鹽膚木根的化學(xué)成分及其抗氧化活性研究

鹽膚木根的化學(xué)成分及其抗氧化活性研究

在過(guò)去15年中，冠狀動(dòng)脈硬化（chd）是世界上威脅人類健康的第一個(gè)殺手。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)最新報(bào)告,至2015年,冠心病和中風(fēng)導(dǎo)致了全球范圍內(nèi)1500萬(wàn)例死亡,占總死亡人數(shù)的26.6%1企業(yè)生產(chǎn)純化系統(tǒng)柱色譜硅膠(100～200、200～300目,青島海洋化工廠);SP825L大孔樹脂(日本三菱公司);ODS(50μm,美國(guó)Welch公司);WatersAutoPurification自動(dòng)純化系統(tǒng);XBridgePrepC鹽膚木采自福建福州,經(jīng)福建中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物實(shí)驗(yàn)室范世明高級(jí)實(shí)驗(yàn)師鑒定為漆樹科鹽膚木(R.chinensisMill.)的干燥根,其標(biāo)本(編號(hào):YFM20151003)存放于福建中醫(yī)藥大學(xué)生物醫(yī)藥研發(fā)中心標(biāo)本室。2洗脫部位濃縮取鹽膚木粗粉10.05kg,加入10倍量水,回流提取兩次,每次1.5h,合并兩次濾液,濃縮至2.02g生藥/mL,加入3倍量乙醇醇沉,放入4℃冰箱冷藏24h后取出抽濾,得上清液,濃縮得浸膏438.51g。取浸膏100.08g,用500mL熱水分散,采用石油醚萃取,得到石油醚層浸膏9.84g,剩余水層采用SP825L大孔樹脂(60cm×5.5cm)粗分,上樣后,分別用水(含1%甲酸)和95%乙醇梯度洗脫,各洗脫5L,收集95%乙醇洗脫部位濃縮得浸膏65.21g。石油醚部位(9.84g)經(jīng)硅膠柱色譜,石油醚-丙酮(20∶1→1∶1)梯度洗脫,每500mL收集1份。其中第9～13號(hào)收集液合并,經(jīng)過(guò)ODS柱(甲醇/水,9∶1)分離得到化合物11(35.05mg);95%乙醇洗脫部位(65.21g)經(jīng)硅膠柱色譜,二氯甲烷-甲醇梯度(40∶1→1∶1)洗脫,薄層色譜(TLC)檢識(shí),合并得到5個(gè)餾分(Fr.1～5)。Fr.1經(jīng)硅膠柱色譜,二氯甲烷-甲醇梯度洗脫(40∶1→20∶1),再經(jīng)ODS柱(甲醇/水梯度洗脫)得化合物14(9.08mg)和13(18.07mg)。Fr.2經(jīng)反復(fù)ODS色譜和純化系統(tǒng)制備(乙腈-0.1%甲酸梯度洗脫)得化合物19(29.09mg)、16(18.11mg)、17(17.03mg)、1(124.04mg)和6(48.06mg)。Fr.3經(jīng)硅膠柱色譜,以二氯甲烷-甲醇(25∶1→1∶1)梯度洗脫,再經(jīng)反復(fù)ODS柱色譜(甲醇/水梯度洗脫)得到化合物2(16.06mg)、20(88.11mg)、15(11.01mg)、12(14.03mg)、5(46.08mg)和4(252.14mg);Fr.4經(jīng)硅膠柱色譜,以二氯甲烷-甲醇(20∶1→1∶2)梯度洗脫,再經(jīng)反復(fù)ODS柱色譜(甲醇-水梯度洗脫)得化合物18(28.07mg)、7(16.02mg)和9(95.07mg);Fr.5經(jīng)反復(fù)ODS柱色譜得化合物10(13.01mg)、8(17.04mg)和3(185.13mg)。