藥物敏感試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上藥物敏感試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告篇一：藥敏試驗(yàn)報(bào)告藥敏試驗(yàn)報(bào)告（瓊脂稀釋法）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康臋z測(cè)載銅離子土對(duì)沙門氏菌的最小抑菌濃度（mIc）二、實(shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)材料與試劑材料：平板，錐形瓶，10mLep管等；試劑：載銅離子土，沙門氏菌，瓊脂平板計(jì)數(shù)培養(yǎng)基，mh肉湯培養(yǎng)基，硫酸（1%），氯鋇（0.25%）。四、實(shí)驗(yàn)方法1配制瓊脂平板計(jì)數(shù)培養(yǎng)基，按配方配制300mL，mh肉湯培養(yǎng)基100mL，待高壓；2高壓滅菌平板，錐形瓶，10mLep管等；3沙門氏菌擴(kuò)大培養(yǎng):10mlep管中加入4mlmh肉湯培養(yǎng)基，4ul菌液，放置搖床37，220rpm過夜培養(yǎng)；4麥?zhǔn)媳葷峁?.5的制備：0.25%氯

2、化鋇0.1ml，1%硫酸4.9ml。8（即細(xì)菌的近似濃度為×10/ml）5將擴(kuò)大培養(yǎng)的沙門氏菌調(diào)制0.5麥?zhǔn)媳葷岫群?，再稀?00倍備用；（每組做三個(gè)重復(fù)，16-24h后觀察結(jié)果）五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)組1、2以及對(duì)照組平板中，肉眼可見針尖狀半透明菌落，革蘭氏染色后，鏡下形態(tài)為紅色短桿狀，初步斷定為沙門氏菌；實(shí)驗(yàn)組3、4、5未見菌落，涂片染色后，鏡下也未觀察到細(xì)菌。六、結(jié)論載銅離子土對(duì)沙門氏菌最小抑菌濃度（mIc）為3g/L。篇二：001-藥物敏感試驗(yàn)抗菌藥物實(shí)驗(yàn)方法藥敏試驗(yàn)由于養(yǎng)殖過程中不科學(xué)的、盲目的濫用抗菌藥，細(xì)菌的耐藥性問題正變得越來越突出，不少耐藥菌株可耐受多種抗生素。由此而造成

3、的危害十分嚴(yán)重，它不僅使抗菌藥的療效降低，療程延長，死亡率升高和治療費(fèi)用增加。這不僅給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失，而且耐藥菌株可能會(huì)將耐藥性基因由動(dòng)物轉(zhuǎn)移給人類，對(duì)人類健康也造成潛在威脅。專家強(qiáng)調(diào)指出，臨床上應(yīng)合理應(yīng)用抗菌藥，以避免或減少耐藥性的產(chǎn)生，而合理應(yīng)用抗菌藥控制畜禽疾病的一項(xiàng)重要內(nèi)容就是通過藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)臨床用藥，以充分發(fā)揮抗菌藥療效，并盡可能減少其不良影響。目前由各種細(xì)菌所引起的疾病給畜禽養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，阻礙了養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展和經(jīng)濟(jì)效益，所以使用抗菌藥預(yù)防和治療細(xì)菌性疾病成了畜禽養(yǎng)殖過程中的一項(xiàng)重要工作。但由于養(yǎng)殖過程中不科學(xué)的、盲目的濫用抗菌藥，細(xì)菌的耐藥性問題正變得越來越突

4、出，不少耐藥菌株可耐受多種抗生素。由此而造成的危害十分嚴(yán)重，它不僅使抗菌藥的療效降低，療程延長，死亡率升高和治療費(fèi)用增加。這不僅給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失，而且耐藥菌株可能會(huì)將耐藥性基因由動(dòng)物轉(zhuǎn)移給人類，對(duì)人類健康也造成潛在威脅。因此，臨床上應(yīng)合理應(yīng)用抗菌藥，以避免或減少耐藥性的產(chǎn)生，而合理應(yīng)用抗菌藥控制畜禽疾病的一項(xiàng)重要內(nèi)容就是通過藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)臨床用藥，以充分發(fā)揮抗菌藥療效，并盡可能減少其不良影響。一、什么是藥敏試驗(yàn)？抗菌藥物敏感性試驗(yàn)（Antimicrobialsusceptibilitytest，AsT），簡稱藥敏試驗(yàn)，是指對(duì)敏感性不能預(yù)測(cè)的分離菌株進(jìn)行試驗(yàn)，測(cè)試抗菌藥在體外對(duì)病原微生物

