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文檔簡介

1、蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留速測技術果蔬農(nóng)殘速測卡果蔬農(nóng)殘檢測卡農(nóng)藥殘留速測卡對蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留速測技術的發(fā)展具有重要意義。一、蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留速測原理及特點(一)蔬菜、水果中用于快速檢測的農(nóng)藥有兩類一是有機磷類農(nóng)藥,有甲拌磷( 3911)、對硫磷( 1605)、甲胺磷等;二是氨基甲酸脂類農(nóng)藥,有呋喃丹、抗蚜威、西維因等。有機磷類農(nóng)藥和氨基甲酸脂類農(nóng)藥在我國使用比較廣泛, 這類農(nóng)藥中有不少為高殘留、高毒農(nóng)藥。有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的快速檢測方法,不受時間、地點、場合等條件限制,甚至普通消費者也能夠操作使用,有利于及時發(fā)現(xiàn)問題、采取措施,控制高殘留農(nóng)藥蔬菜的攝入,降低農(nóng)藥中毒發(fā)生率,保障消費者

2、食菜安全。(二)蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留速測原理有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留可以和人體內(nèi)神經(jīng)傳導物質膽堿脂酶相結合,即抑制酶的生理活性,引起神經(jīng)傳導過程受到阻礙,出現(xiàn)中毒癥狀,輕則引起慢性頭疼、記憶力減退等癥狀,重則導致呼吸困難,甚至死亡。蔬菜中農(nóng)藥殘留快速檢測是基于 “在一定條件下, 有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用, 其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關” 這一原理,提取制備了膽堿脂酶作為檢測試劑, 根據(jù)酶的活性變化程度來測定蔬菜中殘留的農(nóng)藥。正常情況下, 膽堿酯酶(酶)催化乙酰膽堿(底物)水解,其水解產(chǎn)物(膽堿)與顯色劑反應,產(chǎn)生黃色物質,用分光光度計在 412nm處測定吸光度隨

3、時間的變化值, 計算出抑制率, 通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。基本的化學反應式:酶( 膽堿酯酶) + 底物(乙酰膽堿) 中間產(chǎn)物(膽堿)中間產(chǎn)物(膽堿) +顯色試劑 黃色物質基本檢驗機理顯色劑抑制率 50%,沒有或少部分大量中間產(chǎn)物溶液呈黃色活性被抑制,合格酶顯色劑抑制率 50%,大部分活性部+少量中間產(chǎn)物溶液呈 淡黃樣分被抑制,不合格本+底顯色劑物抑制率 100%,無活性或嚴重無中間產(chǎn)物溶液呈無色超標,不合格抑制率的概念抑制率指的是農(nóng)藥對酶抑制程度的指標。其計算公式為:I=(A0 - At)/ A0*100%為抑制率A0為 3 分鐘對照溶液吸光度的變化

4、At為 3 分鐘樣品溶液吸光度的變化二、速測儀檢測原理、結構前面介紹過,農(nóng)藥殘留速測是在412nm處測定反應產(chǎn)物吸光度隨時間的變化值,因此農(nóng)殘速測儀即是分光光度計的一種新的形式。(一)農(nóng)殘速測儀基本原理光源發(fā)出的光經(jīng)過單色器時被變成平行的單色光,當單色光通過均勻的溶液時,光的一部分被溶液吸收,在吸收層厚度(比色皿)一定時,光的吸收于溶液的濃度成正比。 儀器檢測器將光的變化信號轉化為電信號變化,經(jīng)過儀器測量系統(tǒng)處理,檢測結果顯示在屏幕上。(二)農(nóng)殘速測儀結構可見吸光光度計是利用物質本身對可見光的選擇性吸收進行測定的。分光光度計的基本部件有:光源、單色器、吸收池(比色皿)、檢測器和顯示裝置 。光源

