TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)原理和方法tunel完成教學(xué)文稿_第1頁
TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)原理和方法tunel完成教學(xué)文稿_第2頁
TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)原理和方法tunel完成教學(xué)文稿_第3頁
TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)原理和方法tunel完成教學(xué)文稿_第4頁
TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)原理和方法tunel完成教學(xué)文稿_第5頁
已閱讀5頁，還剩5頁未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

TUNEL（TdT-mediateddUTPnickendlabeling）法實(shí)際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法，對完整的單個凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色，能準(zhǔn)確的反應(yīng)細(xì)胞凋亡最典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征，可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中分離的細(xì)胞的細(xì)胞凋亡測定，并可檢測出極少量的凋亡細(xì)胞，靈敏度遠(yuǎn)比一般的組織化學(xué)和生物化學(xué)測定法要高，因而在細(xì)胞凋亡的研究中已被廣泛采用。

TdT介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)

TUNELTUNEL的原理TUNEL的操作步驟結(jié)果及注意事項(xiàng)TUNEL的原理凋亡細(xì)胞的特征是:內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活，細(xì)胞自身的染色質(zhì)DNA被切割，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口，并產(chǎn)生與DNA斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TerminaldeoxynucleotidylTransferaseTdT)能將脫氧核糖核苷酸連接到DNA的3’-末端。TUNEL的原理是：用熒光素（fluorescein）標(biāo)記的脫氧核糖核苷酸，在TdT的作用下連接到凋亡細(xì)胞中斷裂DNA的3’-OH末端，用熒光顯微鏡即可觀察結(jié)果。在此基礎(chǔ)上連接辣根過氧化酶標(biāo)記的熒光素抗體，可進(jìn)一步放大檢測信號，并且普通顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂，因而沒有3’-OH形成，很少能夠被染色。TUNEL原理標(biāo)本處理實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)流程結(jié)果注意事項(xiàng)極少數(shù)細(xì)胞凋亡時沒有DNA斷裂或DNA裂解不完全，此時不適用TUNEL法檢測，進(jìn)而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。在個別類型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測呈陽性。在高度增殖/代謝的組織細(xì)胞中可產(chǎn)生大量DNA片斷，

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論