5、有無抑制作用，以指導(dǎo)選擇治療藥物和了解區(qū)域內(nèi)常見病原菌耐藥性變遷，有助于經(jīng)驗(yàn)性治療選藥。藥敏試驗(yàn)是獸醫(yī)臨床工作中的一項(xiàng)基本技能，也是使用抗菌藥物治療前必不可少的一道環(huán)節(jié)。二、藥敏試驗(yàn)的意義1、可以相對(duì)快速有效地檢測(cè)病原菌對(duì)各種抗菌藥的敏感性，指導(dǎo)臨床合理用藥。因?yàn)閷?shí)驗(yàn)是在體外對(duì)已經(jīng)分離的細(xì)菌進(jìn)行藥敏，不需要生物載體，不需要實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，操作相對(duì)簡單，成本相對(duì)降低。是一種既經(jīng)濟(jì)又有效的方法。2、可以對(duì)流行病學(xué)調(diào)查進(jìn)行監(jiān)控，控制和預(yù)防耐藥菌株的流行。因?yàn)殡S著新型致病菌的不斷出現(xiàn)，各種致病菌對(duì)不同的抗菌藥的敏感性不同，同一細(xì)菌的不同菌株對(duì)不同抗菌藥的敏感性也有差異。進(jìn)行有效的藥敏試驗(yàn)可以及時(shí)掌握各種新型

6、菌種和菌株的耐藥性，對(duì)流行病學(xué)調(diào)查建立監(jiān)控，同時(shí)采取相應(yīng)的措施也就可以控制和預(yù)防耐藥菌株的流行。3、為臨床用藥提供參考依據(jù)。因?yàn)橐粋€(gè)正確的藥敏試驗(yàn)結(jié)果，可作為臨床獸醫(yī)和畜禽養(yǎng)殖者選用有效抗菌藥的參考。長期以來，由于各種致病菌耐藥性的產(chǎn)生使各種常用抗菌藥藥效下降或消失。不能很好的掌握藥物對(duì)細(xì)菌的敏感程度，不但造成藥物浪費(fèi)，而且還延誤病情，給養(yǎng)殖戶造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。近十幾年，在肉雞生產(chǎn)中，為了控制大腸桿菌及某些細(xì)菌感染，一些抗菌藥物的盲目使用，導(dǎo)致耐藥菌株越來越多。根據(jù)已進(jìn)行的大量藥敏試驗(yàn)結(jié)果，大腸桿菌、沙門氏菌對(duì)曾經(jīng)敏感的氨基糖苷類、氟喹諾酮類等，均產(chǎn)生了不同程度的耐藥性，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)對(duì)十幾種常

7、用抗菌藥都不敏感的菌株。這是一個(gè)非常危險(xiǎn)的信號(hào)。所以在臨床疾病防治工作中，要取得較好的治療效果，應(yīng)擴(kuò)大常規(guī)抗菌藥種類進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，選擇敏感藥物，且應(yīng)注意交替用藥，按療程投藥，這樣才能收到較好的治療效果。三、常用的藥敏試驗(yàn)方法獸醫(yī)臨床常用的藥敏試驗(yàn)方法主要有兩種，即擴(kuò)散法和稀釋法。其中擴(kuò)散法屬手工測(cè)試方法，通過測(cè)試藥物紙片或者牛津杯在固體培養(yǎng)基上的抑菌圈的大小，判斷細(xì)菌對(duì)該種藥物是否敏感。稀釋法包括試管稀釋法和微量稀釋法，通過測(cè)試細(xì)菌在含不同濃度藥物培養(yǎng)基內(nèi)的生長情況，判斷其最低抑菌濃度（mIc）。（一）紙片法由于擴(kuò)散法操作簡單，成本低，已經(jīng)被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室和基層單位所采用。擴(kuò)散

