催乳素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

催乳素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1檢驗(yàn)原理：ARCHITECT催乳素項(xiàng)目采用延遲兩步法免疫檢測(cè)，運(yùn)用Chemiflex技術(shù)，即化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)技術(shù)(CMIA)與靈活的檢測(cè)模式的結(jié)合，定量測(cè)定人血清和血漿中的催乳素。第一步，將樣本和催乳素抗體（小鼠，單克?。┌坏捻槾盼⒘Ｗ踊旌?。樣本中的催乳素與催乳素（小鼠，單克隆）抗體包被的微粒子結(jié)合。沖洗后進(jìn)入第二步，加入吖啶酯標(biāo)記的催乳素抗體結(jié)合物。將預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液加入反應(yīng)混合物中。測(cè)量產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，以相對(duì)發(fā)光單位（RLUs）表示。樣本中的催乳素含量與ARCHITECTi光學(xué)系統(tǒng)檢測(cè)到的RLUs值之間成正比。2.試劑主要組成成分2.1試劑盒微粒子：催乳素抗體（小鼠，單克?。┌坏奈⒘Ｗ樱瑑?chǔ)存于含有蛋白（牛和鼠）穩(wěn)定劑的三羥甲基氨基甲烷（TRIS）緩沖液中。最低濃度：0.1%固體物質(zhì)。防腐劑：抗菌劑。結(jié)合物：吖啶酯標(biāo)記的催乳素抗體（小鼠，單克?。┙Y(jié)合物，儲(chǔ)存于含有蛋白（魚(yú)和牛）穩(wěn)定劑的磷酸鹽緩沖液中。最低濃度：0.05μg/mL。防腐劑：ProClin。2.2需要但未提供的試劑預(yù)激發(fā)液：預(yù)激發(fā)液含有1.32%（W/V）過(guò)氧化氫激發(fā)液：激發(fā)液含有0.35N氫氧化鈉濃縮清洗緩沖液：濃縮清洗緩沖液含有磷酸鹽緩沖液。防腐劑：抗菌劑。3.樣本要求：人血清（包括采集于血清分離管中的血清）或采集于肝素或EDTA鉀抗凝管中的血漿。血清和血漿樣本中應(yīng)不含纖維蛋白、紅細(xì)胞或其他顆粒物質(zhì)。2-8℃可保存7天；-10℃以下可保存12個(gè)月。樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融。4.檢驗(yàn)方法：儀器法（詳見(jiàn)雅培i1000標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程）5.參考范圍樣本參考范圍（ng/L）血清、血漿男性3.46-19.40女性5.18-26.536.6.檢驗(yàn)結(jié)果的解釋催乳素項(xiàng)目通過(guò)四參數(shù)Logistic曲線擬合數(shù)據(jù)約簡(jiǎn)法（4PLC,Y加權(quán)）生成一條校準(zhǔn)曲線7.檢驗(yàn)方法的局限性7.1檢測(cè)結(jié)果用于診斷時(shí)，應(yīng)當(dāng)與其他數(shù)據(jù)，如癥狀、其他檢測(cè)結(jié)果、臨床表現(xiàn)等結(jié)合使用。7.2催乳素檢測(cè)結(jié)果與臨床表現(xiàn)不符時(shí)，需要通過(guò)附加試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證檢測(cè)結(jié)果。7.3接受小鼠單克隆抗體制劑診斷或治療的患者，其樣本中可能含有人抗小鼠抗體（HAMA）。使用含有小鼠單克隆抗體的試劑盒檢測(cè)此類(lèi)樣本時(shí)，檢測(cè)值可能會(huì)假性升高或降低?？赡苄枰渌畔⒂糜谠\斷。7.4人血清中的異嗜性抗體可與試劑中的免疫球蛋白發(fā)生反應(yīng)，干擾體外免疫測(cè)定。