HPLC法測(cè)定小兒酚氨咖敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚含量

HPLC法測(cè)定小兒酚氨咖敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚含量〔〕:

摘要：目的建立高效液相色譜法測(cè)定小兒酚氨咖敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚的含量。方法采用高效液相色譜法。色譜柱：DiamonsilC18〔250x4.6mm,5m〕；流動(dòng)相：1%醋酸溶液〔用二乙胺調(diào)pH至3.7〕甲醇〔60：40〕；流速：1.0mL-min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：257nm。結(jié)果對(duì)乙酰氨基酚在8~120g-mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r=0.9998。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，適于小兒酚氨咖敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；含量；小兒酚氨咖敏顆粒；對(duì)乙酰氨基酚

本文引用格式：高翔,王濤,賈首前,等.HPLC法測(cè)定小兒酚氨咖敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚含量[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2022,19(78):266,276.

0引言

小兒酚氨咖敏顆粒是如今市場(chǎng)上常見的用于兒童的藥物，每袋含對(duì)乙酰氨基酚63mg,咖啡因15mg,馬來酸氯苯那敏1mg，氨基比林50mg。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)【1】WS-10001-(HD-1107)-2022給出了氨基比林、咖啡因、馬來酸氯苯那敏含量測(cè)定的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)，但對(duì)其另一主要成分，對(duì)乙酰氨基酚的含量、限度和測(cè)定方法沒有規(guī)定。為了更好的控制其質(zhì)量，本文以高效液相色譜法測(cè)定小兒酚氨咖敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚含量，結(jié)合中國藥典以及參考相關(guān)文獻(xiàn)[2-3],建立了小兒酚氨咖敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚含量的高效液相色譜法，方法學(xué)結(jié)果說明：本方法簡(jiǎn)便易行，精細(xì)度高，重現(xiàn)性好，具有很好的可行性。

1儀器與試藥

1.1儀器

美國Waters公司高效液相色譜儀〔AllianceE2695色譜系統(tǒng)，2489紫外檢測(cè)器，Empower工作站〕瑞士梅特勒公司ME204型，XPE105型全自動(dòng)電子分析天平，昆山超聲儀器KQ-500DE型，超聲波清洗器。

1.2試藥

試藥：對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品〔中國藥品生物制品檢定研究院〕批號(hào)100018-202208，小兒酚氨咖敏顆?！步鸹ㄆ髽I(yè)〔集團(tuán)〕股份西安金花制藥廠〕〔批號(hào)171213〕。

試劑：冰醋酸〔國藥集團(tuán)化學(xué)試劑，批號(hào)：20220425〕分析純，二乙胺〔國藥集團(tuán)化學(xué)試劑，批號(hào)：20221031〕分析純，甲醇〔默克公司，批號(hào)：1837107.623〕色譜純，水為18.3Mu;Omega;-CM的超純水。

2方法與結(jié)

2.1色譜條件

色譜柱：DiamonsilC18〔250x4.6mm,5m〕；流動(dòng)相：1%醋酸溶液〔用二乙胺調(diào)pH至3.7〕甲醇〔60：40〕；柱溫：30℃;流速：1.0mL-min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：257nm；進(jìn)樣量：20l。

2.2溶液的配制

對(duì)照品溶液：精細(xì)稱取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品40.02mg，置于到100mL容量瓶中，加適量的流動(dòng)相，徹底搖勻使對(duì)乙酰氨基酚完全溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，制成約400g/mL〔400.2g/mL〕的溶液，制成對(duì)照品儲(chǔ)藏液；精細(xì)量取5mL上述對(duì)照品儲(chǔ)藏液，置50mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。

供試品溶液：取本品10袋，研細(xì)，精細(xì)稱取細(xì)粉0.8028g〔約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚10mg〕，置50mL容量瓶中，參加適量的流動(dòng)相，超聲15min，使樣品完全溶解，放冷，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精細(xì)移取5mL續(xù)濾液,置25mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.3專屬性試驗(yàn)