8、法又包括紙片法、牛津杯法和打孔法，目前牛津杯法和打孔法在獸醫(yī)臨床已較少應(yīng)用。以下簡單介紹紙片法。1、藥敏紙片的制作紙片法中使用的藥敏紙片目前市場(chǎng)上已有較多廠家的產(chǎn)品銷售。但也可根據(jù)需要自制，具體自制的方法如下：取質(zhì)量較好的定性濾紙，用普通的打孔器打成直徑6mm的圓形小紙片。取圓紙片50片放入清潔干燥的小瓶或小平皿中，以單層牛皮紙?jiān)诨虬?。?jīng)15磅15-20分鐘高壓滅菌后，置于37溫箱或烘箱中數(shù)天，使完全干燥。按每張紙片飽和吸水量為0.01ml計(jì)，在上述含有50片紙片的小瓶內(nèi)加入藥液0.5ml，不時(shí)翻動(dòng)，使濾紙片將藥液均勻吸凈，一般浸泡30分鐘即可。同時(shí)在記錄藥物名稱，于37溫箱過夜。在溫箱或

9、烘箱中的時(shí)間不宜過長，以免某些抗生素失效。青霉素、金霉素宜在低溫下真空干燥。干燥后即密封。切勿受潮，置陰暗干燥處或家用冰箱中保存，有效期4-6個(gè)月。2、藥液的制備自制藥敏紙片時(shí)還需自行配制抗菌藥液?？咕幍南♂寗┩ǔＳ谜麴s水。一般可按商品藥使用說明書上的配料或飲水濃度，按1g需加多少毫升水或配多少毫克飼料，就相當(dāng)于配制藥液所加蒸餾水的毫升數(shù)。如10g藥物可配50kg飼料，其換算方法為：1g本品加5000ml蒸餾水。此溶液液即為用于做藥敏試驗(yàn)的藥液。3、試驗(yàn)操作方法在超凈工作臺(tái)中或酒精燈旁，用無菌棉簽或經(jīng)酒精燈火焰滅菌的接種環(huán)挑取適量細(xì)菌培養(yǎng)物，以劃線方式將菌液均勻涂布到平皿中的固體培養(yǎng)基表面。

10、然后用無菌鑷子將紙片放于固體培養(yǎng)基表面并輕壓，使紙片與培養(yǎng)基表面完全接觸。為了能準(zhǔn)確觀察結(jié)果，要求藥敏紙片均勻分布于培養(yǎng)基上，位置安排適中，防止出現(xiàn)抑制圈重疊。一般各紙片中心相距應(yīng)大于24mm，可在平皿中央貼一片，外周等距離貼56片。記住每種藥敏紙片的名稱。貼完紙片的平皿15分鐘后再置于37溫箱中培養(yǎng)1624小時(shí)，觀察記錄結(jié)果。以藥敏紙片周圍沒有肉眼可見生長物區(qū)域?yàn)橐志?，根?jù)抑菌圈直徑大小判斷細(xì)菌對(duì)抗菌藥的敏感性。表1藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)抑菌圈直徑（毫米）敏感性20XX-2010-14100極敏感高敏感中敏感低敏感不敏感實(shí)踐證明，利用自制藥敏紙片進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，可以靈活選藥，與某病菌相關(guān)的藥物

11、均可隨時(shí)制作藥敏紙片用于治療?？稍诒緢?chǎng)藥品范圍內(nèi)或本地區(qū)容易買到的藥品中選出最敏感的藥物。還可在短時(shí)間內(nèi)選擇最佳藥品和最佳劑量，既能縮短病程，又能避免盲目用藥，減少浪費(fèi)。4、影響藥敏試驗(yàn)結(jié)果的因素在以紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)時(shí)，以下幾方面因素可影響試驗(yàn)的結(jié)果：（1）培養(yǎng)基：首先應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)菌的營養(yǎng)需要選擇適宜的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的成分的不同，不僅影響敏感菌株的生長繁殖并可影響到抑制圈的直徑。一般細(xì)菌，如大腸桿菌及葡萄球菌可使用普通營養(yǎng)瓊脂；做磺胺類藥物敏感試驗(yàn)時(shí)應(yīng)選用無蛋白胨平板；鏈球菌和巴氏桿菌可用綿羊血瓊脂平板。其次，傾注平板時(shí)，厚度應(yīng)合適（約5-6mm），不可太薄，一般90mm直徑的培養(yǎng)皿，傾注培養(yǎng)

