DB22-T2963-2019-湖庫水生生物資源調(diào)查技術(shù)規(guī)程-吉林省

ICS65.020.01DB22B50吉林省地方標(biāo)準(zhǔn)DB22/T2963—2019湖庫水生生物資源調(diào)查技術(shù)規(guī)程RegulationsforInvestigationofhydrobiologicalresourcesonlakesandreservoir吉林省市場監(jiān)督管理廳發(fā)布DB22/T2963—2019前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省水利廳提出。本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：李月紅、黃權(quán)、李海波、劉春力、朱鳳林、盧玉婷、張蕾、劉佳。IDB22/T2963—2019湖庫水生生物資源調(diào)查技術(shù)規(guī)程1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了湖庫水生生物資源調(diào)查的自然環(huán)境、水的理化項目測定、浮游植物、浮游動物、底棲動物和水生高等植物。本標(biāo)準(zhǔn)適用于湖泊、水庫水生生物的資源調(diào)查。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。SC/T9102.3漁業(yè)生態(tài)環(huán)境檢測規(guī)范第3部分：淡水SL88水質(zhì)葉綠素的測定分光光度法SL167水庫漁業(yè)資源調(diào)查規(guī)范3自然環(huán)境根據(jù)水體面積、形態(tài)、浮游植物的生態(tài)分布特點和調(diào)查的目的等決定采樣點數(shù)量。應(yīng)兼顧在近岸和中部設(shè)點，可根據(jù)湖泊形狀在湖心區(qū)、大的湖灣中心區(qū)、進(jìn)水口和出水口附近、沿岸淺水區(qū)（有水草區(qū)和無水草區(qū)）分散選點。應(yīng)按SL167規(guī)定執(zhí)行。1DB22/T2963—20195.2.2采樣層次5.2.2.1水深小于3m時，只在中層采樣。5.2.2.2水深3m～6m時，在表層、底層采樣，其中表層水在離水面0.5m處，底層水在離泥面0.5m處。5.2.2.3水深6m～10m時，在表層、中層、底層采樣。5.2.2.4水深大于10m時，在0.5m、5m、10m水層采樣，10m以下處除特殊需要外一般不采樣。5.2.3采樣頻次采集次數(shù)依研究目的而定，采樣次數(shù)可逐月或按季節(jié)進(jìn)行，一般按季節(jié)進(jìn)行。5.2.4采樣時間上午8：00～10：00，宜保持一致。5.2.5采樣方法5.2.5.1定量用采水器采集，每個采樣點取水樣1L，貧營養(yǎng)型水體應(yīng)酌情增加采水量。泥沙多時需先在容器內(nèi)沉淀后再取樣。5.2.5.2定性大型浮游植物定性樣品用25號浮游生物網(wǎng)在表層緩慢拖曳采集，注意網(wǎng)口與水面垂直，網(wǎng)口上端不要露出水面。浮游植物用魯哥氏液固定，用量為水樣體積的1%～1.5%。如樣品需較長時間保存，則需加入37%～40%甲醛溶液，用量為水樣體積的4%。樣品瓶應(yīng)貼上標(biāo)簽，標(biāo)明采集時間、地點、層次。固定后的浮游植物水樣搖勻倒入固定在架子上的1L沉淀器中，2h后將沉淀器輕輕旋轉(zhuǎn)，使沉淀器壁上盡量少附著浮游植物，再靜置24h。5.4.2濃縮充分沉淀后，用虹吸管慢慢吸去上清液。吸至澄清液的1/3時，應(yīng)逐漸減緩流速，至留下含沉淀物的水樣20mL～25mL（或30mL～40mL），放入30mL（或50mL）的定量樣品瓶中。