炎癥反應(yīng)的交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解

1、炎癥反應(yīng)產(chǎn)生交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解Nobuhiko Yui. Tenio Okano and Yasuhisa Sakurai 本女子醫(yī)學(xué)院生物 1：程研究所摘要 制備可降解的二縮水甘油基酸(glycidyether)交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠，研究體內(nèi)炎癥和離 體羥基自由基降解交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠。離體是由HAh and FeSO反應(yīng)產(chǎn)生羥基誘導(dǎo)迅速 但有限制的交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解。降解樣式符合假定適合于凝膠表而降解的理論方程。 由于阻止透明質(zhì)酸酶進(jìn)入交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠內(nèi)部，離體交聯(lián)透明質(zhì)酸酶的降解作用很小。 交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉基質(zhì)中摻入微球藥物。在交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉基質(zhì)降解過程中藥物被釋放。在體 移植實(shí)驗(yàn)

2、揭示了炎癥應(yīng)答過程交中聯(lián)透明質(zhì)酸鈉基質(zhì)的降解。因此交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠可以 可以作為能降解的移植藥物載體。前言藥物經(jīng)由多聚體基質(zhì)的降解、釋放、分散和溶解，多聚體基質(zhì)表而降解已經(jīng)得到廣泛研究。 過去，酯鍵的水解經(jīng)常作為多聚體基質(zhì)降解的機(jī)制。具有疏水鍵聚酯像多聚乙醇酸、多聚乳 酸得到深入研究。經(jīng)由表面侵蝕藥物傳輸?shù)纳锝到舛嗑垠w優(yōu)于經(jīng)由體積降解藥物的降解基 質(zhì)?；旧?，這些多聚體的降解貫穿整個(gè)多聚體，可導(dǎo)致即突發(fā)的作用和摻入藥物無(wú)活性。 因此，藥物的擴(kuò)散發(fā)生在多聚體基質(zhì)降解之前是有意義的。由此，生物降解的藥物釋放時(shí)必 須被預(yù)言。因此，表面降解多聚體發(fā)展給與更多關(guān)注。最近，為了獲得藥物傳輸體系研究了幾

3、種多聚體。這些體系的可以使用磁的、電的、超聲的、 溫度、PH值多聚體。這些多聚體可以與酶底物反應(yīng)以及藥物PH敏感的溶解能力相結(jié)合。使 用了作為藥物緩釋作用的多聚物侵蝕率的比率的多聚體，例如1,1,1-三乙氧基乙烷 poly(orthiesters),多聚乙縮醛(polyacetals) and 聚酸酎(polyanhydrides) 這些多聚體的 表面侵蝕率(降解)通過疏水多聚體不穩(wěn)定的鏈的水化發(fā)生的。由摻入敏感PH的不穩(wěn)定的 鍵完成刺激反應(yīng)多聚體的侵蝕。酶底物反應(yīng)產(chǎn)生局部PH變化用來改變多聚體的侵蝕率。不 管怎么說，經(jīng)由PH敏感多聚體的侵蝕率調(diào)節(jié)藥物的釋放率是相當(dāng)困難。為了實(shí)現(xiàn)自動(dòng)反饋 藥物

4、傳輸系統(tǒng)“生物降解多聚體”，這個(gè)多聚體將被設(shè)計(jì)成有特殊的內(nèi)部信號(hào)，保證適合藥 物傳輸?shù)淖銐蜷L(zhǎng)的周期降解。透明質(zhì)酸鈉是由氨基葡萄糖和葡萄糖醛酸二糖單位重復(fù)構(gòu)成的線性粘多糖。當(dāng)溶解在水溶液 中時(shí)透明質(zhì)酸通常為高粘度液體，可以被修飾成生理性關(guān)節(jié)滑液、玻璃體和身體其他液體。 眾所周知HA在機(jī)體有多種重要生理功能，包括控制細(xì)胞滲透樂、細(xì)胞分化、炎癥過程的羥 基的清除，血管生成。最近，通過微生物發(fā)酵實(shí)現(xiàn)了大量HA商業(yè)化。HA已經(jīng)在眼外科、關(guān) 節(jié)外科作為治療因子得到使用。在活體HA的降解主要通過兩個(gè)途徑實(shí)現(xiàn)。一是經(jīng)由透明質(zhì)酸酶途徑，二是作為活性氧來源 的羥基途徑。在正常身體狀態(tài)下皮膚和皮下組織中酶的活性很低

