迷迭香乙醇提取物的制備及抗氧化活性研究

1、XXXX大學(xué)畢 業(yè) 論 文（設(shè)計(jì)）題 目：迷迭香乙醇提取物的制備及抗氧化活性研究 姓 名： XXX 學(xué) 院： XXXXXX 專 業(yè)： XXXXXXX 班 級(jí)： 學(xué) 號(hào)： 指導(dǎo)教師： 201X年X月X日目 錄摘 要1ABSTRACT21引言31.1迷迭香的功用價(jià)值31.2迷迭香抗氧化劑31.3 微波輔助萃取技術(shù)41.4 論文研究的主要內(nèi)容52 材料與方法62.1 材料與設(shè)備62.1.1 主要材料62.1.2 主要試劑62.1.3 主要設(shè)備及儀器62.2 實(shí)驗(yàn)方法62.2.1 原料預(yù)處理62.2.2 迷迭香乙醇提取物的粗提取62.2.3 迷迭香乙醇提取物的分離與含量測(cè)定72.2.4 迷迭香乙醇提取

2、物清除DPPH自由基能力的測(cè)定72.2.5 實(shí)驗(yàn)流程73 結(jié)果與分析103.1 溶劑濃度對(duì)提取物得率的影響103.2 微波功率對(duì)提取物得率的影響103.3 提取時(shí)間對(duì)提取物得率的影響113.4 料液比對(duì)提取物得率的影響123.5 迷迭香乙醇提取物制備的正交試驗(yàn)123.6 迷迭香乙醇提取物制備的驗(yàn)證試驗(yàn)133.7 迷迭香脂溶性提取物清除DPPH自由基能力測(cè)定134 討論15致謝16參考文獻(xiàn)17迷迭香乙醇提取物的制備及抗氧化活性研究食品質(zhì)量與安全 XXX指導(dǎo)教師 XXX摘 要：迷迭香作為一種香草材料，具有諸多功用價(jià)值，尤其有研究發(fā)現(xiàn)其具有極高的抗氧化活性。為探索迷迭香乙醇提取物微波輔助提取的最佳工

3、藝條件，并對(duì)其抗氧化活性進(jìn)行研究，本文利用微波輔助萃取技術(shù)萃取迷迭香中的天然抗氧化活性成分。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，確定其最佳提取條件為：溶劑濃度80%，微波功率為700w，提取時(shí)間為5min，料液比為1:12，在這個(gè)條件下提取迷迭香乙醇提取物，平均得率為13.3%。在確定最佳提取工藝的基礎(chǔ)上，測(cè)定迷迭香乙醇提取物清除DPPH自由基能力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，迷迭香乙醇提取物具有優(yōu)良的氧化活性，可以應(yīng)用于食品、藥品和化工等領(lǐng)域。關(guān)鍵詞：迷迭香；抗氧化；微波輔助；提取Study on Preparation of Rosemary ethanol extract and Antioxidants Activity Stu

4、dent majoring in Food quality and safety Cui XiaonanTutor Zhang ShuanglingAbstract: Rosemary herb as a material having many functions value, especially studies have found that it has a high antioxidant activityIn order to explore the optimum conditions Rosemary ethanol extract of Microwave assistant

5、 extraction，and to study its antioxidant activity, The extraction by Microwave assistant extraction was studiedThe result showed that，the optimum extraction conditions of Rosemary ethanol extract were：ethanol concentration 80%,microwave power 700w,extraction time 5min and solid/solvent ratio 1:

6、12.The average yield of extracts was 13.3%. To determine the best extraction process based on the determination of Rosemary ethanol extract DPPH radical scavenging activity and found that the fat-soluble antioxidant rosemary excellent oxidative activity, can be used in food, pharmaceuticals and chem

7、ical industry.Key words：Rosemary；Antioxidant；Microwave assistant extraction；Extraction1引言迷迭香(Rosmarinus officinalis)，別名海洋之露，原產(chǎn)于歐洲及北非地中海沿岸，曹魏時(shí)即曾引入我國(guó)1。迷迭香葉帶有茶香，味辛辣、微苦，因此被作為一種香料作物在全世界廣泛種植。近年來(lái)，我國(guó)西南部分省區(qū)也有種植。二十世紀(jì)五十年代，有研究發(fā)現(xiàn)，迷迭香除了可以作為香料用于日用化工產(chǎn)品、食品烹調(diào)以外，其中含有多種抗氧化性很強(qiáng)的活性成分，且這些活性成分同時(shí)具有較高的醫(yī)用保健價(jià)值。因此，在此次研究過(guò)程中，在傳統(tǒng)溶劑

