第二章核酸復(fù)習(xí)提要

1、第三章 核酸的結(jié)構(gòu)和功能核酸（nucleic acid）是重要的生物大分子，它的構(gòu)件分子是核苷酸（nucleotide），天然DNA貯存細(xì)胞所有的遺傳信息，是物種保持進(jìn)化和世代繁衍的物質(zhì)基礎(chǔ)。RNA中參與蛋白質(zhì)合成的有三類(lèi)：轉(zhuǎn)移RNA（transfer RNA，tRNA），核糖體RNA（ribosomal RNA，rRNA）和信使RNA（messenger RNA，mRNA）。20世紀(jì)末，發(fā)現(xiàn)許多新的具有特殊功能的RNA，幾乎涉及細(xì)胞功能的各個(gè)方面。第一節(jié) 核苷酸 核苷酸可分為核糖核苷酸和脫氧核糖核苷酸兩類(lèi)，核糖核苷酸是RNA的構(gòu)件分子，而脫氧核糖核苷酸是DNA構(gòu)件分子。細(xì)胞內(nèi)還有各種游離的核

2、苷酸和核苷酸衍生物，它們具有重要的生理功能。核苷酸由核苷（nucleoside）和磷酸組成。而核苷則由堿基（base）和戊糖構(gòu)成。一、 堿基構(gòu)成核苷酸中的堿基是含氮雜環(huán)化合物，有嘧啶（pyrimidine）和嘌呤（purine）兩類(lèi)。核酸中嘌呤堿主要是腺嘌呤和鳥(niǎo)嘌呤，嘧啶堿主要是胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶。DNA和RNA中均含有腺嘌呤、鳥(niǎo)嘌呤和胞嘧啶，而尿嘧啶主要存在于RNA中，胸腺嘧啶主要存tRNA分子中也有胸腺嘧啶，少數(shù)幾種噬菌體的DNA含尿嘧啶而不是胸腺嘧啶。這五種堿基受介質(zhì)pH的影響出現(xiàn)酮式、烯醇式互變異構(gòu)體。在DNA和RNA中，尤其是tRNA中還有一些含量甚少的堿基，稱為稀有堿基（ra

3、re bases）稀有堿基種類(lèi)很多，大多數(shù)是甲基化堿基。tRNA中含稀有堿基高達(dá)10%。二、 戊糖核酸中有兩種戊糖（圖3-5）。在核苷酸中，為了與堿基中的碳原子編號(hào)相區(qū)別核糖或脫氧核糖中碳原子標(biāo)以C-1，C-2等。脫氧核糖與核糖兩者的差別只在于脫氧核糖中與2位碳原子連結(jié)的不是羥基而是氫，這一差別使DNA在化學(xué)上比RNA穩(wěn)定得多。三、 核苷的N-1或者與嘌吟堿的N9相連接，戊糖與堿基間的連接鍵是N-C鍵，一般稱為N-糖苷鍵（圖3-6）。RNA中含有稀有堿基，并且還存在異構(gòu)化的核苷。如在tRNA和rRNA中含有少量假尿嘧啶核苷（用表示），在它的結(jié)構(gòu)中戊糖的C-1不是與尿嘧啶的N-1相連接，而是與尿

4、嘧啶C-5相連接（圖3-7）。四、核苷酸核苷中的戊糖5碳原子上羥基被磷酸酯化形成核苷酸。核苷酸分為核糖核苷酸與脫氧核糖核苷酸兩大類(lèi)。依磷酸基團(tuán)的多少，有一磷酸核苷、二磷酸核苷、三磷酸核苷。（圖3-8）核苷酸在體內(nèi)除構(gòu)成核酸外，尚有一些游離核苷酸參與物質(zhì)代謝、能量代謝與代謝調(diào)節(jié)，如三磷酸腺苷（ATP）是體內(nèi)重要能量載體；三磷酸尿苷參與糖原的合成；三磷酸胞苷參與磷脂的合成；環(huán)腺苷酸（cAMP）和環(huán)鳥(niǎo)苷酸（cGMP）作為第二信使，在信號(hào)傳遞過(guò)程中起重要作用；核苷酸還參與某些生物活性物質(zhì)的組成：如尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+），+尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）和黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）