5、單色器吸收池檢測器測量裝置A、光源分光光度計常用鎢燈作為光源,波長為320-2500nm。B、單色器單色器是將光源發(fā)射的復合光分解為單色光的光學裝置。C、吸收池也叫比色皿,是盛放樣品溶液的容器,一般為1 厘米厚。D、檢測器是一種光電轉換設備,它將光強度轉變?yōu)殡娦盘栵@示出來。E、測量系統(tǒng)包括放大器和結果顯示裝置,它可以將結果進行處理,并顯示在屏幕上,或者打印出來。三、速測儀的使用方法及注意事項(一)試劑的配制1、提取液:將提取液粉劑置于500ml 瓶中 , 加入 510 ml 蒸餾水搖勻溶解備用??稍诔叵卤4?。2、酶液:每瓶酶粉劑加入3.1 ml 提取液,搖勻后 4 冰箱中保存?zhèn)溆谩E渲坪玫拿?/p>

6、液在4可保存 6 天。3、底物:每瓶底物粉劑加入3.1 ml蒸餾水,搖勻后4 冰箱中保存?zhèn)溆?。配制好的底物?4可保存 6 天。4、顯色劑:將顯色劑粉劑倒入棕色瓶中,加入32ml 提取液搖勻后4冰箱中保存(二)試劑保存的注意事項1、酶的保存:粉狀的酶應儲藏在冷凍室(約0-8 ),使用時用提取試劑溶解,溶解后的酶液分成小瓶。暫時不用的儲存在冷凍室內(nèi),用時解凍;用后的酶液儲存在冷藏室(05)內(nèi),在 1 周內(nèi)用完。酶液反復解凍最多不超過兩次,否則會影響酶活性。2、底物和顯色劑保存:固體保存在冷凍室(約0-8 ),溶解后的底物和顯色劑應保存在冰箱的冷藏室內(nèi)(05)。3、提取試劑的保存:固體及溶解后的提

7、取試劑只需在常溫下保存。(三)儀器使用步驟開機預熱儀器調零儀器調 100做對照樣品檢測(四)儀器調零、調100A、儀器調零打開儀器后,進入儀器調零界面,將儀器所配的擋光黑塊放入檢測通道,蓋好蓋板,按下儀器調零確認鍵,待出現(xiàn)0.00 后,即可完成調零。B、儀器調 100取出擋光黑塊,確認各光路中沒有擋光物質后,蓋好蓋板,按下儀器調100 確認鍵,待出現(xiàn)99.9 后,即可完成調100。注意:一般應先調零,后調100。(五)樣品處理及檢測1、樣品采集后,后應盡快進行檢測, 選取表面干凈的的蔬菜或水果樣品,葉菜類蔬菜用剪刀隨機取樣品的不同植株葉片; 瓜果類蔬菜用削皮刀沿果菜表面處取約 1 厘米厚的樣本

8、,然后剪成 1cm左右見方碎片,備用。2、用天平準確稱取1g 放入小燒杯中。3、用移液管吸取5ml 提取液浸泡,在常溫下放置10 分鐘,每 3 分鐘晃動一下燒杯,使蔬菜中的農(nóng)藥充分溶入液體中。若用震蕩器,震蕩 2 分鐘即可。4、吸取上清液2.5ml 于小試管內(nèi),加入0.1ml 酶、 0.1ml 顯色劑, 30水浴 15 分鐘。6、加入 0.1ml 底物,混勻,倒入比色皿中,放入通道蓋好蓋板,按“啟動”鍵,開始檢測。蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對酶有影響的植物次生物質, 容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時,可采取整株(體)蔬菜浸提。(六)樣品檢測流程樣品對照取樣品可食

