二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠降糖作用研究_逯鳳肖(1)

1、中藥藥理與臨床 2016; 32( 3)45and immunolocation in prion diseases Biochem Soc Trans，2002; 30 ( 4) 387 3917 Fu H，Subramanian ，Masters SC 14-3-3 proteins: structure，func-tion and regulation Annu ev Pharmacol Toxicol，2000; 40617 6478Kleppe ，Toska K，Haavik J Interaction of phosphorylated tyrosinehydroxylase wi

2、th 14-3-3 proteins: evidence for a phosphoserine 40-dependentassociation J Neur-ochem，2001; 77( 4) 1097 11079Ouyang LF，Wang ZL，Dai JG，et al Determination of total ginsenosidesin ginseng extracts using charged aerosol detection with post-column compen-sation of the gradient Chin J Nat Med，2014; 12 (

3、11) 857 86810Zhou DH，Zhao F，Nisbet AJ，et al Comparative proteomic analysisof different Toxoplasma gondii genotypes by two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis combined with mass spectrometry Electrophore-sis，2014; 35( 4) 533 54511Leung SM，Pitts L A novel approach using MALDI-TOF /

4、 TOF massspectrometry and prestructured sample supports ( AnchorChip Technology) for proteomic profiling and protein identification Methods Mol Biol，2008; 441 57 7012Macht M，Asperger A，Deininger SO Comparison of laser-induced dis-sociation and high-energy collision-induced dissociation using matrix-

5、assistedlaserdesorption / ionization tandemtime-of flight ( MALDI-TOF / TOF ) forpeptide and protein identificationapid Commun Mass Spectrom，2004; 18( 18) 2093 210513Cooper B the problem with peptide presumption and low Mascot sco-ringJ Proteome es，2011; 10( 3) 1432 143514Brosch M，Yu L，Hubbard T，et

6、al Accurate and sensitive peptide i-dentification with Mascot PercolatorJ Proteome es，2009; 8( 6) 3176 318115Matsuda LA，Lolait SJ，Brownstein MJ，et al Structure of a cannabi-noid receptor and a functional expression of the cloned cDNA Nature，1990;346561 56416石楸鳴 人參皂苷的藥理作用研究進(jìn)展 中國(guó)藥房，2010; 31 2967 29681

7、7 李芳，馬風(fēng)杰，丁緒平 人參總皂苷對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)血管單元的保護(hù)作用 濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014; 36( 1) 76 7918 賴?yán)?，潘偉男，鄧水?14-3-3 蛋白家族新機(jī)制和新功能研究亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2014; 10( 2) 58 59 19 潘偉男，陳臨溪 14-3-3 蛋白 中華醫(yī)藥研究雜志，2006; 6 ( 10) 1103 110620 伍家發(fā)，吳 喬 14-3-3 蛋白家族的調(diào)控機(jī)制和生物學(xué)功能 中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào)，2005; 27 101 10421 萬(wàn)曦娣，王 楓，黃歐平 14-3-3 蛋白在人類(lèi)疾病中的研究 南昌大學(xué)學(xué)報(bào)( 醫(yī)學(xué)版) ，2013; 53(

8、4) 92 9522 鄭 欣，胡 波，高順祥，等 生物膜干涉法研究 STX 與適配體間的相互作用 中國(guó)生化藥物雜志，2014; 9( 34) 17 1923 王 靜，張雅雅，劉 濤，等 姜黃素對(duì) Hsp90 的結(jié)合及抑制作用 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2015; 23( 1) 32 35esearch of ginseng total saponins pull down the proteins in brainChen Feiyan，Ouyang Liufeng ，Jiang Yucui，Gu Ling，Chen Cuihua，Xu Yan，Zhao Yunan( esearch Center of

9、Basic Medical College，Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing210023)Objective: To predict the targets of ginseng total saponin in brain Methods: In this study，We adopt direct affinity pull down the pro-teins in brain which may interact with ginseng saponins Then，the unknown proteins were iden