5、。第二節(jié) 核酸的分子結(jié)構(gòu)一、 核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu) DNA的脫氧核糖核苷酸主要是dAMP、dGMP、dCMP和dTMP，組成RNA的核糖核苷酸主要是AMP、GMP、CMP和UMP。核酸中的核苷酸以3，5磷酸二酯鍵構(gòu)成無(wú)分支結(jié)構(gòu)的線性分子。核酸鏈具有方向性，有兩個(gè)末端分別是5末端與3末端。5末端含磷酸基團(tuán)，3末端含羥基。核酸鏈內(nèi)的前一個(gè)核苷酸的3羥基和下一個(gè)核苷酸的5磷酸形成3,5磷酸二酯鍵，故核酸中的核苷酸被稱為核苷酸殘基。核酸鏈的結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖3-10。通常將小于50個(gè)核苷酸殘基組成的核酸稱為寡核苷酸（oligonucleotide），大于50個(gè)核苷酸殘基稱為多核苷酸（polynucleotide）。二

6、、 DNA的空間結(jié)構(gòu)(一)DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)double helix structure）。20世紀(jì)50年代初Chargaff等人分析多種生物DNA的堿基組成發(fā)現(xiàn)的規(guī)則。DNA雙螺旋模型的提出不僅揭示了遺傳信息穩(wěn)定傳遞中DNA半保留復(fù)制的機(jī)制，而且是分子生物學(xué)發(fā)展的里程碑。相連而成的親水骨架在螺旋分子的外側(cè)，而疏水的堿基對(duì)則在螺旋分子內(nèi)部，堿基平面與螺旋軸垂直，螺旋旋轉(zhuǎn)一周正好為10個(gè)堿基對(duì)，螺距為3.4nm，這樣相鄰堿基平面間隔為0.34nm并有一個(gè)36的夾角。DNADNA鏈依靠彼此堿基之間形成的氫鍵而結(jié)合在一起。根據(jù)堿基結(jié)構(gòu)特征，只能形成嘌呤與嘧啶配對(duì)，即相配對(duì)，形成2個(gè)氫鍵；G與C相配對(duì)，

7、形成3個(gè)氫鍵。因此G與C之間的連接較為穩(wěn)定（圖3-12）。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定。維持這種穩(wěn)定性主要靠堿基對(duì)之間的氫鍵以及堿基的堆集力（stacking force）。生理?xiàng)l件下，DNA雙螺旋大多以B型形式存在。右手雙螺旋DNA除B型外還有A型、C型、D型、E型。此外還發(fā)現(xiàn)左手雙螺旋Z型DNA。Z型DNA是1979年Rich等在研究人工合成的CGCGCG的晶體結(jié)構(gòu)時(shí)發(fā)現(xiàn)的。Z-DNA的特點(diǎn)是兩條反向平行的多核苷酸互補(bǔ)鏈組成的螺旋呈鋸齒形，其表面只有一條深溝，每旋轉(zhuǎn)一周是12個(gè)堿基對(duì)。研究表明在生物體內(nèi)的DNA分子中確實(shí)存在Z-DNA區(qū)域，其功能可能與基因表達(dá)的調(diào)控有關(guān)（圖3-13）。DNA二

8、級(jí)結(jié)構(gòu)還存在三股螺旋DNA，三股螺旋DNA中通常是一條同型寡核苷酸與寡嘧啶核苷酸-寡嘌呤核苷酸雙螺旋的大溝結(jié)合，三股螺旋中的第三股可以來(lái)自分子間，也可以來(lái)自分子內(nèi)（圖3-14）。三股螺旋DNA存在于基因調(diào)控區(qū)和其他重要區(qū)域，因此具有重要生理意義。（二） DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)超螺旋結(jié)構(gòu)DNA是以雙鏈環(huán)狀DNA形式存在，如有些病毒DNA，某些噬菌體DNA，細(xì)菌染色體與細(xì)菌中質(zhì)粒DNA，真核細(xì)胞中的線粒體DNA、葉綠體DNA都是環(huán)狀的。環(huán)狀DNA分子可以是共價(jià)閉合環(huán)，即環(huán)上沒(méi)有缺口，也可以是缺口環(huán)，環(huán)上有一個(gè)或多個(gè)缺口。在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，共價(jià)閉合環(huán)DNA（covalently close circ