12、基18-20ml為宜。培養(yǎng)基內(nèi)應(yīng)盡量避免有抗菌藥物的拮抗物質(zhì)，如鈣、鎂離子能減低氨基糖苷類的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和對(duì)氨苯甲酸（pAbA）能拮抗磺胺藥和Tmp的活性。（2）細(xì)菌接種量：細(xì)菌接種量應(yīng)恒定，如太多，抑菌圈變小，能產(chǎn)酶的菌株更可破壞藥物的抗菌活性。（3）藥物濃度：藥物的濃度和總量直接影響抑菌試驗(yàn)的結(jié)果，需精確配制。商品藥應(yīng)嚴(yán)格按照其推薦治療量配制。（4）培養(yǎng)時(shí)間：一般細(xì)菌培養(yǎng)溫度和時(shí)間為3712-24小時(shí)，有些抗菌藥擴(kuò)散慢如多粘菌素，可將已放好藥敏紙片的培養(yǎng)基先置4冰箱內(nèi)2-4小時(shí)，使抗菌藥預(yù)擴(kuò)散，然后再放37溫箱中培養(yǎng)，可以推遲細(xì)菌的生長，而得到較明顯的抑菌圈。5、紙片法藥敏試驗(yàn)存

13、在的問題當(dāng)前進(jìn)行藥敏試驗(yàn)仍然存在一些問題，主要包括以下幾方面：（1）方法學(xué)不統(tǒng)一，沒有標(biāo)準(zhǔn)化。（2）市場(chǎng)提供的藥敏試驗(yàn)的培養(yǎng)基、藥敏紙片等缺乏嚴(yán)格質(zhì)控，質(zhì)量難以保證。所以還是建議按要求自制藥敏紙片。（3）因需要先進(jìn)行細(xì)菌的分離培養(yǎng)，所以藥敏試驗(yàn)報(bào)告出結(jié)果時(shí)間長，檢驗(yàn)與臨床缺乏溝通，對(duì)于基層獸醫(yī)站或養(yǎng)殖場(chǎng)，藥敏結(jié)果不能滿足臨床治療要求，容易延誤治療時(shí)機(jī)。但根據(jù)有關(guān)報(bào)道，也可進(jìn)行簡易的藥敏試驗(yàn)，方法如下：無菌取病死畜禽的部分肝、脾等組織，按1：5加生理鹽水研磨制成懸液，靜置5分鐘，用無菌吸管吸懸液，加兩滴于營養(yǎng)瓊脂板上，涂布均勻，5分鐘后貼上藥敏試紙，培養(yǎng)、觀察抑菌圈大小。（4）對(duì)于部分營養(yǎng)需求較

14、高的細(xì)菌或微生物，如鏈球菌和支原體，臨床上較難培養(yǎng)，限制了藥敏試驗(yàn)的應(yīng)用。（5）部分養(yǎng)殖場(chǎng)或基層獸醫(yī)站缺乏做細(xì)菌分離培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)的意識(shí)。絕大多數(shù)養(yǎng)殖者或技術(shù)人員是在沒有明確微生物學(xué)診斷的情況下使用抗菌藥物，養(yǎng)殖場(chǎng)規(guī)模越小，細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)做的越少，有的養(yǎng)殖場(chǎng)輪翻使用多種抗菌藥物而不做細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，致使療效不佳，治療時(shí)機(jī)延誤和藥品的浪費(fèi)。一些病例用藥前不做藥敏試驗(yàn)，而是在大量使用多種抗菌藥物療效不明顯時(shí)才想起做細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，而此時(shí)細(xì)菌已對(duì)多種抗菌藥產(chǎn)生耐藥性。6、紙片法藥敏試驗(yàn)中應(yīng)注意的問題藥敏試驗(yàn)不僅是獸醫(yī)工作中的一項(xiàng)基本技能，也是使用藥物治療前必不可少的一道環(huán)節(jié)，因此在實(shí)際操

15、作過程中應(yīng)注意以下幾個(gè)問題，以保證試驗(yàn)結(jié)果的可靠性。（1）病料采集：采集病料最好是典型的病例，原則上采集的時(shí)間越早越好，特別是夏季，如果時(shí)間過長會(huì)發(fā)生質(zhì)變，影響試驗(yàn)的結(jié)果，通常采集5份以上，使其具有代表性。（2）劃線接種：在接種的過程中，所用剪刀或手術(shù)刀必須滅菌消毒，用酒精燈消毒時(shí)，在切口時(shí)注意不要過熱，否則燙死細(xì)菌，劃線涂布時(shí)定要均勻。（3）培養(yǎng)基的選擇：如前所述，培養(yǎng)基的成分的不同，不僅影響敏感菌株的生長繁殖并可影響到抑制圈的直徑。因此，操作過程中應(yīng)注意培養(yǎng)基的選擇，必要時(shí)可進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)。（4）待試菌的涂布：用滅菌鉑金耳無菌操作進(jìn)行待試菌涂布時(shí)，應(yīng)涂布均勻，并注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基的表面。

