臨床免疫學(xué)檢驗.ppt

臨床免疫學(xué)實驗診斷 (NO.2),第五節(jié) 腫瘤標(biāo)志物檢測,第六節(jié) 自身抗體檢測,重要內(nèi)容,如何選擇和使用腫瘤標(biāo)志物?,腫瘤標(biāo)志物的定義?, 分類和指征? AFP、CEA、 PSA、CA15-3、 CA125、CA19-9、CA72-4、NSE,第五節(jié) 腫瘤標(biāo)志物檢測,腫瘤標(biāo)志物(tumor marker)的定義?,在腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞本身 合成、釋放或者是由機(jī)體對腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn) 生的一類物質(zhì)，反映腫瘤存在和生長的一類物 質(zhì),可存在于病人的血液、體液、組織或細(xì)胞中,高危人群中惡性腫瘤的早期檢測 應(yīng)用于初步診斷 應(yīng)用于預(yù)后 治療監(jiān)測 腫瘤復(fù)發(fā)的早期檢測,指征,Tumor markers are not suited for screening asymptomatic individuals because they have a too low organ and tumor specificity as well as a too low predictive value positive of a test.,Patients with a familiar tumor risk and symptomatic patients,甲胎蛋白 (alpha-fetoprotein,AFP),AFP是在胎兒早期由肝臟和卵黃囊合成的 一種血清糖蛋白，出生后AFP的合成受到抑制。,指征,AFP濃度檢測對診斷肝細(xì)胞癌及滋養(yǎng)細(xì)胞惡性 腫瘤有重要的臨床價值。,【 參考范圍】,Serum 25g /L,【 臨床意義 】,原發(fā)性肝細(xì)胞癌: 陽性率為67.8%74.4%，約50%的患者 AFP300g/L。 18%左右的原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者AFP不升高。,其他惡性腫瘤：如胃癌、胰腺癌,良性疾?。翰《拘愿窝?、肝硬化時AFP也升高，通 常300g/L。,妊娠：34個月，AFP開始升高，78個月達(dá)高 峰，但多400g/L，分娩后3周回復(fù)正常。,生殖腺胚胎腫瘤:睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等,癌胚抗原 (carcinoembryonic antigen,CEA),CEA是在胎兒早期由胃腸道及某些組織合成的 一種糖蛋白，妊娠6個月后含量逐漸下降，出生 后含量極低。CEA是一種廣譜腫瘤標(biāo)記物。,【 參考范圍】,Serum 5g /L,【 臨床意義 】,惡性腫瘤:胰腺癌、結(jié)腸癌、直腸癌、乳腺癌、胃 癌、肺癌等,良性疾?。航Y(jié)腸炎、胰腺炎、肝臟疾病等。,吸煙：CEA水平可升高，血清10g/L。,惡性腫瘤術(shù)后檢測:直腸癌等,前列腺特異性抗原 Prostate Specific Antigen (PSA),【概述】 存在部位：前列腺腺管的上皮細(xì)胞中，血 清中含量極微。 用途：前列腺癌的輔助診斷。,血清中存在方式,t-PSA,F-PSA 20%,C-PSA 80%,【參考值】,t-PSA 4.0g/L f-PSA 0.8g/L,【臨床意義】,1.前列腺癌診斷、判斷病情變化和療效的重要指標(biāo)。,t-PSA4.0g/L判斷為前列腺癌，靈敏度尚可， 特異性較差。,t-PSA,手術(shù)成功，恢復(fù)較好,或 腫瘤轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā),前列腺癌術(shù)后：,2.前列腺良性疾?。呵傲邢俜蚀蟆⑶傲邢傺?、腎臟和泌尿系統(tǒng)疾病，t-PSA一般在4.010.0g/L。 3.前列腺癌和前列腺良性疾病的鑒別診斷：,PSA 4.010.0g/L“診斷灰區(qū)” 多數(shù)患者不是前列腺癌,F/ T 比值,25%提示前列腺增生 10%25%前列腺癌診斷敏感性為90%,提高PSA 診斷前列腺癌的特異性,直腸指檢、超生檢查、前列腺活檢,4.t-PSA+PAP：提高前列腺癌檢出的陽性率 （5%的前列腺癌患者t-PSA正常）。 5.其他腫瘤：腎癌、膀胱癌、腎上腺癌、乳腺 癌等。 6.PSA檢測，采集血液前禁止做前列腺按摩、肛門指診、膀胱鏡檢查及前列腺手術(shù)。,cancer antigen 15-3 (CA15-3),CA15-3是轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者病程監(jiān)測的有價 值的指標(biāo)。