10、tified using the MALDI-TOF / TOF after the SDS-PAGE gel electrophoresis separation And the direct affinity chromatography using ginseng total saponins as ligands was adopted to dis-cover the protein targets of ginseng saponin in brain，on the other hand to explore whether the direct affinity chromato

11、graphy is feasible for the finding of small molecular targets Using the BLI technique，the affinity between 14-3-3 protein and ginsenosides was determined to further confirm whether 14-3-3 protein has the direct interaction with ginsenosides，and what kind of ginseng saponin individual has the stronge

12、st af-finity with 14-3-3 protein esults: It showed that five predict proteins were acquired by SDS-PAGE and mass spectrometry espectively:the 14-3-3 protein，actin，creatine kinase B，ATP synthetase and unknown proteinKinetics analysis showed that the affinity ( KD) betweenprotopanoxadiol and 14-3-3 pr

13、otein is 7 8 10-4 M Meanwhile，the affinity ( KD)between panaxatriol and 14-3-3 protein is 5 62 10-4 MConclusion: The 14-3-3 protein is one of the targets for brain of ginseng total saponins，and that protopanoxadiol，panaxatriol could be activa-tors of 14-3-3 proteinKey wordsginseng total saponins( 人參

14、皂苷) ; pull down; mass spectrometry; 14-3-3 protein; protopanoxadiol; panaxatriol二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠降糖作用研究*逯鳳肖，王恩花，秦湉，郁建平( 貴州大學(xué)藥學(xué)院，貴陽(yáng)550025)摘 要 目的: 研究藤茶中二氫楊梅素的降糖作用。方法: 一次性尾靜脈注射四氧嘧啶( 75mg / kg) 建立糖尿病小鼠模型，以二甲雙胍為陽(yáng)性對(duì)照，研究二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠的體重、攝食量、飲水量、空腹血糖、糖耐量、糖原、抗氧化能力、血清胰島素和胰* 貴州藤茶資源及加工應(yīng)用示范( 黔科合 NY20113094 號(hào))46中藥藥理與臨床 2

15、016; 32( 3)腺組織的影響。結(jié)果: 二氫楊梅素 100、150 mg / kg 對(duì)四氧嘧啶致病小鼠能極顯著降低血糖; 提高糖尿病小鼠的糖耐量，減少四氧嘧啶對(duì)胰島的損害，促進(jìn)糖尿病小鼠肝糖原的合成和胰島素的分泌; 提高糖尿病小鼠的抗氧化能力。結(jié)論: 二氫楊梅素對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠有降糖作用，其降糖機(jī)制可能是通過(guò)提高抗氧化作用減輕四氧嘧啶對(duì)肝臟和胰島 B 細(xì)胞的損傷，促進(jìn)了肝糖原和胰島素的合成。關(guān)鍵詞二氫楊梅素; 糖尿病; 血糖; 糖原; 抗氧化DOI:10.13412/ki.zyyl.2016.03.012二氫楊梅素來(lái)源廣泛，是藤茶的主要活性成分，藤茶是葡萄科蛇葡萄屬的藤本植物，學(xué)名為顯

16、齒蛇葡萄 ( Ampelopsis grossedentata) ，廣泛分布在我國(guó)湖北，湖南，貴州，廣西等省1，2。前人的研究證明藤茶總黃酮對(duì)糖尿病模型具有較好的區(qū)3。本研究基于藤茶總黃酮的降糖作用降血糖作用，且毒性小進(jìn)一步研究二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠血糖的影響。1 材料和方法1 1 試驗(yàn)藥物 二氫楊梅素為白色粉末，實(shí)驗(yàn)室自制，經(jīng)HPLC 測(cè)定，色譜條件: 色譜柱為 Diamonsil C18 ( 250mm 46mm，5m，Dikma) ; 流動(dòng)相: 甲醇-0 2% 磷酸水溶液( 25: 75 v /v) ; 流速: 1 0ml / min ; 檢測(cè)波長(zhǎng): 291 nm; 柱溫: 35 ; 進(jìn)

