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1、一、ddPCR是什么 ddPCR是一種新形的絕對(duì)定量PCR，其特點(diǎn)是靈敏度高、定量精確、檢測(cè)的線性范圍寬、特異性好、費(fèi)用適中，是一種很有前途的分子定量檢測(cè)手段。 微滴數(shù)字PCR的原理，就是把原來一整管的PCR反應(yīng)液，分散成幾萬個(gè)，甚至幾百萬個(gè)極微小的液滴。這些小微滴同時(shí)進(jìn)行PCR反應(yīng)，這樣就可以計(jì)算出原來的反應(yīng)液當(dāng)中，有多少個(gè)目標(biāo)基因的拷貝了。二、ddPCR的發(fā)展1999已經(jīng)以數(shù)字PCR為名字發(fā)表了文章，2011年底數(shù)字PCR進(jìn)入一個(gè)商業(yè)化的，一些公司也是這個(gè)時(shí)候的產(chǎn)生。2012年的一片Nature綜述提到了數(shù)字PCR可以為科研臨床帶來的變化和提供的一些服務(wù)。普通的PCR熒光定量PCRddPC

2、R1、定量方式是一種絕對(duì)的定量方式；2、對(duì)PCR的擴(kuò)增效率以及他對(duì)PCR抑制劑的要求都比第二代的PCR要低；3、不需要任何的標(biāo)準(zhǔn)品；4、在實(shí)驗(yàn)結(jié)果方面，在精確度、靈敏度和重復(fù)性一個(gè)本質(zhì)的提升。三、ddPCR操作流程四、ddPCR的應(yīng)用1、基因表達(dá)檢查 基因表達(dá)檢測(cè)，現(xiàn)在用的最廣的是熒光定量PCR。但是存在許多弊端：首先制作一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線，其次是要拿到各個(gè)樣品，包括對(duì)照組、樣品組所有基因的CT值。在低拷貝的情況下我們要做多板分析時(shí)，我們要做板間比較還要做一些板間的質(zhì)控，來矯正掉不同板與板的技術(shù)誤差。 而ddPCR可以避免這些缺點(diǎn)。2、腫瘤的檢查（腫瘤的突變序列，腫瘤的拷貝 數(shù)突變的檢查；3、二代測(cè)序的定量和二代測(cè)

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