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ICS65.020.01DB22B50吉林省地方標(biāo)準(zhǔn)DB22/T2963—2019湖庫水生生物資源調(diào)查技術(shù)規(guī)程RegulationsforInvestigationofhydrobiologicalresourcesonlakesandreservoir吉林省市場監(jiān)督管理廳發(fā)布DB22/T2963—2019前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省水利廳提出。本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:李月紅、黃權(quán)、李海波、劉春力、朱鳳林、盧玉婷、張蕾、劉佳。IDB22/T2963—2019湖庫水生生物資源調(diào)查技術(shù)規(guī)程1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了湖庫水生生物資源調(diào)查的自然環(huán)境、水的理化項目測定、浮游植物、浮游動物、底棲動物和水生高等植物。本標(biāo)準(zhǔn)適用于湖泊、水庫水生生物的資源調(diào)查。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。SC/T9102.3漁業(yè)生態(tài)環(huán)境檢測規(guī)范第3部分:淡水SL88水質(zhì)葉綠素的測定分光光度法SL167水庫漁業(yè)資源調(diào)查規(guī)范3自然環(huán)境根據(jù)水體面積、形態(tài)、浮游植物的生態(tài)分布特點和調(diào)查的目的等決定采樣點數(shù)量。應(yīng)兼顧在近岸和中部設(shè)點,可根據(jù)湖泊形狀在湖心區(qū)、大的湖灣中心區(qū)、進(jìn)水口和出水口附近、沿岸淺水區(qū)(有水草區(qū)和無水草區(qū))分散選點。應(yīng)按SL167規(guī)定執(zhí)行。1DB22/T2963—20195.2.2采樣層次5.2.2.1水深小于3m時,只在中層采樣。5.2.2.2水深3m~6m時,在表層、底層采樣,其中表層水在離水面0.5m處,底層水在離泥面0.5m處。5.2.2.3水深6m~10m時,在表層、中層、底層采樣。5.2.2.4水深大于10m時,在0.5m、5m、10m水層采樣,10m以下處除特殊需要外一般不采樣。5.2.3采樣頻次采集次數(shù)依研究目的而定,采樣次數(shù)可逐月或按季節(jié)進(jìn)行,一般按季節(jié)進(jìn)行。5.2.4采樣時間上午8:00~10:00,宜保持一致。5.2.5采樣方法5.2.5.1定量用采水器采集,每個采樣點取水樣1L,貧營養(yǎng)型水體應(yīng)酌情增加采水量。泥沙多時需先在容器內(nèi)沉淀后再取樣。5.2.5.2定性大型浮游植物定性樣品用25號浮游生物網(wǎng)在表層緩慢拖曳采集,注意網(wǎng)口與水面垂直,網(wǎng)口上端不要露出水面。浮游植物用魯哥氏液固定,用量為水樣體積的1%~1.5%。如樣品需較長時間保存,則需加入37%~40%甲醛溶液,用量為水樣體積的4%。樣品瓶應(yīng)貼上標(biāo)簽,標(biāo)明采集時間、地點、層次。固定后的浮游植物水樣搖勻倒入固定在架子上的1L沉淀器中,2h后將沉淀器輕輕旋轉(zhuǎn),使沉淀器壁上盡量少附著浮游植物,再靜置24h。5.4.2濃縮充分沉淀后,用虹吸管慢慢吸去上清液。吸至澄清液的1/3時,應(yīng)逐漸減緩流速,至留下含沉淀物的水樣20mL~25mL(或30mL~40mL),放入30mL(或50mL)的定量樣品瓶中。