大規(guī)模細胞培養(yǎng)與細胞工廠課件

細胞工廠細胞工廠1內(nèi)容一〕動物細胞培養(yǎng)與細胞工廠二〕生物制品三〕疫苗四〕現(xiàn)代生物技術(shù)與基因工程五〕單克隆抗體與抗體藥物六〕干細胞與體細胞治療內(nèi)容一〕動物細胞培養(yǎng)與細胞工廠2我們熟知的細胞培養(yǎng)——動物細胞培養(yǎng)我們熟知的細胞培養(yǎng)——動物細胞培養(yǎng)3動物細胞培養(yǎng)技術(shù)1〕無菌環(huán)境：超凈臺、平安柜2〕生長環(huán)境：CO2培養(yǎng)箱3〕營養(yǎng)環(huán)境：培養(yǎng)基4〕貼壁環(huán)境：培養(yǎng)瓶〔皿〕等、細胞工廠動物細胞培養(yǎng)技術(shù)1〕無菌環(huán)境：超凈臺、平安柜4動物細胞的形態(tài)貼壁細胞：細胞的生長必須有可以貼附的支持物外表，依靠自身分泌的或培養(yǎng)基中提供的貼附因子才能在該外表上生長、增殖，當細胞在該外表生長后，一般形成兩種形態(tài)，即成纖維樣細胞型或上皮樣細胞型懸浮細胞：懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞、Namalwa細胞兼性貼壁細胞：中國倉鼠卵巢細胞、小鼠L929細胞動物細胞的形態(tài)貼壁細胞：細胞的生長必須有可以貼附的支持物外表5〔一〕貼附型：大多數(shù)培養(yǎng)細胞貼附生長，屬于貼壁依賴性細胞貼附:是大多數(shù)有機體細胞在體內(nèi)生存和生長發(fā)育的根本存在方式結(jié)果:基于貼附特性，使細胞與細胞之間相互結(jié)合形成組織，有機體的絕大多數(shù)細胞必須貼附于一固相外表才能生存和生長。培養(yǎng)時：這些細胞被放到體外環(huán)境中以后,同樣需要貼附于某一固相外表才能生存和生長，因而屬于貼附型細胞貼附(錨定或錨著)依賴型(性)細胞：唯有貼附于固相外表才能生存的細胞〔一〕貼附型：6貼附生長型細胞細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、6孔板、96孔板貼附生長型細胞細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、6孔板、96孔板7細胞貼附材料與外表貼附的固相外表材料：玻璃、塑料〔聚苯乙烯〕玻璃：本身具有親水性，適于細胞貼壁塑料：沒有親水性，不能使細胞貼壁，所以必須在塑料外表進展親水性接枝〔等離子處理〕細胞貼附材料與外表貼附的固相外表材料：玻璃、塑料〔聚苯乙烯〕8〔二〕懸浮型：見于少數(shù)特殊的細胞，如某些類型的癌細胞及白血病細胞。胞體圓形，不貼于支持物上，呈懸浮生長。這類細胞容易大量繁殖。概念：培養(yǎng)時不貼附于底物而呈懸浮狀態(tài)生長或以機械方法使保持懸浮狀態(tài)下生長來源：自血，脾或骨髓，血中白細胞癌腫細胞特點：在懸浮中生長良好細胞圓形，單個或小細胞團優(yōu)點：生存空間大，提供數(shù)量大，傳代方便(不需消化)，易于收獲，可獲得穩(wěn)定狀態(tài)缺點：純化不方便，不能通過離心將死、活細胞別離〔二〕懸浮型：9懸浮生長型細胞懸浮生長型細胞10懸浮培養(yǎng)磁力攪拌器懸浮培養(yǎng)磁力攪拌器11大規(guī)模細胞培養(yǎng)細胞工廠培養(yǎng)技術(shù)在大規(guī)模細胞培養(yǎng)中的應用.doc大規(guī)模細胞培養(yǎng)細胞工廠培養(yǎng)技術(shù)在大規(guī)模細胞培養(yǎng)中的應用.do12轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的缺點轉(zhuǎn)瓶技術(shù)為傳統(tǒng)的貼壁細胞培養(yǎng)技術(shù)，細胞接種在旋轉(zhuǎn)的圓筒形培養(yǎng)器-轉(zhuǎn)瓶中，培養(yǎng)過程中轉(zhuǎn)瓶不斷旋轉(zhuǎn)，使細胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣。缺點：勞動強度大，占地空間大，單位體積提供細胞生長的外表積小，細胞生長密度低，瓶間差異較難控制等，因而難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)?；a(chǎn)。重要的是：轉(zhuǎn)瓶由于不是靜止培養(yǎng)，產(chǎn)品質(zhì)量經(jīng)常達不到要求或由于細胞易破碎而存在DNA毒性潛在危險，據(jù)稱國家準備淘汰轉(zhuǎn)瓶生產(chǎn)技術(shù)。

轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的缺點轉(zhuǎn)瓶技術(shù)為傳統(tǒng)的貼壁細胞培養(yǎng)技術(shù)，細胞接種在旋13細胞工廠用于大規(guī)模細胞培養(yǎng)與生產(chǎn)細胞工廠用于大規(guī)模細胞培養(yǎng)與生產(chǎn)14細胞工廠關(guān)鍵技術(shù)：貼壁處理：高真空等離子接枝外表處理〔know-how:接枝材料與接枝技術(shù)〕材料性能：生物相容性〔無細胞毒性〕多層焊接技術(shù)：密封性與結(jié)實性滅菌技術(shù)：Y射線輻照細胞工廠關(guān)鍵技術(shù)：15細胞工廠競爭NuncCorningDHS細胞工廠競爭Nunc16DHS細胞工廠DHS大規(guī)模細胞培養(yǎng)系統(tǒng)單頁.pdfDHS細胞工廠DHS大規(guī)模細胞培養(yǎng)系統(tǒng)單頁.pdf17NuncCellFactoryNuncCellFactory18CorningCellSTACKChamberChoiceoftraditionalsurfacetreatment(TC),newCorning?CellBIND?Surfaceforenhancedcellattachment,orUltra-LowAttachmentSurfaceforreducedcellattachmentCorningCellSTACKChamberChoic19CorningCellSTACKChamberCorningCellSTACKChamber20三種細胞工廠的比較材料：均為PS塑料外表處理：各自的Know-how頂層：DHS同Nunc,便于顯微鏡觀察細胞生長情況焊接工藝：Nunc采用超聲焊接，Corning采用特殊膠粘接，Corning的更加結(jié)實〔不易開裂〕，所以DHS采用Corning的粘接工藝只有DHS是可以定制任意層的細胞工廠三種細胞工廠的比較材料：均為PS塑料21細胞工廠的使用細胞工廠的使用22實驗室應用：替代培養(yǎng)瓶及多層培養(yǎng)瓶實驗室應用：替代培養(yǎng)瓶及多層培養(yǎng)瓶23細胞培養(yǎng)的評價貼壁率細胞生長密度細胞形態(tài)毒力測定細胞培養(yǎng)的評價貼壁率24謝謝！謝謝！25細胞工廠細胞工廠26內(nèi)容一〕動物細胞培養(yǎng)與細胞工廠二〕生物制品三〕疫苗四〕現(xiàn)代生物技術(shù)與基因工程五〕單克隆抗體與抗體藥物六〕干細胞與體細胞治療內(nèi)容一〕動物細胞培養(yǎng)與細胞工廠27我們熟知的細胞培養(yǎng)——動物細胞培養(yǎng)我們熟知的細胞培養(yǎng)——動物細胞培養(yǎng)28動物細胞培養(yǎng)技術(shù)1〕無菌環(huán)境：超凈臺、平安柜2〕生長環(huán)境：CO2培養(yǎng)箱3〕營養(yǎng)環(huán)境：培養(yǎng)基4〕貼壁環(huán)境：培養(yǎng)瓶〔皿〕等、細胞工廠動物細胞培養(yǎng)技術(shù)1〕無菌環(huán)境：超凈臺、平安柜29動物細胞的形態(tài)貼壁細胞：細胞的生長必須有可以貼附的支持物外表，依靠自身分泌的或培養(yǎng)基中提供的貼附因子才能在該外表上生長、增殖，當細胞在該外表生長后，一般形成兩種形態(tài)，即成纖維樣細胞型或上皮樣細胞型懸浮細胞：懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞、Namalwa細胞兼性貼壁細胞：中國倉鼠卵巢細胞、小鼠L929細胞動物細胞的形態(tài)貼壁細胞：細胞的生長必須有可以貼附的支持物外表30〔一〕貼附型：大多數(shù)培養(yǎng)細胞貼附生長，屬于貼壁依賴性細胞貼附:是大多數(shù)有機體細胞在體內(nèi)生存和生長發(fā)育的根本存在方式結(jié)果:基于貼附特性，使細胞與細胞之間相互結(jié)合形成組織，有機體的絕大多數(shù)細胞必須貼附于一固相外表才能生存和生長。