5、，皮下注射透明質(zhì)酸酶降解 生理鹽水透明質(zhì)酸鈉凝膠要好幾天時(shí)間。然而，倘若透明質(zhì)酸鈉凝膠注射在一個(gè)部位，在這 個(gè)部位就有炎癥發(fā)生，羥基降解透明質(zhì)酸鈉凝膠速率比酶迅速和明顯。在炎癥的初始階段增 加了毛細(xì)血管的滲透性可以使細(xì)胞因子和吞噬細(xì)胞在炎癥部位聚集。吞噬細(xì)胞可以被免疫復(fù) 合體和炎癥復(fù)合體激活產(chǎn)生殺菌因子羥基(0H)。不管怎樣，宿主的保護(hù)性反應(yīng)產(chǎn)生過多 羥基可導(dǎo)致結(jié)締組織損傷。羥基涉及到了器官和組織損傷和包括透明質(zhì)酸鈉大分子降解。透 明質(zhì)酸在炎癥的急性期的降解機(jī)制是羥基(0H)在關(guān)W炎的滑液中得到了證據(jù)?；旱恼?性下降和HA溶解發(fā)生在離體產(chǎn)生酶觸超氧發(fā)生之后，這已經(jīng)使用單管粘度計(jì)證實(shí)了。從那

6、時(shí)起，許多作者在離體和在體實(shí)驗(yàn)中羥基解聚了大分子。刺激生物降解敏感的藥物傳輸體系的發(fā)展中，應(yīng)用了羥基降解HA。例如：具有關(guān)行病的患 者治療注射了母體激素和HA液體。從這一點(diǎn)來看，交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠正面對(duì)著一個(gè)藥物 移植的炎癥反應(yīng)降解新家族。這樣，抗炎藥物的結(jié)合，像給體激素和交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠依 賴炎癥作為藥物傳輸。在這篇文章中，描述了交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠制備，研究由羥基降解交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠。離 體檢測(cè)了炎癥應(yīng)答反應(yīng)中交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠的降解。交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解特性提示設(shè) 計(jì)一個(gè)新的在體炎癥調(diào)節(jié)降解凝膠是可能的。材料和方法交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠制備分子量8.7x 10透明質(zhì)酸鈉購(gòu)自Shiseid

7、o Co., Tokyo, Japan.乙二醇二縮水甘油基酷 Ethyleneglycol diglycidylether （EGDGE） and多聚縮水甘油基酸Polyglycerol polyglycidylether （PGPGE）由Nippon Oil & Fats, Co., Tokyo, Japan,和 Nagage Chemical Industry Co.,提供。透 明質(zhì)酸PGPGE和EGDGE化學(xué)結(jié)構(gòu)在圖1中顯示，聚苯乙烯乳膠，直徑購(gòu)自Sekisui 化學(xué)公司。.交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠按下面方法制備1N的氫氧化鈉溶液中放入透明質(zhì)酸鈉20wt%溶解，在乙醇中溶解的EGDGE加入HA

8、液中（氫 氧化鈉液/乙醉9;1）旋轉(zhuǎn)混勻。當(dāng)含HA的微球被制備的時(shí)候，EGDGE加之前，多聚乳膠加 入透明質(zhì)酸鈉溶液。當(dāng)PGPGE作為交聯(lián)劑時(shí)，PGPGE溶入1N氫氧化鈉溶液中，加入HA溶液 （如表）?；旌衔锓湃胫睆?0mm、高3mm的玻璃小皿中，并在60反應(yīng)15分鐘。獲得凝 膠放入過量水/乙醇（1:1）皿中并用1N鹽酸PH值至中性。凝膠被過量水/乙醇（1:1）沖洗若 干遍。最后，在實(shí)驗(yàn)室實(shí)施前凝膠中乙醉被水取代。 CH ?CH EGDGE CH2-O-(CHI2-Cii-CH2*O-GM2-CH-CH2-O)-CM2-GH-CM OZk2 弋一CKPQPaE、c/圖1透明質(zhì)酸PGPGE和EG