17、樣量: 20l。) ，純度 95 1% ，臨用前用生理鹽水配制為所需濃度的; 二氫楊梅素標(biāo)品 HPLC 98% ，批號(hào): 20120916，上海源葉生物科技有限公司。圖 1二氫楊梅素標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖( 保留時(shí)間 3 821min)圖 2 二氫楊梅素樣品色譜圖( 保留時(shí)間 3 814min)二甲雙胍為北京京豐制藥有限公司產(chǎn)品。1 2動(dòng)物 KM 小鼠，清潔級(jí)，雄性，體重 23 25 g，由貴州醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許 可證號(hào): SCXK( 黔) 2012-0001。1 3試劑 四氧嘧啶( Alloxan) 為 Sigma 產(chǎn)品。血糖含量測(cè)定試劑盒和糖原測(cè)定試劑盒為蘇州科銘生物技術(shù)有限公

18、司產(chǎn)品，胰島素 ELISA 試劑盒、超氧化物歧化酶( SOD) 、丙二醛( MDA) 和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶( GSH-Px) 測(cè)定試劑盒為上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司產(chǎn)品。1 4 儀器 TU-1901 雙光束紫外分光光度計(jì)為北京普析通用儀器有限責(zé)任公司產(chǎn)品。酶標(biāo)儀為芬蘭 Labsystems Multiskan MS 352 型號(hào)。日本島津液相色譜儀( SPD-20A 檢測(cè)器、LC-20AT二元泵、LCsolution 色譜工作站) 。1 5 方法4，5，雄性小鼠，普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng) l參照文獻(xiàn)周，隨機(jī)取出 10 只作為正常對(duì)照組，其余小鼠禁食不禁水 12 h 后，一次性尾靜脈注射四氧嘧啶 75

19、mg / kg，72 h 后尾靜脈取血測(cè)小鼠空腹血糖，把血糖值高于 16 7 mmol / L 的小鼠定為糖尿病鼠。糖尿病鼠按血糖值隨機(jī)分為 5 組: 模型對(duì)照組，二氫楊梅素 50、100、150 mg / kg 和二甲雙胍 150 mg / kg。分別給予生理鹽水，二氫楊梅素和二甲雙胍每天灌胃一次，連續(xù) 4 周。實(shí)驗(yàn)期間，每周測(cè)量 1 次小鼠的體重，并觀察動(dòng)物的一般情況，每周末自小鼠尾靜脈取血，用葡萄糖氧化酶法測(cè)定血糖水平，動(dòng)態(tài)觀測(cè)空腹血糖的變化，最后一周記錄小鼠每天的進(jìn)食量和飲水量。給藥第 4 周，進(jìn)行糖耐量實(shí)驗(yàn): 各實(shí)驗(yàn)組小鼠禁食 8 h) 后，以 25 g / kg 劑量灌服葡萄糖，測(cè)

20、定給葡萄糖前( 0 h) 及給葡萄糖后0 5 h) ，1 h 和 2 h) 的血糖值，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)摘眼球取血，處死動(dòng)物后立即解剖取后肢骨骼肌和肝組織，按要求做成勻漿，按試劑盒方法測(cè)定肌糖原、肝糖原、SOD、MDA、GSH-Px 和胰島素，取小鼠胰腺，用 10% 福爾馬林溶液固定，做胰腺組織切片，且用 HE 染色，形態(tài)觀察并計(jì)算 4X 視野中胰島個(gè)數(shù)。2 結(jié)果2 1 二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠體重、攝食量及飲水量的影響由表 1 可知，糖尿病小鼠體重明顯下降，灌胃 4 周后，二氫楊梅素各劑量組和二甲雙胍都能顯著改善糖尿病小鼠體重減輕的現(xiàn)象，其中 100、150 mg / kg 的二氫楊梅素作用極其顯著。