8、浸提法的基礎(chǔ)上，將利用微波輔助萃取迷迭香干葉中的脂溶性抗氧化活性成分。1.1迷迭香的功用價(jià)值隨著國(guó)內(nèi)外對(duì)迷迭香成分分析的日益深入，迷迭香及其制品的功用價(jià)值被不斷挖掘出來(lái)。除觀賞價(jià)值外，當(dāng)前，迷迭香已經(jīng)廣泛的應(yīng)用于醫(yī)藥、化工和食品等諸多領(lǐng)域。迷迭香作為一種常見的香草，具有許多獨(dú)特的醫(yī)療保健價(jià)值，例如：可促進(jìn)血液循環(huán)，調(diào)節(jié)血壓，增強(qiáng)神經(jīng)系統(tǒng)功能，緩解緊張，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)等，因此?？捎米鹘∥杆帯⒅雇此?、利膽劑等。迷迭香提取物也經(jīng)常用于日常生活中的化工產(chǎn)品之中，尤其是迷迭香精油對(duì)皮膚、頭發(fā)具有滋養(yǎng)功效，因此廣泛地應(yīng)用于護(hù)膚、護(hù)發(fā)等產(chǎn)品；同時(shí)，迷迭香精油具有很強(qiáng)的驅(qū)蟲殺菌效果，是很好的天然防腐劑2。由于迷

9、迭香氣味芳香獨(dú)特，成為傳統(tǒng)西餐制作中常用的香料，也有很多人將其代茶飲用，這些食用方法都可以有效促進(jìn)消化，有利于緩解胃部脹氣等癥狀。1.2迷迭香抗氧化劑如今，抗氧化劑在食品、醫(yī)藥和化工等諸多領(lǐng)域都發(fā)揮著積極作用。但是，隨著生活水平的不斷提高，消費(fèi)者對(duì)生活品質(zhì)的要求越來(lái)越高，人們追求健康的消費(fèi)心理占據(jù)主流，由于傳統(tǒng)化學(xué)合成的抗氧化劑存在潛在致癌作用，使得化學(xué)合成的抗氧化劑已經(jīng)不能滿足當(dāng)下消費(fèi)者的消費(fèi)需求。同時(shí)，天然抗氧化劑不僅可以有效防止食品氧化，而且可以作為體內(nèi)氧自由基的清除劑，以達(dá)到保護(hù)人體細(xì)胞組織，保護(hù)心腦血管循環(huán)系統(tǒng)，抗癌及延緩衰老等生理作用3。由于當(dāng)下食品安全問(wèn)題愈演愈烈，天然抗氧化劑必

10、將取代合成抗氧化劑的主流地位，成為食品添加劑應(yīng)用領(lǐng)域的另一個(gè)里程碑。迷迭香抗氧化劑是一種天然抗氧化劑，具有極高的抗氧化活性4。因此，迷迭香抗氧化劑已經(jīng)被美國(guó)FDA作為“公眾安全食品”成為新寵。迷迭香抗氧化劑具有安全性高、熱穩(wěn)定性高等優(yōu)勢(shì)，同時(shí)，抗氧化效果也非常理想，在食品、醫(yī)藥、保健品和化妝品等領(lǐng)域都有較為廣闊的應(yīng)用空間。迷迭香提取物成分復(fù)雜，可分為脂溶性和水溶性兩部分5。其中，脂溶性成分具有抗氧化活性，活性成分主要為鼠尾草酸、鼠尾草酚等；水溶性成分也是優(yōu)良的抗氧化劑和防腐劑，以迷迭香酸為主6。迷迭香脂溶性抗氧化活性成分可以廣泛應(yīng)用于富含油脂的食品當(dāng)中，從而有效防止食品中油脂發(fā)生氧化變質(zhì)，且由

