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. . . .第一章 緒論一、概念1、細(xì)胞生物學(xué)cell biology;是研究細(xì)胞基本生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué),是在顯微、亞顯微和分子水平上,以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能,細(xì)胞增殖、分化、衰老與凋亡,細(xì)胞信號(hào)傳遞,真核細(xì)胞基因表達(dá)與調(diào)控,細(xì)胞起源與進(jìn)化等為主要內(nèi)容的一門(mén)學(xué)科。二、填空題1、細(xì)胞生物學(xué)是研究細(xì)胞基本生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué),是在顯微水平,亞顯微水平和分子水平三個(gè)不同層次上,以研究細(xì)胞的細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能,細(xì)胞增殖、分化、衰老與凋亡,細(xì)胞信號(hào)傳遞、真核細(xì)胞基因表達(dá)與調(diào)控和細(xì)胞起源與進(jìn)化等為主要內(nèi)容的一門(mén)科學(xué)。2、1665年英國(guó)學(xué)者胡克(Robert Hooke)第一次觀察到細(xì)胞并命名為cell;后來(lái)第一次真正觀察到活細(xì)胞有機(jī)體的科學(xué)家是列文虎克(Leeuwen Hoek)。3、18381839年,施萊登(Schleiden)和施旺(Schwann)共同提出:一切植物、動(dòng)物都是由細(xì)胞組成的,細(xì)胞是一切動(dòng)植物的基本單位。三、選擇題1、第一個(gè)觀察到活細(xì)胞有機(jī)體的是( B )。a、Robert Hooke b、Leeuwen Hoek c、Grew d、Virchow2、細(xì)胞學(xué)說(shuō)是由( C )提出來(lái)的。a、Robert Hooke和Leeuwen Hoek b、Crick和Watson c、Schleiden和Schwann d、Sichold和Virchow六、論述題1、什么叫細(xì)胞生物學(xué)?試論述細(xì)胞生物學(xué)研究的主要內(nèi)容。答:細(xì)胞生物學(xué)是研究細(xì)胞基本生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué),它是在三個(gè)水平(顯微、亞顯微與分子水平)上,以研究細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、細(xì)胞衰老開(kāi)發(fā)商地亡、細(xì)胞信號(hào)傳遞、真核細(xì)胞基因表達(dá)與調(diào)控、細(xì)胞起源與進(jìn)化等為主要內(nèi)容的一門(mén)科學(xué)。細(xì)胞生物學(xué)的主要研究?jī)?nèi)容主要包括兩個(gè)大方面:細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能、細(xì)胞重要生命活動(dòng)。涵蓋九個(gè)方面的內(nèi)容:細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;生物膜與細(xì)胞器的研究;細(xì)胞骨架體系的研究;細(xì)胞增殖及其調(diào)控;細(xì)胞分化及其調(diào)控;細(xì)胞的衰老與凋亡;細(xì)胞的起源與進(jìn)化;細(xì)胞工程;細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。2、試論述當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)研究最集中的領(lǐng)域。答:當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)研究主要集中在以下四個(gè)領(lǐng)域:細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);細(xì)胞增殖調(diào)控;細(xì)胞衰老、凋亡及其調(diào)控;基因組與后基因組學(xué)研究。人類(lèi)亟待通過(guò)以上四個(gè)方面的研究,闡明當(dāng)今主要威脅人類(lèi)的四大疾?。喊┌Y、心血管疾病、艾滋病和肝炎等傳染病的發(fā)病機(jī)制,并采取有效措施達(dá)到治療的目的。七、翻譯題1、cell biology;細(xì)胞生物學(xué)第二章 細(xì)胞的統(tǒng)一性與多樣性一、名詞解釋1、細(xì)胞;由膜轉(zhuǎn)圍成的、能進(jìn)行獨(dú)立繁殖的最小原生質(zhì)團(tuán),是生物體電基本的開(kāi)礦結(jié)構(gòu)和生理功能單位。其基本結(jié)構(gòu)包括:細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核(擬核)。 2、原核細(xì)胞;沒(méi)有由膜圍成的明確的細(xì)胞核、體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、進(jìn)化地位原始的細(xì)胞。 二、填空題1、所有細(xì)胞的表面均有由脂類(lèi)和蛋白質(zhì)構(gòu)成的細(xì)胞膜;所有的細(xì)胞都含有兩種核酸;所有細(xì)胞都以二分分裂方式增殖;所有細(xì)胞內(nèi)均存在蛋白質(zhì)生物合成的機(jī)器核糖體。2、病毒是迄今發(fā)現(xiàn)的最小的、最簡(jiǎn)單的專(zhuān)性活細(xì)胞內(nèi)寄生的非細(xì)胞生物。3、病毒核酸是病毒的遺傳信息唯一的貯存場(chǎng)所,是病毒的感染單位;病毒蛋白質(zhì)構(gòu)成病毒的外殼(殼體)具有保護(hù)作用。4、病毒的增殖一般可分為病毒侵入細(xì)胞,病毒核酸的侵染和病毒核酸的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與蛋白質(zhì)的合成;病毒的裝配、成熟與釋放三個(gè)階段。5、原核細(xì)胞的遺傳信息量小,遺傳信息載體僅由一個(gè)環(huán)狀的DNA構(gòu)成,細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有專(zhuān)門(mén)的細(xì)胞器 和核膜,其細(xì)胞膜具有多功能性性。6、一個(gè)細(xì)胞生存與增殖必須具備的結(jié)構(gòu)為細(xì)胞膜、遺傳信息載體DNA與RNA、進(jìn)行蛋白質(zhì)生物合成的一定數(shù)量的核糖體和催化酶促反應(yīng)所需要的酶。7、病毒的抗原性是由殼體蛋白來(lái)決定的。8、原核細(xì)胞和真核細(xì)胞核糖體的沉降系數(shù)分別為70S和 80S 。9、細(xì)菌細(xì)胞表面主要是指細(xì)胞壁和細(xì)胞膜及其特化結(jié)構(gòu)間體,莢膜和鞭毛等。10、真核細(xì)胞亞顯微水平的三大基本結(jié)構(gòu)體系是生物膜結(jié)構(gòu)系統(tǒng)、遺傳信息表達(dá)系統(tǒng),和細(xì)胞骨架系統(tǒng)。11、目前發(fā)現(xiàn)的最小最簡(jiǎn)單的細(xì)胞是形態(tài)結(jié)構(gòu),功能。三、選擇題1、大腸桿菌的核糖體的沉降系數(shù)為( B )A、80S B、70S C、 60S D、50S2、植物細(xì)胞特有的細(xì)胞器是( B )A、線(xiàn)粒體 B、葉綠體 C、高爾基體 D、核糖體3、在病毒與細(xì)胞起源的關(guān)系上,下面的( C )觀戰(zhàn)越來(lái)越有說(shuō)服力。A、生物大分子病毒細(xì)胞 B、生物大分子細(xì)胞和病毒C、生物大分子細(xì)胞病毒 D、都不對(duì)6、動(dòng)物細(xì)胞特有的細(xì)胞器是( C )A、細(xì)胞核 B、線(xiàn)粒體 C、中心粒 D、質(zhì)體7、在真核細(xì)胞和原核細(xì)胞中共同存在的細(xì)胞器是( D )A、中心粒 B、葉綠體 C、溶酶體 D、核糖體8、原核細(xì)胞的呼吸酶定位在( B )。A、細(xì)胞質(zhì)中 B、質(zhì)膜上 C、線(xiàn)粒體內(nèi)膜上 D、類(lèi)核區(qū)內(nèi)11、在英國(guó)引起瘋牛病的病原體是( A )。A、朊病毒(prion) B、病毒(Virus) C、立克次體 D、支原體四、判斷題1、所有細(xì)胞的表面均有由磷酯雙分子層和鑲嵌蛋白質(zhì)構(gòu)成的生物膜即細(xì)胞膜。