9、ular DNA）可以進(jìn)一步扭曲形成超螺旋形（super helical form）（圖3-15 ）結(jié)構(gòu)更緊密，雙螺旋圈數(shù)增加，而負(fù)超螺旋可以減少雙螺旋的圈數(shù)。幾乎所有天然DNA中都存在負(fù)超螺旋結(jié)構(gòu)。（三） DNA與蛋白質(zhì)形成復(fù)合物在真核生物中其基因組DNA要比原核生物大得多，如原核生物大腸桿菌的DNA約為4.7×103kb，而人的基因組DNA約為3×106 kb結(jié)合，經(jīng)過(guò)多層次反復(fù)折疊，壓縮近10 000倍后，以染色體形式存在于平均直徑為5m的細(xì)胞核中。線性雙螺旋DNA折疊的第一層次是形成核小體（nucleosome）。猶如一串念珠, 核小體由直徑為11nm×5

10、.5nm的組蛋白核心和盤(pán)繞在核心上的DNA構(gòu)成。核心由組蛋白H2A、H2B、H3和H4各2分子組成，為八聚體，146 bp長(zhǎng)的 DNA以左手螺旋盤(pán)繞在組蛋白的核心1.75圈，形成核小體的核心顆粒，各核心顆粒間有一個(gè)連接區(qū)，約有60 bp雙螺旋DNA和1個(gè)分子組蛋白H1構(gòu)成。平均每個(gè)核小體重復(fù)單位約占DNA 200 bp（圖3-16）。DNA組裝成核小體其長(zhǎng)度約縮短7倍。在此基礎(chǔ)上核小體又進(jìn)一步盤(pán)繞折疊，最后形成染色體（圖3-17）。三、基因與基因組（一） 基因（gene）是指能編碼有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或合成RNA所必需的全部核酸序列，是核酸分子的功能單位。一個(gè)基因通常包括編碼蛋白質(zhì)多肽鏈或RN

11、A的編碼序列，保證轉(zhuǎn)錄和加工所必需的調(diào)控序列和5端、3端非編碼序列。另外在真核生物基因中還有內(nèi)含子等核酸序列（圖3-18）。（二）基因組（genome）是指一個(gè)細(xì)胞或病毒所有基因及間隔序列，儲(chǔ)存了一個(gè)物種所有的遺傳信息。在病毒中通常是一個(gè)核酸分子的堿基序列，單細(xì)胞原核生物是它僅有的一條染色體的堿基序列，而多細(xì)胞真核生物是一個(gè)單倍體細(xì)胞內(nèi)所有的染色體。如人單倍體細(xì)胞的23條染色體的堿基序列。多細(xì)胞真核生物起源于同一個(gè)受精卵，其每個(gè)體細(xì)胞的基因組都是相同的。在高等真核生物中基因序列占整個(gè)基因組不到10%，大部分是非編碼的間隔序列。人類(lèi)基因組研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)在人的基因組中與蛋白質(zhì)合成有關(guān)的基因只占整個(gè)基

12、因組2 %。真核生物基因組的最大的特點(diǎn)是出現(xiàn)分隔開(kāi)的基因，在這類(lèi)基因中有編碼作用的序列稱外顯子（exon），沒(méi)有編碼作用的序列稱內(nèi)含子（intron），它們彼此間隔排列（見(jiàn)圖3-18）。四、各類(lèi)RNA的結(jié)構(gòu)絕大部分RNA分子都是線狀單鏈，但是RNA分子的某些區(qū)域可自身回折進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，形成局部雙螺旋。在RNA局部雙螺旋中A與U配對(duì)、G與C配對(duì)，除此以外，還存在非標(biāo)準(zhǔn)配對(duì)，如G與U配對(duì)。RNA分子中的雙螺旋與A型DNA雙螺旋相似，而非互補(bǔ)區(qū)則膨脹形成凸出（bulge）或者環(huán)（loop），這種短的雙螺旋區(qū)域和環(huán)稱為發(fā)夾結(jié)構(gòu)（hairpin）（圖3-19）。發(fā)夾結(jié)構(gòu)是RNA中最普通的二級(jí)結(jié)構(gòu)形式