11、于其具有優(yōu)良的熱穩(wěn)定性，可耐200左右的高溫，因此即使在加工溫度較高的油炸食品、烘焙食品之中依然可以發(fā)揮較強(qiáng)的抗氧化作用。水溶性抗氧化活性成分兼具抗氧化性和防腐抑菌功能，主要用于水產(chǎn)品、飲料產(chǎn)品的抗氧化7?，F(xiàn)如今，隨著提取技術(shù)方法不斷豐富，迷迭香抗氧化劑的提取方法已有了極大的突破，例如：有機(jī)溶劑浸提法、超臨界流體萃取法等8。1.3 微波輔助萃取技術(shù)微波輔助萃?。∕icrowave assistant extraction，MAE）是微波和傳統(tǒng)的溶劑萃取法相結(jié)合后形成的一種新的天然產(chǎn)物中有效成分提取的方法9，它是利用微波的能量使物料中的目標(biāo)成分加速?gòu)臉悠坊|(zhì)溶出而達(dá)到分離目的，目前已經(jīng)應(yīng)用于環(huán)境

12、分析、植物化學(xué)和食品工業(yè)等方面 10。微波是一種介于紅外線和無(wú)線電波之間的電磁能，其波長(zhǎng)介于1mm至1m之間、頻率介于300MHz至300000 MHz之間11。微波輔助萃取的原理與我們通常所了解的熱傳導(dǎo)、熱傳遞是不一樣的，它是通過(guò)偶極子旋轉(zhuǎn)和離子傳導(dǎo)兩種方式里外同時(shí)加熱，在微波加熱過(guò)程中，被加熱介質(zhì)中分子的極性取向?qū)㈦S著外電場(chǎng)的變化而變化12。由于物質(zhì)內(nèi)部分子的極性，微波誘導(dǎo)偶極子轉(zhuǎn)動(dòng)或離子傳導(dǎo)快速將目標(biāo)化合物萃取出來(lái)13。萃取過(guò)程中微波輻射能穿透介質(zhì)，到達(dá)物料的內(nèi)部，使基質(zhì)內(nèi)部溫度迅速上升，增大萃取成分在介質(zhì)中的溶解度，從而在微波產(chǎn)生的電磁場(chǎng)中加速目標(biāo)物向溶劑的擴(kuò)散14-15。傳統(tǒng)熱提取主

13、要采取熱傳導(dǎo)、熱輻射等方式由外向內(nèi)進(jìn)行，相比之下，微波輔助萃取內(nèi)外同時(shí)加熱的方法具有快速高效、加熱均勻以及選擇性高等特點(diǎn)16。除此之外，設(shè)備較簡(jiǎn)單、能源消耗較低、不產(chǎn)生污染源、廢棄物較少和易于控制等也是微波輔助萃取的顯著優(yōu)勢(shì)。近些年，對(duì)微波輔助萃取技術(shù)的研究越來(lái)越多，也越來(lái)越深入，相關(guān)的應(yīng)用也隨著越來(lái)越成熟。當(dāng)前，微波輔助萃取技術(shù)具有萃取速度快、萃取質(zhì)量高等優(yōu)勢(shì)，既能降低生產(chǎn)時(shí)間、能源、溶劑的消耗以及廢物的產(chǎn)生17，也能提高生產(chǎn)率和萃取物的純度，現(xiàn)在主要應(yīng)用于天然產(chǎn)物提取中，尤其是天然色素、油脂、多糖等產(chǎn)品，相關(guān)工藝研究都取得了良好效果18。1.4 論文研究的主要內(nèi)容本文將研究運(yùn)用微波輔助萃取

14、迷迭香乙醇提取物的最佳工藝，通過(guò)控制改變?nèi)軇舛龋ㄒ掖迹?、微波功率、微波提取時(shí)間、料液比等四個(gè)因素中的一個(gè)變量，依次逐個(gè)條件進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，得出最佳值，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，進(jìn)行正交試驗(yàn)，最終獲得微波輔助提取迷迭香乙醇提取物的最佳提取工藝條件。同時(shí)，此次研究將采用清除DPPH自由基的能力對(duì)迷迭香乙醇提取物的抗氧化活性進(jìn)行檢測(cè)。2 材料與方法2.1 材料與設(shè)備2.1.1 主要材料迷迭香干葉（購(gòu)于青島百草香香草有限公司）2.1.2 主要試劑無(wú)水乙醇 分析純 煙臺(tái)三和化學(xué)試劑廠DPPH 分析純 上海西寶生物科技有限公司 BHT 分析純 河北百味生物科技有限公司BHA 分析純 上海浦鎮(zhèn)生物科技有限公司2