( )2、細(xì)菌的DNA復(fù)制、RNA轉(zhuǎn)錄與蛋白質(zhì)的翻譯可以同時(shí)進(jìn)行,沒(méi)有嚴(yán)格的時(shí)間上的階段性與空間上的區(qū)域性。( )3、細(xì)菌的基因組主要是由一個(gè)環(huán)狀DNA分子盤(pán)繞而成,特稱(chēng)為核區(qū)或擬核。( )4、原核細(xì)胞 與真核細(xì)胞相比,一個(gè)重要的特點(diǎn)就是原核細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有細(xì)胞器。( x )5、所有的細(xì)胞均具有兩種核酸,即DNA和RNA。( )6、核糖體僅存在于真核細(xì)胞中,而在原核細(xì)胞沒(méi)有。( x )7、細(xì)菌核糖體的沉降系數(shù)為70S,由50S大亞基和30S小亞基組成。( )五、簡(jiǎn)答題1、為什么說(shuō)支原體是目前發(fā)現(xiàn)的最小、最簡(jiǎn)單的能獨(dú)立生活的細(xì)胞生物?答:支原體的的結(jié)構(gòu)和機(jī)能極為簡(jiǎn)單:細(xì)胞膜、遺傳信息載體DNA與RNA、進(jìn)行蛋白質(zhì)合成的一定數(shù)量的核糖體以及催化主要酶促反應(yīng)所需要的酶。這些結(jié)構(gòu)及其功能活動(dòng)所需空間不可能小于100nm。因此作為比支原體更小、更簡(jiǎn)單的細(xì)胞,又要維持細(xì)胞生命活動(dòng)的基本要求,似乎是不可能存在的,所以說(shuō)支原體是最小、最簡(jiǎn)單的細(xì)胞。六、論述題1、如何理解“細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位”。答:細(xì)胞是構(gòu)成有機(jī)體的基本單位。一切有機(jī)體均由細(xì)胞構(gòu)成,只有病毒是非細(xì)胞形態(tài)的生命體。細(xì)胞具有獨(dú)立的、有序的自控代謝體系,細(xì)胞是代謝與功能的基本單位細(xì)胞是有機(jī)體生長(zhǎng)與發(fā)育的基礎(chǔ)細(xì)胞是遺傳的基本單位,細(xì)胞具有遺傳的全能性細(xì)胞是生命起源和進(jìn)化的基本單位。沒(méi)有細(xì)胞就沒(méi)有完整的生命2、試論述原核細(xì)胞與真核細(xì)胞最根本的區(qū)別。答:原核細(xì)胞與真核細(xì)胞最根本的區(qū)別在于:生物膜系統(tǒng)的分化與演變:真核細(xì)胞以生物膜分化為基礎(chǔ),分化為結(jié)構(gòu)更精細(xì)、功能更專(zhuān)一的基本單位細(xì)胞器,使細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)與職能的分工是真核細(xì)胞區(qū)別于原核細(xì)胞的重要標(biāo)志;遺傳信息量與遺傳裝置的擴(kuò)增與復(fù)雜化:由于真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)雜化,遺傳信息量相應(yīng)擴(kuò)增,即編碼結(jié)構(gòu)蛋白與功能蛋白的基因數(shù)首先大大增多;遺傳信息重復(fù)序列與染色體多倍性的出現(xiàn)是真核細(xì)胞區(qū)別于原核細(xì)胞的一個(gè)重大標(biāo)志。遺傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯的裝置和程序也相應(yīng)復(fù)雜化,真核細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的轉(zhuǎn)錄與翻譯有嚴(yán)格的階段性與區(qū)域性,而在原核細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄與翻譯可同時(shí)進(jìn)行。七、翻譯1、virus ;病毒 2、bacteria ;、細(xì)菌第三章 細(xì)胞生物學(xué)研究方法一、名詞解釋 1、原代細(xì)胞培養(yǎng);直接從有機(jī)體取出組織,通過(guò)組織塊長(zhǎng)出單層細(xì)胞,或者用酶消化或機(jī)械方法將組織分散成單個(gè)細(xì)胞,在體外進(jìn)行培養(yǎng),在首次傳代前的培養(yǎng)稱(chēng)為原代培養(yǎng)。 2、傳代細(xì)胞培養(yǎng);原代培養(yǎng)形成的單層培養(yǎng)細(xì)胞匯合以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或由于細(xì)胞密度過(guò)大引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將影響細(xì)胞的生長(zhǎng),這一分離培養(yǎng)稱(chēng)為傳代細(xì)胞培養(yǎng)3、細(xì)胞融合;兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)雙核細(xì)胞或多核細(xì)胞的現(xiàn)象。一般通過(guò)滅活的病毒或化學(xué)物質(zhì)介導(dǎo),也可通過(guò)電刺激融合。4、單克隆抗體;通過(guò)克隆單個(gè)分泌抗體的B淋巴細(xì)胞,獲得的只針對(duì)某一抗原決定簇的抗體,具有專(zhuān)一性強(qiáng)、能大規(guī)模生產(chǎn)的特點(diǎn)。二、填空題1、熒光顯微鏡是以紫外光為光源,電子顯微鏡則是以電子束為光源。2、電鏡超薄切片技術(shù)包括固定,包埋,切片,染色。等四個(gè)步驟。3、細(xì)胞組分的分級(jí)分離方法有超速離心法,層析法和電泳法。4、電子顯微鏡使用的是電磁透鏡,而光學(xué)顯微鏡使用的是玻璃透鏡。5、雜交瘤是通過(guò)(小鼠骨髓)瘤細(xì)胞細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞種細(xì)胞的融合實(shí)現(xiàn)的,由此所分泌的抗體稱(chēng)為單克隆抗體。6、觀察活細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可選用相差顯微鏡顯微鏡,觀察觀察細(xì)胞的形態(tài)和運(yùn)動(dòng)可選用暗視野顯微鏡顯微鏡,觀察生物膜的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可采用冰凍蝕刻法。7、體外培養(yǎng)的細(xì)胞,不論是原代細(xì)胞還是傳代細(xì)胞,一般不保持體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài),而呈現(xiàn)出兩種基本形態(tài)即成纖維樣細(xì)胞和上皮樣細(xì)胞。三、選擇題1、由小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某一B細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體稱(chēng)( A )。A、單克隆抗體 B、多克隆抗體 C、單鏈抗體 D、嵌合抗體2、適于觀察培養(yǎng)瓶中活細(xì)胞的顯微鏡是( C )A、熒光顯微鏡 B、相差顯微鏡 C、倒置顯微鏡 D、掃描電鏡 3、冰凍蝕刻技術(shù)主要用于( A )A、電子顯微鏡 B、光學(xué)顯微鏡 C、微分干涉顯微鏡 D、掃描隧道顯微鏡4、分離細(xì)胞內(nèi)不同細(xì)胞器的主要技術(shù)是( A )A、超速離心技術(shù) B、電泳技術(shù) C、層析技術(shù) D、光鏡技術(shù)5、Feulgen反應(yīng)是一種經(jīng)典的細(xì)胞化學(xué)染色方法,常用于細(xì)胞內(nèi)( C )A、蛋白質(zhì)的分布與定位 B、脂肪的分布與定位 C、DNA的分布與定位 D、RNA的分布與定位6、流式細(xì)胞術(shù)可用于測(cè)定( D )A、細(xì)胞的大小和特定細(xì)胞類(lèi)群的數(shù)量 B、分選出特定的細(xì)胞類(lèi)群C、細(xì)胞中DNA、RNA或某種蛋白的含量 D、以上三種功能都有7、真核細(xì)胞和原核細(xì)胞的最主要區(qū)別是( A )。A、真核細(xì)胞具有完整的細(xì)胞核 B、原核細(xì)胞無(wú)核糖體C、質(zhì)膜結(jié)構(gòu)不同 D、細(xì)胞形狀不同8、直接取材于機(jī)體組織的細(xì)胞培養(yǎng)稱(chēng)為(B )。A、細(xì)胞培養(yǎng) B、原代培養(yǎng) C、傳代培養(yǎng) D、細(xì)胞克隆9、掃描電子顯微鏡可用于( D )。