13、，二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)一步折疊形成三級(jí)結(jié)構(gòu)，RNA只有在具有三級(jí)結(jié)構(gòu)時(shí)才能成為有活性的分子。RNA也能與蛋白質(zhì)形成核蛋白復(fù)合物，RNA的四級(jí)結(jié)構(gòu)是RNA與蛋白質(zhì)的相互作用。tRNA的結(jié)構(gòu)tRNA約占總RNA的15%，tRNA主要的生理功能是在蛋白質(zhì)生物合成中轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸和識(shí)別密碼子，細(xì)胞內(nèi)每種氨基酸都有其相應(yīng)的一種或幾種tRNA， 因此tRNA的種類(lèi)很多，在細(xì)菌中約有3040種tRNA，在動(dòng)物和植物中約有50100種tRNA。1. tRNA一級(jí)結(jié)構(gòu)：tRNA是單鏈分子，含7393核苷酸，分子質(zhì)量為24 00031 000，沉降系數(shù)4S。含有DHU）、核糖胸腺嘧啶（rT）和假尿苷（）以及不少堿基被甲基化,

14、其分子中大約30%的堿基是不變的或半不變的，也就是說(shuō)它們的堿基類(lèi)型是保守的。2. tRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)：形成環(huán)。三葉草型結(jié)構(gòu)由4臂4環(huán)組成。氨基酸臂由7對(duì)堿基組成，雙螺旋區(qū)的3末端為一個(gè)4個(gè)堿基的單鏈區(qū)-NCCA-OH 3，腺苷酸殘基的羥基可與氨基酸羧基結(jié)合而攜帶氨2個(gè)稀有堿基二氫尿嘧啶（DHU）而得名，不同tRNA其大小并不恒定，在8-14個(gè)堿基之間變動(dòng)，二氫尿嘧啶臂一般由34對(duì)堿基組成。反密碼環(huán)由7個(gè)堿基組成，大小相對(duì)恒定，其中3個(gè)核苷酸組成反密碼子（anticodon），在蛋白質(zhì)生物合成時(shí)，可與mRNA上相應(yīng)的密碼子配對(duì)。反密碼臂由5對(duì)堿基組成。額外環(huán)在不同tRNA分子中變化較大可在421個(gè)

15、堿基之間變動(dòng)，又稱為可變環(huán)，其大小往往是tRNA分類(lèi)的重7個(gè)堿基，大小相對(duì)恒定，幾乎所有的tRNA在此環(huán)中都含TC序列，5對(duì)堿基組成。tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)：二十世紀(jì)七十年代初科學(xué)家用X線射衍技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)為倒L形（圖3-20b）。tRNA三級(jí)結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)是氨基酸臂與TC臂構(gòu)成L的一橫，-CCAOH3末端就在這一橫的端點(diǎn)上，是結(jié)合氨基酸的部位，而二氫尿嘧啶臂與反密碼臂及反密碼環(huán)共同構(gòu)成L的一豎，反密碼環(huán)在一豎的端點(diǎn)上，能與mRNA上對(duì)應(yīng)的密碼子識(shí)別，二氫尿嘧啶環(huán)與TC環(huán)在L的拐角上。形成三級(jí)結(jié)構(gòu)的很多氫鍵與tRNA中不變的核苷酸密切有關(guān)，這就使得各種tRNA三級(jí)結(jié)構(gòu)都呈倒L形的。在t

16、RNA中堿基堆積力是穩(wěn)定tRNA構(gòu)型的主要因素。活化、搬運(yùn)氨基酸到核糖體，參與蛋白質(zhì)的翻譯（二）mRNA原核生物中mRNA轉(zhuǎn)錄后一般不需加工，直接進(jìn)行蛋白質(zhì)翻譯。mRNA轉(zhuǎn)錄和翻譯不僅發(fā)生在同一細(xì)胞空間，而且這兩個(gè)過(guò)程幾乎是同時(shí)進(jìn)行的。真核細(xì)胞成熟mRNA是由其前體核內(nèi)不均一RNA（heterogeneous nuclear RNA，hnRNA）剪接并經(jīng)修飾后才能進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中參與蛋白質(zhì)合成。所以真核細(xì)胞mRNA的合成和表達(dá)發(fā)生在不同的空間和時(shí)間。mRNA的結(jié)構(gòu)在原核生物中和真核生物中差別很大。下面分別作一介紹：1. 原核生物mRNA結(jié)構(gòu)特點(diǎn)原核生物的mRNA結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，往往含有幾個(gè)功能上相關(guān)的蛋