9、DGE化學(xué)結(jié)構(gòu)表1由PGPGE和EGDGE制備交聯(lián)透明質(zhì)酸凝膠編號(hào)EGDGE摩爾水含量溶脹率微球數(shù)/mlHA10.599.856.9 X104-HA21.099.764.2 X104-HA31.599.481.9X104一HA41.099.512.0 X1049.0 X105HA51.099.542.1 X104-交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠性質(zhì)在蒸僧水中（25C）檢測(cè)交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠水溶脹。冷凍干燥后，用掃描電鏡觀察了干燥 交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠。交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠在體外降解由硫酸鐵和過氧化氫反應(yīng)產(chǎn)生羥基降解交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠。該過程是眾所周知過程。除了 另由注釋，按下例方法實(shí)施。7 mmx7 mm7

10、mm方形交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠浸泡在5 mM FeS04溶液中（100 ml） 2天。為了形成HA-Fe?+復(fù)合體。然后，交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠最初降解浸 泡凝膠進(jìn)入不同濃度的H9? （100 ml）中。H2O2濃度由液體分光光度法（二甲氧苯胺反應(yīng) 500nm產(chǎn)生紅顏色）檢測(cè)。除了另有說明，降解交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠（HPLC）分析。在預(yù)測(cè)試 的基礎(chǔ)上，HPLC分析了 1ml的降解產(chǎn)物，HPLC （X-8010. Tosoh Co., Japan）0使用恢復(fù)相柱 （Pak ODS-2201-N.64）X 200 mm. Senshu Sci., Tokyo, Japan）o 使用的溶劑是水，35C流動(dòng) 速

11、度Iml/min。降解產(chǎn)物保留時(shí)間1.5-3.5min。相差顯微鏡下（0.100mm, 1 /400mm2）用血球 計(jì)數(shù)器記數(shù)微球釋放數(shù)量估算微球釋放透明質(zhì)酸鈉凝膠量。在體炎癥反應(yīng)交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解在下列實(shí)驗(yàn)前，20X10X1.8 mm凝膠平板用高壓鍋火菌30分鐘。確認(rèn)高壓滅菌沒有改變平 板凝膠內(nèi)容，表明通過高壓凝膠沒有降解。外科移植凝膠平板在5周Waster大鼠（平均體重 110g）背部皮下（實(shí)驗(yàn)用鼠46只）。切口4cm長(zhǎng)，用5號(hào)絲線縫合，然后消毒。移植后14和28天， 為了產(chǎn)生初始炎癥反應(yīng)，背部切口4cm長(zhǎng)傷口作為傷口愈合實(shí)驗(yàn)。預(yù)定的周期后，用過量麻 醉劑殺死大鼠，然后移植HA凝膠和局

12、部組織一起取出。傷口愈合實(shí)驗(yàn)7天后殺死大鼠。殘留 HA用咔哇法定量分析葡萄糖醛酸。沒有移植（對(duì)照組）交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠的大鼠背部組 織葡萄糖醛酸幾近陰性。結(jié)果和討論前面文獻(xiàn)和專利已經(jīng)報(bào)道交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠制備和在體沒有毒性。HA與商業(yè)化的交聯(lián)劑 反應(yīng)，使用的交聯(lián)劑例如雙環(huán)氧化合物和二乙烯颯（bisepoxy compounds, divinyl sulfone.） o最適合的交聯(lián)劑是通過HA分子的羥基基團(tuán)形成醛鍵的多功能環(huán)氧化 合物。本實(shí)驗(yàn)使用的EGDGEandPGPGE分別具有兩個(gè)或四個(gè)環(huán)氧基團(tuán)，它們被 認(rèn)為制備穩(wěn)定的、親水的交聯(lián)HA凝膠是充分的夠用。在本實(shí)驗(yàn)中，催化是使用 的氫氧化鈉。文獻(xiàn)

