保健食品中金雀異黃素的測(cè)定

1、保健食品中金雀異黃素的測(cè)定Determination of genistein in health food2.試劑本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑未經(jīng)指定者，均為分析純（A.R）,水為石英亞沸蒸餾水。3.1 甲醇（色譜純）3.2 無水乙醚3.3 甲醇+水（80+20）3.4 金雀異黃素（Genistein） 標(biāo)準(zhǔn)品3.5 0.050 mol/L 醋酸銨，pH 4.6 :準(zhǔn)確稱取 3.85 g 醋酸銨于小燒杯中，適量水溶解，轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，加水500 mL，加入3.00 mL冰醋酸，搖勻，加水至容量瓶 刻度，搖勻即可。4. 儀器4.1 高效液相色譜儀（二極管陣列檢測(cè)器或紫外檢測(cè)器）20.0 lL定

2、量管4.2 超聲波清洗器4.3 離心機(jī) 4000 r/min5. 分析步驟5.1高效液相色譜參考條件5.1.1 色譜柱：不銹鋼柱，內(nèi)徑 4.6mm,長(zhǎng)250mm C18柱，填料粒徑10m。5.1.2 流動(dòng)相：甲醇 +0.05 mol/L 乙酸銨,pH 4.6（46+54 ,v/v）5.1.3 流量：1.2mL/min。5.1.4 進(jìn)樣量：20.0此5.2試樣制備保健食品：準(zhǔn)確稱取 1g試樣，加50mL甲醇水（3.3） 超聲提取30min，上清液抽濾，殘?jiān)茫?.3）甲醇水洗，洗 液一并抽濾，定容至 100.0mL，過0.45 lm濾膜，測(cè)定。5.2.2 豆奶粉類食品：準(zhǔn)確稱取磨碎的豆粉或奶粉類

3、試樣5-10 g，用60mL-100 mL乙醚分三次脫脂，棄取乙醚層，加 50mL甲醇水（3.3）超聲提取30min，上清液抽濾，殘?jiān)茫?.3 ）甲醇水洗，洗滌液一并抽濾，定容后過0.45濾膜，測(cè)定。各種豆腐：準(zhǔn)確稱取試樣10g,用玻棒攪勻后用60mL 乙醚分三次脫脂，加 50mL甲醇水（3.3）超聲提取30 min， 過濾，測(cè)量體積后過 0.45 "m濾膜，測(cè)定。豆腐絲、豆腐干：準(zhǔn)確稱取試樣10g，加無水硫酸鈉研磨，轉(zhuǎn)入具塞三角瓶中，加 50mL甲醇水（3.3）超聲提取30 min，過濾，定容后過 0.45 lm濾膜，測(cè)定。5.2.5 金雀異黃素儲(chǔ)備液：精密稱取金雀異黃素標(biāo)準(zhǔn)品1

4、0.00mg，用甲醇溶解并定容至10.00mL。此液為1.000mg/mL。金雀異黃素應(yīng)用液：分別取金雀異黃素儲(chǔ)備液0.0100、0.0500、0.100、0.300、0.500、1.25mL，用甲醇定容至 10.0 mL （濃度各為 1.00、5.00、10.0、30.0、50.0、1251 g/mL ）。在上述色譜條件下注入標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液，以保留時(shí)間 定性，峰面積定量，外標(biāo)法計(jì)算6. 分析結(jié)果的表述 6.1計(jì)算ACiV X KX=Aim式中：X:試樣中金雀異黃素的含量mg/kgA :試樣的峰面積或峰咼Ci :金雀異黃素標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,g/mLAi :標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積或峰高m:試樣質(zhì)量，

5、gV :試樣定谷體積，mLK:稀釋因子6.2結(jié)果表示：報(bào)告算術(shù)平均值的兩位有效數(shù)。7.允許差同一實(shí)驗(yàn)室，同時(shí)測(cè)定或重復(fù)測(cè)定結(jié)果的相對(duì)偏差不 得超過10% o8. 準(zhǔn)確度將試樣中加入不同濃度的金雀異黃素，做回收率實(shí)驗(yàn)，回收率應(yīng)在 85%110%范圍內(nèi)。9. 其它1. 使用二極管陣列檢測(cè)器波長(zhǎng)設(shè)定范圍210-400 nm;2. 可以建立金雀異黃素標(biāo)準(zhǔn)的吸收光譜譜庫(kù)，測(cè)定試樣 時(shí)試樣吸收光譜與標(biāo)準(zhǔn)的吸收光譜進(jìn)行比較，可以克服單靠 保留時(shí)間定性的不足，增加定性的準(zhǔn)確性；3根據(jù)色譜峰的峰純度可以判定是否有干擾物質(zhì)存在。4.在標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液可同時(shí)加入黃豆苷(Daidzin),染料木苷(Genistin),黃豆苷原(Daidzein)標(biāo)準(zhǔn)品，黃豆苷，染料木苷，黃豆 苷原不干擾金雀異黃素的測(cè)定。1.范圍本方法規(guī)定了用高效液相色譜法測(cè)定保健食品和普通食 品中金雀異黃素的含量。本方法適用于保健食品和普通食品中金雀異黃素的測(cè)定。最低檢出限量為：0.1 Jg;本方法最佳線性范圍：1.00125g/mL。2.方法提要試樣經(jīng)乙醚脫脂，棄取乙醚后用甲醇水( 80+20, v/v ) 聲提