認(rèn)識藥品檢驗

1、藥品檢驗技術(shù)課程單元教學(xué)設(shè)計情境：認(rèn)識藥品檢驗 任務(wù)：認(rèn)識藥物分析 教學(xué)目標(biāo)設(shè)計序號5上課地點理實一體化教室授課形式講授、學(xué)生操作練習(xí)教 學(xué) 目 標(biāo)技能目標(biāo)知識目標(biāo)學(xué)會使用中國藥典藥物分析與檢驗的目的、性質(zhì)和任務(wù);藥品檢驗工作的基本程序;全面控制藥品質(zhì)量的科學(xué)管理;藥物檢驗課程的特點、主要內(nèi)容與學(xué)習(xí)要求;教 學(xué) 重 點藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容；中國藥典的基本結(jié)構(gòu)和內(nèi)容；藥品檢驗基本程序；藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法的驗證內(nèi)容;教 學(xué) 難 點藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容；中國藥典的基本結(jié)構(gòu)和內(nèi)容；藥品檢驗基本程序；藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法的驗證內(nèi)容;能力訓(xùn)練任務(wù)及案例通過對藥物分析基礎(chǔ)的知識點的講解和對藥典使用方法

2、的講解讓同學(xué)們更加深刻的了解藥品檢驗技術(shù)。教學(xué)進程設(shè)計步驟教學(xué)內(nèi)容教學(xué)方法教學(xué)手段學(xué)生活動時間分配藥品檢驗工作的相關(guān)基礎(chǔ)引導(dǎo)學(xué)生探究藥品檢驗的基本程序教師舉例、點評、歸納概括引出知識點。任務(wù)引導(dǎo)在實驗室中進行簡單的藥品檢驗20分鐘藥典的使用和查詢藥典的基本結(jié)構(gòu)和內(nèi)容、使用方法舉例：在中國藥典2015版中查找阿司匹林的檢驗方法25分鐘本單元主要講解了藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容、中國藥典的基本結(jié)構(gòu)和內(nèi)容和藥品檢驗基本程序、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法的驗證內(nèi)容，同學(xué)們結(jié)合所學(xué)的知識能夠進行簡單的藥品檢驗并能在藥典中找出某種藥品的檢驗方法。 例如：藥品：是指用于預(yù)防、治療、診斷人的疾病，有目的地調(diào)節(jié)人的生理機能

3、并規(guī)定有適應(yīng)癥或者功能主治、用法和用量的物質(zhì)，包括中藥材、中藥飲片、中成藥、化學(xué)原料藥及其制劑、抗生素、生化藥品、放射性藥品、血清、疫苗、血液制品和診斷藥品等。藥物分析與檢驗的目的、性質(zhì)和任務(wù)：藥品質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響到藥品的安全性和有效性，關(guān)系到用藥者的健康和生命安危。藥物檢驗的目的就是為新藥研發(fā)過程提供有力的現(xiàn)代檢測手段；為藥品生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制、工藝優(yōu)化、合理貯藏等提供有效依據(jù)；為藥物不良反應(yīng)的及時發(fā)現(xiàn)、確認(rèn)、處理和危害性評價提供快速、準(zhǔn)確的分析手段等。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定的目的和意義：藥品質(zhì)量直接影響到藥品的安全性和有效性。由于各藥品生產(chǎn)廠家的生產(chǎn)工藝、技術(shù)水平及設(shè)備條件均有所不同，貯運及

4、保存情況也存在著一定的差異，都將影響到藥品的質(zhì)量。為了加強對藥品質(zhì)量的控制及行政管理，必須有一個統(tǒng)一的藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。為保證藥品質(zhì)量而對各種檢查項目、指標(biāo)、限度、范圍等所做的規(guī)定，稱為藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，簡稱藥品標(biāo)準(zhǔn)。它是對藥品的來源、制藥工藝等生產(chǎn)及貯運過程中的各環(huán)節(jié)所制定的、用以檢測藥品質(zhì)量是否達到用藥要求并衡量其質(zhì)量是否穩(wěn)定均一的技術(shù)規(guī)定。由國家政府制定并頒布的藥品標(biāo)準(zhǔn)即國家藥品標(biāo)準(zhǔn)，系國家站在公眾的立場為保證藥品質(zhì)量而規(guī)定的藥品所必須達到的最基本的技術(shù)要求，它是藥品現(xiàn)代化生產(chǎn)和質(zhì)量管理的重要組成部分，是國家對藥品質(zhì)量、規(guī)格、檢驗方法及生產(chǎn)工藝所作的技術(shù)要求，是藥品生產(chǎn)、經(jīng)營、使用、檢驗和行政、

