第六章芳酸類及其酯類

第六章芳酸及其酯類藥物分析一、苯甲酸類苯甲酸（pKa4.20）COOH苯甲酸鈉COONa第一節(jié)、典型藥物分類與理化性質(zhì)COOH(CH3CH2CH2)2N

SO2丙磺舒（pKa3.4）HOCOOC2H5羥苯乙酯(二)主要理化性質(zhì)固體，一定的熔點，具苯環(huán)，有紫外吸收，只有苯甲酸鈉溶于水。二、水楊酸類COOHOH水楊酸（pKa2.98）COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）COONaOHNH2對氨基水楊酸鈉?OCOCH3COONHCOCH3貝諾酯結(jié)構(gòu)性質(zhì)：1、具有芳環(huán)、羧基及其它取代基團(tuán)。2、具有游離羧基呈酸性，可成鹽或酯。3、pka=3～6，酸性比鹽酸、硫酸弱，比碳酸、苯酚強(qiáng)。4、含共軛體系，在一定波長處有UV吸收。5、均有紅外吸收酸性：受苯環(huán)、羧基和取代基的影響取代基為-X，-NO2，-OH時酸性比苯甲酸強(qiáng)原因：吸電子效應(yīng)，使羧基中-OH極性減弱，較易離解出質(zhì)子，故酸性增強(qiáng)。取代基為-CH3，-NH2，酸性比苯甲酸弱原因：斥電子效應(yīng)，增加苯環(huán)電子云密度，增加-OH極性，不易離解出質(zhì)子，使酸性降低。氯貝丁酯ClCH3O

C

COOC2H5CH3三、其他芳酸類CH3

CH

CH2CH3CH

COOHCH3布洛芬第二節(jié)、鑒別試驗（一）與鐵鹽反應(yīng)1、水楊酸及其鹽反應(yīng)條件：弱酸性（pH4~6）反應(yīng)現(xiàn)象：紫堇色OHCOOH6+

FeCl3O-COO-2FeFe3+

12HCl2、阿司匹林需加熱水解后與FeCl3反應(yīng)方法：取本品0.1g加水10ml煮沸放冷 顯紫堇色加FeCl3

1dOCOCH3COOH+

H2OO-COO-2Fe3Fe+

12HClOHCOOH+CH3COOHOHCOOH+FeCl33、苯甲酸（鈉）與三氯化鐵生成褐色沉淀4、丙磺舒與三氯化鐵成米黃色沉淀堿性或中性fi

赭色fl3苯甲酸（鈉）+FeCl丙磺舒NaOH

fi

鈉鹽

pH

5.0～6.0fiFeCl3

fi

米黃色fl5、布洛芬：與高氯酸羥胺及N，N-雙環(huán)己基羧二亞胺混合，再與高氯酸鐵反應(yīng)顯紫色6、氯貝丁酯的鑒別：異羥肟酸鐵反應(yīng)。氯貝丁酯分子中具有酯結(jié)構(gòu)，與鹽酸羥胺及三氯化鐵作用，形成有色的異羥肟酸鐵，顯紫色。（二）重氮化-偶合反應(yīng)對氨基水楊酸鈉具芳伯氨基結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中，與亞硝酸鈉液進(jìn)行重氮化反應(yīng)，生成的重氮鹽與

堿性β-萘酚偶合產(chǎn)生橙紅色沉淀。三、氧化反應(yīng)甲酚那酸遇硫酸顯黃色（四）水解反應(yīng)：阿司匹林與碳酸鈉試液反應(yīng)反應(yīng)現(xiàn)象：水楊酸白色沉淀析出，并產(chǎn)生醋酸的臭氣HOOC3HCOCO+3oc2aNaNOOCHO+aNOOC3HC+2OCaNOOCHO+4OS2HHOHOOC+4OS2aN2aNOOC3HC+4OS2HHOOC3HC2+4OS2aN五、分解產(chǎn)物的反應(yīng)苯甲酸鹽-升華含硫藥物-與氫氧化鈉、硝酸反應(yīng)產(chǎn)生硫 酸鹽，或加熱產(chǎn)生二氧化硫。六、紫外吸收光譜

七、紅外吸收光譜法八、薄層色譜法九、高效液相色譜法第三節(jié)、特殊雜質(zhì)檢查（一）阿司匹林（ASA）合成工藝：OHCOOH+(CH3CO)2OH2SO470~75OCOCH3COOH+CH3COOH（二）檢查：1、溶液的澄清度：雜質(zhì)來源：①原料②合成工藝中由副反應(yīng)生成的醋酸苯酯、水楊酸苯酯和乙酰水楊酸苯酯等。檢查原理：利用藥物與雜質(zhì)在溶解行為上的差異進(jìn)行檢查檢查方法：取供試品0.5g

溶液應(yīng)澄清用45℃的碳酸鈉試液10ml2、游離水楊酸（SA）----特殊雜質(zhì)來源：①生產(chǎn)過程乙?；煌耆ㄎ捶磻?yīng)SA）②貯存不當(dāng)水解而產(chǎn)生的SA檢查原理：阿司匹林+硫酸鐵銨