16、（5）貼紙片：貼紙片時(shí)位置一定要安排適中，防止出現(xiàn)抑制圈重疊。（6）判定結(jié)果：根據(jù)試驗(yàn)不同要求，并嚴(yán)格遵守細(xì)菌生化實(shí)驗(yàn)室觀察結(jié)果的時(shí)間要求，多在24小時(shí)內(nèi)判定，注意時(shí)間過長或過短都會(huì)影響到抑制圈的正常結(jié)果。（二）稀釋法及其他方法1、肉湯稀釋法1.1常量肉湯稀釋法1.1.1.抗菌藥物貯存液制備抗菌藥物貯存液濃度不應(yīng)低于1000g/ml(如1280g/ml)或10倍于最高測(cè)定濃度。溶解度低的抗菌藥物可稍低于上述濃度。抗菌藥物直接購自廠商或相關(guān)機(jī)構(gòu)。配制好的抗菌藥物貯存液應(yīng)貯存于-60以下環(huán)境，保存期不超過6個(gè)月。1.1.2.藥敏試驗(yàn)用抗菌藥物濃度范圍根據(jù)抗菌藥物敏感性試驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)，藥物濃度范圍應(yīng)包

17、含耐藥、中介和敏感分界點(diǎn)值，特殊情況例外。1.1.3.培養(yǎng)基推薦使用mueller-hinton（mh）肉湯，ph7.27.4。需氧菌及兼性厭氧菌在此培養(yǎng)基中生長良好。在測(cè)試葡萄球菌對(duì)苯唑西林的敏感性時(shí)，應(yīng)在肉湯中加入2%（w/V）氯化鈉，按制造廠家的要求配制需要量的mh肉湯。嗜血桿菌屬菌使用hTm肉湯，肺炎鏈球菌和其它鏈球菌使用含2%5%溶解馬血的mh肉湯。營養(yǎng)瓊脂平板制備：牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化鈉5g、瓊脂20g、蒸餾水1000ml營養(yǎng)肉湯制備：牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化鈉5g、蒸餾水1000ml1.1.4.接種物的制備以細(xì)菌生長方法配制接種物：用接種環(huán)挑取形態(tài)相似待檢菌落3-

18、5個(gè)，接種于4-5ml的mh肉湯中，37孵育2-6h。對(duì)增菌后的對(duì)數(shù)生長期菌液進(jìn)行平板菌落計(jì)數(shù)，一般約含1089cFu/ml。用mh肉湯將上述菌懸液進(jìn)行1100010000稀釋后備用。并取一份接種物在非選擇性瓊脂平板上傳代培養(yǎng)，以檢查接種物純度。取無菌試管（13×100mm）1012支，排成一排，除第1管加入1.6mlmh肉湯外，其余每管加入mh肉湯1ml，在第1管加入抗菌藥物原液（如1280g/ml）0.4ml混勻，然后吸取1ml至第2管，混勻后再吸取1ml至第3管，如此連續(xù)倍比稀釋至第11管，并從第11管中吸取1ml棄去，第12管為不含藥物的生長對(duì)照。此時(shí)各管藥物濃度依次為256

19、、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25g/ml。然后在每管內(nèi)加入上述制備好的接種物各1ml，使每管最終菌液濃度約為5×105cFu/ml。第1管至第11管藥物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125g/ml。另設(shè)藥物對(duì)照（藥物營養(yǎng)肉湯）、培養(yǎng)基對(duì)照（營養(yǎng)肉湯）。表2試管稀釋法操作方法1按每管需1.0ml，每排12管計(jì)算，一排需13ml（首管為2.0ml），如需重復(fù)4次，則共需42ml，計(jì)算損耗在內(nèi)，應(yīng)需50ml。依次類推。b、菌液制備最終需將菌液稀釋成濁度為105cFu/ml的應(yīng)用菌液。而菌原液濁度約為108cFu/ml，

