宮頸鱗癌轉移淋巴結乙酰肝素酶的表達及臨床意義--畢業(yè)答辯

1、宮頸鱗癌轉移淋巴結乙酰肝素酶宮頸鱗癌轉移淋巴結乙酰肝素酶的表達及臨床意義的表達及臨床意義 研研 究究 生生 指導老師指導老師2目錄目錄t 研究背景與目的研究背景與目的t 研究方法研究方法t 研究結果研究結果t 主要結論主要結論t 討論討論t 展望展望t 致謝致謝 研究背景與目的（研究背景與目的（1 1）u宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，其最主要的轉移途徑是淋巴轉移，淋巴轉移是目前明確的可導致臨床治療失敗和死亡的主要原因。u有研究發(fā)現(xiàn)1宮頸癌無淋巴結轉移的患者5年生存率為80%90%，當淋巴結有轉移時生存率下降至45%，盆腔淋巴結轉移是影響宮頸癌患者預后的重要因素。研究背景與目的（研究背景與目的

2、（2 2）u有報道指出2,3，宮頸癌伴有淋巴結轉移者，約60%為多組淋巴結轉移，其中有53%的病例出現(xiàn)了跳躍性轉移。u如能在術前準確的預測淋巴結的轉移情況，即可準確的了解腫瘤的范圍，選擇合適的治療方案，避免不必要的根治性手術及術后相應并發(fā)癥的發(fā)生，但目前對于淋巴結轉移的診斷，尚缺乏有效的手段。研究背景與目的（研究背景與目的（3 3） 乙酰肝素酶（heparanase，HPA）是一種-D-葡萄糖醛酸內切酶，它能在數(shù)個位點降解硫酸乙酰肝素蛋白多糖，破壞細胞外基質和基膜的完整性，同時釋放VEGF、b-FGF、細胞因子、細胞粘附分子等生物活性因子，從而有利于腫瘤細胞穿越細胞外基質和血管壁，促進腫瘤的局

3、部侵襲和遠處轉移。 乙酰肝素酶作用機制模式圖4研究背景與目的（研究背景與目的（4 4）u我們的前期研究及一些國外的研究均已證實HPA在宮頸癌原發(fā)灶中的表達顯著增高，是宮頸癌的重要生物標志物。 u本研究通過免疫組織化學法檢測宮頸鱗癌原發(fā)灶及轉移淋巴結中HPA的表達情況，分析宮頸鱗癌淋巴結HPA的表達與臨床預后因素間的關系，以期為宮頸鱗癌淋巴結的轉移診斷提供一新的分子指標。研究方法（研究方法（1 1）u收集鄭州大學第二附屬醫(yī)院病理科2007年1月2012年12月病理確診且臨床資料完整的宮頸鱗癌石蠟標本102例，其中淋巴結轉移者53例（A組），淋巴結未轉移者49例（B組）。A組取原發(fā)灶、轉移淋巴結及

4、未轉移淋巴結3個部位B組取原發(fā)灶和淋巴結2個部位，用于免疫組織化學染色研究方法（研究方法（2 2）u采用免疫組織化學S-P法檢測HPA在宮頸鱗癌淋巴結轉移者（A組）和淋巴結未轉移者（B組）的表達情況。u分別行常規(guī)HE染色和HPA、CK19免疫組織化學標記，CK19為鱗狀上皮標記。u結合圖像分析技術檢測各組中HPA表達的平均灰度值和陽性單位。研究方法（研究方法（3 3）圖1 研究技術路線研究方法（研究方法（4 4）u所有數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析，圖像分析數(shù)據(jù)采用s表示，各組間比較采用方差分析，HPA表達率采用卡方檢驗。u生存曲線采用Kaplan-Meier方法，生存率比較采用Lo

5、g-rank檢驗，多因素分析采用Cox回歸分析法。u檢驗水平= 0.05。研究結果（研究結果（1 1）1.1.宮頸鱗癌原發(fā)灶和淋巴結中宮頸鱗癌原發(fā)灶和淋巴結中HPAHPA的陽性表達情況的陽性表達情況0%20%40%60%80%100%A組B組原發(fā)灶未轉移淋巴結轉移淋巴結圖2 宮頸鱗癌原發(fā)灶和淋巴結中的HPA陽性表達率12研究結果（研究結果（3 3）3 3. .宮頸鱗癌原發(fā)灶和淋巴結中宮頸鱗癌原發(fā)灶和淋巴結中HPAHPA的表達情況的表達情況表1 宮頸鱗癌原發(fā)灶和淋巴結中HPA的表達水平比較分組例數(shù)平均灰度值FP 陽性單位FP A組組原發(fā)灶531028*30.5210.0005.03.96.351

