總磷--鉬氨酸分光光度法.doc

水質(zhì) 總磷的測(cè)定水質(zhì)中總磷的測(cè)定采用鉬氨酸分光光度法（GB 11893-89）。1. 實(shí)驗(yàn)原理：在中性條件下用過硫酸鉀（或硝酸高氯酸）使試樣消解，將所含磷全部氧化為正磷酸鹽。在酸性介質(zhì)中，正磷酸鹽與鉬酸銨反應(yīng)，在銻鹽存在下生成磷鉬雜多酸后，立即被抗壞血酸還原，生成藍(lán)色的絡(luò)合物。2. 主要儀器：可見分光光度計(jì)，消解裝置，比色管。3. 主要試劑：（1） 1:1硫酸（H2SO4）溶液（2） 100g/L抗壞血酸（C6H8O6）溶液：稱取10g抗壞血酸溶于水中，稀釋至100mL。貯存于棕色瓶中。（3） 鉬酸鹽溶液：稱取13g鉬酸銨(NH4)6Mo7O244H2O于100mL水中。溶解0.35g酒石酸銻鉀KSbC4H4O7H2O于100mL水中。在不斷攪拌下把鉬酸銨溶液徐徐加到300mL 1:1硫酸中，加酒石酸銻鉀溶液并且混合均勻。此溶液貯存于棕色試劑瓶中。（4） 磷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：稱取0.21970.001g于110干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氫鉀(KH2PO4)，用水溶解后轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加入大約800mL水、加5mL 1:1硫酸用水稀釋至標(biāo)線并混勻。1.00mL此標(biāo)準(zhǔn)溶液含50.0g磷。（5） 磷標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：將10.0mL的磷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線并混勻。1.00mL此標(biāo)準(zhǔn)溶液含2.0g磷。過硫酸鉀消解法所需藥品：（1） 50g/L過硫酸鉀（K2S2O8）溶液：稱取5g過硫酸鉀溶于水，稀釋至100mL。（2） 6 mol/L氫氧化鈉（NaOH）溶液：稱取24g氫氧化鈉溶于水中，稀釋至100mL。調(diào)樣品pH用。硝酸-高氯酸消解法所需藥品：（1） 硝酸。（2） 高氯酸。（3） 6 mol/L氫氧化鈉（NaOH）溶液：稱取24g氫氧化鈉溶于水中，稀釋至100mL。（4） l mol/L H2SO4溶液：將27mL硫酸，加入到973mL水中。（5） 10g/L酚酞指示劑：稱取0.5g酚酞溶于50mL 95乙醇中。注：未說明的實(shí)驗(yàn)試劑均為標(biāo)準(zhǔn)分析純或者實(shí)驗(yàn)純藥品。4. 操作步驟取待測(cè)樣品，搖勻。將待測(cè)樣品和空白樣品消解，冷卻。繪制磷標(biāo)準(zhǔn)曲線。將處理后的試樣（待測(cè)試樣和空白試樣），加入抑制劑和顯色劑，顯色。顯色后放置一段時(shí)間，測(cè)吸光度。5. 實(shí)驗(yàn)過程（1） 洗滌并標(biāo)記實(shí)驗(yàn)儀器：藥品標(biāo)記：藥品名稱、藥品濃度、配制時(shí)間、配制人員；比色管、具塞刻度管（或錐形瓶）標(biāo)記：ZL-BX-0、ZL-BX-1、ZL-BX-2、ZL-BX-3、ZL-BX-4、ZL-BX-5、ZL-BX-6、ZL-CK-1、ZL-CK-2、ZL-CK-3、ZL-YP-1、ZL-YP-2、ZL-YP-3。（字母意義：ZL-總磷、BX-標(biāo)線、CK-空白、YP-樣品）。（2） 將樣品搖勻后，取樣品25mL于具塞刻度管（或者錐形瓶）中，準(zhǔn)備消解。a過硫酸鉀消解：向試樣中加4mL 50g/L過硫酸鉀，將具塞刻度管的蓋塞緊后，用一小塊布和線將玻璃塞扎緊(或用其他方法固定)，放在大燒杯中置于高壓蒸汽消毒器中加熱，待壓力達(dá)1.1kg/cm2、相應(yīng)溫度為120時(shí)，保持30min，然后停止加熱。待壓力表讀數(shù)降至零后，取出放冷。然后用水稀釋至標(biāo)線。 注：如用硫酸保存水樣。當(dāng)用過硫酸鉀消解時(shí)，需先將試樣調(diào)至中性。b硝酸-高氯酸消解：向錐形瓶中，加數(shù)粒玻璃珠，加2mL硝酸，然后在電熱板上加熱濃縮至10mL。冷后加5mL硝酸，再加熱濃縮至10mL，放冷。加3mL高氯酸，加熱至高氯酸冒白煙，此時(shí)可在錐形瓶上加小漏斗或調(diào)節(jié)電熱板溫度，使消解液在錐形瓶內(nèi)壁保持回流狀態(tài)，直至剩下34mL，放冷。 加水10mL，加1滴酚酞指示劑。滴加6 mol/L氫氧化鈉溶液至剛呈微紅色，再滴加l mol/L H2SO4溶液使微紅剛好退去，充分混勻。移至具塞刻度管中，用水稀釋至標(biāo)線。（3） 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在7個(gè)已標(biāo)記的具塞刻度管中，依次分別加入0.00mL、0.50mL、1.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、和15.00mL 氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，其所對(duì)應(yīng)的氨氮含量分別為0.0g、1.0g、2.0g、6.0g、10.0g、20.0g、和30g，加水至標(biāo)線。加入1.0mL抗壞血酸溶液，搖勻，30s后再加入2.0mL鉬酸鹽溶液，充分搖勻。放置15min后，在波長700nm下，用30mm比色皿，以水作參比，測(cè)量吸光度。以空白校正后的吸光度為縱坐標(biāo)，以其對(duì)應(yīng)的氨氮含量（g）為橫坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線；（4） 測(cè)定消解后的樣品、空白對(duì)照的吸光度：向裝有待測(cè)液的具塞刻度管中加入1.0mL抗壞血酸溶液，搖勻，30s后再加入2.0mL鉬酸鹽溶液，充分搖勻。放置15min后，在波長700nm下，用30mm比色皿，以水作參比，測(cè)量吸光度。（5） 記錄、處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。6. 原始數(shù)據(jù)（1） 實(shí)驗(yàn)藥品配制原始數(shù)據(jù)： 硫酸溶液：抗壞血酸溶液：鉬酸鹽溶液：磷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：磷標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：（2） 消解方法所需實(shí)驗(yàn)藥品配制原始數(shù)據(jù)： （3） 標(biāo)準(zhǔn)曲線原始數(shù)據(jù)：表1-1 氨氮標(biāo)準(zhǔn)曲線原始數(shù)據(jù)比色管編號(hào)氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液加入量/mL吸光度（AAS）ZL-BX-0ZL-BX-1ZL-BX-2ZL-BX-3ZL-BX-4ZL-BX-5ZL-BX-6（4） 樣品及空白原始數(shù)據(jù)表1-2 樣品和空白吸光度原始數(shù)據(jù)比色管編號(hào)吸光度（AAS）ZL-CK-1ZL-CK-2