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1、第1頁/共26頁Solid Phase Extraction SPE And Solid phase Micro-Extraction SPME 準(zhǔn)系列中,有很多項(xiàng)目,尤其是農(nóng)藥項(xiàng)目的前處理普遍使用了固相萃取技術(shù)經(jīng)典的真空固相萃取裝置 第2頁/共26頁SPESPE的分類及一般操作程序的分類及一般操作程序第3頁/共26頁課后思考題課后思考題第4頁/共26頁SPE的操作第5頁/共26頁SPE的操作第6頁/共26頁試樣20g加入內(nèi)標(biāo),劇烈搖均后放置10min萃取丙酮15ml液-液萃取:電磁攪拌2min+15min;靜置分層(時(shí)間視情況而定)水300ml NaCl3g 正己烷3.5ml小心吸取獲得有機(jī)
2、相40攝氏度,氮?dú)獯蹈梢宜嵋阴ト芙釭C/MS微量液-液萃取操作步驟第7頁/共26頁SPMESPME的發(fā)展歷史的發(fā)展歷史第8頁/共26頁SPMESPME裝置裝置 裝置外型如一只微量進(jìn)樣器,由手柄(holderholder)和萃取頭或纖維頭(fiberfiber)兩部分構(gòu)成,萃取頭是一根1 1長,涂有吸附劑(萃取相)的熔融纖維,接在不銹鋼絲上,外套細(xì)不銹鋼管(保護(hù)纖維不被折斷),纖維頭在鋼管內(nèi)可伸縮或進(jìn)出,細(xì)不銹鋼管可穿透橡膠或塑料墊片進(jìn)行取樣或進(jìn)樣。手柄用于安裝或固定萃取頭,可永遠(yuǎn)使用第9頁/共26頁SPEMSPEM原理原理Fiber SPME第10頁/共26頁Fiber-SPME-HPLC第1
3、1頁/共26頁課后思考題課后思考題 SPE、SPME與液-液萃取相比,有何優(yōu)點(diǎn)? 在應(yīng)用上,有何局限第12頁/共26頁優(yōu)缺點(diǎn)第13頁/共26頁第14頁/共26頁第15頁/共26頁第16頁/共26頁第17頁/共26頁第18頁/共26頁圖示圖示【大腸菌群大腸菌群】123456平面凹面第19頁/共26頁大腸菌群測(cè)試片是一種預(yù)先制備好的培養(yǎng)基系統(tǒng),含有VRB 培養(yǎng)基,冷水可溶性凝膠和TTC指示劑,可增強(qiáng)菌落計(jì)數(shù)效果。表面覆蓋的膠膜,可截留發(fā)酵乳糖的大腸菌群產(chǎn)生的氣體。培養(yǎng)結(jié)束后計(jì)數(shù)紅點(diǎn)周圍有氣泡的菌落為大腸菌群數(shù)。培養(yǎng)24h 2h后應(yīng)立即計(jì)數(shù),可目測(cè)、用標(biāo)準(zhǔn)菌落計(jì)數(shù)器、顯微鏡、或自動(dòng)判讀儀來計(jì)數(shù)。紅色
4、有氣泡的菌落確認(rèn)為大腸菌群數(shù)。培養(yǎng)圓形面積邊緣上及邊緣以外的菌落不作計(jì)數(shù)。當(dāng)培養(yǎng)區(qū)域出現(xiàn)大量氣泡,大量不明顯小菌落或培養(yǎng)區(qū)呈暗紅色三種情況,表明大腸菌群的濃度較高,需要進(jìn)一步稀釋樣品來獲得準(zhǔn)確的讀數(shù)。第20頁/共26頁 3MTM快速涂抹棒(Quick Swab)干式取樣干式取樣 當(dāng)待測(cè)表面潮濕時(shí)當(dāng)待測(cè)表面潮濕時(shí)1. 標(biāo)記每個(gè)涂抹棒2. 擰扭管子使球莖末端和涂抹棒管相連處分開3. 30度角緩慢并全面涂抹待測(cè)表面,每涂抹一次注意翻轉(zhuǎn)涂抹棒頭的方向4. 取樣后, 完整地把涂抹棒放回管中5. 用大拇指掰斷球莖中的紅色閥門, 聽到啪的一聲, 閥門打開, Leetheen 肉湯流入管中和浸濕涂抹棒6. 用
5、力擠壓球莖末端, 使Leetheen 肉湯流入管中7. 在實(shí)驗(yàn)室里, 充分振蕩涂抹棒至少10分鐘, 使菌與涂抹棒分離8. 在管壁上擠擰出涂抹棒頭上的內(nèi)容物, 按通常工業(yè)用標(biāo)準(zhǔn)方法處置棄去涂抹棒9. 小心地傾注管中的全部內(nèi)容物到3M PetrifilmTM測(cè)試片上10. 按包裝內(nèi)說明培養(yǎng)測(cè)試片第21頁/共26頁 3MTM快速涂抹棒(Quick Swab)濕式取樣濕式取樣 當(dāng)待測(cè)表面干燥時(shí)當(dāng)待測(cè)表面干燥時(shí)1. 標(biāo)記每個(gè)涂抹棒4. 擰扭管子使球莖末端和涂抹棒管相連處分開5. 30度角緩慢并全面涂抹待測(cè)表面,每涂抹一次注意翻轉(zhuǎn)涂抹棒頭的方向6. 取樣后, 完整地把涂抹棒放回管中2. 用大拇指掰斷球莖中
6、的紅色閥門, 聽到啪的一聲, 閥門打開, Leetheen 肉湯流入管中和浸濕涂抹棒3. 用力擠壓球莖末端, 使Leetheen 肉湯流入管中7. 在實(shí)驗(yàn)室里, 充分振蕩涂抹棒至少10分鐘, 使菌與涂抹棒分離8. 在管壁上擠擰出涂抹棒頭上的內(nèi)容物, 按通常工業(yè)用標(biāo)準(zhǔn)方法處置棄去涂抹棒9. 小心地傾注管中的全部內(nèi)容物到3M PetrifilmTM測(cè)試片上10. 按包裝內(nèi)說明培養(yǎng)測(cè)試片第22頁/共26頁 Hygicult 瓊脂載片是一塊兩面覆有為特定細(xì)菌生長的瓊脂培養(yǎng)基的塑料載片并根據(jù)歐盟(EU)相關(guān)法規(guī)而設(shè)計(jì),用來檢測(cè)各類表面、原材料、食品原料中的微生物(菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌和酵母菌)存在狀況(其使用不會(huì)影響被采樣本的質(zhì)量)。該培養(yǎng)基上另含有吐溫和卵磷脂以中和殘留的消毒劑對(duì)微生物生長的影響。 Hygicult瓊脂載片檢測(cè)微生物介紹TPC:菌落總數(shù) CF:大腸菌群 E:大腸桿菌 Y&F:霉菌和酵母第23頁/共26頁 操作步驟接種培養(yǎng)判讀第一步第二步第三步第
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