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1、免疫球蛋白 IgA 測(cè)定1 檢驗(yàn)?zāi)康闹笇?dǎo)本室工作人員規(guī)范操作本檢測(cè)項(xiàng)目,確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確。2 原理免疫透射比濁法抗免疫球蛋白 A 抗體和樣本中的抗原形成抗原抗體復(fù)合物,出現(xiàn)凝集,進(jìn)行透射比濁檢測(cè)。通過加入PEG可促使反應(yīng)迅速達(dá)到終點(diǎn),可增加靈敏度,降低樣本中抗原過剩導(dǎo)致 假陰性的風(fēng)險(xiǎn)。3 標(biāo)本要求3.1 使用新鮮血清 , 不使用血漿 .3.2 在采集血液后 2h 分離血清 .3.3 8h內(nèi)不能及時(shí)測(cè)定血清可存放于2-8 °C冰箱保存,3天后測(cè)定的血清置-15 °C- -20 °C冰凍保存,但冰凍血清只能復(fù)融 一次.3.4 嚴(yán)重溶血或脂血的標(biāo)本不能作測(cè)定4 試劑4
2、.1 試劑: 上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司 IgA 試劑盒 , 國械注進(jìn) 20142405056 YZB/GER 5724-2014 )4.1.1 試劑組成R1:TRIS 緩沖液:20 mmol/l ,pH 8.0 ;氯化鈉:200 mmol/L ;PEG 3.6%;防腐劑和穩(wěn)定劑。R2: 抗人免疫球蛋白 A 抗體(羊):取決于滴度; TRIS 緩 沖液: 20 mmol/l ;氯化鈉: 150 mmol/L ;防腐劑。4.1.2 試劑準(zhǔn)備: 試劑為即用式。4.1.3 試劑穩(wěn)定性與貯存:2-8 ° C下保存期限:見試劑標(biāo)簽上的有效期。 機(jī)上穩(wěn)定期: 90 天。4.1.4 變質(zhì)指示: 當(dāng)試
3、劑有濁度時(shí),表明有細(xì)菌污染則試劑 不能使用。4.2 校準(zhǔn)品: 使用羅氏多項(xiàng)生化校準(zhǔn)品提供的 IgA 校準(zhǔn)品對(duì) 自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)。4.3 質(zhì)控品: 使用正常值、病理值復(fù)合控制品。5 儀器AU2700 生化分析儀,羅氏 P800 生化分析儀 , 西門子ADVIA-2400 生化分析儀,東芝 TBA-120 生化分析儀6 操作步驟6.1 樣品的準(zhǔn)備:將標(biāo)好號(hào)的樣品離心后放到儀器規(guī)定的位6.2 試劑的檢測(cè):儀器開機(jī)后,檢查各種試劑的位置,體積等確認(rèn)無誤后方可進(jìn)行測(cè)定。6.3 項(xiàng)目基本參數(shù): 參見生化檢驗(yàn) AU2700 生化分析儀,羅 氏 P800 生化分析儀 , 西門子 ADVIA-2400 生化分
4、析儀,東芝 TBA-120 生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù)。6.4 儀器操作步驟:參見生化檢驗(yàn) AU2700生化分析儀,羅氏P800 生化分析儀 , 西門子 ADVIA-2400 生化分析儀,東芝TBA-120 生化分析儀操作規(guī)程。7 質(zhì)量控制在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平 I 與 II 質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析,以 2S為質(zhì)控警告限,3S為失控限,繪制質(zhì)控圖,判斷是否在控。8計(jì)算方法以IgA復(fù)合校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器后,在病人結(jié)果可報(bào)告范圍 內(nèi),儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果,以g/l報(bào)告。9參考值成人0.7-4 g/L(70-400 mg/dL;4.38-25.0 umol/L)兒童及青少年0-1歲g/L
5、(0-83 mg/dL; 0.00-5.19 umol/L)1-3歲umol/L)g/L(20-100mg/dL ;4-6歲umol/L)g/L(27-195mg/dL ;7-9歲umol/L)g/L(34-305mg/dL ;10-11 歲umol/L)g/L(53-204mg/dL ;3.31 -12.7512-13 歲g/L(58-358mg/dL ;umol/L)14-15 歲0.47-2.49g/L(47-249mg/dL ;umol/L)16-19 歲0.61 -3.48g/L(61 -348mg/dL ;3.81-21.75umol/L)我室的參考值06-4 g/l10臨床意義:
6、IgA約占血漿免疫球蛋白的13%,它的作用是保護(hù)皮膚及粘膜免受微生物的感染。它能結(jié)合毒素,與溶酶體一起具 有抗病毒及細(xì)菌的功能。IgA是體液分泌物,如:初乳、唾 液和汗水內(nèi)的主要免疫球蛋白。分泌IgA可防止局部感染,在腸內(nèi)和食物抗原結(jié)合有重要作用。在血清中,IgA以單體、二聚體及三聚體等形式存在,而分泌型的IgA全部為有添加 鏈(分泌組分)的二聚體形式。在慢性肝病、慢性感染、自身免疫性疾?。愶L(fēng)濕性關(guān) 節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡)、結(jié)節(jié)病和威-奧綜合癥(Wiskott-Aldrich syndrome,X連鎖免疫缺陷綜合癥)時(shí), 會(huì)出現(xiàn)多克隆的 IgA 水平升高。 在 IgA 骨髓瘤時(shí)單克隆 IgA 升高。IgA 的合成降低可見于獲得性或先天性免疫缺陷疾病, 如布魯頓丙球蛋白缺乏血癥。另外,腸胃病蛋白流失和燒傷 由皮膚的流失等,使 IgA 合成下降。11 操作性能11.1 線性范圍: 0.5-8 g/l11.2 精密度采用內(nèi)部協(xié)議重復(fù)檢測(cè)人樣本和質(zhì)
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