21、由表 2 可知，糖尿病小鼠的攝食飲水量明顯升高，二氫楊梅素和二甲雙胍能明顯減少糖尿病小鼠的飲水量，但二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠的攝食量影響不顯著，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠多飲癥狀有所改善。表 1二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠體重的影響 ( x珋 s，n = 10)組別劑量體重( g)( mg / kg)01234( 周)正常對(duì)照29 8 1 431 3 1 334 4 1 136 4 1 440 5 1 2模型對(duì)照27 1 1 226 9 0 925 2 1 124 1 0 722 6 0 7二甲雙胍15026 7 0 928 0 0 627 8 0 727 9 0 9*26 0 1 1*

22、二氫楊梅素5026 5 0 926 5 1 127 5 1 126 9 1 426 5 1 6*二氫楊梅素10026 7 1 128 0 1 429 2 1 431 0 1 332 7 1 6二氫楊梅素15027 0 0 828 5 0 729 6 0 831 8 0 836 1 0 8與模型對(duì)照組比較 *P 0 05， P 0 01( 下同)中藥藥理與臨床 2016; 32( 3)47表 2與糖尿病小鼠攝食量及飲水量的影響 ( x珋 s，n = 10)組別劑量攝食量飲水量( mg / kg)( g / kg / d)( ml / kg / d)正常對(duì)照210 5 74232 9 9 6模型對(duì)

23、照401 3 11 91108 55二甲雙胍150369 4 96*872 5 33 4二氫楊梅素50377 4 87984 5 29 2二氫楊梅素100383 1 62962 2 21 3二氫楊梅素150379 4 10 9967 5 31 32 2二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠血糖和糖耐量的影響由表 3可知，灌胃 1 周后，二氫楊梅素 150 mg / kg 對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠有顯著的降糖作用，灌胃 2 周后，二氫楊梅素 150 mg / kg 和二甲雙胍均能降低糖尿病小鼠血糖，灌胃 3 4 周后，二氫楊梅素100、150 mg / kg 劑量和二甲雙胍均對(duì)糖尿病小鼠有極顯著的降糖作用。由表 3

24、 和圖 1 可知 100、150 mg / kg 二氫楊梅素和二甲雙胍均能極顯著減少糖耐量曲線下面積，表明一定劑量二氫楊梅素能提高糖尿病小鼠的糖耐量。表 3 二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠空腹血糖及糖耐量的影響 ( x珋 s，n = 10)組別劑量血糖 ( mmol / L)糖耐量( mg / kg)01234( 周)( mmolh / L)正常對(duì)照5 24 0 25 03 0 35 10 0 35 47 0 25 25 0 327 08 1 8模型對(duì)照25 46 1 130 65 2 129 74 1929 98 0 928 58 1 2108 61 3 1二甲雙胍15025 84 1 227 33

25、 1 725 51 17*23 75 1 521 51 1 287 25 2 8二氫楊梅素5025 93 1 228 49 1 627 64 1527 53 1 227 74 1 2109 14 2 4二氫楊梅素10024 77 1 227 05 1 725 67 1623 28 1 321 53 1 892 45 3 6二氫楊梅素15025 68 0 924 97 2 1*25 07 18*21 27 1 418 70 0 881 59 2 8圖 3二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠糖耐量的影響2 3二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠肝糖原和肌糖原的影響由表3 可知，糖尿病小鼠的肝糖原和肌糖原均明顯減少，二氫楊梅素

26、能促進(jìn)糖尿病小鼠肝糖原的合成，與模型對(duì)照組相比 100 mg / kg 二氫楊梅素效果顯著，150 mg / kg 二氫楊梅素效果極顯著。對(duì)肌糖原有一定的增加作用，但效果不顯著。表 4二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠肝糖原和肌糖原的影響 ( x珋 s，n =10)組別劑量肝糖原肌糖原( mg / kg)( mg / g)( mg / g)正常對(duì)照10 1 0 51 81 007模型對(duì)照7 5 0 41 09 011二甲雙胍1508 6 0 4*1 24 007二氫楊梅素507 7 0 31 20 016二氫楊梅素1008 6 0 3*1 21 015二氫楊梅素1509 8 0 31 35 0092 4