15、.1.3 主要設(shè)備及儀器EG720KG4-NA微波爐美的集團(tuán)有限公司KDM型可調(diào)控溫電熱套山東鄄城華魯電熱儀器有限公司AP-01P真空泵 SHB-III循環(huán)水式多用真空泵天津奧特賽恩斯儀器有限公司鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司HH-1數(shù)顯恒溫水浴鍋常州丹瑞實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備有限公司TU-1810型紫外可見分光光度計(jì)北京普析通用儀器有限責(zé)任公司SE602F型電子天平美國(guó)奧豪斯儀器（上海）有限公司2.2 實(shí)驗(yàn)方法2.2.1 原料預(yù)處理將迷迭香干葉放到樣品粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎處理，過(guò)40目篩，精確稱量得到100g樣品，加入12倍量的水，進(jìn)行水蒸氣蒸餾，4小時(shí)后，經(jīng)過(guò)濾得到固體殘?jiān)?，并將獲得的殘?jiān)诺?0干燥箱中干燥處

16、理，干燥至恒重，備用。2.2.2 迷迭香乙醇提取物的粗提取將干燥后的殘?jiān)砸掖既芤簽槿軇?，以微波爐產(chǎn)生的微波為輔助手段，提取迷迭香乙醇提取物。準(zhǔn)確稱量殘?jiān)?0g，加入乙醇溶液后，置于家用微波爐中進(jìn)行加熱浸提。將浸提得到的產(chǎn)物，使用適量活性炭在50水浴條件下，吸附脫色20min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，在50干燥箱中干燥，得到提取物粗品。微波浸提方法：輻射1min，冷卻10min后，再輻射1min，通過(guò)這種間隔輻射加熱的方式使得最終微波輻射總時(shí)間達(dá)到實(shí)驗(yàn)設(shè)定水平，從而防止料液爆沸。2.2.3 迷迭香乙醇提取物的分離與含量測(cè)定將得到的迷迭香乙醇提取物粗品，使用50熱水進(jìn)行洗滌過(guò)濾，過(guò)濾后將其放在50干燥箱

17、中進(jìn)行干燥，制得迷迭香乙醇提取物，稱重后計(jì)算乙醇提取物得率（提取物得率=提取物質(zhì)量/原料質(zhì)量，mg/g）。2.2.4 迷迭香乙醇提取物清除DPPH自由基能力的測(cè)定對(duì)提取得到的迷迭香乙醇提取物，使用DPPH法對(duì)樣品進(jìn)行抗氧化活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)19。（1）溶液的配制DPPH溶液的配制：稱取DPPH 39.4mg，加入無(wú)水乙醇定容至1L，利用超聲波充分震蕩搖勻，共處理5min，得到1.0×10-4mol·L-1的DPPH溶液，置于冰箱4下保存?zhèn)溆?。樣品溶液的配制：?zhǔn)確稱量樣品5.0mg，用乙醇定容至50mL，得到0.1mg/mL樣品溶液，再用乙醇分別質(zhì)量稀釋至0.08 mg/mL、0.

18、06 mg/mL、0.04 mg/mL、0.02mg/mL，備用。（2）清除DPPH自由基能力的測(cè)定使用移液管準(zhǔn)確移取已配置好的1.0×10-4mol·L-1的DPPH溶液3mL，加入到10mL試管中，隨后，加入無(wú)水乙醇1mL，將其震蕩搖勻，使用紫外可見分光光度計(jì)在519nm處測(cè)吸光度，得到值記為A0。取五只10mL試管，分別加入3mLDPPH溶液，再分別加入1mL不同濃度的樣品溶液、BHT、BHA對(duì)照液，充分震蕩使其均勻，放置到暗處反應(yīng)30min，然后使用紫外可見分光光度計(jì)在519nm處測(cè)定吸光值，記為AS，將有關(guān)數(shù)據(jù)帶入下列公式，計(jì)算得到DPPH自由基清除率Y。 清除率

