B淋巴細胞課件

第九章B淋巴細胞第九章B淋巴細胞來源：是由哺乳動物骨髓或鳥類法氏囊中淋巴樣干細胞分化成熟而來。分布：骨髓中的淋巴細胞主要是B細胞脾中的淋巴細胞，50%淋巴結(jié)中的淋巴細胞，25%外周血淋巴細胞，5%-25%來源：是由哺乳動物骨髓或鳥類法氏囊中淋巴樣干細胞分化成熟而來第一節(jié)B細胞的分化發(fā)育第一節(jié)B細胞的分化發(fā)育BCR是表達于B細胞表面的免疫球蛋白，即膜型免疫球蛋白（membraneimmunoglobulin,mIg）。B細胞通過BCR識別抗原，接受抗原刺激，啟動體液免疫應(yīng)答。

編碼BCR重鏈或輕鏈的基因是以數(shù)個分隔開的基因片段的形式成簇存在的。在B細胞的分化過程中，只有經(jīng)過基因重排，才能形成有功能的BCR。（一）BCR的基因結(jié)構(gòu)、重排及其多樣性BCR是表達于B細胞表面的免疫球蛋白，即膜型免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)第九章B淋巴細胞(共47張)課件443015402p1112962540HBCRCJDV染色體定位肽鏈

人BCR染色體定位和功能性基因片段編碼可變區(qū)編碼恒定區(qū)443015402p11129625VH（variable）:

人VH基因片段為40個，根據(jù)同源性分為7個家族，編碼H鏈的信號序列和V區(qū)1-98aa，包括CDR1和CDR2

D（diversity）：

人D基因片段為25個，編碼V區(qū)中大部分CDR3

JH（joining）：

人JH基因片段為6個，編碼CDR3其余部分和第4個骨架，15-17aa重鏈重鏈基因CDR1CDR2CDR3VCVDJCBCR的基因結(jié)構(gòu)（一）重鏈V區(qū)基因VH（variable）:重鏈重鏈CH：人CH基因片段含多個外顯子，在大多數(shù)情況下C區(qū)中每個結(jié)構(gòu)域和鉸鏈區(qū)是由單獨外顯子編碼。重鏈重鏈基因CDR1CDR2CDR3VCVDJC（二）重鏈C區(qū)基因重鏈重鏈基因CDR1CDR2CDR3VV：人V基因片段為40個，根據(jù)同源性可分7個家族，編碼1-95aa，包括CDR1、CDR2和部分CDR3

J：人J基因片段為5個，編碼96-108aa,包括部分CDR3和第4個骨架區(qū)

C：人C基因片段為1個，編碼109-214aa輕鏈輕輕基因CDR1CDR2CDR3VCVJC（三）輕鏈的結(jié)構(gòu)V：人V基因片段為40個，根據(jù)同

人Vλ約有30個，根據(jù)同源性可分10個家族；Jλ和Cλ各4個，并成對排列輕鏈輕輕基因CDR1CDR2CDR3VCVJC（四）λ輕鏈的結(jié)構(gòu)輕鏈輕輕基因CDR1CDR2（一）重組信號序列(recombinationsignalsequence,RSS)

重排過程主要由一組重組酶來識別V、（D）、J基因片段兩側(cè)的重組信號序列，通過切斷、修復(fù)DNA而實現(xiàn)的RSS

結(jié)構(gòu)：回文結(jié)構(gòu)七聚體富含A/T的九聚體分布：V片段3、J片段

5和D片段的兩側(cè)RSS與重鏈VDJ基因重排：D+JDJV+DJVDJRSS與輕鏈VJ基因重排：V+JVJBCR的基因重排（一）重組信號序列(recombinationsignal（二）V(D)J重組酶(recombinase)

RAG-1/RAG-2復(fù)合物（重組激活酶復(fù)合物）

性質(zhì)：內(nèi)切酶

表達：T/B淋巴細胞發(fā)育早期階段

作用：識別RSS，切斷七聚體一側(cè)末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）

表達：B細胞前體

作用：通過非模板的方式將數(shù)個核苷酸加到DNA斷端

其它：內(nèi)切酶、DNA外切酶、DNA合成酶等（三）BCR重排順序

H（二）V(D)J重組酶(recombinase)重鏈可變區(qū)基因重排示意圖重鏈可變區(qū)基因重排示意圖

BCR胚系基因重排發(fā)生具有明顯的程序化形式，首先是重鏈進行基因重排，隨后才是輕鏈重排。

經(jīng)過胚系基因的重排，B細胞的DNA序列與其他體細胞有很大不同，這是存在于B細胞和T細胞中非常獨特的現(xiàn)象。BCR胚系基因重排發(fā)生具有明顯的程序化形式，首（四）等位排斥和同型排斥