6、0.021轉移淋巴結531193#4.74.4未轉移淋巴結5313651.30.7B組組原發(fā)灶49113321.3970.0004.73.14.827 0.037淋巴結4914341.10.8研究結果（研究結果（4 4）4.4.淋巴結淋巴結HPAHPA表達水平與臨床病理學特征的關系表達水平與臨床病理學特征的關系圖 4 宮頸鱗癌淋巴結的轉移與患者生存分析圖 5 宮頸鱗癌淋巴結HPA表達水平與患者生存分析研究結果（研究結果（5 5）5 5. .宮頸鱗癌中宮頸鱗癌中HPAHPA的表達與生存時間的關系的表達與生存時間的關系 研究結果（研究結果（6 6）6 6. .宮頸鱗癌預后的宮頸鱗癌預后的CoxCo

7、x模型多因素分析模型多因素分析主要結論主要結論1.HPA在宮頸鱗癌原發(fā)灶和轉移淋巴結中的表達均顯著增高，可作為宮頸鱗癌淋巴結轉移的生物學檢測指標；2.宮頸鱗癌淋巴結轉移者MOS明顯低于淋巴結未轉移者，淋巴結轉移是宮頸癌的獨立預后因素；3.淋巴結HPA陽性表達者MOS明顯低于淋巴結HPA陰性表達者，提示淋巴結HPA陽性患者預后差。 1.HPA1.HPA在宮頸癌中的研究在宮頸癌中的研究討論（討論（1 1）u我們的前期研究及一些國外的研究均已證實HPA在宮頸癌原發(fā)灶中的表達顯著增高，是宮頸癌的重要生物標志物。u本課題對宮頸鱗癌淋巴結HPA的表達情況進行了全面的研究，證實宮頸癌原發(fā)灶HPA的陽性表達率

8、明顯增高，與我們前期研究結果相同。討論（討論（2 2）u本研究中，轉移淋巴結表達率高達92.6%，提示HPA的異常表達在宮頸鱗癌淋巴結轉移中發(fā)揮了重要作用，可能參與宮頸鱗癌腹膜后淋巴結轉移的過程。uDafni等6在檢測HPA表達對淋巴結轉移效應的研究中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)生物素標記后，HPA高表達的淋巴瘤小鼠的腘窩淋巴結較HPA低表達的小鼠腘窩淋巴結的MRI顯像強度明顯增加，說明HPA表達對淋巴結的轉移有影響。討論（討論（3 3） u淋巴結清掃的范圍一直是宮頸癌患者手術爭論的熱點，術前若能通過宮頸癌特異性分子標志物，對宮頸癌患者淋巴結轉移的情況進行評估，則可針對轉移淋巴結行相應淋巴結清掃以減少手術創(chuàng)傷，對

9、術后是否輔以放療也起到了關鍵性的指導作用。討論（討論（4 4）2.2.淋巴結中淋巴結中HPAHPA表達的研究現(xiàn)況表達的研究現(xiàn)況u國內外都在尋找轉移淋巴結特異性和敏感性的生物分子指標。u基于我們的前期研究工作，本研究是國內外首次以HPA為靶分子的宮頸癌轉移淋巴結的研究。u本研究對我們下一步進行的研究，宮頸癌PET成像診斷研究的靶分子的選擇提供了依據(jù)，尤其是鱗癌轉移淋巴結無創(chuàng)傷PET成像診斷的研究。展望展望t HPA的研究經(jīng)歷了一個漫長的時期，其作用機制也逐漸清晰。HPA不僅是宮頸癌的生物標志物，也有望成為宮頸鱗癌轉移淋巴結診斷的生物標志物。在我們下一步要進行的宮頸癌PET成像診斷的研究中，HPA

10、作為宮頸癌示蹤劑，是對其作用的進一步開發(fā)，同樣擁有廣闊的前景和更加深遠的意義。1 Aoki Y, Sasaki M, Watanabe M, et al. High-risk group in node-positive patients with stageB,A, and B cervical carcinoma after radical hysterectomy and postoperative pelvic irradiation JGynecol oncol, 2000, 77(2):305-309.2 馮淑瑜, 張彥娜, 劉建剛, 等. 宮頸癌淋巴結轉移的高危因素及預后分析J癌

11、癥, 2005, 24(10):1261-1266.3 張秀珍, 付玉蘭, 趙西俠, 等. 宮頸癌盆腔淋巴結轉移情況分析J現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學, 2005, 13(2):232-234.4 Expression and analysis of heparanase、VEGF and-FGF in prostate cancerJ. Oncol Res, 2006, 61(3):219-234.5 Parish CR,Freeman C,Hulett MD,et al.Heparanase:a key enzyme involved in cell invasionJ.Biochim Biophys Acta,2001,1471:99-108.6 Dafni H, Cohen B, Ziv K, e