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學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精開學(xué)第九課(檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì))主備人:熊寶芹審核:周康、馮潔學(xué)習(xí)目標(biāo):知道還原性糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定原理和操作方法。關(guān)鍵詞:婓林試劑、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、50%的酒精溶液、雙縮脲試劑【學(xué)習(xí)內(nèi)容】一.實驗?zāi)康模簢L試用化學(xué)試劑檢測生物組織中還原性糖、脂肪和蛋白質(zhì)二.實驗原理:某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。1.可溶性還原性糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu2O沉淀。即Cu(OH)2被葡萄糖還原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.2.脂肪可以被染成橘黃色(或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色)。3.蛋白質(zhì)與發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。三.實驗材料1.做可溶性還原性糖鑒定實驗,應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨.2.做脂肪的鑒定實驗。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡3~4小時(也可用蓖麻種子)。3.做蛋白質(zhì)的鑒定實驗,可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。四、實驗試劑斐林試劑(包括:質(zhì)量濃度為0。1g/mL和質(zhì)量濃度為0.05g/mL)、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑(包括:質(zhì)量濃度為0.1g/mLNaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.01g/mLCuSO4溶液)、體積分數(shù)為50%的,蒸餾水。五、方法步驟:(一)還原性糖的鑒定1.制備組織樣液。(去皮、切塊、研磨、過濾) 蘋果或梨組織液必須臨時制備。2。取1支試管,向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。 3.向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。 4。試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鐘,觀察.溶液顏色:淺藍色→棕色→磚紅色(沉淀) 最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向?qū)嶒炚?。(?脂肪的鑒定1。切.花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。 2。染。在子葉薄片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液,染色1分鐘。 3。漂洗(洗去浮色)。用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。4。滴清水制片觀察。用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上1~2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片。(三)蛋白質(zhì)的鑒定1、制備組織樣液。(黃豆浸泡、去皮研磨、過濾.)也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間。2、鑒定。加樣液約2ml于試管中,加入雙縮脲試劑A,搖勻;再加入雙縮脲試劑B液3~4滴,搖勻,溶液變。 (可用蛋清代替豆?jié){。 蛋清要先稀釋。 如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。)【課堂檢測】1.在過氧化氫酶溶液中加入雙縮脲試劑,其結(jié)果應(yīng)該是()A。產(chǎn)生氣泡B.溶液呈藍色C.溶液呈紫色D.產(chǎn)生磚紅色沉淀2.生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機物鑒定實驗中,以下操作錯誤的是()A.只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡B。用雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)不需要加熱C。使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)配現(xiàn)用D??扇苄赃€原糖的鑒定,可用酒精燈直接加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀3。根據(jù)生物組織中的有機物與某些化學(xué)試劑相互作用能產(chǎn)生顏色反應(yīng)的原理,可以鑒定生物組織中某些有機物的存在.填寫下表中的空格。需鑒定的有機物用于鑒定的試劑反應(yīng)產(chǎn)生的顏色磚紅色雙縮脲試劑藍色蘇丹III染液4.將小麥種子分別置于20℃和30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4天,依次取等量的萌發(fā)種子分別制成提取液I和提取液II。取3支試管甲、乙、丙,分別加入等量的淀粉液,然后按下圖加
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