A、獲得細(xì)胞不同切面的圖像 B、觀察活細(xì)胞C、定量分析細(xì)胞中的化學(xué)成分 D、觀察細(xì)胞表面的立體形貌10、建立分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞是通過(guò)下列技術(shù)構(gòu)建立( A)A、細(xì)胞融合 B、核移植 C、病毒轉(zhuǎn)化 D、基因轉(zhuǎn)移11、動(dòng)物細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)情況是( C )。A、能無(wú)限增殖 B、不能增殖分裂很快死亡 C、經(jīng)過(guò)有限增殖后死亡 D、一般進(jìn)行有限增殖后死亡,但少數(shù)情況下某些細(xì)胞發(fā)生了遺傳突變,獲得無(wú)限增殖能力12、細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),要保持細(xì)胞原來(lái)染色體的二倍體數(shù)量,最多可傳代培養(yǎng)( B )代。A、1020 B、4050 C、2030 D、9010013、在雜交瘤技術(shù)中,篩選融合細(xì)胞時(shí)常選用的方法是( C )。A、密度梯度離心法 B、熒光標(biāo)記的抗體和流式細(xì)胞術(shù)C、采用在選擇培養(yǎng)劑中不能存活的缺陷型瘤系細(xì)胞來(lái)制作融合細(xì)胞D、讓未融合的細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中自然死亡四、判斷題1、熒光顯微鏡技術(shù)是在光鏡水平,對(duì)特異性蛋白質(zhì)等大分子定性定位的最有力的工具。廣泛用于測(cè)定細(xì)胞和細(xì)胞器中的核酸、氨基酸、蛋白質(zhì)等。( )2、細(xì)胞株是指在體外培養(yǎng)的條件下,細(xì)胞發(fā)生遺傳突變且?guī)в邪┘?xì)胞特點(diǎn),有可能無(wú)限制地傳下去的傳代細(xì)胞。(x )3、掃描電子顯微鏡不能用于觀察活細(xì)胞,而相差顯微鏡可以用于觀察活細(xì)胞。( )4、酶標(biāo)抗體法是利用酶與底物的特異性反應(yīng)來(lái)檢測(cè)底物在組織細(xì)胞中的存在部位。( x )5、光鏡和電鏡的切片均可用載玻片支持。( x )五、簡(jiǎn)答題1、超薄切片的樣品制片過(guò)程包括哪些步驟?答案要點(diǎn):固定,包埋,切片,染色。2、 熒光顯微鏡在細(xì)胞生物學(xué)研究中有什么應(yīng)用?答案要點(diǎn):熒光顯微鏡是以紫外線(xiàn)為光源,照射被檢物體發(fā)出熒光,在顯微鏡下觀察形狀及所在位置,圖像清晰,色彩逼真。熒光顯微鏡可以觀察細(xì)胞內(nèi)天然物質(zhì)經(jīng)紫外線(xiàn)照射后發(fā)熒光的物質(zhì)(如葉綠體中的葉綠素能發(fā)出血紅色熒光);也可觀察誘發(fā)熒光物質(zhì)(如用丫啶橙染色后,細(xì)胞中RNA發(fā)紅色熒光,DNA發(fā)綠色熒光),根據(jù)發(fā)光部位,可以定位研究某些物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的變化情況3、比較差速離心與密度梯度離心的異同。答案要點(diǎn):二者都是依靠離心力對(duì)細(xì)胞勻漿懸浮扔中的顆粒進(jìn)行分離的技術(shù)。差速離心是一種較為簡(jiǎn)便的分離法,常用于細(xì)胞核和細(xì)胞器的分離。因?yàn)樵诿芏染坏慕橘|(zhì)中,顆粒越大沉降越快,反之則沉降較慢。這種離心方法只能將那些大小有顯著差異的組分分開(kāi),而且所獲得的分離組分往往不很純;而密度梯度離心則是較為精細(xì)的分離手段,這種方法的關(guān)鍵是先在離心管中制備出蔗糖或氯化銫等介質(zhì)的濃度梯度并將細(xì)胞勻漿裝在最上層,密度梯度的介質(zhì)可以穩(wěn)定沉淀成分,防止對(duì)流混合,在此條件下離心,細(xì)胞不同組分將以不同速率沉降并形成不同沉降帶。4、為什么電子顯微鏡不能完全替代光學(xué)顯微鏡?答案要點(diǎn):電子顯微鏡用電子束代替了光束,大大提高了分辨率,電子顯微鏡相對(duì)光學(xué)顯微鏡是個(gè)飛躍。但是電子顯微鏡:樣品制備更加復(fù)雜;鏡筒需要真空,成本更高;只能觀察“死”的樣品,不能觀察活細(xì)胞。光學(xué)顯微鏡技術(shù)性能要求不高,使用容易;可以觀察活細(xì)胞,觀察視野范圍廣,可在組織內(nèi)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系;而且一些新發(fā)展起來(lái)的光學(xué)顯微鏡能夠觀察特殊的細(xì)胞或細(xì)胞結(jié)構(gòu)組分。因此,電子顯微鏡不能完全代替光學(xué)顯微鏡。5、相差顯微鏡在細(xì)胞生物學(xué)研究中有什么應(yīng)用?答案要點(diǎn):相差顯微鏡通過(guò)安裝特殊裝置(如相差板等)將光波通過(guò)樣品的光程差或相差位轉(zhuǎn)換為振幅差,由于相差板上部分區(qū)域有吸光物質(zhì),使兩組光線(xiàn)之間增添了新的光程差,從而對(duì)樣品不同同造成的相位差起“夸大作用”,樣品表現(xiàn)出肉眼可見(jiàn)的明暗區(qū)別。相差顯微鏡的樣品不需染色,可以觀察活細(xì)胞,甚至研究細(xì)胞核、線(xiàn)粒體等到細(xì)胞器的形態(tài)。六、論述題1、試比較電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的區(qū)別。答案要點(diǎn):光學(xué)顯微鏡是以可見(jiàn)光為照明源,將微小的物體形成放大影像的光學(xué)儀器;而電子顯微鏡則是以電子束為照明源,通過(guò)電子流對(duì)樣品的透射或反射及電磁透鏡的多級(jí)放大后在熒光屏上成像的大型儀器。它們的不同在于:照明源不同:光鏡的照明源是可見(jiàn)光,電鏡的照明源是電子束;由于電子束的波長(zhǎng)遠(yuǎn)短于光波波長(zhǎng),因而電鏡的放大率及分辨率顯著高于光鏡。透鏡不同:光鏡為玻璃透鏡;電鏡為電磁透鏡。分辨率及有效放大本領(lǐng)不同:光鏡的分辨率為0.2m左右,放大倍數(shù)為1000倍;電鏡的分辨率可達(dá)0.2nm,放大倍數(shù)106倍。真空要求不同:光鏡不要求真空;電鏡要求真空。成像原理不同:光鏡是利用樣品對(duì)光的吸收形成明暗反差和顏色變化成像;而電鏡則是利用樣品對(duì)電子的散射和透射形成明暗反差成像。生物樣品制備技術(shù)不同:光鏡樣品制片技術(shù)較簡(jiǎn)單,通常有組織切片、細(xì)胞涂片、組強(qiáng)壓片和細(xì)胞滴片等;而電鏡樣品的制備較復(fù)雜,技術(shù)難度和費(fèi)用都較高,在取材、固定、脫水和包埋等環(huán)節(jié)上需要特殊的試劑和操作,還需要制備超薄切片七、翻譯1、cell line ;細(xì)胞系2、cell strain;細(xì)胞株3、cell culture ;細(xì)胞培養(yǎng)4、cell engineering;細(xì)胞工程5、cell fusion;細(xì)胞融合6、primary culture cell ;代細(xì)胞7、monoclonal antibody、;單克隆抗體第四章 細(xì)胞膜與細(xì)胞表面 一、名詞解釋1、生物膜;把細(xì)胞所有膜相結(jié)構(gòu)稱(chēng)為生物膜。 2、脂質(zhì)體;是根據(jù)磷脂分子可在水相中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的而制備的人工膜。 3、內(nèi)在蛋白;分布于磷脂雙分子層之間,以疏水氨基酸與磷脂分子的疏水尾部結(jié)合,結(jié)合力較強(qiáng)。只有用去垢劑處理,使膜崩解后,才能將它們分離出來(lái)。 4、外周蛋白 ;為水溶性蛋白,靠離子鍵或其它弱鍵與膜表面的蛋白質(zhì)分子或脂分子極性頭部非共價(jià)結(jié)合,易分離。二、填空題1、細(xì)胞膜的最顯著特性是流動(dòng)性和不對(duì)稱(chēng)性。2、細(xì)胞膜的膜脂主要包括不對(duì)稱(chēng)性,糖脂,和膽固醇中以磷脂為主。三、判斷題1、脂質(zhì)體是根據(jù)磷脂分子可在水相中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的趨勢(shì)而制備的人工膜。( 對(duì) )2、外在(外周)膜蛋白為水不溶性蛋白,形成跨膜螺旋,與膜結(jié)合緊密,需用去垢劑使膜崩解后才可分離。( x )四、簡(jiǎn)答題1、簡(jiǎn)述細(xì)胞膜的基本功能。答案要點(diǎn):(1)限定細(xì)胞的范圍,維持細(xì)胞的形狀。