19、Y（%）=（1-AS/A0）×100%2.2.5 實(shí)驗(yàn)流程（1） 確定最佳溶劑濃度稱取蒸出精油后的殘?jiān)?0g，分別加入濃度為20%、40%、60%、80%乙醇溶液200mL，在350w功率下進(jìn)行微波加熱浸提5min，提取迷迭香乙醇提取物，將浸提過(guò)濾后得到的產(chǎn)物，在50水浴環(huán)境下，使用適量活性炭吸附脫色20min，然后放到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，放到50干燥箱中進(jìn)行干燥處理，得到迷迭香乙醇提取物粗品。經(jīng)60熱水洗滌，過(guò)濾，得到脂溶性成分，在50下干燥，稱量后計(jì)算得率。（2） 確定最佳微波功率稱取蒸出精油后的殘?jiān)?0g，加入濃度為80%乙醇溶液200mL，調(diào)節(jié)微波爐功率，分別在210w

20、、350w、560w、700w功率下加熱萃取5min，提取迷迭香乙醇提取物，將浸提過(guò)濾后得到的產(chǎn)物，在50水浴環(huán)境下，使用適量活性炭吸附脫色20min，然后放到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，放到50干燥箱中進(jìn)行干燥處理，得到迷迭香乙醇提取物粗品。經(jīng)60熱水洗滌，過(guò)濾，得到脂溶性成分，在50下干燥，稱量后計(jì)算得率。（3） 確定最佳提取時(shí)間稱取蒸出精油后的殘?jiān)?0g，加入80%乙醇溶液200mL，分別在350w功率下進(jìn)行微波加熱浸提3min、5min、7min、9min，提取迷迭香乙醇提取物，將浸提過(guò)濾后得到的產(chǎn)物，在50水浴環(huán)境下，使用適量活性炭吸附脫色20min，然后放到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，

21、放到50干燥箱中進(jìn)行干燥處理，得到迷迭香乙醇提取物粗品。經(jīng)60熱水洗滌，過(guò)濾，得到脂溶性成分，在50下干燥，稱量后計(jì)算得率。（4） 確定最佳料液比稱取蒸出精油后的殘?jiān)?0g，分別加入80%乙醇溶液160mL、200mL、240mL、280mL，在350w功率下進(jìn)行微波加熱浸提5min，提取迷迭香乙醇提取物，將浸提過(guò)濾后得到的產(chǎn)物，在50水浴環(huán)境下，使用適量活性炭吸附脫色20min，然后放到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，放到50干燥箱中進(jìn)行干燥處理，得到迷迭香乙醇提取物粗品。經(jīng)60熱水洗滌，過(guò)濾，得到脂溶性成分，在50下干燥，稱量后計(jì)算得率。（5） 確定最佳工藝參數(shù)的正交試驗(yàn) 在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，

22、為綜合考慮溶液濃度、微波功率、提取時(shí)間、料液比對(duì)乙醇提取物得率的影響，采用L9（43）設(shè)計(jì)4因素3水平正交試驗(yàn)20。因素水平見表1。表1 正交試驗(yàn)因素水平表Table1 The factor and level of orthogonal test水平因素A溶劑濃度（%）B微波功率（W）C提取時(shí)間（min）D料液比（g：mL）14035031:1026056051:1238070071:14（6） 提取工藝驗(yàn)證試驗(yàn)準(zhǔn)確稱量蒸出精油后的殘?jiān)?0g，根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，在最佳提取工藝條件下，使用微波輔助提取，經(jīng)60熱水洗滌，過(guò)濾，在50下干燥制得迷迭香脂溶性乙醇提取物，重復(fù)實(shí)驗(yàn)三次，然后測(cè)定其得率，

23、并計(jì)算平均得率。3 結(jié)果與分析3.1 溶劑濃度對(duì)提取物得率的影響準(zhǔn)確稱取20g迷迭香殘?jiān)勰?，固定料液比?:10（g：mL），設(shè)置微波功率為350w，確定微波處理時(shí)間為5min，按照2.2.5中相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行操作，實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)為圖1。Fig.1 不同乙醇濃度對(duì)迷迭香乙醇提取物得率的影響Fig.2 Influence of different ethanol concentrate on the yield of extracts由圖1可以得到，在料液比固定不變的情況下，控制微波功率、微波提取時(shí)間等也保持不變時(shí)，迷迭香乙醇提取物的得率隨著乙醇濃度的增加而增加，且當(dāng)溶劑濃度達(dá)到80%時(shí)，迷迭