13、報(bào)道HA長(zhǎng)時(shí)間暴露在高PH值中導(dǎo)致HA解聚作用，通常，該 過程室溫條件下幾個(gè)小時(shí)內(nèi)完成，本實(shí)驗(yàn)使用了相似濃度氫氧化鈉液體。為了減 少HA的解聚，反應(yīng)15分鐘后停止交聯(lián)反應(yīng)。用不同的摩爾濃度EGDGE或 PGPGE/ HA制備交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠的結(jié)果顯示在表1。盡管，交聯(lián)劑的含量 相當(dāng)?shù)母?，每一個(gè)交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠都含有較高的水（95%）。交聯(lián)劑的摩爾 濃度和透明質(zhì)酸鈉是變化的0.5-1.5, EGDGE交聯(lián)的透明質(zhì)酸鈉凝膠在潮濕的狀 態(tài)下是有點(diǎn)脆，不適合在體皮下移植。這結(jié)果表明：HA凝膠交聯(lián)密度相對(duì)較低。 這可以由于EGDGE與HA反應(yīng)過低，（a） EGDGE具有水不相混性（b） HA溶 液具

14、有高的粘性。在降解試驗(yàn)中，使用方形EGDGE交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠是容易處理。 圖2顯示了掃描電鏡交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠的橫斷而。觀察了覆蓋致密的皮膚大孔海綿樣結(jié)構(gòu)。 當(dāng)HA凝膠含水超過95%冷凍干燥樣品形成大孔。由于交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠制備后切除方形 平面，冷凍干燥致密的皮膚也將呈現(xiàn)。x300011 5.0kV 1mm佟12交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠凝膠冰凍干燥樣品掃描電鏡圖為了在體試驗(yàn)中使用更好的機(jī)械性能的交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠，測(cè)試了PGPGE交聯(lián)的透明質(zhì) 酸鈉凝膠。PGPGE作為交聯(lián)劑有兩個(gè)好處第一溶于水，第二每個(gè)分子具有更多的環(huán)氧基團(tuán)。 盡管它有更高的水溶脹值，PGPGE交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠有好的機(jī)械性能，

15、可以板樣結(jié)構(gòu)移 植。圖3表明：在羥基存在的情況下交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠的降解結(jié)果。在這個(gè)例子中，方形交聯(lián) 透明質(zhì)酸鈉凝膠浸入含H?。2的液體中，然后加入確定量的FeSOg靠測(cè)量殘留凝膠重量評(píng)價(jià) 降解。盡管在H?Ch中是穩(wěn)定的，加入FeSO液體后交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠迅速降解。在圖2圖 像顯示降解依賴于FeSO4液體加入的限制。一段時(shí)間凝膠達(dá)到恒定重量后迅速降解是由于 比。2產(chǎn)生了H。氧化Fe?+到Fe3+0以前，羥基水溶液中HA凝膠的解聚作用己經(jīng)被廣泛研究。 H202和FeSO4結(jié)合經(jīng)常被使用產(chǎn)生羥基。這芬頓反應(yīng)表示為下式：Fe2+H2O2 f Fe3+OH +OH關(guān)于由羥基降解HA并且形成其降解產(chǎn)物

16、的機(jī)制，電子順磁共振觀察到了證據(jù)。HA與羥基反應(yīng) 是首先在碳抽出氫到葡萄糖醛酸竣基，引起糖昔的裂解。羥基被認(rèn)為是最重要的活性組分, 這具有在活性氧中最短的生命周期。例如報(bào)道：1 uM羥基生命周期200 n so我們的結(jié)果 表明：在其它氧化反應(yīng)因子存在的情況下產(chǎn)生羥基降解了交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠并且降解以脈 沖方式發(fā)生。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)體系中，據(jù)認(rèn)為由于當(dāng)FeSO溶解在比02的液體中速率與發(fā)生羥基 速率相同，即使H2O2已經(jīng)滲透到凝膠內(nèi)部，羥基的產(chǎn)生發(fā)生在交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠表面。HA gol; 02955gSmM soln.: 100ml020 40 60 80 100 12Q 140TlnMfmln)圖