17、白質(zhì)的編碼序列，可翻譯出幾種蛋白質(zhì)，為多順?lè)醋?。在原核生物mRNA中編碼序列之間有間隔序列，可能與核糖體的識(shí)別和結(jié)合有關(guān)。在5端與3端有與翻譯起始和終止有關(guān)的非編碼序列（圖3-21），原核生物mRNA中沒(méi)有修飾堿基， 5端沒(méi)有帽子結(jié)構(gòu)，3端沒(méi)有多聚腺苷酸的尾巴（polyadenylate tail，polyA尾巴）。原核生物的mRNA的半衰期比真核生物的要短得多，現(xiàn)在一般認(rèn)為，轉(zhuǎn)錄后1min，mRNA降解就開(kāi)始。2. 真核生物mRNA結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1. 大多數(shù)真核mRNA的7-甲基鳥(niǎo)苷，同時(shí)第一個(gè)核苷酸的C´2m7GpppNm-。帽子結(jié)構(gòu)可保護(hù)mRNA不被核酸外切酶水解，并且能與帽結(jié)合蛋白

18、結(jié)合識(shí)別核糖體并與之結(jié)合，與翻譯起始有關(guān)。2. 大多數(shù)真核mRNA的能可能與mRNA的穩(wěn)定性有關(guān)把DNA所攜帶的遺傳信息，按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，抄錄并傳送至核糖體，用以決定其合成蛋白質(zhì)的氨基酸排列順序。真核生物mRNA為單順?lè)醋咏Y(jié)構(gòu)，即一個(gè)mRNA分子只包含一條多肽鏈的信息。，少數(shù)成熟mRNA沒(méi)有polyA尾巴，如組蛋白mRNA，它們的半衰期通常較短。（三）rRNA的結(jié)構(gòu)rRNA占細(xì)胞總RNA的80%左右，3-22），如大腸桿菌的這三種rRNA分別由120、1542和2904個(gè)核苷酸組成。真核生物則有4種，即5S、5.8S、121、158、1874和4718骨架與多種核糖體蛋白（ribosoma

19、l protein）裝配成核糖體。 所有生物體的核糖體都由大小不同的兩個(gè)亞基所組成。原核生物核糖體為70S，由50S和30S兩個(gè)大小亞基組成。30S小亞基含16S的rRNA和21種蛋白質(zhì)，50S大亞基含23S和5S兩種rRNA及34種蛋白質(zhì)。真核生物核糖體為80S，是由60S和40S兩個(gè)大小亞基組成。40S的小亞基含18S rRNA及33種蛋白質(zhì)，60S大亞基則由28S、5.8S和5S 種rRNA及49種蛋白質(zhì)組成。參與組成核蛋白體，作為蛋白質(zhì)生物合成的場(chǎng)所。（四）其他RNA分子20世紀(jì)80年代以后由于新技術(shù)不斷產(chǎn)生，人們發(fā)現(xiàn)RNA有許多新的功能和新的RNA基因。細(xì)胞核內(nèi)小分子RNA（smal

20、l nuclear RNA，snRNA）是細(xì)胞核內(nèi)核蛋白顆粒（Small nuclear ribonucleoprotein particles，snRNPs）的組成成分，參與mRNA前體的剪接以及成熟的mRNA由核內(nèi)向胞漿中轉(zhuǎn)運(yùn)的過(guò)程。核仁小分子RNA（small nucleolar RNA，snoRNA）是類(lèi)新的核酸調(diào)控分子, 參與rRNA前體的加工以及核糖體亞基的裝配。胞質(zhì)小分子RNA（small cytosol RNA， scRNA）的種類(lèi)很多，其中7S LRNA與蛋白質(zhì)一起組成信號(hào)識(shí)別顆粒（signal recognition particle，SRP）, SRP參與分泌性蛋白質(zhì)的合