24、香脂溶性提取物得率達(dá)到最大值。鑒于微波輔助萃取的安全性考慮，認(rèn)為在微波輔助條件下提取迷迭香脂溶性提取物，濃度為80%乙醇溶液最佳。3.2 微波功率對(duì)提取物得率的影響準(zhǔn)確稱取20g迷迭香殘?jiān)勰?，固定料液比?:10（g：mL），確定溶劑濃度為80%，設(shè)置微波處理時(shí)間為5min，按照2.2.5中相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行操作，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2。圖2 不同微波功率對(duì)迷迭香乙醇提取物得率的影響Fig.2 Influence of different microwave pover on the yield of extracts由圖2可以得到，在料液比固定的情況下，控制溶劑濃度、微波提取時(shí)間等因素保持不變時(shí)，

25、迷迭香乙醇提取物的得率隨著微波功率的增加而增加，且當(dāng)微波功率達(dá)到最大功率時(shí)，即700w時(shí)，提取物得率達(dá)到最大值。因此，認(rèn)為在微波輔助條件下提取迷迭香脂溶性提取物，微波功率700w最佳。3.3 提取時(shí)間對(duì)提取物得率的影響準(zhǔn)確稱取20g迷迭香殘?jiān)勰?，固定料液比?:10（g：mL），確定溶劑濃度為80%，設(shè)置微波功率為700w，按照2.2.5中相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行操作，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3。圖3 不同提取時(shí)間對(duì)迷迭香乙醇提取物得率的影響Fig.3 Influence of different extraction time on the yield of extracts由圖3可以得到，在料液比固定不變

26、的情況下，控制微波功率、溶劑濃度等因素也保持不變時(shí)，調(diào)整微波處理時(shí)間進(jìn)行不斷增加，迷迭香脂溶性提取物的得率變化幅度較小，且當(dāng)微波處理時(shí)間為5min時(shí)，提取物得率達(dá)到最大值。因此，認(rèn)為在微波輔助條件下提取迷迭香脂溶性提取物，提取時(shí)間為5min最佳。3.4 料液比對(duì)提取物得率的影響準(zhǔn)確稱量20g迷迭香殘?jiān)勰潭ㄒ掖紳舛葹?0%，設(shè)置微波功率為700w，確定提取時(shí)間為5min，按照2.2.5中相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行操作，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖4。圖4 不同料液比對(duì)迷迭香乙醇提取物得率的影響Fig.4 Influence of different solvent/solid ratio on the yield

27、 of extracts由圖4可以得到，在乙醇濃度固定的情況下，控制微波功率、微波提取時(shí)間等因素保持不變時(shí)，使料液比不斷增加，迷迭香乙醇提取物的得率變化幅度較小，但當(dāng)料液比為1:12時(shí)，迷迭香乙醇提取物得率達(dá)到最大值。因此，認(rèn)為在微波輔助條件下提取迷迭香脂溶性提取物，料液比為1:12最佳。3.5 迷迭香乙醇提取物制備的正交試驗(yàn)根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，重點(diǎn)對(duì)溶劑濃度、微波功率、提取時(shí)間和料液比四個(gè)因素進(jìn)行三水平上的正交實(shí)驗(yàn)21，研究這4個(gè)因素對(duì)微波輔助提取迷迭香脂溶性提取物得率的影響，采用L9（43）正交表設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果分析見表2。表2 正交試驗(yàn)結(jié)果Table2 The results of ort

28、hogonal test編號(hào)因 素提取物得率（%）A溶劑濃度（%） B微波功率（w）C提取時(shí)間（min）D料液比（g：mL）11(40)1(350)1(3)1(1:10)11.321(40)2(560)2(5)2(1:12)12.231(40)3(700)3(7)3(1:14)12.142(60)1(350)2(5)3(1:14)12.652(60)2(560)3(7)1(1:10)12.962(60)3(700)1(3)2(1:12)13.873(80)1(350)3(7)2(1:12)13.383(80)2(560)1(3)3(1:14)12.793(80)3(700)2(5)1(1:10