濃縮后的水量多少要視浮游植物濃度大小而定，正常情況下可用透明度作參考，依透明度確定水樣濃縮體積見附錄B，濃縮標(biāo)準(zhǔn)以每個視野里有十幾個藻類為宜。5.5.1優(yōu)勢種類應(yīng)鑒定到種，其它種類至少鑒定到屬。5.5.2種類鑒定除用定性樣品進(jìn)行觀察外，微型浮游植物需吸取定量樣品進(jìn)行觀察，但要在定量觀察2DB22/T2963—20195.6計數(shù)見附錄C。5.7水體初級生產(chǎn)力的測定5.7.1浮游植物葉綠素測定，按SL88規(guī)定執(zhí)行。5.7.2黑白瓶法見附錄D5.8結(jié)果整理見附錄E中E.1。6浮游動物調(diào)查6.1采樣工具見附錄A。6.2采樣6.2.1采樣點布置同5.2.1。6.2.2采樣層次同5.2.2。6.2.4.1.1原生動物、輪蟲和無節(jié)幼體定量可用浮游植物定量樣品，如單獨采集取水樣量以1L為宜。6.2.4.1.2枝角類和橈足類定量樣品應(yīng)在定性采樣之前用采水器采集，每個采樣點采水樣10L～50L，再用25號浮游生物網(wǎng)過濾濃縮，過濾物放入標(biāo)本瓶中，并用濾出水洗過濾網(wǎng)3次，所得過濾物也放入上述瓶中。6.2.4.2.1原生動物、輪蟲和無節(jié)幼體定性樣品采集方法同浮游植物。6.2.4.2.2枝角類和橈足類定性樣品用13號浮游生物網(wǎng)在表層緩慢拖曳采集，過濾網(wǎng)和定性樣品采集網(wǎng)應(yīng)分開使用。6.3.1原生動物和輪蟲定性樣品，除留一瓶供活體觀察不固定外，其余全部固定。固定方法同浮游植6.3.2枝角類和橈足類定量、定性樣品應(yīng)用37%～40%甲醛溶液固定，用量為水樣體積的5%。3DB22/T2963—20196.4水樣的沉淀和濃縮6.4.1原生動物和輪蟲的計數(shù)可與浮游植物計數(shù)合用一個樣品。6.4.2枝角類和橈足類通常用過濾法濃縮水樣。6.5種類鑒定優(yōu)勢種類應(yīng)鑒定到種，其它種類至少鑒定到屬。6.6計數(shù)見附錄F。6.7結(jié)果整理見附錄E中表E.2。7底棲動物調(diào)查7.1采樣工具見附錄A。7.2采樣7.2.1采樣點設(shè)置7.2.1.1大型水體的采樣斷面5個～6個。7.2.1.2中型水體的采樣斷面3個～5個。7.2.3.1螺、蚌等較大型底棲動物，用帶網(wǎng)夾泥器采集。采得泥樣后應(yīng)將網(wǎng)口閉緊，放在水中滌蕩，清除網(wǎng)中泥沙，然后提出水面，撿出其中全部螺、蚌等底棲動物。7.2.3.2水生昆蟲、水棲寡毛類和小型軟體動物，用采泥器采集。將采得的泥樣全部倒入塑料桶或盆內(nèi)，經(jīng)40目、60目分樣篩篩洗后，撿出篩上可見的全部動物。如帶回的樣品不能及時分檢，可置于低溫（4℃）保存。4DB22/T2963—20197.3.1軟體動物宜用75%乙醇溶液保存，4d～5d后再換一次乙醇溶液，或用5%甲醛溶液固定，或去內(nèi)臟后保存空殼。7.3.2水生昆蟲可用5%乙醇溶液固定，5h～6h后移入75%乙醇溶液中保存。7.3.3水棲寡毛類應(yīng)先放入培養(yǎng)皿中，加少量清水，并緩緩滴加數(shù)滴75%乙醇溶液將蟲體麻醉，待其完全舒展伸直后，再用5%甲醛溶液固定，75%乙醇溶液保存。7.4種類鑒定7.4.1鑒定7.4.1.1軟體動物須鑒定到種7.4.1.2水生昆蟲（除搖蚊科幼蟲）至少鑒定到科；7.4.1.3水生寡毛類和搖蚊科幼蟲至少鑒定到屬。7.4.2方法鑒定水生寡毛類和搖蚊科幼蟲時，應(yīng)制片在解剖鏡或低倍顯微鏡下進(jìn)行，用甘油做透明劑。