(2)具有高度的選擇性,(為半透膜)并能進(jìn)行主動(dòng)運(yùn)輸使細(xì)胞內(nèi)外形成不同的離子濃度并保持細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和外界環(huán)境之間的必要差別。(3)是接受外界信號(hào)的傳感器,使細(xì)胞對(duì)外界環(huán)境的變化產(chǎn)生適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)。(4)與細(xì)胞新陳代謝、生長(zhǎng)繁殖、分化及癌變等重要生命活動(dòng)密切相關(guān)。第五章 物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸?shù)诎苏?細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)一、名詞解釋1、載體蛋白 :是一類(lèi)膜內(nèi)在蛋白,幾乎所有類(lèi)型的生物膜上存在的多次跨膜的蛋白質(zhì)分子。通過(guò)與特定溶質(zhì)分子的結(jié)合,引起一系列構(gòu)象改變以介導(dǎo)溶質(zhì)分子的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)。 2、細(xì)胞通訊 一個(gè)細(xì)胞發(fā)出的信息通過(guò)介質(zhì)傳遞到另一個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的反應(yīng)。對(duì)于多細(xì)胞生物體的發(fā)生和組織的構(gòu)建,協(xié)調(diào)細(xì)胞的功能,控制細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂、分化和凋亡是必須的。 3、通道蛋白 由幾個(gè)蛋白亞基在膜上形成的孔道,能使適宜大小的分子及帶電荷的溶質(zhì)通過(guò)簡(jiǎn)單的自由擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)從膜的一側(cè)到另一側(cè)。 4、分子開(kāi)關(guān) 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中,通過(guò)結(jié)合GTP與水解GTP,或者通過(guò)蛋白質(zhì)磷酸化與去磷酸化而開(kāi)啟或關(guān)閉蛋白質(zhì)的活性。 5、鈉鉀泵(Na+K+ pump)又稱(chēng)Na+ - K+ ATPase,能水解ATP,使a亞基帶上磷酸集團(tuán)或去磷酸化,將Na+泵出細(xì)胞,而將K+泵入細(xì)胞的膜裝運(yùn)載體蛋白。 6質(zhì)子泵 質(zhì)子泵是位于細(xì)胞膜或細(xì)胞內(nèi)膜上的一種能主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)質(zhì)子(H+)的特殊蛋白質(zhì).7、胞吞作用 細(xì)胞攝取大分子和顆粒性物質(zhì)時(shí),細(xì)胞膜向內(nèi)凹陷形成囊泡,將物質(zhì)裹進(jìn)并輸入細(xì)胞的過(guò)程。 8、胞吐作用 攜帶有內(nèi)容物的膜泡與質(zhì)膜融合,將內(nèi)容物釋放到胞外的過(guò)程。 9、胞飲作用 細(xì)胞對(duì)液體物質(zhì)或細(xì)微顆粒物質(zhì)的攝入和消化過(guò)程。10、信號(hào)分子 生物體內(nèi)的某些化學(xué)分子,如激素、神經(jīng)遞質(zhì)、生長(zhǎng)因子等,在細(xì)胞間和細(xì)胞內(nèi)傳遞信息,特稱(chēng)為信號(hào)分子。11、受體 一種能夠識(shí)別和選擇性地結(jié)合某種配體(信號(hào)分子)的大分子,當(dāng)與配體結(jié)合后,通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用將胞外信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)為胞內(nèi)化學(xué)或物理的信號(hào),以啟動(dòng)一系列過(guò)程,最終表現(xiàn)為生物學(xué)效應(yīng)。12、第一信使 :一般將胞外信號(hào)分子稱(chēng)為第一信使。 13、第二信使:細(xì)胞表面受體接受胞外信號(hào)后最早在胞內(nèi)產(chǎn)生的信號(hào)分子。細(xì)胞內(nèi)重要的第二信使有:cAMP、cGMP、DAG、IP3等。15、G蛋白 由GTP控制活性的蛋白,當(dāng)與GTP結(jié)合時(shí)具有活性,當(dāng)與GDP結(jié)合時(shí)沒(méi)有活性。既有單體形式(ras蛋白),也有三聚體形式(Gs蛋白)。在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中起著分子開(kāi)關(guān)的作用。16、G蛋白耦聯(lián)受體 是指配體受體復(fù)合物與靶蛋白的作用要通過(guò)與G蛋白的偶聯(lián),在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生第二信使,從而將胞外信號(hào)跨膜傳遞到胞內(nèi)影響細(xì)胞的行為。 17、組成型胞吐作用 所有真核細(xì)胞都有的、從高爾基體反面管網(wǎng)區(qū)分泌的囊泡向質(zhì)膜流動(dòng)并與質(zhì)膜融合、將分泌小泡的內(nèi)含物釋放到細(xì)胞外的過(guò)程。此過(guò)程不需要任何信號(hào)的觸發(fā),除了給細(xì)胞外提供酶、生長(zhǎng)因子和細(xì)胞外基質(zhì)成分外,還為細(xì)胞膜提供膜整合蛋白和膜脂。18、調(diào)節(jié)型胞吐作用 某些特化的細(xì)胞(如分泌細(xì)胞)產(chǎn)生的分泌物(如激素、粘液或消化酶)儲(chǔ)存在分泌泡內(nèi),當(dāng)細(xì)胞受到胞外信號(hào)刺激時(shí),分泌泡與質(zhì)膜融合并將內(nèi)含物釋放出去的過(guò)程。19、蛋白激酶A :稱(chēng)為依賴(lài)于cAMP的蛋白激酶A,是由四個(gè)亞基組成的復(fù)合物,其中兩個(gè)是調(diào)節(jié)亞基,兩個(gè)是催化亞基;PKA的功能是將ATP上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到特定蛋白質(zhì)的絲氨酸或蘇氨酸殘基上,使蛋白質(zhì)被磷酸化,被磷酸化的蛋白質(zhì)可以調(diào)節(jié)下游靶蛋白的活性。20、雙信使系統(tǒng) 胞外信號(hào)分子與細(xì)胞表面G蛋白偶聯(lián)的受體結(jié)合后,激活質(zhì)膜上的磷脂酶C(PLC),使質(zhì)膜上的二磷酸磷脂酰肌醇分解成三磷酸肌醇(IP3)和二?;视停―G)兩個(gè)第二信使,將胞外信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)為胞內(nèi)信號(hào),兩個(gè)第二信使分別激動(dòng)兩個(gè)信號(hào)傳遞途徑即IP3Ca+和DGPKC途徑,實(shí)現(xiàn)對(duì)胞外信號(hào)的應(yīng)答,因此將這一信號(hào)系統(tǒng)稱(chēng)為“雙信使系統(tǒng)”。 21、Ras蛋白 是ras基因的產(chǎn)物,由191個(gè)氨基酸殘基組成,分布于質(zhì)膜胞質(zhì)側(cè),結(jié)合GTP時(shí)為活化狀態(tài),結(jié)合GDP時(shí)失活狀態(tài),因此Ras蛋白屬于GTP結(jié)合蛋白,具有GTP酶活性,具有分子開(kāi)關(guān)的作用。22、STATs 23、受體酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase, RTK):能將自身或胞質(zhì)中底物上的酪氨酸殘基磷酸化的細(xì)胞表面受體。主要參與細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的調(diào)控。 23胞質(zhì)酪氨酸蛋白激酶Jak 二、填空題1、細(xì)胞的化學(xué)信號(hào)可分為 內(nèi)分泌激素 、 神經(jīng)遞質(zhì) 、 介導(dǎo)因子 、氣體分子 等四類(lèi)。3、細(xì)胞膜表面受體主要有三類(lèi)即 離子通道型受體 、 G蛋白偶聯(lián)受體 和 酶偶聯(lián)型受體 。4、在細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中,第二信使主要有 cAMP 、 cGMP、 IP3 和 DG 。