17、3當(dāng)FeS04溶解在HQ的液體中羥基交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠的降解TirMfiftlh)圖4當(dāng)FeSOq溶解在不同濃度H2O2的液體中羥基交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠的降解因此，正像圖3顯示交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠的降解發(fā)生在正而。它也表明由于羥基短的生命周 期大多數(shù)快速消失。為了控制藥物傳輸釋放以滿足患者的生物需求，當(dāng)生物需求結(jié)束時(shí)具有 局部藥的多聚體基質(zhì)連續(xù)降解是可能的。從這一點(diǎn)看，交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解特性原理上 使它適合于自反饋藥物傳輸體系的應(yīng)用。羥基的短生命周期使他很難檢測(cè)交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉降解動(dòng)力學(xué)。文獻(xiàn)報(bào)道HA能與金屬離子形 成復(fù)合體像Qi?*和Fe2+,3。?存在條件下該復(fù)合體引起位點(diǎn)特殊的氧化反應(yīng)。這

18、個(gè)系統(tǒng) 的特性是Fe?+似乎束縛于HA,阻止沒有液體情況下產(chǎn)生羥基，若非在透明質(zhì)酸特殊位點(diǎn)產(chǎn)生 羥基。在本研究中為了產(chǎn)生羥基，形成HA-Fe?+復(fù)合體，交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠首先進(jìn)入FeSO 液體中，然后移到H2O2液體。圖4顯示在不同H2O2條件下交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解時(shí)間進(jìn)程。 這些交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉降解時(shí)間從幾分鐘到若干小時(shí)即依賴于羥基的產(chǎn)生又依賴于凝膠交聯(lián) 條件。通常，假設(shè)多聚體降解有三個(gè)可能的方法：（I）優(yōu)先于表面（2）均勻貫穿多聚體基質(zhì)（3） 靠上述機(jī)制結(jié)合。在這個(gè)體系中，可以預(yù)料是具有Fe的凝膠表面的H2O2反應(yīng)產(chǎn)生羥基導(dǎo)致 交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解?？梢酝茰y(cè)，沒有透明質(zhì)酸鈉凝膠凝膠表面特

19、殊位點(diǎn)Fe2+, H2O2不 能侵入就沒有透明質(zhì)酸鈉凝膠的降解。當(dāng)然，理論上預(yù)測(cè)交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解動(dòng)力學(xué)以表面降解為基礎(chǔ)。如果Mt是從方形表 而任一時(shí)間t基質(zhì)降解的量，那么方形樣品塊保留可表示為下式。（1M1/dt=B p A=6Bp （h-2Bt）2（1）B是單位長(zhǎng)度/時(shí)間表面降解速率，p為多聚體密度,A為方塊表而積，h為方塊初始長(zhǎng)度，方塊 表示Mx =p/3(2)替代為h =2Btx(3)J是全部降解的時(shí)間，方程(l)能夠與方程(2)、(3)整合表達(dá)部分多聚體降解相對(duì)時(shí) 間。Mt/M 1-1 -(t/foc)3 (4)所有資料表明在圖4方程4為降解周期基礎(chǔ)的理論曲線，方程可以由下式表達(dá)

20、。Mt/Mg m 個(gè)二外(5)以圖4得到的方程5是顯示在圖5的線性關(guān)系。M 8040*041.0圖5 H濃度(50-500 uM)得到的方程5是顯示在圖5的線性關(guān)系。 表2編號(hào)重量gH2O2 u mFe2+降解率時(shí)間(min)降解率 cm/SHA10.35505.0100501.4X10-4HA10.325005.010078.1 X10-4HA30.37505.01001803.3X1O5HA30.335005.0100451.3X10-4HA40.1555.0100902.2X104HA40.15505.01003.41.4X1O420408080Tlme(rnin)1OOBOM 如201