經(jīng)常與動(dòng)物或動(dòng)物血清產(chǎn)品接觸的患者，其樣本可能容易受到此干擾，并使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)異常值?？赡苄枰渌畔⒂糜谠\斷。7.5催乳素可能以其他結(jié)構(gòu)形式（例如，巨催乳素）存在，這些催乳素可能會(huì)表現(xiàn)出不同水平的生理活性。催乳素檢測(cè)結(jié)果升高的患者，需要參考其他信息才能明確診斷。8.產(chǎn)品性能指標(biāo)8.1分析靈敏度：經(jīng)計(jì)算，ARCHITECT催乳素檢測(cè)的分析靈敏度小于0.6ng/mL(n=24)。分析靈敏度被定義為ARCHITECT催乳素MasterCheck水平0（0.0ng/mL）的RLU均值加上兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差的濃度，表示催乳素區(qū)別于零的最低檢出濃度。8.2分析特異性：催乳素含量為13-16ng/mL的人血清樣本中加入特定水平的尿促卵泡素（FSH）、人絨毛膜促性腺激素（hCG）、人生長(zhǎng)激素（hGH）、人胎盤(pán)催乳素（hPL）、黃體生成素（LH）或促甲狀腺激素（TSH）。結(jié)果如下。潛在交叉反應(yīng)物檢測(cè)濃度交叉反應(yīng)率（%）FSH1,000mIU/mL0Hcg100,000mIU/mL0hGH1,000ng/mL0.03hPL100,000ng/mL0LH5,000mIU/mL0.001TSH20,000μIU/mL08.3精密度是根據(jù)美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究所（CLSI，前身為NCCLS）的EP5-T2方案進(jìn)行的。在精密度試驗(yàn)中，使用同一批號(hào)的試劑，對(duì)一個(gè)由3份蛋白質(zhì)緩沖基質(zhì)樣本組成的測(cè)試盤(pán)，每天在2個(gè)不同的時(shí)間在兩臺(tái)儀器上各檢測(cè)2次，共進(jìn)行20天。研究數(shù)據(jù)總結(jié)于下表。檢測(cè)盤(pán)試劑批號(hào)儀器n濃度均值（ng/mL）批內(nèi)總SD%CVSD%CV111806.930.2663.80.3234.7112807.050.2233.20.3104.42118018.240.5372.90.7484.12128017.920.4772.70.6553.73118035.861.0963.11.3023.63128035.250.7932.31.1653.39.臨床意義：人催乳素（hPRL）含199個(gè)氨基酸，是一條單鏈多肽，分子量大約是23,000道爾頓。經(jīng)過(guò)1965年至1971年期間的一系列試驗(yàn)證實(shí)，它作為一個(gè)區(qū)別于生長(zhǎng)激素的獨(dú)立化學(xué)實(shí)體存在。催乳素由垂體前葉分泌，受下丘腦催乳素抑制因子和催乳素釋放因子生理性調(diào)控。促甲狀腺素釋放激素（TRH）給藥后，血液中很快出現(xiàn)催乳素。催乳素的主要生理功能是促發(fā)和維持女性泌乳。高催乳素血癥被認(rèn)為是男女不孕和生殖腺紊亂的主要原因。催乳素可以抑制卵巢類(lèi)固醇的分泌、干擾卵泡成熟以及抑制女性體內(nèi)黃體生成素（LH）和尿促卵泡素（FSH）的分泌。血清催乳素水平升高為垂體功能紊亂提供了第一個(gè)量化證據(jù)。經(jīng)量化的催乳素水平同樣用于評(píng)估和監(jiān)測(cè)閉經(jīng)和溢乳患者。除了疾病狀態(tài)以外還有多種因素會(huì)影響催乳素的水平。造成催乳素水平上升的因素包括：妊娠、乳腺刺激、精神緊張、性生活和使用雌激素、孕酮和雄激素、某些精神類(lèi)藥物和抗高血壓藥物以及TRH治療。降低催乳素濃度的因