5、在磷脂酰肌醇信號(hào)通路中胞外信號(hào)分子與細(xì)胞 G蛋白偶聯(lián) 表面受體結(jié)合, 激活 質(zhì)膜上的磷脂酶C,使質(zhì)膜上 二磷酸磷脂酰肌醇 水解成1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)和二?;视停―G)兩個(gè)第二信使,胞外信號(hào)轉(zhuǎn)換為胞內(nèi)信號(hào),這一信號(hào)系統(tǒng)又稱(chēng)為雙信使系統(tǒng) 。6、酶偶聯(lián)受體通常是指與酶連接的細(xì)胞表面受體又稱(chēng) 催化性受體 ,目前已知的這類(lèi)受體都是跨膜蛋白,當(dāng)胞外配體與受體結(jié)合即激活受體胞內(nèi)段的酶活性。至少包括五類(lèi)即: 受體酪氨酸激酶 、 受體絲氨酯酸/蘇氨酸激酶 、 受體酪氨酸磷酸酯酶 、 受體鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶 和 酪氨酸蛋白激酶聯(lián)系的受體 。7、門(mén)通道對(duì)離子的通透有高度的 選擇性 不是連續(xù)開(kāi)放而是 瞬時(shí) 開(kāi)放,門(mén)的開(kāi)關(guān)在于孔道蛋白的 構(gòu)象 變化,根據(jù)控制門(mén)開(kāi)關(guān)的影響因子的不同,可進(jìn)一步區(qū)分為 配體 門(mén)通道、 電壓 門(mén)通道、 壓力激活 門(mén)通道。8、由G蛋白偶聯(lián)受體所介導(dǎo)有細(xì)胞信號(hào)通路主要包括_cAMP_信號(hào)通路和_雙信使系統(tǒng)_信號(hào)通路。9、磷脂酰肌醇信號(hào)通路中產(chǎn)生兩個(gè)第二信使的前體物質(zhì)是 IP3,DG 。10、硝酸甘油之所以能治療心絞痛是因?yàn)樗隗w內(nèi)能轉(zhuǎn)化為 NO ,引起血管 舒張 ,從而減輕 心臟 的負(fù)荷和 心肌 的需氧量。三、選擇題1、下列不屬于第二信使的是(D )。A、cAMP B、cGMP C、DG D、NO2、Na+-K+泵由、兩個(gè)亞基組成,當(dāng)亞基上的( C )磷酸化才可能引起亞基構(gòu)象變化,而將Na+泵出細(xì)胞外。A、蘇氨酸 B、酪氨酸 C、天冬氨酸 D、半胱氨酸3、真核細(xì)胞的胞質(zhì)中,Na+和K+平時(shí)相對(duì)胞外,保持( C )。A、濃度相等 B、Na+高,K+低C、Na+低,K+高 D、Na+ 是K+的3倍4、生長(zhǎng)因子是細(xì)胞內(nèi)的( C )。A、結(jié)構(gòu)物質(zhì) B、能源物質(zhì) C、信息分子 D、酶5、腎上腺素可誘導(dǎo)一些酶將儲(chǔ)藏在肝細(xì)胞和肌細(xì)胞中的糖原水解,第一個(gè)被激活的酶是( D )。A、蛋白激酶A B、糖原合成酶 C、糖原磷酸化酶 D、腺苷酸環(huán)化酶6、Ras基因的哪一種突變有可能引起細(xì)胞的癌變( A )A、突變后的Ras蛋白不能水解GTP B、突變后的Ras蛋白不能結(jié)合GTPC、突變后的Ras蛋白不能結(jié)合Grb2或Sos D、突變后的Ras蛋白不能結(jié)合Raf7、( D )不是細(xì)胞表面受體。A、離子通道 B、酶連受體 C、G蛋白偶聯(lián)受體 D、核受體8、動(dòng)物細(xì)胞中cAMP的主要生物學(xué)功能是活化( A )。A、蛋白激酶C B、蛋白激酶A C、蛋白激酶K D、Ca2+激酶9、在G蛋白中,亞基的活性狀態(tài)是( A )。A、與GTP結(jié)合,與分離 B、與GTP結(jié)合,與聚合C、 與GDP結(jié)合,與分離 D、 與GTP結(jié)合,與聚合四、判斷題1、親脂性信號(hào)分子可穿過(guò)質(zhì)膜,通過(guò)與胞內(nèi)受體結(jié)合傳遞信息。( )2、協(xié)助擴(kuò)散是一種不需要消耗能量、不需要載體參與的被動(dòng)運(yùn)輸方式。( )3、細(xì)胞外信號(hào)分子都是通過(guò)細(xì)胞表面受體又進(jìn)行跨膜信號(hào)傳遞的。( )4、G蛋白偶聯(lián)受體都是7次跨膜的。( )5、G蛋白偶聯(lián)受體被激活后,使相應(yīng)的G蛋白解離成三個(gè)亞基,以進(jìn)行信號(hào)傳遞。( )6、胞外信號(hào)通過(guò)跨膜受體才能轉(zhuǎn)換成胞內(nèi)信號(hào)。( )7、Na+K+泵既存在于動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)膜上,也存在于植物細(xì)胞質(zhì)膜上。( )8、DG結(jié)合于質(zhì)膜上,可活化與質(zhì)膜結(jié)合的蛋白激酶C。( )9、IP3與內(nèi)質(zhì)內(nèi)上的IP3配體門(mén)鈣通道結(jié)合,關(guān)閉鈣通道,使胞內(nèi)Ca2+濃度升高。( )10、硝酸甘油治療心絞痛的作用原理是:硝酸甘油在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成NO,從而可舒張血管,減輕心臟負(fù)荷和心肌的需氧量。( )五、簡(jiǎn)答題1、簡(jiǎn)述細(xì)胞信號(hào)分子的類(lèi)型及特點(diǎn)?答案要點(diǎn):細(xì)胞信號(hào)分子包括:短肽、蛋白質(zhì)、氣體分子(NO、CO)以及氨基酸、核苷酸、脂類(lèi)的膽固醇衍生物等,其共同特點(diǎn)是:特異性,只能與特定的受體結(jié)合;高效性,幾個(gè)分子即可發(fā)生明顯的生物學(xué)效應(yīng),這一特性有賴(lài)于細(xì)胞的信號(hào)逐級(jí)放大系統(tǒng);可被滅活,完成信息傳遞后可被降解或修飾而失去活性,保證信息傳遞的完整性和細(xì)胞免于疲勞。2、 NO的產(chǎn)生及其細(xì)胞信使作用?答案要點(diǎn):NO是可溶性的氣體,NO的產(chǎn)生與血管內(nèi)皮細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞相關(guān),血管內(nèi)皮細(xì)胞接受乙酰膽堿,引起細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高,激活一氧化氮合成酶,該酶以精氨酸為底物,以NADPH為電子供體,生成NO和胍氨酸。細(xì)胞釋放NO,通過(guò)擴(kuò)散快速透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入平滑肌細(xì)胞內(nèi),與胞質(zhì)鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶活性中心的Fe2+結(jié)合,改變酶的構(gòu)象,導(dǎo)致酶活性的增強(qiáng)和cGMP合成增多。cGMP可降低血管平滑肌中的Ca2+離子濃度,引起血管平滑肌的舒張,血管擴(kuò)張、血流通暢。NO沒(méi)有專(zhuān)門(mén)的儲(chǔ)存及釋放調(diào)節(jié)機(jī)制,靶細(xì)胞上NO的多少直接與NO的合成有關(guān)。3、 簡(jiǎn)要說(shuō)明由G蛋白偶聯(lián)的受體介導(dǎo)的信號(hào)的特點(diǎn)。答案要點(diǎn):G蛋白偶聯(lián)的受體是細(xì)胞質(zhì)膜上最多,也是最重要的倍轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng),具有兩個(gè)重要特點(diǎn):信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)由三部分構(gòu)成:G蛋白偶聯(lián)的受體,是細(xì)胞表面由單條多肽鏈經(jīng)7次跨膜形成的受體;G蛋白能與GTP結(jié)合被活化,可進(jìn)一步激活其效應(yīng)底物;效應(yīng)物:通常是腺苷酸環(huán)化酶,被激活后可提高細(xì)胞內(nèi)環(huán)腺苷酸(cAMP)的濃度,可激活cAMP依賴(lài)的蛋白激酶,引發(fā)一系列生物學(xué)效應(yīng)。產(chǎn)生第二信使。配體受體復(fù)合物結(jié)合后,通過(guò)與G蛋白的偶聯(lián),在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生第二信使,從而將胞外信號(hào)跨膜傳遞到胞內(nèi),影響細(xì)胞的行為。根據(jù)產(chǎn)生的第二信使的不同,又可分為cAMP信號(hào)通路和磷酯酰肌醇信號(hào)通路。cAMP信號(hào)通路的主要效應(yīng)是激活靶酶和開(kāi)啟基因表達(dá),這是通過(guò)蛋白激酶完成的。