20、故共需稀釋1000倍。首先取菌原液（濁度約為108cFu/ml）0.2ml加至1.8mlmh肉湯中，混勻后取0.5ml加至49.5mlmh肉湯中，即為105cFu/ml的應(yīng)用菌液50ml。c、計(jì)算所需菌液總量取無菌試管（13×100mm）1012支，排成一排，除第1管加入1.8ml應(yīng)用菌液外，其余每管加入應(yīng)用菌液1ml（或0.9ml），在第1管加入抗菌藥物原液（如1280g/ml）0.2ml混勻，然后吸取1ml(或0.9ml)至第2管，混勻后再吸取1ml(或0.9ml)至第3管，如此連續(xù)倍比稀釋至第11管，并從第11管中吸取1ml(或0.9ml)棄去，第12管為不含藥物的生長對(duì)照。此

21、時(shí)各管藥物濃度依次為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125g/ml。另設(shè)藥物對(duì)照（藥物營養(yǎng)肉湯）、培養(yǎng)基對(duì)照（營養(yǎng)肉湯）。表3試管稀釋法操作方法21.1.6.孵育將接種好的稀釋管塞好塞子，置37普通空氣孵箱中孵育1620h。1.1.7.結(jié)果判斷與解釋在讀取和報(bào)告所測(cè)試菌株的mIc前，應(yīng)檢查生長對(duì)照管的細(xì)菌生長情況是否良好，同時(shí)還應(yīng)檢查接種物的傳代培養(yǎng)情況以確定其是否污染。以肉眼觀察，藥物最低濃度管無細(xì)菌生長者，即為受試菌的mIc。1.2微量肉湯稀釋法1.2.1.抗菌藥物和培養(yǎng)基制備同常量肉湯稀釋法。1.2.2.mIc板制備無菌操作，將倍比稀釋后不同濃度的抗菌藥物

22、溶液分別加到滅菌的96孔聚苯乙烯板中，第1至第11孔加藥液，每孔10l，第12孔不加藥作為生長對(duì)照，冰凍干燥后密封，-20(:藥物敏感試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告)以下保存?zhèn)溆谩?.2.3.接種物制備將用生長法或直接菌懸液法制備的濃度為1089cFu/ml菌懸液，經(jīng)mh肉湯1100010000稀釋后，向每孔中加100l，密封后置37普通空氣孵箱中，孵育1620h判斷結(jié)果。此時(shí)，第1孔至第11孔藥物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125g/ml。1.2.4.結(jié)果判斷以在小孔內(nèi)完全抑制細(xì)菌生長的最低藥物濃度為mIc。當(dāng)陽性對(duì)照孔（即不含抗生素）內(nèi)細(xì)菌明顯生長試驗(yàn)才有意義。

23、當(dāng)在微量肉湯稀釋法出現(xiàn)單一的跳孔時(shí)，應(yīng)記錄抑制細(xì)菌生長的最高藥物濃度。如出現(xiàn)多處跳孔，則不應(yīng)報(bào)告結(jié)果，需重復(fù)試驗(yàn)。通常對(duì)革蘭陰性桿菌而言，微量肉湯稀釋法測(cè)得的mIc與常量肉湯稀釋法測(cè)得的結(jié)果相同或低一個(gè)稀釋度（1孔或2倍）。2、瓊脂稀釋法瓊脂稀釋法是將不同劑量的抗菌藥物，加入融化并冷至50左右的定量mh瓊脂中，制成含不同遞減濃度抗菌藥物的平板，接種受試菌，孵育后觀察細(xì)菌生長情況，以抑制細(xì)菌生長的瓊脂平板所含最低藥物濃度為mIc。本法優(yōu)點(diǎn)是可在一個(gè)平板上同時(shí)作多株菌mIc測(cè)定，結(jié)果可靠，易發(fā)現(xiàn)污染菌；缺點(diǎn)是制備含藥瓊脂平板費(fèi)時(shí)費(fèi)力。2.1.培養(yǎng)基制備使用mh瓊脂，按商品說明書進(jìn)行配制，ph7.27.4。2.2.含藥瓊脂平板制備根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，將已倍比稀釋的不同濃度的抗菌藥物分別加入已加熱溶解，并在4550水浴中平衡的mh瓊脂中，充分混勻傾倒滅菌平皿，瓊脂厚度34mm。通常按19比例配制藥物瓊脂平板，根據(jù)需要來選擇藥物濃度范圍。配制好的含藥瓊脂平板應(yīng)裝入密封塑料袋中，置28冰箱可貯存5天。篇三：藥敏試驗(yàn)與報(bào)告解讀藥敏試驗(yàn)與報(bào)告解讀一、藥敏試驗(yàn)1、概念:測(cè)定