如需對小型底棲動物保留制片，可將保存在75%乙醇溶液中的標(biāo)本取出，用85%、90%、95%、100%乙醇進(jìn)行逐步脫水處理，每15min更換1次，直至將標(biāo)本水分脫盡，再移入二甲苯溶液中透明，然后將標(biāo)本置于載玻片上，用樹膠或Puris膠封片。7.5計數(shù)每個采樣點所采得的底棲動物應(yīng)按不同種類準(zhǔn)確地統(tǒng)計個體數(shù)。在標(biāo)本已有損壞的情況下，只統(tǒng)計頭部，不統(tǒng)計零散的腹部、附肢等。8高等水生植物調(diào)查25DB22/T2963—20198.2.2.2沉水植物、浮葉植物和漂浮植物，用采樣面積為0.25m的水草定量夾采集，采集時，將水2草夾張開，插入水底，然后用力加緊，把方框內(nèi)的全部植物連根帶泥夾起，沖洗除去淤泥，將網(wǎng)內(nèi)水草洗凈裝入編有號碼的水草袋內(nèi)。8.2.2.3除去污泥等雜質(zhì)，裝入樣品袋內(nèi)，沉水植物可放入盛水的容器中。8.2.2.4每個采樣點采集兩個平行樣品。8.2.3定性采樣8.2.3.1挺水植物用手采集。8.2.3.2浮葉植物和沉水植物用水草采集耙采集。8.2.3.3漂浮植物直接用手或帶柄手抄網(wǎng)采集。8.2.3.4樣品宜在開花和（或）果實發(fā)育的生長高峰季節(jié)采集，采集的樣品應(yīng)完整（包括根、莖、葉、花、果）。8.3標(biāo)本制作見附錄G。8.4種類鑒定定性樣品趁新鮮時進(jìn)行鑒定。所有標(biāo)本應(yīng)鑒定到種。8.5稱重見附錄H。6DB22/T2963—2019AA附錄A（規(guī)范性附錄）主要器具A.1浮游植物調(diào)查器具A.1.1采水器水深小于10m的水體可用玻璃瓶采水器，深水應(yīng)用顛倒式采水器或有機(jī)玻璃采水器，規(guī)格為1000mL。A.1.2浮游生物網(wǎng)A.1.2.113號生物網(wǎng)圓錐形，孔徑0.112mm，篩絹縫制成。A.1.2.225號生物網(wǎng)圓錐形，孔徑0.064mm，篩絹縫制成。A.1.3水樣瓶1000mL。定量樣品瓶采用帶刻度的30mL或50mL玻璃試劑瓶；定性樣品瓶采用30mL～50mL玻璃或聚乙烯瓶。7DB22/T2963—2019A.1.11顯微鏡附測微尺。A.2浮游動物調(diào)查器具A.2.1采樣工具采水器（1000mL，5000mL），13號浮游生物網(wǎng)（孔徑0.112mm），水樣瓶（1000mL，帶刻度的30mL或50mL）。A.2.2計數(shù)器具沉淀器（1000mL），刻度吸管（1.0mL，5.0mL），計數(shù)框（0.1mL，1.0mL，5.0mL），顯微鏡，解剖鏡，蓋玻片。A.2.3其他電子天平（精度0.0001mg）、乳膠管等。A.3底棲動物調(diào)查器具A.3.1采樣工具面積1/16m或1/20m），手抄網(wǎng)，普通溫度計，深水溫度計，酸度計，40目（孔徑0.635mm）、2260目（孔徑0.423mm）的分樣篩，塑料桶或盆，塑料袋，樣品瓶（30mL～50mL，250mL廣口瓶），培養(yǎng)皿，白色解剖盤，吸管，小鑷子，解剖針等。A.3.2觀察器具解剖鏡，顯微鏡，載玻片，蓋玻片等。A.3.3稱量工具刀片或硬刷，大鑷子，小鑷子，30mL～50mL玻璃或聚乙烯瓶，顯微鏡，解剖鏡，載玻片，裝樣用塑膠桶等。28DB22/T2963—2019A.5.1.2采樣方框1m（邊長1m）和0.25m（邊長0.5m）。22A.5.2其他A.5.2.1帶柄手抄網(wǎng)，水草采集耙，樣品袋。A.5.2.2盤秤，普通藥物天平，鼓風(fēng)干燥箱，標(biāo)本夾等。