等位排斥(allelicexclusion)：

在B細胞中的一對同源染色體上，只有一條染色體上的H或L基因可得到有效表達。抑制另一條染色體H基因重排14號染色體有效H基因重排啟動2號染色體鏈基因重排失敗另一條染色體H基因重排

同型排斥(isotypeexclusion)：

Ig和兩型中擇一表達；先表達鏈基因，如鏈基因重排失敗，才開始鏈基因表達。

小鼠：=95:5，人：=65:35（四）等位排斥和同型排斥BCR多樣性產(chǎn)生的機制

胚系中眾多V、D、J基因片段（組合多樣性，combinatorialdiversity）人重鏈：VH(40)D(25)JH(6)=6000人輕鏈：V(40)J(5)=200人輕鏈：V(30)J(4)=120

輕、重鏈不同配對6103

102+6103

102106

V（D）J連接的多樣性（junctionaldiversity）

體細胞高頻突變（somatichypermutation）BCR多樣性產(chǎn)生的機制胚系中眾多V、D、B細胞雙重抗原識別模式圖BCR復(fù)合體介導(dǎo)的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)模式圖6103102+6103102106CD81：連接CD19和CD21，穩(wěn)定復(fù)合物結(jié)構(gòu)。CDR1CDR2CDR3Ig(CD79a)人Vλ約有30個，根據(jù)同源性可分10個家族；B細胞抗原受體(BCR)復(fù)合物B7：CD80/CD86CD80/CD86：活化B細胞表達，與T細胞上CD28和CTLA-4結(jié)合，提供T細胞活化的第二信號；CD80/CD86：活化B細胞表達，與T細胞上CD28和CTLA-4結(jié)合，提供T細胞活化的第二信號；CDR1CDR2CDR3功能：參與固有免疫（二）B細胞的發(fā)育和分化B細胞雙重抗原識別模式圖（二）B細胞的發(fā)育和分化B細胞的發(fā)育階段B細胞的發(fā)育階段B細胞中樞免疫耐受的形成

克隆清除：

未成熟B細胞表面表達的mIgM與骨髓中的自身抗原結(jié)合，會導(dǎo)致該細胞的凋亡。

受體編輯：

mIgM對自身抗原的識別導(dǎo)致RAG基因重新活化，發(fā)生輕鏈VJ的再次重排，合成新的輕鏈。

失能：

mIgM與自身抗原的結(jié)合引起mIgM表達下調(diào)，進入外周淋巴器官后對抗原刺激不應(yīng)答。B細胞中樞免疫耐受的形成克隆清除：第二節(jié)B淋巴細胞的表面分子及其作用第二節(jié)B淋巴細胞的第九章B淋巴細胞(共47張)課件B細胞的膜表面分子

B細胞抗原受體復(fù)合物

B細胞共受體協(xié)同刺激分子

其他表面分子B細胞的膜表面分子B細胞抗原受體復(fù)合物一.B細胞抗原受體(BCR)復(fù)合物

mIgIg(CD79a)Ig(CD79b)BCR復(fù)合物結(jié)構(gòu)模式圖BCR復(fù)合物結(jié)構(gòu)模式圖BCR復(fù)合體介導(dǎo)的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)模式圖BCR復(fù)合體介導(dǎo)的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)模式圖二、B細胞共受體（coreceptor）

CD19/CD21/CD81

多分子活化共受體，增強B細胞對抗原刺激的敏感性。

CD19：胞質(zhì)區(qū)可傳遞活化信號；CD21(CR2)：可結(jié)合補體C3d；CD81：連接CD19和CD21，穩(wěn)定復(fù)合物結(jié)構(gòu)。第九章B淋巴細胞(共47張)課件B細胞雙重抗原識別模式圖B細胞雙重抗原識別模式圖三、協(xié)同刺激分子（co-stimulatorymolecules）