27、二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠抗氧化作用的影響由表 5 可知，糖尿病對(duì)照組小鼠血清中 SOD 活性有所下降，但與正常組相比無(wú)顯著差異，MDA 含量極顯著升高，GSH-Px 活性高極顯著降低，說(shuō)明糖尿病小鼠血清中自由基產(chǎn)生增加，抗氧化酶活性降低，抗氧化水平降低。灌胃 100、150 mg / kg 二氫楊梅素均能顯著減少糖尿病小鼠血清中過(guò)氧化物 MDA 含量，增加 GSH-Px 活性，與糖尿病對(duì)照組有極顯著差異，但二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠血清中 SOD 無(wú)顯著影響。表 5 二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠血清 SOD、MDA 和 GSH-Px 的影響 ( x珋 s，n = 10)組別劑量SODMDAGSH-Px(

28、mg / kg)( U / ml)( nmol / L)( U / L)正常對(duì)照127 2 3 86 7 0 1376 11 413模型對(duì)照124 7 2 67 4 0 2322 40 533二甲雙胍150125 6 2 67 4 0 2331 20 736二氫楊梅素50126 8 4 37 2 0 2337 78 605二氫楊梅素100125 9 3 76 8 0 2*372 03 614二氫楊梅素150127 0 2 96 7 0 2374 61 592由表 6 可知，糖尿病對(duì)照組小鼠肝臟中 SOD 活性明顯下降，MDA 含量極顯著升高，GSH-Px 活性高極顯著降低，說(shuō)明糖尿病小鼠肝臟的

29、抗氧化水平降低，通過(guò)灌胃 100、150 mg / kg 二氫楊梅素能提高糖尿病小鼠肝臟中 SOD 活性，降低 MDA 含量，與糖尿病對(duì)照組有極顯著差異，但對(duì) GSH-Px 活性無(wú)顯著影響。 50 mg / kg 二氫楊梅素能增加 GSH-Px 活性，與糖尿病對(duì)照組有極顯著差異，但對(duì) SOD 活性和 MDA 含量無(wú)顯著影響。表 6二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠肝臟 SOD、MDA 和 GSH-Px 的影響( x珋 s，n = 10)組別劑量SODMDAGSH-Px( mg / kg)( U / mg)( mmol / g)( U / g)正常對(duì)照1 14 0 0376 08 1 635 10 0 04

30、模型對(duì)照0 97 0 0387 77 1 514 67 0 08二甲雙胍1501 01 0 0382 92 2 094 71 0 06二氫楊梅素501 03 0 0283 77 1 895 02 0 06二氫楊梅素1001 09 0 0277 17 1 954 83 0 09二氫楊梅素1501 09 0 0276 18 1 454 73 0 082 5 二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠血清胰島素的影響 二氫楊梅素 100、150 mg / kg 能極顯著提高糖尿病小鼠血清中胰島素含量，50 mg / kg 劑量無(wú)明顯效果，結(jié)果見(jiàn)表 7。表 7二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠血清胰島素的影響 ( x珋 s，n =

31、10)組別劑量血清胰島素( mg / kg)( mIU / L)正常對(duì)照7 5 0 1模型對(duì)照5 4 0 2二甲雙胍1505 2 0 2二氫楊梅素505 4 0 2二氫楊梅素1006 0 0 2二氫楊梅素1506 1 0 248中藥藥理與臨床 2016; 32( 3)2 6二氫楊梅素對(duì)糖尿病小鼠胰腺組織病理形態(tài)的影響正常小鼠的胰腺中胰島數(shù)目 12 0 個(gè)，輪廓清晰，體積較大，呈橢圓形，胰島細(xì)胞排列整齊，無(wú)細(xì)胞破損現(xiàn)象; 模型對(duì)照組小鼠胰腺中胰島數(shù)目 7 0 個(gè)，輪廓模糊，無(wú)固定形態(tài)，胰島細(xì)胞減少且有組織中有水腫; 二甲雙胍組小鼠胰腺中的胰島數(shù)目 7 5 個(gè)，無(wú)固定形態(tài)，但相較于模型對(duì)照組胰島中