9DB22/T2963—2019BB附錄B（規(guī)范性附錄）根據(jù)透明度確定水樣濃縮體積表B.1根據(jù)透明度確定水樣濃縮后的體積透明度（cm）>1001L水樣濃縮后的水量（mL）30~5050~10030~5020~30<20100~50500~1001000（不濃縮）>1000（稀釋）10DB22/T2963—2019CC附錄C（規(guī)范性附錄）浮游植物計數(shù)C.1計數(shù)框行格法計數(shù)前需先核準(zhǔn)濃縮沉淀后定量瓶中水樣的實際體積，可加純水使其成30mL、50mL、100mL等整量。然后將定量樣品充分搖勻，迅速吸出0.1mL置于0.1mL計數(shù)框內(nèi)（面積20mm×20mm）。蓋上蓋玻片后，在高倍鏡下選擇3行～5行逐行計數(shù)，數(shù)量少時可全片計數(shù)。1L水樣中的浮游植物個數(shù)（密度）可用下列公式計算：NN0V1NVPn.................................(C.1)10式中：N——1L水樣中浮游生物的數(shù)量，個/L；NO——計數(shù)框總格數(shù)；V1——1L水樣經(jīng)濃縮后的體積，mL；VO——計數(shù)框容積，mL；首先應(yīng)用臺微尺測量所用顯微鏡在一定放大倍數(shù)下的視野直徑，計算出面積。計數(shù)的視野應(yīng)均勻分布在計數(shù)框內(nèi)，每片計數(shù)視野數(shù)可按浮游植物的多少而酌情增減，一般為50個～300個，依浮游植物數(shù)確定計算視野數(shù)見表B.1。浮游植物平均數(shù)（個/視野）Csn.................................(C.2)11DB22/T2963—2019N——1L水樣中浮游生物的數(shù)量，個/L；Cs——計算框面積，mmFs——視野面積，mm22Fn——每片計數(shù)過的視野數(shù)；V——1L水樣經(jīng)濃縮后的體積，mL；V0——計數(shù)框容積，mL；Pn——計數(shù)的浮游植物個數(shù)。C.3目鏡視野法首先應(yīng)用臺微尺測量所用顯微鏡在一定放大倍數(shù)下的視野直徑，計算出面積。計數(shù)的視野應(yīng)均勻分布在計數(shù)框內(nèi)，每片計數(shù)視野數(shù)可按浮游植物的多少而酌情增減，一般為50個～300個，依浮游植物數(shù)確定計算視野數(shù)見表C.1。表C.1浮游植物數(shù)確定計算視野數(shù)浮游植物平均數(shù)（個/視野）視野數(shù)（個）1～2300200100502～55～10CsNFn..................................(C.3)s式中：2212DB22/T2963—2019DD附錄D（規(guī)范性附錄）黑白瓶法D.1水樣采集采樣前，先用塞氏盤測量水體的透明度，再按照透明度的0、0.5、1、2、3、4倍分層測定水下光照強(qiáng)度，然后分層采集水樣，掛到相應(yīng)層次培養(yǎng)。將導(dǎo)管插到樣品瓶底部，灌滿瓶并溢出2～3倍體積的水，以保證所有樣品瓶中的溶解氧與所采水樣的溶解氧完全一致。灌瓶完畢，將瓶蓋塞好，立即對其中一個玻瓶進(jìn)行溶解氧的固定，這個瓶就代表初始瓶，另外2個玻瓶，做黑白瓶用，掛在原采水處曝光24h。曝光結(jié)束后對黑白瓶進(jìn)行溶解氧的固定。D.2黑白瓶的固定曝光結(jié)束，取出黑白瓶，立即加入MnSO4與堿性碘化鉀進(jìn)行溶解氧固定，固定搖勻后放入黑暗處帶回室內(nèi)分析。如果白瓶內(nèi)產(chǎn)生大的氣泡，應(yīng)將玻瓶微微傾斜，將氣泡置于瓶肩處，小心打開瓶塞加入固定試劑，蓋好瓶塞搖勻。注意玻瓶要加好封口水。D.3黑白瓶的計算2·d）的計算按公式（D.1）～（D.3）計算。