29、)13.9k1k2k3R11.86713.10013.3001.43312.40012.60013.2670.86712.60012.90012.7670.30012.70013.10012.4670.633通過(guò)分析結(jié)果顯示，微波輔助提取迷迭香脂溶性提取物的F值分別為：FA=2.926，F(xiàn)B=1.000，F(xiàn)C=0.110，F(xiàn)D=0.498。因此，可知在影響迷迭香脂溶性提取物得率的四個(gè)因素中，溶劑濃度影響最大，微波功率和料液比分列二、三位，微波提取時(shí)間的影響程度在四個(gè)因素中最小，即：A>B>D>C，最佳組合是A3B3C2D2，即：乙醇濃度為80%，微波功率為700w，微波提取時(shí)

30、間為5min，料液比為1:12。3.6 迷迭香乙醇提取物制備的驗(yàn)證試驗(yàn)根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，得出最佳提取工藝的條件，即：乙醇濃度為80%，微波功率為700w，提取時(shí)間為5min，料液比為1:12條件下，進(jìn)行迷迭香脂溶性提取物微波輔助提取工藝驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果統(tǒng)計(jì)如表7。表3提取工藝驗(yàn)證試驗(yàn)Table3 Experiment for validating of Rosemary antioxidants序號(hào)123X提取物得率（%）13.313.513.213.3經(jīng)過(guò)三次驗(yàn)證試驗(yàn)，利用微波輔助技術(shù)提取迷迭香脂溶性提取物，在上述最佳提取工藝條件下，其平均得率可以達(dá)到13.3%。3.7 迷迭香脂溶性提取物清除

31、DPPH自由基能力測(cè)定按照2.2.4中所示的方法，對(duì)微波輔助提取的迷迭香脂溶性提取物樣品的氧化活性進(jìn)行測(cè)定，以其清除DPPH自由基的能力為標(biāo)準(zhǔn)，并以樣品濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)，以DPPH自由基清除率（%）為縱坐標(biāo)，繪制自由基清除曲線，結(jié)果如圖1所示。圖5 DPPH自由基清除率曲線Fig.5 Clearance rate curve of DPPH freeradical如圖5所示，可直觀得到迷迭香脂溶性提取物樣品清除DPPH自由基能力較強(qiáng),且其抗氧化活性優(yōu)于BHT，與BHA接近。因此，實(shí)驗(yàn)認(rèn)為迷迭香脂溶性提取物具有優(yōu)良的抗氧化活性。4 討論本次研究的主要內(nèi)容就是在傳統(tǒng)有機(jī)溶劑提取的基礎(chǔ)上，

32、利用微波輔助提取迷迭香脂溶性提取物。首先，本實(shí)驗(yàn)中開展了四組單因素實(shí)驗(yàn)，初步確定了溶劑濃度、微波功率、微波提取時(shí)間和料液比等4個(gè)因素對(duì)于微波輔助法提取迷迭香脂溶性提取物的影響。之后，在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，通過(guò)正交試驗(yàn)，研究上述4個(gè)因素對(duì)于迷迭香脂溶性提取物微波輔助提取工藝的影響。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，各因素影響迷迭香脂溶性提取物得率的程度大小為A>B>D>C，即影響因素最大的為提取溶劑乙醇的濃度，微波功率和提取時(shí)間分列第二、第三，影響程度最小的因素是料液比。進(jìn)而通過(guò)對(duì)結(jié)果的分析發(fā)現(xiàn)，最佳的提取工藝組合為A3B3C2D2，即：乙醇濃度為80%，微波功率為700w，提取時(shí)間為5min，料液比

33、為1:12。經(jīng)過(guò)三次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，可得到在上述最佳提取工藝條件下，迷迭香脂溶性提取物的平均得率可以達(dá)到13.3%。最后，在最佳提取工藝的基礎(chǔ)上，通過(guò)清除DPPH自由基能力的測(cè)定實(shí)驗(yàn)，了解迷迭香脂溶性提取物的抗氧化活性，并于食品、化工領(lǐng)域經(jīng)常使用的抗氧化劑BHT、BHA進(jìn)行比較。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，迷迭香脂溶性提取物的活性高于BHT，與BHA接近，因此認(rèn)為迷迭香脂溶性提取物具有優(yōu)良的抗氧化活性，并且可以廣泛的應(yīng)用于食品、日用化工、藥品等領(lǐng)域。由于實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)時(shí)間限制，本實(shí)驗(yàn)僅是針對(duì)迷迭香脂溶性提取物的微波輔助萃取工藝和抗氧化活性進(jìn)行了初步的研究，期盼實(shí)驗(yàn)結(jié)果能夠給大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)提供參考依據(jù)。致謝大學(xué)四年的時(shí)