32、的細(xì)胞數(shù)目有所增多; 二氫楊梅素 100、150 mg / kg 劑量組小鼠胰腺中胰島數(shù)目 10 5 個(gè)，部分胰島恢復(fù)橢圓狀，輪廓清晰，細(xì)胞排列緊密，但仍有部分胰島萎縮成無(wú)定型狀，表明二氫楊梅素能減輕四氧嘧啶對(duì)小鼠胰島的損害。3 討論四氧嘧啶是特異性的胰島 B 細(xì)胞毒劑，選擇性作用于胰島 B 細(xì)胞，通過(guò)超氧自由基破壞胰島 B 細(xì)胞，使胰島 B 細(xì)胞分泌6 而長(zhǎng)期處于高血糖狀態(tài)下的小鼠胰島素減少，產(chǎn)生高血糖由于氧化應(yīng)激作用，進(jìn)一步導(dǎo)致小鼠機(jī)體抗氧化防御體系的失衡，引發(fā)一系列糖尿病并發(fā)癥。因此小鼠體內(nèi)抗氧化機(jī)制的失7 12衡與糖尿病及其并發(fā)癥的產(chǎn)生密切相關(guān)。增加糖的利用和轉(zhuǎn)化是目前降糖藥物降糖的機(jī)

33、制之一，其主要是通過(guò)促進(jìn)胰島素的分泌，增強(qiáng)胰島素的作用來(lái)實(shí)現(xiàn)，糖的利用和轉(zhuǎn)化的主4要去向是合成糖原 。因此本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定抗氧化指標(biāo)、糖原含量和血清胰島素含量初步研究二氫楊梅素降糖機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)一次性尾靜脈注射四氧嘧啶 75 mg / kg 建立的糖尿病模型，成模動(dòng)物空腹血糖均大于 16 7 mmol / L，且在 4 周內(nèi)穩(wěn)定。在以二氫楊梅素 100、150 mg / kg 連續(xù)灌胃 4 周后，糖尿病小鼠空腹血糖極顯著下降，且 150 mg / kg 劑量組降糖速度比二甲雙胍組( 150 mg / kg) 快，并能極顯著改善糖尿病小鼠的糖耐量、多飲和體重減輕癥狀。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定血清和肝臟中

34、SOD 活性、MDA 含量和 GSH-Px 活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素100、150 mg / kg 能顯著降低血清中 MDA 含量，增強(qiáng) GSH-Px 活性，提高肝臟中 SOD 活性，降低 MDA 含量。提示二氫楊梅素100、150 mg / kg 均能提高糖尿病小鼠的抗氧化能力。二氫楊梅素 50 mg / kg 能極顯著提高肝臟中 GSH-Px 活性，但不能顯著降低血糖，提示提高肝臟中 GSH-Px 活性可能與二氫楊梅素的降糖作用無(wú)關(guān)。此外，二氫楊梅素 100、150 mg / kg 組均能明顯促進(jìn)肝糖原合成，增加血清中胰島素含量。因此，二氫楊梅素可能是通過(guò)提高抗氧化作用減輕四氧嘧啶對(duì)肝臟和

35、胰腺的損傷，促進(jìn)了肝糖原和胰島素的合成，從而起到降糖作用。參考文獻(xiàn)1 中國(guó)科學(xué)院研究所 中國(guó)高等植物圖鑒 科學(xué)出版社 第一版，1982 353 3542 鄭成，陳靜，郭麗娜，等 二氫楊梅素的降血糖及保護(hù)腎臟損傷效果研究 精細(xì)化工，2008; 10( 25) 967 969 3 鐘正賢，覃潔萍，周桂芬，等 廣西藤茶總黃酮降血糖的實(shí)驗(yàn)研究 中國(guó)中藥雜志，2002; 27( 9) 687 689 4 盧 威 秦曉改，王躍虎，等 二氫楊梅素對(duì)四氧嘧啶性糖尿病小鼠的降糖作用研究 中藥藥理與臨床，2011; 27( 4) 15 17 5 張 潔，韓愛(ài)萍，丁選勝 淫羊藿總黃酮對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠降糖作用的研

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