濃縮后的水量多少要視浮游植物濃度大小而定,正常情況下可用透明度作參考,依透明度確定水樣濃縮體積見附錄B,濃縮標(biāo)準(zhǔn)以每個視野里有十幾個藻類為宜。5.5.1優(yōu)勢種類應(yīng)鑒定到種,其它種類至少鑒定到屬。5.5.2種類鑒定除用定性樣品進(jìn)行觀察外,微型浮游植物需吸取定量樣品進(jìn)行觀察,但要在定量觀察2DB22/T2963—20195.6計數(shù)見附錄C。5.7水體初級生產(chǎn)力的測定5.7.1浮游植物葉綠素測定,按SL88規(guī)定執(zhí)行。5.7.2黑白瓶法見附錄D5.8結(jié)果整理見附錄E中E.1。6浮游動物調(diào)查6.1采樣工具見附錄A。6.2采樣6.2.1采樣點布置同5.2.1。6.2.2采樣層次同5.2.2。6.2.4.1.1原生動物、輪蟲和無節(jié)幼體定量可用浮游植物定量樣品,如單獨采集取水樣量以1L為宜。6.2.4.1.2枝角類和橈足類定量樣品應(yīng)在定性采樣之前用采水器采集,每個采樣點采水樣10L~50L,再用25號浮游生物網(wǎng)過濾濃縮,過濾物放入標(biāo)本瓶中,并用濾出水洗過濾網(wǎng)3次,所得過濾物也放入上述瓶中。6.2.4.2.1原生動物、輪蟲和無節(jié)幼體定性樣品采集方法同浮游植物。6.2.4.2.2枝角類和橈足類定性樣品用13號浮游生物網(wǎng)在表層緩慢拖曳采集,過濾網(wǎng)和定性樣品采集網(wǎng)應(yīng)分開使用。6.3.1原生動物和輪蟲定性樣品,除留一瓶供活體觀察不固定外,其余全部固定。固定方法同浮游植6.3.2枝角類和橈足類定量、定性樣品應(yīng)用37%~40%甲醛溶液固定,用量為水樣體積的5%。3DB22/T2963—20196.4水樣的沉淀和濃縮6.4.1原生動物和輪蟲的計數(shù)可與浮游植物計數(shù)合用一個樣品。6.4.2枝角類和橈足類通常用過濾法濃縮水樣。6.5種類鑒定優(yōu)勢種類應(yīng)鑒定到種,其它種類至少鑒定到屬。6.6計數(shù)見附錄F。6.7結(jié)果整理見附錄E中表E.2。7底棲動物調(diào)查7.1采樣工具見附錄A。7.2采樣7.2.1采樣點設(shè)置7.2.1.1大型水體的采樣斷面5個~6個。7.2.1.2中型水體的采樣斷面3個~5個。7.2.3.1螺、蚌等較大型底棲動物,用帶網(wǎng)夾泥器采集。采得泥樣后應(yīng)將網(wǎng)口閉緊,放在水中滌蕩,清除網(wǎng)中泥沙,然后提出水面,撿出其中全部螺、蚌等底棲動物。7.2.3.2水生昆蟲、水棲寡毛類和小型軟體動物,用采泥器采集。將采得的泥樣全部倒入塑料桶或盆內(nèi),經(jīng)40目、60目分樣篩篩洗后,撿出篩上可見的全部動物。如帶回的樣品不能及時分檢,可置于低溫(4℃)保存。4DB22/T2963—20197.3.1軟體動物宜用75%乙醇溶液保存,4d~5d后再換一次乙醇溶液,或用5%甲醛溶液固定,或去內(nèi)臟后保存空殼。7.3.2水生昆蟲可用5%乙醇溶液固定,5h~6h后移入75%乙醇溶液中保存。7.3.3水棲寡毛類應(yīng)先放入培養(yǎng)皿中,加少量清水,并緩緩滴加數(shù)滴75%乙醇溶液將蟲體麻醉,待其完全舒展伸直后,再用5%甲醛溶液固定,75%乙醇溶液保存。7.4種類鑒定7.4.1鑒定7.4.1.1軟體動物須鑒定到種7.4.1.2水生昆蟲(除搖蚊科幼蟲)至少鑒定到科;7.4.1.3水生寡毛類和搖蚊科幼蟲至少鑒定到屬。7.4.2方法鑒定水生寡毛類和搖蚊科幼蟲時,應(yīng)制片在解剖鏡或低倍顯微鏡下進(jìn)行,用甘油做透明劑。