9、用部分剪碎 ( 1cm見方),稱取 1g 于小燒杯中加入 5ml 提取液,放置10 分鐘,吸取 2.5ml 于試管吸取 2.5ml提取液于試管各加入 100 微升酶液和 100 微升顯色劑搖勻后30水浴 15 分鐘各加入 100 微升底物混勻,立即轉移到比色皿立即將比色皿放 入儀分鐘后自動計算抑制結果判定抑制率 50%抑制率 50%合格不合格根據(jù)市場管理規(guī)定處理,用其他方法進一步分析檢測過程中應注意事項(1)檢測所用的蒸餾水為兩次以上蒸餾水。(2)檢測時操作步驟要按程序進行,前后順序不要顛倒,動作要迅速,加完試劑不能停留太長時間。(3)電子天平使用前要調水平,使電子天平上的氣泡處于圓圈內(nèi)。然后

10、調零,稱量。(4)樣品、樣品提取液、酶、顯色劑、底物等取樣量要準確。(5)每次使用移液槍量取液體過程中,取液時移液槍按到第一停位點,排液時按到第二停位點,盡量排盡溶液,以免引起誤差。(6)操作時間要按照標準控制好。振蕩時間12 分鐘;樣品提取時間1015 分鐘;水浴抑制時間15 分鐘。(7)水浴溫度設置。乙酰膽堿脂酶抑制溫度30,丁酰膽堿脂酶抑制溫度 3738。(七)結果判別被測樣品酶抑制率低于50%為安全果蔬,酶抑制率高于50%為農(nóng)藥殘留超標,建議重復一次,確定之后送農(nóng)產(chǎn)品質檢中心做進一步檢測。結果判別應注意事項1)空白值, 3 分鐘前后吸光值控制在 0.4 0.8 之間為好。如果空白值低于

11、 0.4 ,可適當加大酶底物等試劑的使用量。 3 分鐘前后吸光值變化率應大于 30%,如果低于 30%,可適當提高水浴溫度及時間。2)如果抑制率出現(xiàn)負值較大, 造成主要原因是操作中出現(xiàn)的系統(tǒng)誤差,例如操作人員操作不熟練,若蒸餾水的純度不夠,也可能造成抑制率負值。另外,同一種蔬菜由于不同次重復取樣部位不同,較小的負值誤差( -10%以下)是在允許范圍內(nèi),這種情況下,樣本無農(nóng)藥檢出。3)乙酰膽堿脂酶 50%,丁酰膽堿脂酶 70%時超標,說明蔬菜中含有某種有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥殘留。此時樣本要有 2 次以上的重復檢測。(八)檢測注意事項1、每次檢測前儀器預熱20 分鐘,要進行儀器調零、調100。2

12、、每次檢測樣品前應先做對照,在使用過程中更換一瓶試劑,環(huán)境溫度發(fā)生明顯或者同一瓶酶上次對照制作的時間距離本次檢測時間超過4 小時以上,對照則要重做。3、提取各種試劑和樣品提取液的移液管及移液器的頭不能混用。4、使用后的燒杯、移液管、比色皿等應及時用自來水沖洗,再用蒸餾水沖洗,并干燥備用。久華食安專業(yè)生產(chǎn)研發(fā)果蔬農(nóng)殘速測卡果蔬農(nóng)殘檢測卡農(nóng)藥殘留速測卡。歡迎來電咨詢。富不貴只能是土豪,你可以一夜暴富,但是貴氣卻需要三代以上的培養(yǎng)??鬃诱f“富而不驕,莫若富而好禮?!?如今我們不缺土豪,但是我們?nèi)鄙儋F族。高貴是大庇天下寒士俱歡顏的豪氣與悲憫之懷,高貴是位卑未敢忘憂國的壯志與擔當之志高貴是先天下之憂而憂的責任之心。精神的財富和高貴的內(nèi)心最能養(yǎng)成性格的高貴,以貴為美,在不知不覺中營造出和氣的氛圍;以貴為高,在潛移默化中提升我們的素質。以貴為尊,在創(chuàng)造了大量物質財富的同時,精神也提升一個境界。一個心靈高貴的人舉手投足間都會透露出優(yōu)雅的品質,一個道德高貴的社會大街小巷都會留露出和諧的溫馨,

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