不反應(yīng)水楊酸+硫酸鐵銨 紫堇色與一定量水楊酸對照液生成的色澤比較，不得更深。

對氨基水楊酸鈉中特殊雜質(zhì)-間氨基酚離子對-HPLC法：分離有機(jī)離子-COOH、-SO3H

基團(tuán)，選用帶正電荷的有機(jī)銨鹽；-NH2、-NH等陽離子，選用帶負(fù)電荷烷基磺酸鹽或烷基硫酸鹽。緩沖鹽調(diào)節(jié)溶液pH。甲酚那酸中特殊雜質(zhì)-銅，原子吸收分光光度法氯貝丁酯中特殊雜質(zhì)-對氯酚，氣相色譜法第四節(jié)、含量測定1、酸堿滴定法直接滴定法：：原理利用阿司匹林游離羧基的酸性，以標(biāo)準(zhǔn)堿滴定液直接滴定。方法：滴定液：NaOH(0.1mol/L)

溶劑：中性乙醇指示液：酚酞3）注意事項：A

采用中性乙醇做溶劑的目的：①易于溶解樣品 ②防止本品水解B

滴定過程中不斷振搖目的：防止局部堿度過大而促使其水解。C采用酚酞作指示劑：本品是弱酸，用強(qiáng)堿滴定時，化學(xué)計量點偏堿性，故選用在堿性區(qū)域變色的酚酞。水楊酸檢查合格用此法2、水解后剩余滴定法酯結(jié)構(gòu)在堿性溶液中水解，加入定量過量的氫氧化鈉滴定液，加熱使藥物水解，過量氫氧化鈉用硫酸滴定液回滴。注意空白3、兩步滴定法適用范圍：阿司匹林片劑采用本法原因：①消除片劑中穩(wěn)定劑干擾（枸櫞酸或酒石酸）②消除水解產(chǎn)物干擾：阿司匹林片在貯存過程水解產(chǎn)生水楊酸和醋酸測定：第一步：中和精密稱取片粉 酚酞指示劑 迅速滴至粉紅色加中性乙醇溶解

NaOH滴定液酒石酸等穩(wěn)定劑、SA、ASA均成為相應(yīng)鈉鹽水浴加熱第二步：水解中和后供試品液加定量過量NaOH(0.1mol/l)第三步：測定用H2SO4滴定液(0.05mol/l)滴定剩余的堿。滴定結(jié)果用空白試驗校正每1ml

H2SO4滴定液(0.05mol/l)滴定液相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4（3）含量計算：標(biāo)示量:表示制劑中各成分含量的理論值。一般用標(biāo)示量的百分值來控制制劑含量。公式通則為：標(biāo)示量％＝實際測得含量×100％標(biāo)示量片劑標(biāo)示量％＝

VTF×平均片重

×100％供試品重×標(biāo)示量阿司匹林含量由水解時消耗的堿量計算標(biāo)示量％＝（V0-V)

C

H2SO4×18.02/1000

×W平×100％0.05

×m

×標(biāo)示量上式中：V0：空白試驗消耗硫酸體積（ml)V：剩余滴定時消耗硫酸體積(ml)C

H2SO4:硫酸滴定液的實際濃度（mol/l)m供試品片粉量（g) W平:平均片重（g)例：取標(biāo)示量為0.3g的阿司匹林片10片，稱出總重為3.5840g，研細(xì)后稱取0.3484g，按藥典方法用兩步滴定法測定其含量，消耗硫酸滴定液（0.05015mol/l）23.84ml，空白試驗消耗該硫酸滴

定液39.88ml，求阿司匹林的含量為標(biāo)示量的多少？二、亞硝酸鈉法本品具有芳伯氨基，在鹽酸存在條件下與亞硝酸鈉定量地發(fā)生重氮化反應(yīng)。中國藥典采用亞硝酸鈉滴定法測定含量。三、雙相滴定法測定苯甲酸鈉的含量1、采用雙相滴定法原因：滴定過程析出游離酸不溶于水，使滴定終點突躍不明顯，不利于終點的正確判斷，同時吸附包埋未反應(yīng)完全的樣品。2、雙相滴定法定義：在水和與水不相溶的有機(jī)溶劑兩相中進(jìn)行酸堿滴定的方法。3、原理：水層 有機(jī)層4、測定方法：在分液漏斗中進(jìn)行有機(jī)相：乙醚 反應(yīng)產(chǎn)物苯甲酸溶于此相

滴定劑為鹽酸（0.1mol/l)

，指示液：甲基橙注意：邊滴邊振搖，使反應(yīng)產(chǎn)物苯甲酸隨時溶于乙醚層，使反應(yīng)進(jìn)行到底。終點判斷：在水層第二次呈現(xiàn)持續(xù)的橙紅色即為終點。COONa+HClCOOH+

NaCl四、柱分配－紫外分光光度法適用：片劑、膠囊、栓劑特點：能分離雜質(zhì)，同時測定ASA、SASA的限量測定

色譜柱用硅藻土填充。固定相：三氯化鐵－尿素流動相：氯仿，乙醚在λmax=306nm測定吸收度，A樣（SA)＜A標(biāo)（SA)ASA的測定固定相：碳酸氫鈉 流動相：氯仿λmax=280nm測定吸收度，A樣（ASA+SA)-A樣（SA)五、高效液相色譜法阿司匹林栓劑的含量測定丙磺舒原料的含量測定第五節(jié)體內(nèi)藥物分析血清中阿司匹林和水楊酸的HPLC法測定尿中丙磺舒的固相萃取-HPLC法測定血漿中布洛芬的HPLC測定血漿中二氟尼柳的固相萃取-反相HPLC測定LC-MS/MS法定量測定人血