5、技術(shù)監(jiān)督管理各部門應(yīng)共同遵循的法定技術(shù)依據(jù)，也是藥品生產(chǎn)和臨床用藥水平的重要標(biāo)志。藥典是國家（或國際間多國組成的地區(qū)）對其所編纂制定的法定藥品標(biāo)準(zhǔn)的統(tǒng)一集成，并對各藥品標(biāo)準(zhǔn)中的共性要求給予統(tǒng)一的規(guī)定。中國藥典的基本結(jié)構(gòu)：中國藥典，系依據(jù)中華人民共和國藥品管理法組織制定和頒布實施。其英文名稱為Pharmacopoeia of The Peoples Republic of China；英文簡稱Chinese Pharmacopoeia；英文縮寫為Ch.P.。中國藥典2010版由一部、二部、三部及其增補本組成，內(nèi)容分別包括凡例、正文和附錄。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)由凡例與正文及其引用的附錄共同構(gòu)成。中國藥典正

6、文項下各藥品根據(jù)品種和劑型不同，按順序可分別列有：品名（包括中文名稱、漢語拼音與英文名）、有機藥物的結(jié)構(gòu)式、分子式與分子量、來源或有機藥物的化學(xué)名稱、含量或效價規(guī)定、處方、制法、性狀、鑒別、檢查、含量或效價測定、類別、規(guī)格、貯藏及制劑等。藥品檢驗工作的基本程序：1取樣（樣品收審）分析任何樣品，首先是取樣。取樣，系指從一批產(chǎn)品中，按取樣規(guī)則抽取一定數(shù)量具有代表性的樣品，供檢驗用。取樣時，應(yīng)先檢查品名、批號、數(shù)量、包裝等情況，符合要求后方可取樣。取樣的基本原則應(yīng)該是均勻、合理。要從大量的藥物樣品中取出能代表試樣整體質(zhì)量的小量樣品進行分析，應(yīng)特別注意樣品的代表性與真實性，否則就失去了檢驗的意義。有時

7、，為了保證所取樣品具有科學(xué)性、真實性和代表性，需要用到一些特殊裝置，如生產(chǎn)規(guī)模的固體原料藥，需用取樣探子取樣等。藥物檢驗工作者，有時還需對送檢的樣品進行分析。在收到送檢樣品后，應(yīng)對樣品進行全面審查，如樣品數(shù)量、包裝情況、外觀性狀、檢驗?zāi)康牡?；并確定檢驗的依據(jù)，即藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)如中國藥典；正確理解藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢驗項目和方法，然后再進行分析。2鑒別鑒別，系依據(jù)藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)進行某些化學(xué)反應(yīng)，測定某些理化常數(shù)或光譜特征，來判斷藥物及其制劑的真?zhèn)?。通常，某一項鑒別試驗，如焰色反應(yīng)、官能團反應(yīng)，只能表示藥物的某一特征，絕不能將其作為判斷的唯一依據(jù)。因此，藥物的鑒別不只是一項試驗，而是采用一

8、組（二項或幾項）試驗全面評價一個藥物，力求結(jié)論準(zhǔn)確無誤。例如，中國藥典（2010年版）在吡哌酸鑒別項下就規(guī)定了高效液相色譜法、紫外-可見分光光度法及紅外分光光度法等三項鑒別試驗。3檢查藥物在不影響療效及人體健康的原則下，可以允許在生產(chǎn)及貯藏過程中所引入的微量雜質(zhì)的存在。通常按照藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的項目進行“限度檢查”，以判斷藥物的純度是否符合限量規(guī)定要求，所以也稱為純度檢查。檢查的結(jié)果可用于判定藥物優(yōu)劣。4含量測定含量測定，就是測定藥物中主要有效成分的含量。一般采用化學(xué)分析或理化分析的方法來測定，以確定藥物的含量是否符合藥品標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定要求。判斷一個藥物的質(zhì)量是否符合要求，必須全面考慮鑒別、檢查和

9、含量測定三者的檢驗結(jié)果，并兼顧藥品的性狀要求，如外觀、色澤、氣味、物理常數(shù)等。5寫出報告藥品檢驗及其結(jié)果必須要有完整的原始記錄，它是檢驗工作的原始資料，也是判斷藥品質(zhì)量優(yōu)劣的原始依據(jù)。因此，藥品分析檢驗記錄必須做到內(nèi)容真實可靠，簡明具體；原始數(shù)據(jù)不得涂改；宜用鋼筆書寫。全部項目檢驗完畢后，還需根據(jù)分析檢驗的結(jié)果，寫出檢驗報告書。報告書中主要內(nèi)容有檢品名稱、數(shù)量、外觀性狀、檢驗?zāi)康摹z驗依據(jù)、檢驗結(jié)果、報告日期、檢驗人員和復(fù)核人員的簽章、結(jié)論等。檢驗報告必須明確、肯定、有依據(jù)，并得出明確的結(jié)論。藥物檢驗工作者在完成藥品檢驗工作，并寫出書面報告后，還應(yīng)對不符合規(guī)定的藥品提出處理意見，以便供有關(guān)部門