CD40：組成性表達，與活化T細胞CD40L結(jié)合，傳遞B細胞活化第二信號；

CD80/CD86：活化B細胞表達，與T細胞上CD28和CTLA-4結(jié)合，提供T細胞活化的第二信號；

其他黏附分子：ICAM-1（CD54），LFA-1等。第九章B淋巴細胞(共47張)課件ICAM-1LFA-1ICAM-1LFA-1協(xié)同刺激分子B淋巴細胞重要的表面分子示意圖協(xié)同刺激分子B淋巴細胞重要的表面分子示意圖第九章B淋巴細胞(共47張)課件四、其他表面分子

CD20：調(diào)節(jié)B細胞增殖與分化，B細胞特異性標(biāo)志CD22：胞漿含ITIM基序，負調(diào)節(jié)CD19/CD20/CD81CD32：負反饋調(diào)節(jié)B細胞活化及抗體的分泌第九章B淋巴細胞(共47張)課件一、B-1細胞

表面標(biāo)記：CD5＋

分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層

功能：參與固有免疫第三節(jié)B細胞的亞群一、B-1細胞第三節(jié)B細胞的亞群免疫應(yīng)答特點：

多反應(yīng)性（polyreactivity）—指B細胞抗原受體或其所產(chǎn)生的抗體，以相對較低的親和力與多種不同抗原表位結(jié)合的現(xiàn)象。產(chǎn)生IgM為主的低親和力抗體自發(fā)分泌針對微生物脂多糖的天然抗體無免疫記憶免疫應(yīng)答特點：二、B-2細胞

產(chǎn)生各類（亞類）特異性Ig作為抗原提呈細胞對抗原進行加工處理及呈遞分泌細胞因子調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答二、B-2細胞多反應(yīng)性（polyreactivity）—指B細胞抗原受成對排列重鏈可變區(qū)基因重排示意圖性質(zhì)：內(nèi)切酶B7：CD80/CD86信號序列和V區(qū)1-98aa，包括CDR1和CDR2B細胞抗原受體(BCR)復(fù)合物B細胞抗原受體復(fù)合物CDR1CDR2CDR3V：人V基因片段為40個，根據(jù)同源性可分7個家族，編碼1-人Vλ約有30個，根據(jù)同源性可分10個家族；M0-M、DC不能有效捕獲可溶性抗原CD19：胞質(zhì)區(qū)可傳遞活化信號；結(jié)構(gòu)：回文結(jié)構(gòu)七聚體分布：V片段3、J片段5和D片段的兩側(cè)B7：CD80/CD86B-1細胞與B-2細胞的異同B-1細胞B-2細胞表面標(biāo)記CD5，mIgMCD19，mIgM和mIgD抗原識別譜多糖抗原蛋白質(zhì)抗原作用特點快，IgM為主，不發(fā)生類別轉(zhuǎn)換沒有免疫記憶慢，IgG為主，有類別轉(zhuǎn)換有免疫記憶分布體腔和腸壁固有層淋巴結(jié)、脾臟參與應(yīng)答非特異性免疫應(yīng)答特異性免疫應(yīng)答多反應(yīng)性（polyreactivity）—指B細胞抗原受B第四節(jié)B淋巴細胞的功能一、產(chǎn)生抗體參與體液免疫二、加工處理及提呈抗原三、分泌細胞因子調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答第四節(jié)B淋巴細胞的功能一、產(chǎn)生抗體參與體液免疫一、產(chǎn)生抗體參與體液免疫一、產(chǎn)生抗體參與體液免疫1.中和作用：中和毒素中和病毒1.中和作用：中和毒素中和病毒2.調(diào)理吞噬作用2.調(diào)理吞噬作用3.參與補體的溶細胞或溶菌作用大量水份涌入細胞內(nèi)內(nèi)容物向外滲漏細菌細胞3.參與補體的溶細胞或溶菌作用大量水份涌入細胞內(nèi)內(nèi)容物向外4.NK細胞介導(dǎo)的ADCC作用4.NK細胞介導(dǎo)的ADCC作用二、B細胞處理及提呈抗原B細胞可捕獲可溶性抗原

M0-M、DC不能有效捕獲可溶性抗原活化B細胞呈遞抗原

B7：CD80/CD8