該信號(hào)途徑涉及的反應(yīng)鏈可表示為:激素G蛋白偶聯(lián)受體G蛋白腺苷酸環(huán)化化酶cAMP cAMP依賴(lài)的蛋白激酶A基因調(diào)控蛋白基因轉(zhuǎn)錄。磷酯酰肌醇信號(hào)通路的最大特點(diǎn)是胞外信號(hào)被膜受體接受后,同時(shí)產(chǎn)生兩個(gè)胞內(nèi)信使,分別啟動(dòng)兩個(gè)信號(hào)傳遞途徑即IP3Ca2+和DGPKC途徑,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞對(duì)外界信號(hào)的應(yīng)答,因此,把這一信號(hào)系統(tǒng)又稱(chēng)為“雙信使系統(tǒng)”。4、 磷酯酰肌醇信號(hào)通路的傳導(dǎo)途徑。答案要點(diǎn):外界信號(hào)分子識(shí)別并與膜上的與G蛋白偶聯(lián)的受體結(jié)合活化G蛋白激活磷脂酶C催化存在于細(xì)胞膜上的PIP2水解IP3和DG兩個(gè)第二信使IP3可引起胞內(nèi)Ca2+濃度升高,進(jìn)而通過(guò)鈣結(jié)合蛋白的作用引起細(xì)胞對(duì)胞外信號(hào)的應(yīng)答;DG通過(guò)激活PKC,使胞內(nèi)pH值升高,引起對(duì)胞外信號(hào)的應(yīng)答。6、 論述題1、試論述Na+-K+泵的結(jié)構(gòu)及作用機(jī)理。答案要點(diǎn):1、結(jié)構(gòu):由兩個(gè)亞單位構(gòu)成:一個(gè)大的多次跨膜的催化亞單位(亞基)和一個(gè)小的單次跨膜具組織特異性的糖蛋白(亞基)。前者對(duì)Na+和ATP的結(jié)合位點(diǎn)在細(xì)胞質(zhì)面,對(duì)K+的結(jié)合位點(diǎn)在膜的外表面。2、機(jī)制:在細(xì)胞內(nèi)側(cè),亞基與Na+相結(jié)合促進(jìn)ATP水解,亞基上的一個(gè)天門(mén)冬氨酸殘基磷酸化引起亞基的構(gòu)象發(fā)生變化,將Na+泵出細(xì)胞外,同時(shí)將細(xì)胞外的K+與亞基的另一個(gè)位點(diǎn)結(jié)合,使其去磷酸化,亞基構(gòu)象再度發(fā)生變化將K+泵進(jìn)細(xì)胞,完成整個(gè)循環(huán)。Na+依賴(lài)的磷酸化和K+依賴(lài)的去磷酸化引起構(gòu)象變化有序交替發(fā)生。每個(gè)循環(huán)消耗一個(gè)ATP分子,泵出3個(gè)Na+和泵進(jìn)2個(gè)K+。2、cAMP信號(hào)系統(tǒng)的組成及其信號(hào)途徑?答案要點(diǎn):1、組成:主要包括:Rs和Gs;Ri和Gi;腺苷酸不化酶;PKA;環(huán)腺苷酸磷酸二酯酶。2、信號(hào)途徑主要有兩種調(diào)節(jié)模型:Gs調(diào)節(jié)模型,當(dāng)激素信號(hào)與Rs結(jié)合后,導(dǎo)致Rs構(gòu)象改變,暴露出與Gs結(jié)合的位點(diǎn),使激素-受體復(fù)合物與Gs結(jié)合,Gs的構(gòu)象發(fā)生改變從而結(jié)合GTP而活化,導(dǎo)致腺苷酸環(huán)化酶活化,將ATP轉(zhuǎn)化為cAMP,而GTP水解導(dǎo)致G蛋白構(gòu)象恢復(fù),終止了腺苷酸環(huán)化酶的作用。該信號(hào)途徑為:激素識(shí)別并與G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合激活G蛋白活化腺苷酸環(huán)化酶胞內(nèi)的cAMP濃度升高激活PKA基因調(diào)控蛋白基因轉(zhuǎn)錄。Gi調(diào)節(jié)模型,Gi對(duì)腺苷酸環(huán)化酶的抑制作用通過(guò)兩個(gè)途徑:一是通過(guò)亞基與腺苷酸環(huán)化酶結(jié)合,直接抑制酶的活性;一是通過(guò)和亞基復(fù)合物與游離的Gs的亞基結(jié)合,阻斷Gs的亞基對(duì)腺苷酸酶的活化作用。3、試論述蛋白磷酸化在信號(hào)傳遞中的作用。答案要點(diǎn):蛋白磷酸化是指由蛋白激酶催化的把ATP或GTP的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到底物蛋白質(zhì)氨基酸殘基上的過(guò)程,其逆轉(zhuǎn)過(guò)程是由蛋白磷酸酶催化的,稱(chēng)為蛋白質(zhì)去磷酸化。蛋白磷酸化通常有兩種方式:一種是在蛋白激酶催化下直接連接上磷酸基團(tuán),另一種是被誘導(dǎo)與GTP結(jié)合,這兩種方式都使得信號(hào)蛋白結(jié)合上一個(gè)或多個(gè)磷酸基團(tuán),被磷酸化的蛋白有了活性后,通常反過(guò)來(lái)引起磷酸通路中的下游蛋白磷酸化,當(dāng)信號(hào)消失后,信號(hào)蛋白就會(huì)去磷酸化。磷酸化通路通常是由兩種主要的蛋白激酶介導(dǎo)的:一種是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,另一種是酪氨酸蛋白激酶。蛋白激酶和蛋白磷酸酶通過(guò)將一些酶類(lèi)或蛋白磷酸化與去磷酸化,控制著它們的活性,使細(xì)胞對(duì)外界信號(hào)作出相應(yīng)的反應(yīng)。通過(guò)蛋白磷酸化,調(diào)節(jié)蛋白的活性,通過(guò)蛋白磷酸化,逐級(jí)放大信號(hào),引起細(xì)胞反應(yīng)。4、RTK-Ras蛋白信號(hào)通路。5、Jak-STAT信號(hào)通路。七、翻譯1、passive transport 被動(dòng)運(yùn)輸 2、active transport 主動(dòng)運(yùn)輸 3、endocytosis 胞吞作用 4、exocytosis 胞吐作用 5、cell recognition 細(xì)胞識(shí)別 6、receptor 受體 7、second messenger 第二信使8、double messenger system 雙信使系統(tǒng)第七章 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)與細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)一、名詞解釋1、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì):真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中除去細(xì)胞器和內(nèi)含物以外的、較為均質(zhì)半透明的液態(tài)膠狀物稱(chēng)為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)或胞質(zhì)溶膠。2、微粒體:為了研究ER的功能,常需要分離ER膜,用離心分離的方法將組織或細(xì)胞勻漿,經(jīng)低速離心去除核及線(xiàn)粒體后,再經(jīng)超速離心,破碎ER的片段又封合為許多小囊泡(直徑約為100nm),這就是微粒體。3、糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng):細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一些形狀大小略不相同的小管、小囊連接成網(wǎng)狀,集中在胞質(zhì)中,故稱(chēng)為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的外表面附有核糖體顆粒,則為糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),為蛋白質(zhì)合成的部位。核糖體附著的膜系多為扁囊單位成分,普遍存在于分泌蛋白質(zhì)的細(xì)胞中,其數(shù)量隨細(xì)胞而異,越是分泌旺盛的細(xì)胞中越多。6、溶酶體:溶酶體幾乎存在于所有的動(dòng)物細(xì)胞中,是由單層膜圍繞、內(nèi)含多種酸性水解酶類(lèi)、形態(tài)不一、執(zhí)行不同生理功能的囊泡狀細(xì)胞器,主要功能是進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)的消化作用,在維持細(xì)胞正常代謝活動(dòng)及防御方面起重要作用。7、殘余小體:在正常情況下,被吞噬的物質(zhì)在次級(jí)溶酶體內(nèi)進(jìn)行消化作用,消化完成,形成的小分子物質(zhì)可通過(guò)膜上的載體蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞質(zhì)中,供細(xì)胞代謝用,不能消化的殘?jiān)粤粼谌苊阁w內(nèi),此時(shí)的溶酶體稱(chēng)為殘余小體或三級(jí)溶酶體或后溶酶體。