如需對小型底棲動物保留制片,可將保存在75%乙醇溶液中的標(biāo)本取出,用85%、90%、95%、100%乙醇進(jìn)行逐步脫水處理,每15min更換1次,直至將標(biāo)本水分脫盡,再移入二甲苯溶液中透明,然后將標(biāo)本置于載玻片上,用樹膠或Puris膠封片。7.5計數(shù)每個采樣點所采得的底棲動物應(yīng)按不同種類準(zhǔn)確地統(tǒng)計個體數(shù)。在標(biāo)本已有損壞的情況下,只統(tǒng)計頭部,不統(tǒng)計零散的腹部、附肢等。8高等水生植物調(diào)查25DB22/T2963—20198.2.2.2沉水植物、浮葉植物和漂浮植物,用采樣面積為0.25m的水草定量夾采集,采集時,將水2草夾張開,插入水底,然后用力加緊,把方框內(nèi)的全部植物連根帶泥夾起,沖洗除去淤泥,將網(wǎng)內(nèi)水草洗凈裝入編有號碼的水草袋內(nèi)。8.2.2.3除去污泥等雜質(zhì),裝入樣品袋內(nèi),沉水植物可放入盛水的容器中。8.2.2.4每個采樣點采集兩個平行樣品。8.2.3定性采樣8.2.3.1挺水植物用手采集。8.2.3.2浮葉植物和沉水植物用水草采集耙采集。8.2.3.3漂浮植物直接用手或帶柄手抄網(wǎng)采集。8.2.3.4樣品宜在開花和(或)果實發(fā)育的生長高峰季節(jié)采集,采集的樣品應(yīng)完整(包括根、莖、葉、花、果)。8.3標(biāo)本制作見附錄G。8.4種類鑒定定性樣品趁新鮮時進(jìn)行鑒定。所有標(biāo)本應(yīng)鑒定到種。8.5稱重見附錄H。6DB22/T2963—2019AA附錄A(規(guī)范性附錄)主要器具A.1浮游植物調(diào)查器具A.1.1采水器水深小于10m的水體可用玻璃瓶采水器,深水應(yīng)用顛倒式采水器或有機(jī)玻璃采水器,規(guī)格為1000mL。A.1.2浮游生物網(wǎng)A.1.2.113號生物網(wǎng)圓錐形,孔徑0.112mm,篩絹縫制成。A.1.2.225號生物網(wǎng)圓錐形,孔徑0.064mm,篩絹縫制成。A.1.3水樣瓶1000mL。定量樣品瓶采用帶刻度的30mL或50mL玻璃試劑瓶;定性樣品瓶采用30mL~50mL玻璃或聚乙烯瓶。7DB22/T2963—2019A.1.11顯微鏡附測微尺。A.2浮游動物調(diào)查器具A.2.1采樣工具采水器(1000mL,5000mL),13號浮游生物網(wǎng)(孔徑0.112mm),水樣瓶(1000mL,帶刻度的30mL或50mL)。A.2.2計數(shù)器具沉淀器(1000mL),刻度吸管(1.0mL,5.0mL),計數(shù)框(0.1mL,1.0mL,5.0mL),顯微鏡,解剖鏡,蓋玻片。A.2.3其他電子天平(精度0.0001mg)、乳膠管等。A.3底棲動物調(diào)查器具A.3.1采樣工具面積1/16m或1/20m),手抄網(wǎng),普通溫度計,深水溫度計,酸度計,40目(孔徑0.635mm)、2260目(孔徑0.423mm)的分樣篩,塑料桶或盆,塑料袋,樣品瓶(30mL~50mL,250mL廣口瓶),培養(yǎng)皿,白色解剖盤,吸管,小鑷子,解剖針等。A.3.2觀察器具解剖鏡,顯微鏡,載玻片,蓋玻片等。A.3.3稱量工具刀片或硬刷,大鑷子,小鑷子,30mL~50mL玻璃或聚乙烯瓶,顯微鏡,解剖鏡,載玻片,裝樣用塑膠桶等。28DB22/T2963—2019A.5.1.2采樣方框1m(邊長1m)和0.25m(邊長0.5m)。22A.5.2其他A.5.2.1帶柄手抄網(wǎng),水草采集耙,樣品袋。A.5.2.2盤秤,普通藥物天平,鼓風(fēng)干燥箱,標(biāo)本夾等。