由于CA15-3的檢測對于局部病變的 臨床敏度太低，而且在良性乳房疾病和其他器官 的癌癥中也有相當(dāng)數(shù)量的患者CA15-3水平升高， 因此并不適合作為篩查和診斷指標(biāo)。,指征,乳腺癌患者治療效果和病情監(jiān)測。,【 參考范圍】,Serum 25000U /L,【 臨床意義 】,乳腺癌 : 早期靈敏度(20%30%) 轉(zhuǎn)移性乳腺癌(50%70%): 血清CA15-3的含量增高程度 與轉(zhuǎn)移部位相關(guān)。 CA15-3+CEA: 可提高乳腺癌檢出的靈敏度。,其他惡性腫瘤：如肺癌、腎癌、結(jié)腸癌、胰腺癌 卵巢癌、子宮頸癌、原發(fā)性肝癌,良性疾病：乳腺、肝臟、胃腸道、肺、卵巢等,血清避免污染：CA15-3對蛋白酶和神經(jīng)酰胺酶很 敏感。,cancer antigen 125 (CA125),指征,絕對指征: -懷疑卵巢癌 -監(jiān)測卵巢癌的治療過程 相對指征: -在疑為胰腺癌病例中作為CA19-9之后 的診斷次選腫瘤標(biāo)志物。,【 參考范圍】,Serum 35000U /L,術(shù)前CA125測定： 卵巢上皮癌的CA125的術(shù)前水平與預(yù)后明顯相關(guān)。,【 臨床意義 】,卵巢癌:,原發(fā)性卵巢癌的發(fā)生率為15/100,000婦女/年。,疾病早期 腫瘤體積小 預(yù)示治療效果佳 復(fù)發(fā)率低,疾病正在繼續(xù)發(fā)展，化療效果差,輕微升高,明顯升高,良性疾病： 急性子宮附件炎(17-25%65U/ml) 宮外子宮內(nèi)膜異位(30%35U/ml) 子宮內(nèi)膜異位相關(guān)的囊腫 骨盆炎 腹膜炎(59%65U/ml) 膽囊炎,其他惡性腫瘤: 胰腺癌 45-79%(decision level 35U/ml) 乳腺癌 8-13%(decision level 35/65U/ml) 宮頸癌 13-54% %(decision level 35U/ml),CA19-9 (carbohydrate antigen 19-9 ),胃腸道癌相關(guān)抗原(Gastrointestinal cancer-associated antigen ,GICA),指征,絕對指征: -疑有胰腺癌、膽道癌 -上述癌癥患者的病情監(jiān)測 相對指征: -結(jié)直腸癌（CEA之后的次選腫瘤標(biāo)志物） -卵巢癌（CA125 之后的次選腫瘤標(biāo)志物） 診斷和病情監(jiān)測。,【參考范圍】,serum37000U /L,【臨床意義】,腫瘤診斷:,結(jié)腸癌: 靈敏度 18%58%, CA19-9升高的幅度 依賴于腫瘤的面積。,胰腺癌: 靈敏度 70%95% 特異性 72%90%,膽道系統(tǒng)癌癥: 靈敏度5579%,胃癌: 靈敏度 26%60%, CA19-9升高的幅度 依賴于腫瘤的面積。,良性疾病,膽囊炎, 阻塞性黃疸, 膽管結(jié)石, 急性胰腺炎，膽汁淤積性膽管炎，肝硬化，肝炎等。,鑒別診斷,In order to better differentiate pancreatic cancer from benign diseases, a cut-off value of 100U/ml is recommended as a cost-saving initial test, rather than sonography, in patients presenting with weight loss and abdominal pain. Using this approach, the clinical sensitivity for the diagnosis of cancer is 62% with a specificity of 97%.,carbohydrate antigen 72-4 (CA72-4),指征,絕對指征： -監(jiān)測胃癌患者病程和療效的首選腫瘤標(biāo)志物， 可與次選標(biāo)志物CA19-9或CEA聯(lián)合使用。 相對指征： -作為粘蛋白型卵巢癌的次選腫瘤標(biāo)志物。,【 臨床意義 】,惡性腫瘤: 67%的卵巢癌，47%大腸癌， 45%的胃癌，40%乳腺癌， 42%胰腺癌。,CA72-4+CEA：提高胃癌診斷的敏感性和特異性。,良性疾?。赫Ｈ岁栃月?.5%，良性胃腸道疾病 6.7%。,CA72-4+CA125:提高卵巢癌的檢出率,神經(jīng)原特異性烯醇化酶（NSE）,【概述】 ：肝臟、腎臟 ：骨骼肌和心肌 ：神經(jīng)組織 五種同工酶：、 NSE: 與神經(jīng)內(nèi)分泌起源的腫瘤有關(guān). 小細(xì)胞肺癌和神經(jīng)母細(xì)胞瘤腫瘤標(biāo)志物。 【參考值】 血清 15ug / L,同工酶,【臨床意義】 1.小細(xì)胞肺癌與肺腺癌、肺鱗癌、大細(xì)胞肺癌的鑒別診斷。 2.檢測小細(xì)胞肺癌放療、化療后的治療效果。 治療有效 NSE降低至正常水平 復(fù)發(fā) NSE增高比臨床癥狀早412w 3.