殘余小體有些可通過(guò)外排作用排出細(xì)胞,有些則積累在細(xì)胞內(nèi)不被排出,如表皮細(xì)胞的老年斑、肝細(xì)胞的脂褐質(zhì)。8、蛋白質(zhì)分選:細(xì)胞中絕大多數(shù)蛋白質(zhì)均在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的核糖體上開(kāi)始合成,隨后或在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中或轉(zhuǎn)至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成,然后,通過(guò)不同途徑轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞的特定部位并裝配成結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)合體,參與細(xì)胞的生命活動(dòng)的過(guò)程。又稱(chēng)定向轉(zhuǎn)運(yùn)。9、信號(hào)假說(shuō):1975年G.Blobel和D.Sabatini等根據(jù)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)依據(jù)提出,蛋白合成的位置是由其N(xiāo)端氨基酸序列決定的。他們認(rèn)為:分泌蛋白在N端含有一信號(hào)序列,稱(chēng)信號(hào)肽,由它指導(dǎo)在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)開(kāi)始合成的多肽和核糖體轉(zhuǎn)移到ER膜;多肽邊合成邊通過(guò)ER膜上的水通道進(jìn)入ER腔。這就是“信號(hào)假說(shuō)”。12、信號(hào)肽:分泌蛋白的N端序列,指導(dǎo)分泌性蛋白到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上合成,在蛋白合成結(jié)束前信號(hào)肽被切除。二、填空題1、在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的蛋白質(zhì)主要包括 分泌蛋白 、 膜整合蛋白 、 細(xì)胞器駐留蛋白 等。2、蛋白質(zhì)的糖基化修飾主要分為 N-連接 和 O-連接 ;其中 N-連接 主要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上進(jìn)行,指的是蛋白質(zhì)上的 天冬酰胺殘基 與 N乙酰葡糖胺 直接連接,而 O-連接 則是蛋白質(zhì)上的 絲氨酸 與 N-乙酰半孔糖胺 直接連接。3、肌細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)異常發(fā)達(dá),被稱(chēng)為 肌質(zhì)網(wǎng) 。4、真核細(xì)胞中, 光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 是合成脂類(lèi)分子的細(xì)胞器。5、細(xì)胞質(zhì)中合成的蛋白質(zhì)如果存在 信號(hào)肽 ,將轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成。如果該蛋白質(zhì)上還存在 停止轉(zhuǎn)移 序列,則該蛋白被定位到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上。8、高爾基體三個(gè)功能區(qū)分別是 順面膜囊 、 中間膜囊 和 后面膜囊 。9、具有將蛋白進(jìn)行修飾、分選并分泌到細(xì)胞外的細(xì)胞器是 高爾基體 。10、被稱(chēng)為細(xì)胞內(nèi)大分子運(yùn)輸交通樞紐的細(xì)胞器是 高爾基體 。11、蛋白質(zhì)的糖基化修飾中,N連接的糖基化反應(yīng)一般發(fā)生在 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中 ,而O連接的糖基化反應(yīng)則發(fā)生在 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 和 高爾基體 中。12、根據(jù)溶酶體所處的完成其生理功能的不同階段,大致可將溶酶體分為 初級(jí)溶酶體 、 次級(jí)溶酶體 和 殘余小體 。13、被稱(chēng)為細(xì)胞內(nèi)的消化器官的細(xì)胞器是 溶酶體 。18、真核細(xì)胞中,酸性水解酶多存在于 溶酶體 中。19、溶酶體酶在合成中發(fā)生特異性的糖基化修飾,即都產(chǎn)生 6-磷酸甘露糖 。20、信號(hào)假說(shuō)中,要完成含信號(hào)肽的蛋白質(zhì)從細(xì)胞質(zhì)中向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的轉(zhuǎn)移需要細(xì)胞質(zhì)中的 信號(hào)識(shí)別顆粒 和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的 信號(hào)識(shí)別顆粒受體 的參與協(xié)助。24、在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上進(jìn)行的蛋白合成過(guò)程中,肽鏈邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中的方式稱(chēng)為 共轉(zhuǎn)移 。而含導(dǎo)肽的蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)中合成后再轉(zhuǎn)移到細(xì)胞器中的方式稱(chēng)為 后轉(zhuǎn)移 。三、選擇題1、屬于溶酶體病的是( A )。A、臺(tái)薩氏病 B、克山病 C、白血病 D、貧血病2、真核細(xì)胞中,酸性水解酶多存在于( D )。A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) B、高爾基體 C、中心體 D、溶酶體3、真核細(xì)胞中合成脂類(lèi)分子的場(chǎng)所主要是( A )。A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) B、高爾基體 C、核糖體 D、溶酶體4、被稱(chēng)為細(xì)胞內(nèi)大分子運(yùn)輸交通樞紐大細(xì)胞器是( B )。A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) B、高爾基體 C、中心體 D、溶酶體5、下列哪組蛋白質(zhì)的合成開(kāi)始于胞液中,在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成( C )。A、膜蛋白、核定位蛋白 B、分泌蛋白、細(xì)胞骨架C、膜蛋白、分泌蛋白 D、核定位蛋白、細(xì)胞骨架6、細(xì)胞內(nèi)鈣的儲(chǔ)備庫(kù)是( B )。A、細(xì)胞質(zhì) B、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) C、高爾基體 D、溶酶體7、質(zhì)子膜存在于( C )。A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上 B、高爾基體膜上 C、溶酶體膜上 D、過(guò)氧化物酶體膜上8、細(xì)胞核內(nèi)的蛋白質(zhì)主要通過(guò)( B )完成。A、跨膜運(yùn)輸 B、門(mén)控運(yùn)輸 C、膜泡運(yùn)輸 D、由核膜上的核糖體合成四、判斷題1、細(xì)胞中蛋白質(zhì)的合成都是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行的。( )2、溶酶體是一種異質(zhì)性細(xì)胞器。( )3、氨基化是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中最常見(jiàn)的蛋白質(zhì)修飾。( )4、O-連接的糖基化主要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行。( )5、在高爾基體的順面膜囊上存在M6P的受體,這樣溶酶體的酶與其他蛋白區(qū)分開(kāi)來(lái),并得以濃縮,最后以出芽的方式轉(zhuǎn)運(yùn)到溶酶體中。( )6、指導(dǎo)分泌性蛋白到糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的決定因素是信號(hào)識(shí)別顆粒。