9DB22/T2963—2019BB附錄B(規(guī)范性附錄)根據(jù)透明度確定水樣濃縮體積表B.1根據(jù)透明度確定水樣濃縮后的體積透明度(cm)>1001L水樣濃縮后的水量(mL)30~5050~10030~5020~30<20100~50500~1001000(不濃縮)>1000(稀釋)10DB22/T2963—2019CC附錄C(規(guī)范性附錄)浮游植物計數(shù)C.1計數(shù)框行格法計數(shù)前需先核準(zhǔn)濃縮沉淀后定量瓶中水樣的實際體積,可加純水使其成30mL、50mL、100mL等整量。然后將定量樣品充分搖勻,迅速吸出0.1mL置于0.1mL計數(shù)框內(nèi)(面積20mm×20mm)。蓋上蓋玻片后,在高倍鏡下選擇3行~5行逐行計數(shù),數(shù)量少時可全片計數(shù)。1L水樣中的浮游植物個數(shù)(密度)可用下列公式計算:NN0V1NVPn.................................(C.1)10式中:N——1L水樣中浮游生物的數(shù)量,個/L;NO——計數(shù)框總格數(shù);V1——1L水樣經(jīng)濃縮后的體積,mL;VO——計數(shù)框容積,mL;首先應(yīng)用臺微尺測量所用顯微鏡在一定放大倍數(shù)下的視野直徑,計算出面積。計數(shù)的視野應(yīng)均勻分布在計數(shù)框內(nèi),每片計數(shù)視野數(shù)可按浮游植物的多少而酌情增減,一般為50個~300個,依浮游植物數(shù)確定計算視野數(shù)見表B.1。浮游植物平均數(shù)(個/視野)Csn.................................(C.2)11DB22/T2963—2019N——1L水樣中浮游生物的數(shù)量,個/L;Cs——計算框面積,mmFs——視野面積,mm22Fn——每片計數(shù)過的視野數(shù);V——1L水樣經(jīng)濃縮后的體積,mL;V0——計數(shù)框容積,mL;Pn——計數(shù)的浮游植物個數(shù)。C.3目鏡視野法首先應(yīng)用臺微尺測量所用顯微鏡在一定放大倍數(shù)下的視野直徑,計算出面積。計數(shù)的視野應(yīng)均勻分布在計數(shù)框內(nèi),每片計數(shù)視野數(shù)可按浮游植物的多少而酌情增減,一般為50個~300個,依浮游植物數(shù)確定計算視野數(shù)見表C.1。表C.1浮游植物數(shù)確定計算視野數(shù)浮游植物平均數(shù)(個/視野)視野數(shù)(個)1~2300200100502~55~10CsNFn..................................(C.3)s式中:2212DB22/T2963—2019DD附錄D(規(guī)范性附錄)黑白瓶法D.1水樣采集采樣前,先用塞氏盤測量水體的透明度,再按照透明度的0、0.5、1、2、3、4倍分層測定水下光照強(qiáng)度,然后分層采集水樣,掛到相應(yīng)層次培養(yǎng)。將導(dǎo)管插到樣品瓶底部,灌滿瓶并溢出2~3倍體積的水,以保證所有樣品瓶中的溶解氧與所采水樣的溶解氧完全一致。灌瓶完畢,將瓶蓋塞好,立即對其中一個玻瓶進(jìn)行溶解氧的固定,這個瓶就代表初始瓶,另外2個玻瓶,做黑白瓶用,掛在原采水處曝光24h。曝光結(jié)束后對黑白瓶進(jìn)行溶解氧的固定。D.2黑白瓶的固定曝光結(jié)束,取出黑白瓶,立即加入MnSO4與堿性碘化鉀進(jìn)行溶解氧固定,固定搖勻后放入黑暗處帶回室內(nèi)分析。如果白瓶內(nèi)產(chǎn)生大的氣泡,應(yīng)將玻瓶微微傾斜,將氣泡置于瓶肩處,小心打開瓶塞加入固定試劑,蓋好瓶塞搖勻。注意玻瓶要加好封口水。D.3黑白瓶的計算2·d)的計算按公式(D.1)~(D.3)計算。NPLBIB...................................