神經(jīng)母細(xì)胞瘤和Wilms 瘤的鑒別診斷。 4.神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞腫瘤，如嗜鉻細(xì)胞瘤、胰島細(xì)胞瘤、甲狀腺髓樣癌、黑色素瘤等NSE也增高。 5.NSE存在于正常的RBC和PLT中。,如何選擇腫瘤標(biāo)志物,如何選擇和使用自身抗體？,自身免疫性疾病(AID)的定義?,自身抗體的分類和臨床意義？,第六節(jié) 自身抗體檢測,自身免疫性疾病的定義,Autoimmune tolerance,destroy,Some reasons,Immune system,organ、 tissue 、cell,autoantibody,organ tissue cell,Autoimmune disease (AID),自身抗體的分類,抗細(xì)胞核抗體,抗細(xì)胞漿抗體,抗組織細(xì)胞抗體,其他自身抗體,器官特異性,非器官特異性,非器官特異性, 抗核抗體的定義,一般是指抗細(xì)胞核抗原成分的自身抗體的總稱，是針對細(xì)胞核內(nèi)DNA ,RNA,脫氧核糖核蛋白,可提取的核抗原等。主要存在于血清中，無器官及種屬特異性。,是指抗細(xì)胞內(nèi)所有抗原成分的自身抗體的 總稱。對ANA的理解已不局限于核成分， 而是指抗核酸和核蛋白抗體的總稱。,傳統(tǒng)定義：,現(xiàn)代定義：,抗核抗體,Screening test,免疫熒光法 (IFA),DIFA,IIFA,抗核抗體的檢測,HEP-2 cell,Liver cell of monkey,Liver cell of mouse,抗核抗體分類及熒光模型,1.抗細(xì)胞核抗體,2.抗細(xì)胞漿抗體,3.分裂期細(xì)胞陽性抗體,靶抗原,紡錘體,中心粒,中間體,IIF檢測ANA熒光染色常見模型,IIF檢測ANA熒光染色常見模型,IIF檢測ANA熒光染色常見模型,歐蒙斑點法抗ENA譜載片,檢測ANA譜歐蒙印跡法條膜,1.抗雙鏈DNA抗體（Anti-DNA）檢測,抗-dsDNA：細(xì)胞核中DNA 雙股螺旋結(jié)構(gòu) 抗-DNA 抗-ssDNA 抗Z-DNA抗體 【臨床意義】 抗-dsDNA(+): 活動性 SLE (SLE活動的標(biāo)志物)陽性率70% 90%,特異性95%,是SLE診斷的標(biāo)準(zhǔn)之一,是迄今為止參與SLE發(fā)病機(jī)制唯一的一種自身抗體。 類風(fēng)濕、干燥綜合征、藥物誘導(dǎo)的SLE,2.抗-Sm抗體： 為SLE所特有，特異性99%，且能反應(yīng)SLE的活動程度，但敏感性較低，僅為20%。與dsDNA聯(lián)合檢測可提高SLE診斷的陽性率。,3.抗U1-RNP: 抗核糖核蛋白抗體 MCTD：診斷該病的指標(biāo)之一。 SLE： 30 40%的SLE 可檢測出此抗體，并常與抗- Sm 相伴出現(xiàn)。,4.抗-SSA and 抗-SSB: 干燥綜合征的標(biāo)志性抗體 (80 % 90%)，多伴有 內(nèi)臟損傷，發(fā)病早、病程長、腮腺病變重、多系統(tǒng) 受累，少數(shù)引起新生兒狼瘡綜合征（5% 10%）,5.抗-Scl-70: 進(jìn)行性系統(tǒng)硬化癥的標(biāo)志性抗體（30%60%） 病程進(jìn)展快、皮膚或內(nèi)臟損傷嚴(yán)重,6.抗Jo-1: 該抗體對肌炎和間質(zhì)性肺纖維化有高度特異性，抗體的 效價與疾病的活動性相關(guān)。 “Jo-1綜合征” 多發(fā)性肌炎、 Jo-1抗體陽性及HLA-DR/-DRw52標(biāo)志,抗線粒體抗體 anti-mitochondria antibody（AMA）,AMA: 抗線粒體內(nèi)膜脂蛋白成分的抗體， 無器官和組織特異性，抗體主要是IgG. 檢測：用大鼠的胃或腎皮質(zhì)Hep-2做抗原基 質(zhì)，目前發(fā)現(xiàn)9種AMA（M1M9）,【臨床意義】 原發(fā)性膽汁性肝硬化與膽總管阻塞、肝 外膽管阻塞的鑒別診斷。 原發(fā)性膽汁性肝硬化,陰性,膽總管阻塞 肝外膽管阻塞,無癥狀90.5% 有癥狀92.5%,類風(fēng)濕因子：是變性IgG刺激機(jī)體產(chǎn)生的一種自 身抗體，主要存在于類風(fēng)濕關(guān)節(jié) 炎患者的血清和關(guān)節(jié)液內(nèi)。 【參考值】速率散射比濁 :030U/L 【方法】 乳膠凝集法 (LA)-IgM 放射免疫法 -特殊試劑盒 ELISA-可區(qū)分不同類型的 RF 定量、靈敏、特異、簡便 速率散射比濁法敏感、可自動化 不能區(qū)分不同類型的RF,類風(fēng)濕因子（RF）,IgM IgG IgA IgD IgE,【臨床意義】 1.類風(fēng)濕性疾病: 陽性率7090% 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 (rheumatoid arthritis, RA) 2.其他自身免疫性疾病: SLE