精細(xì)量取陰性對(duì)照溶液、對(duì)照品溶液和供試品溶液按上述2.1色譜條件分別進(jìn)展測(cè)定，結(jié)果見圖1.結(jié)果說明：供試品溶液在與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品溶液保存時(shí)間一致處有相應(yīng)的色譜峰；陰性對(duì)照溶液在與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品溶液保存時(shí)間一致處無相應(yīng)的色譜峰。本方法的專屬性良好。

2.4線性關(guān)系試驗(yàn)

準(zhǔn)確量取上述2.2中對(duì)照品儲(chǔ)藏液1.0mL、3.0mL、5.0mL、10.0mL和15.0mL，分別置50mL容量瓶中，參加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻即得濃度分別為8.004g/mL、24.012g/mL、40.02g/mL、80.04g/mL和120.06g/mL的系列對(duì)照品溶液。分別在2.1色譜條件下測(cè)定，記錄色譜圖，以濃度X〔g/mL〕為橫坐標(biāo)，以峰面積積分值Y為縱坐標(biāo)，進(jìn)展線性回歸，得回歸方程為Y=63602X-22557,r=0.9998。結(jié)果說明對(duì)乙酰氨基酚在8.004~120.06g-mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5檢測(cè)限和定量限試驗(yàn)

取線性關(guān)系試驗(yàn)項(xiàng)下對(duì)乙酰基酚濃度為40.02g/mL的對(duì)照品溶液，用流動(dòng)相逐步稀釋，以上述2.1色譜條件進(jìn)展進(jìn)樣，記錄色譜圖，按信噪比為3:1時(shí)的對(duì)照品濃度為檢測(cè)限,結(jié)果得對(duì)乙酰氨基酚檢測(cè)線濃度為0.002g/mL；以信噪比為10:1時(shí)的對(duì)照品濃度為定量限，結(jié)果得對(duì)乙酰氨基酚定量限濃度為0.010g/mL。

2.6重復(fù)性試驗(yàn)

取批號(hào)為171213的樣品按2.2.2項(xiàng)下供試品溶液制備方法平行制備6份樣品溶液。按上述2.1色譜條件測(cè)定，結(jié)果6份樣品中對(duì)乙酰氨基酚含量平均值為63.33mg/袋，RSD為0.77%。

2.7精細(xì)度實(shí)驗(yàn)

精細(xì)汲取上述2.2中對(duì)照品儲(chǔ)藏液5mL,置50mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，，按照上述2.1色譜條件重復(fù)測(cè)定6次，測(cè)定其峰面積積分值的RSD值為0.1%。結(jié)果說明，本方法精細(xì)度良好。

2.8含量測(cè)定

取批號(hào)為171213的樣品，按2.2.2項(xiàng)下供試品溶液制備方法制備樣品，按"2.1";項(xiàng)下色譜條件進(jìn)展測(cè)定，結(jié)果測(cè)定的平均含量為100.3%。

3討論

3.1溶劑的選擇

在挑選含量測(cè)定的流動(dòng)相以及溶劑時(shí)有從以下幾個(gè)方面考慮，首先本品為多組分藥品，成分較多需要考慮該方法中其他成分對(duì)對(duì)乙?；拥姆迕娣e有無影響；其次需要考慮選擇的溶劑是否能使對(duì)乙酰氨基酚完全溶解；最后還需要考慮對(duì)乙?；优c其他幾種成分的別離度是否良好，綜上考慮故挑選用：1%醋酸溶液〔用二乙胺調(diào)節(jié)PH值為3.7〕甲醇〔60：40〕為流動(dòng)相及溶劑。

3.2方法學(xué)評(píng)價(jià)

本文是以高效液相法測(cè)定小兒酚氨咖敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚的含量，經(jīng)過試驗(yàn)方法學(xué)的考察，在本文選定的色譜條件下，小兒酚氨咖敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚與其它成分別離度良好，對(duì)乙酰氨基酚在8~120g-mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r=0.9998。本方法可以方便準(zhǔn)確的測(cè)出對(duì)乙酰氨基酚的含量，且本方法簡(jiǎn)便易行，精細(xì)度高，重現(xiàn)性好，可以很好的控制產(chǎn)品質(zhì)量，具有很好的可行性。

參考文獻(xiàn)

【1】國家藥品監(jiān)視管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)(化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升