21、成，反義RNA（antisense RNA）由于它們可以與特異的mRNA序列互補(bǔ)配對(duì)，阻斷mRNA翻譯，能調(diào)節(jié)基因表達(dá)。核酶是具有催化活性的RNA分子或RNA片段。目前在醫(yī)學(xué)研究中已設(shè)計(jì)了針對(duì)病毒的致病基因mRNA的核酶，抑制其蛋白質(zhì)的生物合成，為基因治療開(kāi)辟新的途徑，核酶的發(fā)現(xiàn)也推動(dòng)了生物起源的研究。微RNA（microRNA，miRNA）是一種具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的非編碼RNA，長(zhǎng)度一般為20-24個(gè)核苷酸，在mRNA翻譯過(guò)程中起到開(kāi)關(guān)作用，它可以與靶mRNA結(jié)合，產(chǎn)生轉(zhuǎn)錄后基因沉默作用（post-transcriptional gene silencing，PTGS），在一定條件下能釋放，這樣m

22、RNA又能翻譯蛋白質(zhì)，由于miRNA的表達(dá)具有階段特異性和組織特異性，它們?cè)诨虮磉_(dá)調(diào)控和控制個(gè)體發(fā)育中起重要作用。五RNA組隨著基因組研究不斷深入，蛋白組學(xué)研究逐漸展開(kāi)，RNA的研究也取得了突破性的進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)了許多新的RNA分子，人們逐漸認(rèn)識(shí)到DNA是攜帶遺傳信息分子，蛋白質(zhì)是執(zhí)行生物學(xué)功能分子，而RNA即是信息分子，又是功能分子。人類(lèi)基因組研究結(jié)果表明，在人類(lèi)基因組中約有3000040000個(gè)基因，其中與蛋白質(zhì)生物合成有關(guān)的基因只占整個(gè)基因組的2%，對(duì)不編碼蛋白質(zhì)的98%基因組的功能有待進(jìn)一步研究，為此20世紀(jì)末科學(xué)家在提出蛋白質(zhì)組學(xué)后，又提出RNA組學(xué)。RNA組是研究細(xì)胞的全部RNA基因

23、和RNA的分子結(jié)構(gòu)與功能。目前RNA組的研究尚處在初級(jí)階段，RNA組的研究將在探索生命奧秘中做出巨大貢獻(xiàn)。第三節(jié) 核酸的理化性質(zhì)一、核酸的大小和測(cè)定一般來(lái)說(shuō)，進(jìn)化程度高的生物DNA分子應(yīng)越大，能貯存更多遺傳信息。但進(jìn)化的復(fù)雜程度與DNA大小并不完全一致，如哺乳類(lèi)動(dòng)物DNA約為3×109 bp，但有些兩棲類(lèi)動(dòng)物、南美肺魚(yú)DNA大小可達(dá)1010bp到1011bp（表3-3）。常用測(cè)定DNA分子大小的方法有電泳法、離心法。凝膠電泳是當(dāng)前研究核酸的最常用方法，凝膠電泳有瓊脂糖（agarose）凝膠電泳和聚丙烯酰胺（polyacrylamide）凝膠電泳， 核酸的紫外吸收：1. DNA或RNA

24、的定量OD260=1.0相當(dāng)于50g/ml雙鏈DNA40g/ml單鏈DNA（或RNA）20g/ml寡核苷酸2.判斷核酸樣品的純度DNA純品: OD260/OD280 = 1.8RNA純品: OD260/OD280 = 2.0二、核酸的水解DNA和RNA中的糖苷鍵與磷酸酯鍵都能用化學(xué)法和酶法水解。在很低pH條件下DNA和RNA都會(huì)發(fā)生磷酸二酯鍵水解。并且堿基和核糖之間的糖苷鍵更易被水解，其中嘌呤堿的糖苷鍵比嘧啶堿的糖苷鍵對(duì)酸更不穩(wěn)定。在高pH時(shí)，RNA的磷酸酯鍵易被水解，而DNA的磷酸酯鍵不易被水解。核酸內(nèi)切酶的作用是在多核苷酸內(nèi)部的3，5磷酸二酯鍵，有些內(nèi)切酶能識(shí)別DNA雙鏈上特異序列并水解有關(guān)的3，5磷酸二酯鍵。核酸內(nèi)切酶是非常重要的工具酶，在基因工程中有廣泛用途。而核酸外切酶只對(duì)核酸末端的3，5磷酸二酯鍵有作用，將核苷酸一個(gè)