3結(jié)構(gòu)評(píng)價(jià)3.1化合物1白色粉末,HR-ESI-MSm/z:939.1094[M-H]3.22化合物2白色粉末,HR-ESI-MSm/z:789.1150[M+H]3.33-化合物3白色針狀結(jié)晶(甲醇),HR-ESI-MSm/z:169.0144[M-H]3.44-化合物4白色針狀結(jié)晶(甲醇),HR-ESI-MSm/z:183.0299[M-H]3.55化合物白色針狀結(jié)晶(甲醇),HR-ESI-MSm/z:197.0455[M-H]3.6化合物6淡黃色粉末,HR-ESI-MSm/z:300.9969[M-H]3.7化合物7灰白色粉末,HR-ESI-MSm/z:137.0237[M-H]3.8化合物8白色粉末,HR-ESI-MSm/z:153.0180[M-H]3.9化合物9無(wú)色針晶(甲醇),HR-ESI-MSm/z:285.1053[M-H]3.10化合物10白色粉末,HR-ESI-MSm/z:137.0235[M-H]3.11化合物11淡黃色粉末,HR-ESI-MSm/z:463.3207[M+H]3.12化合物12黃色粉末,HR-ESI-MSm/z:609.1461[M-H]3.13化合物13黃色粉末,HR-ESI-MSm/z:285.0393[M-H]3.14化合物14黃色粉末,HR-ESI-MSm/z:285.0395[M-H]3.15hr-esi-ms-ms-z黃色粉末,HR-ESI-MSm/z:593.1503[M-H]黃色粉末,HR-ESI-MSm/z:271.0606[M-H]黃色粉末,HR-ESI-MSm/z:287.0561[M-H]白色粉末,HR-ESI-MSm/z:289.0712[M-H]無(wú)色粉末,HR-ESI-MSm/z:273.0768[M-H]黃色粉末,HR-ESI-MSm/z:435.1279[M-H]4關(guān)于抗癲癇活性的研究參照文獻(xiàn)報(bào)道的實(shí)驗(yàn)方法清除率=1-(A單體濃度為橫坐標(biāo)(X)進(jìn)行線性回歸計(jì)算,以清除率為50%時(shí)待測(cè)樣品濃度(IC5不同抗氧化活性化合物的合成課題組從舒冠通糖漿原料鹽膚木中共分離鑒定20個(gè)化學(xué)成分,通過(guò)對(duì)所分離得到化合物進(jìn)行DPPH活性測(cè)試,結(jié)果表明1,2,3,4,6-五-O-沒(méi)食子?；?β-D-葡萄糖(1)、1,2,3,6-四-O-沒(méi)食子?；?β-D-葡萄糖(2)、沒(méi)食子酸(3)、沒(méi)食子酸甲酯(4)、沒(méi)食子酸乙酯(5)、鞣花酸(6)、原兒茶醛(7)、蘆丁(12)、漆黃素(13)、山柰酚(14)的抗氧化活性優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥維生素C。舒冠通糖漿原料鹽膚木中20種化合物,抗氧化活性不同。對(duì)DPPH抗氧化活性進(jìn)行分析。5.1前藥抗氧化活性首先,具有沒(méi)食子酰基結(jié)構(gòu)的化合物具有顯著的抗氧化活性(均優(yōu)于陽(yáng)性藥維生素C),并且其活性與含沒(méi)食子?；Y(jié)構(gòu)的數(shù)量呈正相關(guān),1,2,3,4,6-五-O-沒(méi)食子?；?β-D-葡萄糖(1)其具有5個(gè)沒(méi)食子?；Y(jié)構(gòu),其抗氧化活性為所有測(cè)試化合物中最強(qiáng),IC5.2鹽膚木化學(xué)成分的研究首先,黃酮醇或者黃酮苷,具有B環(huán)鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的蘆丁(12)和漆黃素(13),其抗氧化IC本試驗(yàn)對(duì)舒冠通糖漿原料鹽膚木的化學(xué)成分進(jìn)行研究,共鑒定出20個(gè)化合物,其中6個(gè)成分是首次從鹽膚木中分離得到,可為其進(jìn)一步的開發(fā)與利用提供依據(jù)。此外,本次分離所得到的化合物主要成分為黃酮類和酚