10、參考，并協(xié)助生產(chǎn)企業(yè)盡快提高藥品質(zhì)量以達到合格要求。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法的驗證內(nèi)容：藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法的驗證目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)的檢測要求，包括原料藥及制劑的性狀、鑒別、檢查、含量測定等有關(guān)項目。方法驗證是一個持續(xù)的發(fā)展過程，在藥品生產(chǎn)工藝變更、制劑的組成改變、原分析方法進行修訂或藥典規(guī)定的常規(guī)方法用于新藥時，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法均需要驗證。驗證應(yīng)證明分析方法能夠保持其性能（如專屬性），適用于相應(yīng)的檢測要求。驗證內(nèi)容包括：準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性等一、準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度，系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般以回收率（）表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的

11、范圍內(nèi)建立。 1含量測定方法的準(zhǔn)確度  （1）原料藥 原料藥可用已知純度的對照品或樣品進行測定，按式1-1計算回收率；或用本法測定所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一方法測定的結(jié)果進行比較。 （1-1）（2）制劑 制劑可用含已知量被測物的制劑各組分混合物（包括制劑輔料）進行測定，回收率的計算同原料藥。如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測物進行測定，按式1-2計算回收率；或與另一個已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果。 （1-2）如該法已建立了精密度、線性和專屬性，準(zhǔn)確度有時也能推算出來，該項目可不再進行驗證。2雜質(zhì)定量測定的準(zhǔn)確度  雜質(zhì)定量測定的方法多采用色譜法，其

12、準(zhǔn)確度可通過向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進行測定。如果不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測定結(jié)果與另一成熟的方法進行比較，如藥典標(biāo)準(zhǔn)方法或經(jīng)過驗證的方法。如不能測得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的相對響應(yīng)因子，則可用原料藥的響應(yīng)因子。同時，應(yīng)明確表示單個雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重量比（）或面積比（）。 3數(shù)據(jù)要求 在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果進行評價，例如制備3個不同濃度的樣品，各測定3次。應(yīng)報告已知加入量的回收率（），或測定結(jié)果平均值與真實值之差及其可信限。二、精密度精密度，系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差（d）、標(biāo)準(zhǔn)

13、偏差（SD）或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示。含量測定和雜質(zhì)定量測定應(yīng)考慮方法的精密度。1重復(fù)性在相同條件下，由一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性。在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果進行評價，如制備3個不同濃度的樣品，各測定3次；或把被測物濃度當(dāng)作100，用至少測定6次的結(jié)果進行評價。2中間精密度在同一個實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設(shè)備測定結(jié)果的精密度，稱為中間精密度。為考察隨機變動因素對精密度的影響，應(yīng)設(shè)計方案進行中間精密度試驗。變動因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備。 3重現(xiàn)性在不同實驗室由不同分析人員測定結(jié)果的精密度，稱為重現(xiàn)性。當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時，應(yīng)進

14、行重現(xiàn)性試驗。如建立藥典分析方法時通過協(xié)同檢驗得出重現(xiàn)性結(jié)果，協(xié)同檢驗的過程、重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說明中。 4數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限。三、專屬性專屬性，系指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的方法能準(zhǔn)確測定出被測物的特性。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查、含量測定方法，均應(yīng)考察其專屬性。如方法不夠?qū)?，則應(yīng)采用多個方法予以補充。 1鑒別反應(yīng)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似的化合物區(qū)分。不含被測成分的樣品，以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，均應(yīng)呈負(fù)反應(yīng)。 2含量測定和雜質(zhì)測定色譜法和其他分離方法，應(yīng)附代表性圖譜，以說明專屬性。圖中應(yīng)標(biāo)

15、明諸成分的位置，色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。在雜質(zhì)可獲得的情況下，對于含量測定，試樣中可加入雜質(zhì)或輔料，考察測定結(jié)果是否受干擾，并可與未加雜質(zhì)和輔料的試樣比較測定結(jié)果。對于雜質(zhì)測定，也可向試樣中加入一定量的雜質(zhì)，考察雜質(zhì)能否得到分離。在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進行測定，與另一個經(jīng)驗證了的或藥典方法比較結(jié)果；用強光照射，高溫，高濕，酸、堿水解，或氧化的方法進行加速破壞，以研究降解產(chǎn)物。含量測定方法應(yīng)比對二法的結(jié)果，雜質(zhì)測定應(yīng)比對檢出的雜質(zhì)個數(shù)，必要時可采用光二極管陣列檢測和質(zhì)譜檢測，進行純度檢查。四、檢測限檢測限（LOD），系指試樣中被測物能被檢測出的最低量。