( )五、簡(jiǎn)答題1、信號(hào)假說(shuō)的主要內(nèi)容是什么?答:分泌蛋白在N端含有一信號(hào)序列,稱(chēng)信號(hào)肽,由它指導(dǎo)在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)開(kāi)始合成的多肽和核糖體轉(zhuǎn)移到ER膜;多肽邊合成邊通過(guò)ER膜上的水通道進(jìn)入ER腔,在蛋白合成結(jié)束前信號(hào)肽被切除。指導(dǎo)分泌性蛋白到糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的決定因素是N端的信號(hào)肽,信號(hào)識(shí)別顆粒(SRP)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的信號(hào)識(shí)別顆粒受體(又稱(chēng)停泊蛋白docking protein, DP)等因子協(xié)助完成這一過(guò)程。2、比較粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能?3、細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成部位及其去向如何?4、簡(jiǎn)述細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的功能。:物質(zhì)中間代謝的重要場(chǎng)所;有細(xì)胞骨架的功能;蛋白質(zhì)的合成、修飾、降解和折疊。5、高爾基體的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能?6、蛋白質(zhì)糖基化的基本類(lèi)型、特征及生物學(xué)意義?7、已知的膜泡運(yùn)輸有哪幾種類(lèi)型?各自主要功能如何?六、論述題1、何為蛋白質(zhì)分選?細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)分選的基本途徑、分選類(lèi)型是怎樣的?答案要點(diǎn):蛋白質(zhì)的分選:細(xì)胞中絕大多數(shù)蛋白質(zhì)均在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的核糖體上開(kāi)始合成,隨后或在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中或轉(zhuǎn)至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成,然后,通過(guò)不同途徑轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞的特定部位并裝配成結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)合體,參與細(xì)胞的生命活動(dòng)的過(guò)程。又稱(chēng)定向轉(zhuǎn)運(yùn)。細(xì)胞中蛋白質(zhì)都是在核糖體上合成的,并都是起始于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。基本途徑:一條是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中完成多肽鏈的合成,然后轉(zhuǎn)運(yùn)至膜圍繞的細(xì)胞器,如線(xiàn)粒體、葉綠體、過(guò)氧化物酶體、細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的特定部位,有些還可轉(zhuǎn)運(yùn)至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中;另一條途徑是蛋白質(zhì)合成起始后轉(zhuǎn)移至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),新生肽邊合成邊轉(zhuǎn)入糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中,隨后經(jīng)高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)至溶酶體、細(xì)胞膜或分泌到細(xì)胞外,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體本身的蛋白成分的分選也是通過(guò)這一途徑完成的。蛋白質(zhì)分選的四種基本類(lèi)型:1、蛋白質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn):主要指在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)合成的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線(xiàn)粒體、葉綠體和過(guò)氧化物酶體等細(xì)胞器。2、膜泡運(yùn)輸:蛋白質(zhì)通過(guò)不同類(lèi)型的轉(zhuǎn)運(yùn)小泡從其糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成部位轉(zhuǎn)運(yùn)至高爾基體進(jìn)而分選運(yùn)至細(xì)胞不同的部位。3、選擇性的門(mén)控轉(zhuǎn)運(yùn):指在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中合成的蛋白質(zhì)通過(guò)核孔復(fù)合體選擇性地完成核輸入或從細(xì)胞核返回細(xì)胞質(zhì)。4、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)第九章 細(xì)胞骨架一、名詞解釋1、細(xì)胞骨架:由微管、微絲和中間絲組成的蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),具有為細(xì)胞提供結(jié)構(gòu)支架、維持細(xì)胞形態(tài)、負(fù)責(zé)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和細(xì)胞器轉(zhuǎn)運(yùn)和細(xì)胞運(yùn)動(dòng)等功能。2、應(yīng)力纖維;應(yīng)力纖維是真核細(xì)胞中廣泛存在的微絲束結(jié)構(gòu),由大量平行排列的微絲組成,與細(xì)胞間或細(xì)胞與基質(zhì)表面的粘著有密切關(guān)系,可能在細(xì)胞形態(tài)發(fā)生、細(xì)胞分化和組織的形成等方面具有重要作用。3、微管;在真核細(xì)胞質(zhì)中,由微管蛋白構(gòu)成的,可形成紡錘體、中心體及細(xì)胞特化結(jié)構(gòu)鞭毛和纖毛的結(jié)構(gòu)。4、微絲;在真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中,由肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白構(gòu)成的,可在細(xì)胞形態(tài)的支持及細(xì)胞肌性收縮和非肌性運(yùn)動(dòng)等方面起重要作用的結(jié)構(gòu)。5、中間纖維;存在于真核細(xì)胞質(zhì)中的,由蛋白質(zhì)構(gòu)成的,其直徑介于微管和微絲之間,在支持細(xì)胞形態(tài)、參與物質(zhì)運(yùn)輸?shù)确矫嫫鹬匾饔玫睦w維狀結(jié)構(gòu)。6、微管組織中心(MTOC);存在于真核細(xì)胞質(zhì)中的,由蛋白質(zhì)構(gòu)成的,其直徑介于微管和微絲之間,在支持細(xì)胞形態(tài)、參與物質(zhì)運(yùn)輸?shù)确矫嫫鹬匾饔玫睦w維狀結(jié)構(gòu)。7、肌球蛋白;依賴(lài)于維絲的分子馬達(dá)。8、分子馬達(dá);主要是指依賴(lài)于圍觀的驅(qū)動(dòng)蛋白、動(dòng)力蛋白和依賴(lài)于維斯的肌球蛋白。二、填空題1、細(xì)胞質(zhì)骨架是一種復(fù)雜的蛋白質(zhì)纖維網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu),能使真核細(xì)胞適應(yīng)多種形狀和協(xié)調(diào)的運(yùn)動(dòng)。2、肌動(dòng)蛋白絲具有兩個(gè)結(jié)構(gòu)上明顯不同的末端,即正極極和負(fù)極。3、在動(dòng)物細(xì)胞分裂過(guò)程中,兩個(gè)子細(xì)
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