34、光匆匆而過(guò)，四年的大學(xué)生活讓我不僅收獲了豐富的專業(yè)知識(shí)，增強(qiáng)了學(xué)習(xí)研究能力，還學(xué)會(huì)了很多為人處世的道理，這都得益于老師、同學(xué)、朋友和家人的幫助與教導(dǎo)。在寫論文和論文答辯之際，我謹(jǐn)向曾指導(dǎo)、幫助、支持我的老師、同學(xué)、朋友及家人們致以真誠(chéng)的謝意！首先，我要感謝自己的母校青島農(nóng)業(yè)大學(xué)。正是在青島農(nóng)業(yè)大學(xué)這片肥沃的土地上，讓我們不斷汲取成長(zhǎng)的養(yǎng)料；正是在青島農(nóng)業(yè)大學(xué)這個(gè)廣闊的舞臺(tái)上，讓我們不斷綻放自己的光芒。同時(shí)，也要感謝食品科學(xué)與工程學(xué)院，為我們營(yíng)造了濃厚的學(xué)習(xí)氛圍，讓我們不斷受到知識(shí)的熏陶，促進(jìn)我們個(gè)人的全面成長(zhǎng)。其次，我要感謝自己的導(dǎo)師張雙靈老師以及張志偉老師。不論是論文的選題，還是開展實(shí)驗(yàn)；不

35、論是論文的定稿，還是疑惑的解答都是在導(dǎo)師的悉心指導(dǎo)中進(jìn)行的。兩位老師，嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的治學(xué)態(tài)度、孜孜不倦的求學(xué)品質(zhì)、誨人不倦的育人風(fēng)格和積極樂(lè)觀的認(rèn)識(shí)態(tài)度，都給予我莫大的鼓舞，在此，對(duì)我的導(dǎo)師張雙靈老師和張志偉老師致以由衷的感謝和敬意。同時(shí)，我還要感謝自己的班主任孫丙高老師，對(duì)學(xué)生的嚴(yán)格要求與朋友般的關(guān)懷，讓我受益匪淺?；叵肫鹚哪甑拇髮W(xué)生活，對(duì)食品質(zhì)量與安全專業(yè)的理解由淺入深，這都離不開老師們的培養(yǎng)。在此，希望老師們?cè)诮窈蟮墓ぷ骱蜕钪猩眢w健康，一切順利。 再次，在這里我還要特別感謝我的父母。他們不僅給予我生命，讓我擁有了追求知識(shí)的資本和基礎(chǔ)，同時(shí)正是他們辛勤的勞動(dòng)，給予我大學(xué)生活的物質(zhì)支持。更為重要的是，正是他們的教育，讓我不斷成長(zhǎng)成才。在我踏上工作崗位之后，我一定會(huì)努力工作，報(bào)答父母的養(yǎng)育之恩。同時(shí)，我還要感謝在成長(zhǎng)及求學(xué)過(guò)程中，陪伴著我的同學(xué)和朋友，正是他們的陪伴與關(guān)懷，給予了我生活上的幫助，學(xué)習(xí)上的激勵(lì)。我們?cè)谏钌匣ハ鄮椭?，在學(xué)習(xí)中互相激勵(lì)，四年的生活讓我們積淀了深厚的情誼，在此，我也祝福我的同學(xué)和朋友在今后的生活、學(xué)習(xí)和工作中，都能夠不斷超越，實(shí)現(xiàn)自己的夢(mèng)想。最后，我還要感謝各位領(lǐng)導(dǎo)和老師在百忙之際仍要對(duì)我的論文進(jìn)行修改工作，希望您能對(duì)我的論文進(jìn)行評(píng)價(jià)和批評(píng)，對(duì)論文中出現(xiàn)的不足之處予以指正，不勝感激