21、 usapffBtp 求圖6微球羥基自由基降解透明質(zhì)酸鈉凝膠一83;37 二二圖7凝膠降解和微球釋放速率這些結(jié)果表明羥基降解交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠發(fā)生由表而機(jī)制控制。前而報(bào)道的易受侵蝕表面的多聚體，定義侵蝕過程前而兩個(gè)相對(duì)運(yùn)動(dòng)術(shù)語(yǔ)水的侵入速率為 匕，多聚體侵蝕速率以。當(dāng)匕遠(yuǎn)大于匕時(shí)表面侵蝕過程發(fā)生，由多聚體攝入水的速率完全 決定侵蝕速率。交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠表面降解被定義兩個(gè)反應(yīng)的相對(duì)速率：V3幺任。2侵入 速率，匕為羥基降解交聯(lián)透明質(zhì)酸凝膠速率。在這體系中，僅當(dāng)匕大于時(shí)完成表面降解。 在研究中使用H92濃度(50-500 uM)是遠(yuǎn)低于凝膠中Fe?+ (5mM)的濃度。一旦H2O2面臨 透明質(zhì)酸鈉

22、凝膠表而，比。2將與Fe?+迅速反應(yīng)產(chǎn)生羥基。因?yàn)镠A與Fe?+形成復(fù)合體防止H2O2進(jìn)一步侵入凝膠。由于羥基的生命周期很短-羥基將迅速消失-透明質(zhì)酸與羥基反 應(yīng)羥基反應(yīng)相當(dāng)迅速。佟15提示該體系匕是優(yōu)7V3。計(jì)算交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解圖總結(jié)在 表2。交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解率由方程3估算為IO,到lO-cm/s。本研究的實(shí)驗(yàn)條件下， 102-104 nmol H2O2.在凝膠中電+僅是2.5 nmol,細(xì)胞吞噬過程中O白細(xì)胞釋放0.554).65 nmolH.Oz, min。假設(shè)局部炎癥發(fā)生24小時(shí)內(nèi)H2O2全部的量被預(yù)期在e-enmol,因此，在這研究中制備的交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠被降解與在體炎

23、癥發(fā)生的降解具有相似速率。 發(fā)現(xiàn)激發(fā)誘導(dǎo)交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解快于酶降解c例如，盡管每克透明質(zhì)酸用lot 105單 位透明質(zhì)酸酶，幾分鐘內(nèi)降解透明質(zhì)酸，用相同的酶濃度花了幾個(gè)月時(shí)間降解交聯(lián)透明質(zhì)酸 鈉凝膠。這些詳盡的研究資料將在以后文章中報(bào)告。在這種情況，降解的輪廓遵循表面控制 機(jī)制，評(píng)估降解率是用10工io-8cm/s.這結(jié)果表明因?yàn)樵诨铙w透明質(zhì)酸鈉酶濃度是低于離體 實(shí)驗(yàn)，移植后勿略不計(jì)酶降解交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠。在生理PH值條件下透明質(zhì)酸羥基是陰 電荷。假定靠靜電排斥力或空間阻隔透明質(zhì)酸酶侵入凝膠受到限制，說明對(duì)透明質(zhì)酸鈉凝膠 由酶降解率很低。對(duì)維持藥物維持侵入凝膠保持藥物活性，來自交聯(lián)透明

24、質(zhì)酸鈉凝膠的物質(zhì) 的空間排斥是有用的。由于蛋白質(zhì)不能滲入凝膠，例如透明質(zhì)酸酶摻近凝膠的藥物活力能被 維持直到該藥物被降解。無(wú)論怎樣，為了建立藥物釋放與高水溶交聯(lián)透明質(zhì)酸表面成降解比 例，人們考慮要求藥物分隔貯存。關(guān)于藥物參入交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠，提出降解的透明質(zhì)酸 鈉基質(zhì)內(nèi)作為有用的一個(gè)異質(zhì)藥物微貯存結(jié)構(gòu)。依據(jù)這一道理，若干個(gè)與生物相容性好的微 顆粒例如脂微球白蛋白微球和其他微球引起了注意。在這研究中為了證實(shí)異質(zhì)結(jié)構(gòu)微球控 制降解釋放藥物的可行性，聚苯乙烯被用來制備含有交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠的微球。圖6顯示 靠羥基降解交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠及微球順序釋放的結(jié)果。圖8羥基應(yīng)答交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠臺(tái)階式降解403*1201KO. Diy10000晚 9 知 *圖9在體炎癥應(yīng)答交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠降解 從這圖上：可以結(jié)論基質(zhì)降解的速率與微球釋放速率一致。如果St是任何時(shí)間I從方塊表面 微球釋