16、常用的方法如下。1目視法  用含已知濃度被測物的試樣進行分析，目視確定能被可靠地檢測出的被測物的最低濃度或量。  該方法適用于可用目視法直接評價結(jié)果的分析方法，如顯色鑒別法、薄層色譜法等。2信噪比法用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進行比較，計算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比為3:1或2:1時相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限。3數(shù)據(jù)要求無論用何種方法，均應(yīng)使用一定數(shù)量（如56份）的試樣進行分析，其濃度為近于或等于檢測限目標(biāo)值，以可靠地測定檢測限。同時，報告應(yīng)附測試圖譜，說明測試過程和檢測限結(jié)果。 五、定量

17、限定量限（LOQ），系指樣品中被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng)具有一定的準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測定方法研究時，應(yīng)確定定量限。常用信噪比法確定定量限，一般以信噪比為10:1時相應(yīng)的濃度或注入儀器的量進行確定。數(shù)據(jù)要求：除附測試圖譜，并說明測試過程和定量限結(jié)果外，還應(yīng)說明測試結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度。六、線性線性，系指在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測定線性關(guān)系。可用一貯備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列（至少5份）供試樣品的方法進行測定。以測得的響應(yīng)信號作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進行線性回歸。

18、必要時，響應(yīng)信號可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進行線性回歸計算。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。七、范圍范圍，系指能達到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定。原料藥和制劑含量測定，范圍應(yīng)為測試濃度的80120；制劑含量均勻度檢查，范圍應(yīng)為測試濃度的70130，根據(jù)劑型特點，如氣霧劑、噴霧劑，范圍可適當(dāng)放寬；溶出度或釋放度中的溶出量測定，范圍應(yīng)為限度的±20，如規(guī)定了限度范圍，則應(yīng)為下限的-20至上限的+20；雜質(zhì)測定，范圍應(yīng)根據(jù)初步實測，擬訂出規(guī)定限度的±20；如果含量測定與雜質(zhì)檢查同時

19、測定，用百分歸一化法，則范圍應(yīng)為雜質(zhì)規(guī)定限度的-20至含量限度（或上限）的+20。八、耐用性耐用性，系指在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度，為使方法可用于常規(guī)檢查提供依據(jù)。開始研究分析方法時，就應(yīng)考慮其耐用性。如果測試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫明。典型的變動因素有：被測溶液的穩(wěn)定性，樣品提取次數(shù)、時間等。液相色譜法中典型的變動因素有：流動相的組成和pH值，不同品牌或不同批號的同類色譜柱，柱溫，流速等。氣相色譜法變動因素有：不同品牌或批號的色譜柱、固定相，不同類型的擔(dān)體、柱溫，進樣口和檢測器溫度等。經(jīng)試驗，應(yīng)說明小的變動能否通過設(shè)計的系統(tǒng)適用性試驗，以確保方法有效。驗證一種分析

20、方法，并不一定對上述八項指標(biāo)都有要求，而應(yīng)視方法使用對象擬定驗證的內(nèi)容。大體有以下三種情況：（1）非定量分析方法 如鑒別試驗和雜質(zhì)的限度檢查法，一般需要驗證專屬性、檢測限和耐用性等三項。（2）定量分析方法 如原料藥中主成分或制劑中有效組分的含量測定及含量均勻度、溶出度或釋放度的測定方法，除檢測限和定量限外，其余六項均須驗證。（3）微量定量分析方法 如雜質(zhì)的定量測定方法，除檢測限視情況而定外，其余七項內(nèi)容均須驗證。本課程的學(xué)習(xí)方法與要求：藥物檢驗技術(shù)是一門研究藥品及各種制劑的組成、理化性質(zhì)、真?zhèn)舞b別、純度檢查及其有效成分含量測定的課程，是在學(xué)習(xí)了有機化學(xué)、分析化學(xué)、藥物化學(xué)以及其它相關(guān)課程的基礎(chǔ)上開設(shè)的。要學(xué)好本課程，應(yīng)努力做到以下幾點：1培養(yǎng)學(xué)習(xí)興趣偉大的科學(xué)家愛因斯坦說過：“興趣是最好的老師”。也就是說一個人一旦對某種事物有了濃厚的興趣，就會主動去求知、去探索、去實踐，并在求知、探索、實踐中產(chǎn)生愉快的情緒和體驗。藥物檢驗技術(shù)課程的特點是信息量大，系統(tǒng)性差，記憶困難等，同學(xué)們學(xué)習(xí)起來常常會感覺比較枯燥。因此，要學(xué)好藥物檢驗技術(shù)課程，就必須努力培養(yǎng)學(xué)習(xí)興趣。在學(xué)習(xí)過程中，我們可以結(jié)合相關(guān)時事，結(jié)合身邊的案例，激發(fā)對相關(guān)事實的好奇心，產(chǎn)生對相關(guān)知識探索的欲望，從而增強學(xué)習(xí)的興趣。