NPLBIB...................................(D.1)NP——凈初級生產(chǎn)量，g/(m·d)；2LB——白瓶溶解氧，mg（O2）/L；IB——初始瓶溶解氧，mg（O2）/L。RIBDB...................................(D.2)R——呼吸量,mg（O2）/L；IB——初始瓶溶解氧，mg（O2）/L；DB——黑瓶溶解氧，mg（O2）/L。GPLBDB...................................(D.3)LB——白瓶溶解氧，mg（O2）/L；DB——黑瓶溶解氧，mg（O2）/L。13DB22/T2963—2019EE附錄E（規(guī)范性附錄）結(jié)果整理E.1浮游植物調(diào)查表湖、庫名稱：E1浮游植物調(diào)查表采樣日期：浮游植物總量各門浮游植物數(shù)量（生物量）占總量百分比采樣點數(shù)量（萬個/L）生物量（mg/L）藍(lán)藻綠藻黃藻硅藻甲藻隱藻裸藻其它平均測定日期：記錄人：各類浮游動物數(shù)量（生物量）占總量百分比14DB22/T2963—2019E.3底棲動物調(diào)查表E3底棲動物調(diào)查表湖、庫名稱：采樣日期：采集工具：項目采樣點號平均備注數(shù)量（個/m）2軟體動物水生昆蟲水生寡毛類生物量（g/m2））））數(shù)量（個/m）2生物量（g/m2數(shù)量（個/m）2生物量（g/m2數(shù)量（個/m）2其它生物量（g/m2記錄日期：記錄人：E4大型水生植物調(diào)查表采樣采樣采樣采樣采樣15DB22/T2963—2019FF附錄F（規(guī)范性附錄）浮游動物計數(shù)F.1原生動物吸出0.1mL樣品，置于0.1mL計數(shù)框內(nèi)，蓋上蓋玻片，在10×20倍顯微鏡下全片計數(shù)。每瓶樣品計數(shù)兩片，取其平均值。F.2輪蟲吸出1mL樣品，置于1mL計數(shù)框內(nèi)，在10×10倍顯微鏡下全片計數(shù)。每瓶樣品計數(shù)兩片，取其平均值。F.3枝角類、橈足類用5mL計數(shù)框?qū)悠贩秩舾纱稳坑嫈?shù)。如樣品中個體數(shù)量太多，可將樣品稀釋50mL或100mL，每瓶樣品計數(shù)兩片，取其平均值。F.4無節(jié)幼體如樣品中個體數(shù)量不多，則和枝角類、橈足類一樣全部計數(shù)；如數(shù)量很多，可把過濾樣品稀釋，充分搖勻后取其中部分計數(shù)，計數(shù)3片～5片取其平均值。也可在輪蟲樣品中同輪蟲一起計數(shù)。單位體積浮游動物的數(shù)量按下式計算n.....................................(F.1)aN——1L水樣中浮游動物的數(shù)量，個/L；V——采樣的體積，L；計數(shù)前，充分搖勻樣品，吸出迅速、準(zhǔn)確。蓋上蓋玻片后，計數(shù)框內(nèi)無氣泡，無水樣溢出。每瓶樣品計數(shù)兩片取其平均值，每片結(jié)果與平均數(shù)之差不大于±15%，否則必須計數(shù)第三片，直至三片平均數(shù)與相近兩數(shù)之差不超過均數(shù)的15%為止，這兩個相近值的平均數(shù)即可視為計算結(jié)果。浮游植物計數(shù)單位用細(xì)胞個數(shù)表示。對不易用細(xì)胞數(shù)表示的群體或絲狀體，可求出平均細(xì)胞數(shù)。某些個體一部分在視野中，另一部分在視野外，這時可規(guī)定只計數(shù)上半部分或只計數(shù)下半部分。16DB22/T2963—2019GG附錄G（規(guī)范性附錄）高等植物標(biāo)本制作G.1蠟葉標(biāo)本（干制標(biāo)本）G.1.1在采集到的定性樣品中，選擇較完整的