(D.1)NP——凈初級生產(chǎn)量,g/(m·d);2LB——白瓶溶解氧,mg(O2)/L;IB——初始瓶溶解氧,mg(O2)/L。RIBDB...................................(D.2)R——呼吸量,mg(O2)/L;IB——初始瓶溶解氧,mg(O2)/L;DB——黑瓶溶解氧,mg(O2)/L。GPLBDB...................................(D.3)LB——白瓶溶解氧,mg(O2)/L;DB——黑瓶溶解氧,mg(O2)/L。13DB22/T2963—2019EE附錄E(規(guī)范性附錄)結(jié)果整理E.1浮游植物調(diào)查表湖、庫名稱:E1浮游植物調(diào)查表采樣日期:浮游植物總量各門浮游植物數(shù)量(生物量)占總量百分比采樣點數(shù)量(萬個/L)生物量(mg/L)藍(lán)藻綠藻黃藻硅藻甲藻隱藻裸藻其它平均測定日期:記錄人:各類浮游動物數(shù)量(生物量)占總量百分比14DB22/T2963—2019E.3底棲動物調(diào)查表E3底棲動物調(diào)查表湖、庫名稱:采樣日期:采集工具:項目采樣點號平均備注數(shù)量(個/m)2軟體動物水生昆蟲水生寡毛類生物量(g/m2))))數(shù)量(個/m)2生物量(g/m2數(shù)量(個/m)2生物量(g/m2數(shù)量(個/m)2其它生物量(g/m2記錄日期:記錄人:E4大型水生植物調(diào)查表采樣采樣采樣采樣采樣15DB22/T2963—2019FF附錄F(規(guī)范性附錄)浮游動物計數(shù)F.1原生動物吸出0.1mL樣品,置于0.1mL計數(shù)框內(nèi),蓋上蓋玻片,在10×20倍顯微鏡下全片計數(shù)。每瓶樣品計數(shù)兩片,取其平均值。F.2輪蟲吸出1mL樣品,置于1mL計數(shù)框內(nèi),在10×10倍顯微鏡下全片計數(shù)。每瓶樣品計數(shù)兩片,取其平均值。F.3枝角類、橈足類用5mL計數(shù)框?qū)悠贩秩舾纱稳坑嫈?shù)。如樣品中個體數(shù)量太多,可將樣品稀釋50mL或100mL,每瓶樣品計數(shù)兩片,取其平均值。F.4無節(jié)幼體如樣品中個體數(shù)量不多,則和枝角類、橈足類一樣全部計數(shù);如數(shù)量很多,可把過濾樣品稀釋,充分搖勻后取其中部分計數(shù),計數(shù)3片~5片取其平均值。也可在輪蟲樣品中同輪蟲一起計數(shù)。單位體積浮游動物的數(shù)量按下式計算n.....................................(F.1)aN——1L水樣中浮游動物的數(shù)量,個/L;V——采樣的體積,L;計數(shù)前,充分搖勻樣品,吸出迅速、準(zhǔn)確。蓋上蓋玻片后,計數(shù)框內(nèi)無氣泡,無水樣溢出。每瓶樣品計數(shù)兩片取其平均值,每片結(jié)果與平均數(shù)之差不大于±15%,否則必須計數(shù)第三片,直至三片平均數(shù)與相近兩數(shù)之差不超過均數(shù)的15%為止,這兩個相近值的平均數(shù)即可視為計算結(jié)果。浮游植物計數(shù)單位用細(xì)胞個數(shù)表示。對不易用細(xì)胞數(shù)表示的群體或絲狀體,可求出平均細(xì)胞數(shù)。某些個體一部分在視野中,另一部分在視野外,這時可規(guī)定只計數(shù)上半部分或只計數(shù)下半部分。16DB22/T2963—2019GG附錄G(規(guī)范性附錄)高等植物標(biāo)本制作G.1蠟葉標(biāo)本(干制標(biāo)本)G.1.1在采集到的定性樣品中,選擇較完整的
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