培養(yǎng)時：這些細胞被放到體外環(huán)境中以后,同樣需要貼附于某一固相外表才能生存和生長，因而屬于貼附型細胞貼附(錨定或錨著)依賴型(性)細胞：唯有貼附于固相外表才能生存的細胞〔一〕貼附型：31貼附生長型細胞細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、6孔板、96孔板貼附生長型細胞細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、6孔板、96孔板32細胞貼附材料與外表貼附的固相外表材料：玻璃、塑料〔聚苯乙烯〕玻璃：本身具有親水性，適于細胞貼壁塑料：沒有親水性，不能使細胞貼壁，所以必須在塑料外表進展親水性接枝〔等離子處理〕細胞貼附材料與外表貼附的固相外表材料：玻璃、塑料〔聚苯乙烯〕33〔二〕懸浮型：見于少數(shù)特殊的細胞，如某些類型的癌細胞及白血病細胞。胞體圓形，不貼于支持物上，呈懸浮生長。這類細胞容易大量繁殖。概念：培養(yǎng)時不貼附于底物而呈懸浮狀態(tài)生長或以機械方法使保持懸浮狀態(tài)下生長來源：自血，脾或骨髓，血中白細胞癌腫細胞特點：在懸浮中生長良好細胞圓形，單個或小細胞團優(yōu)點：生存空間大，提供數(shù)量大，傳代方便(不需消化)，易于收獲，可獲得穩(wěn)定狀態(tài)缺點：純化不方便，不能通過離心將死、活細胞別離〔二〕懸浮型：34懸浮生長型細胞懸浮生長型細胞35懸浮培養(yǎng)磁力攪拌器懸浮培養(yǎng)磁力攪拌器36大規(guī)模細胞培養(yǎng)細胞工廠培養(yǎng)技術(shù)在大規(guī)模細胞培養(yǎng)中的應用.doc大規(guī)模細胞培養(yǎng)細胞工廠培養(yǎng)技術(shù)在大規(guī)模細胞培養(yǎng)中的應用.do37轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的缺點轉(zhuǎn)瓶技術(shù)為傳統(tǒng)的貼壁細胞培養(yǎng)技術(shù)，細胞接種在旋轉(zhuǎn)的圓筒形培養(yǎng)器-轉(zhuǎn)瓶中，培養(yǎng)過程中轉(zhuǎn)瓶不斷旋轉(zhuǎn)，使細胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣。缺點：勞動強度大，占地空間大，單位體積提供細胞生長的外表積小，細胞生長密度低，瓶間差異較難控制等，因而難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)?；a(chǎn)。重要的是：轉(zhuǎn)瓶由于不是靜止培養(yǎng)，產(chǎn)品質(zhì)量經(jīng)常達不到要求或由于細胞易破碎而存在DNA毒性潛在危險，據(jù)稱國家準備淘汰轉(zhuǎn)瓶生產(chǎn)技術(shù)。

轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的缺點轉(zhuǎn)瓶技術(shù)為傳統(tǒng)的貼壁細胞培養(yǎng)技術(shù)，細胞接種在旋38細胞工廠用于大規(guī)模細胞培養(yǎng)與生產(chǎn)細胞工廠用于大規(guī)模細胞培養(yǎng)與生產(chǎn)39細胞工廠關(guān)鍵技術(shù)：貼壁處理：高真空等離子接枝外表處理〔know-how:接枝材料與接枝技術(shù)〕材料性能：生物相容性〔無細胞毒性〕多層焊接技術(shù)：密封性與結(jié)實性滅菌技術(shù)：Y射線輻照細胞工廠關(guān)鍵技術(shù)：40細胞工廠競爭NuncCorningDHS細胞工廠競爭Nunc41DHS細胞工廠DHS大規(guī)模細胞培養(yǎng)系統(tǒng)單頁.pdfDHS細胞工廠DHS大規(guī)模細胞培養(yǎng)系統(tǒng)單頁.pdf42NuncCellFactoryNuncCellFactory43CorningCellSTACKChamberChoiceoftraditionalsurfacetreatment(TC),newCorning?CellBIND?Surfaceforenhancedcellattachment,orUltra-LowAttachmentSurfaceforreducedcellattachmentCorningCellSTACKChamberChoic44CorningCellSTACKChamberCorningCellSTACKChamber45三種細胞工廠的比較材料：均為PS塑料外表處理：各自的Know-how頂層：DHS同Nunc,便于顯微鏡觀察細胞生