(zhì)的完全培養(yǎng)基上 小菌落是營養(yǎng)缺陷型突變株小菌落是營養(yǎng)缺陷型突變株第五節(jié)第五節(jié) 微生物育種微生物育種三、體內(nèi)基因重組三、體內(nèi)基因重組1、雜交育種、雜交育種原核微生物：轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)原核微生物：轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo) P215-222轉(zhuǎn)化：轉(zhuǎn)化：受體細(xì)胞直接吸收來自供體細(xì)胞的受體細(xì)胞直接吸收來自供體細(xì)胞的

45、DNADNA片斷，并把它整合片斷，并把它整合 到自己的基因組中，細(xì)胞部分遺傳性狀發(fā)生變化的現(xiàn)象。到自己的基因組中，細(xì)胞部分遺傳性狀發(fā)生變化的現(xiàn)象。 特點(diǎn)：特點(diǎn)：供體供體DNADNA片斷片斷注入受體細(xì)胞，通過細(xì)胞膜注入受體細(xì)胞，通過細(xì)胞膜 方法：方法： CaClCaCl2 2 、電穿孔法使受體細(xì)胞成為感受態(tài)、電穿孔法使受體細(xì)胞成為感受態(tài)轉(zhuǎn)導(dǎo)：轉(zhuǎn)導(dǎo)：遺傳物質(zhì)通過噬菌體的攜帶而轉(zhuǎn)移的基因重組遺傳物質(zhì)通過噬菌體的攜帶而轉(zhuǎn)移的基因重組 特點(diǎn)：特點(diǎn)：供體供體DNADNA片斷通過媒介（噬菌體）攜帶進(jìn)入受體片斷通過媒介（噬菌體）攜帶進(jìn)入受體 方法：方法：噬菌體感染給體細(xì)胞噬菌體感染給體細(xì)胞 含給體細(xì)胞含給體細(xì)胞DNA的的 子代噬菌體子代噬菌體 感染受體細(xì)胞感染受體細(xì)胞 重組細(xì)胞重組細(xì)胞第五節(jié)第五節(jié) 微生物育種微生物育種三、體內(nèi)基因重組三、體內(nèi)基因重組1、雜交育種、雜交育種接合：接合：通過細(xì)胞間的直接接觸能進(jìn)行大段的轉(zhuǎn)移通過細(xì)胞間的直接接觸能進(jìn)行大段的轉(zhuǎn)移 的過程。的過程。 特點(diǎn)：特點(diǎn)：供體進(jìn)入受體通過性毛供體進(jìn)