獸醫(yī)臨床病理學第三節(jié)課件

1、獸醫(yī)臨床病理學第三節(jié)獸醫(yī)臨床病理學第三節(jié)獸醫(yī)臨床病理學第三節(jié)一、臨床化學自動分析儀 世界上第一臺用于臨床生化檢驗的自動分儀，是美國泰克尼康公司TECHNICON， 于 1957年生產的，儀器名為Auto Analyzer。 是一臺單通道、連續(xù)、流動式自動分析儀。最初只用于Glu. BUN 測定。 報告結果是光密度值。 第一頁，共49頁。獸醫(yī)臨床病理學第三節(jié)獸醫(yī)臨床病理學第三節(jié)獸醫(yī)臨床病理學第三節(jié)一、臨床化學自動分析儀 世界上第一臺用于臨床生化檢驗的自動分儀，是美國泰克尼康公司TECHNICON， 于 1957年生產的，儀器名為Auto Analyzer。 是一臺單通道、連續(xù)、流動式自動分析儀。

2、最初只用于Glu. BUN 測定。 報告結果是光密度值。 第二頁，共49頁。一、臨床化學自動分析儀第二頁，共49頁。 1964年，泰克尼康公司又生產出連續(xù)、多道自動分析儀 SMA。 Sequential multiple Auto analyzer，該儀器由電子計算機控制，每小時測150個樣本，每個樣本同時測定20個工程，使連續(xù)流動分析到達了一個新的水平。 65年以后，各種自動分析儀器應運而生。第三頁，共49頁。 1964年，泰克尼康公司又生產出連續(xù)、多道自動分析 1目前臨床常用的自動分析儀器有1生化分析儀 有半自動、全自動和進口、國產 2血氣酸堿分析儀 3血細胞計數(shù)儀 4全自動電位滴定儀 5

3、全自動血液細胞分析儀 第四頁，共49頁。 1目前臨床常用的自動分析儀器有第四頁，共49頁。 2評價自動分析儀器的原那么 1方法先進 2重復性好 3要有準確重復的分析系統(tǒng) 4能自動定時 5結果報告醒目、直觀 6適應范圍廣，一機多用 7靈敏性好 8處理能力強 9實用 第五頁，共49頁。 2評價自動分析儀器的原那么第五頁，共49頁。 二、質量控制 1質量控制的目的 保證檢測結果準確、可靠 通過質量控制，能夠到達 了解試驗結果的精細度 防止試驗出現(xiàn)誤差 了解和校正試驗的準確度 進展實驗室之間的比較 監(jiān)測儀器的工作狀態(tài) 了解操作者的操作水平 第六頁，共49頁。 二、質量控制第六頁，共49頁。 2與質量控

4、制有關的概念【誤差】 指的是實驗結果與真實數(shù)值之間的差異 系統(tǒng)誤差恒定誤差 原因：儀器使用不當 分析方法不完善 試劑不純 環(huán)境改變 操作失誤 第七頁，共49頁。 2與質量控制有關的概念第七頁，共49頁。 隨機誤差偶然誤差 事先無法預料，出現(xiàn)誤差的大小沒有規(guī)律，完全符合概率論定律。這種誤差通過嚴格操作規(guī)程，認真細致的工作是可以減少。當測定次數(shù)增多時，此時誤差可相應抵消。 過失誤差 由工作不慎或操作不當而引起。如配錯試劑，搞錯樣本，操作不正確，讀數(shù)、記錄或計算有誤等。第八頁，共49頁。 隨機誤差偶然誤差第八頁，共49頁。 絕對誤差 即測定值與真值之差 如：稱量為1.655g，實重1.654g，絕對

5、誤差為 0.001g。 相對誤差 絕對誤差在真實數(shù)值中所占的百分率 如上例： 相對誤差 = 0.001/1.654100% = 0.06 %第九頁，共49頁。 絕對誤差第九頁，共49頁?！緶蚀_度】 測定值與真值之間的符合程度 誤差愈小，準確度越大【精細度】 每次測定值與算術平均值之間的符合程度 通常把測定值與算術平均值之間的差異稱之為偏差。 偏差愈小，準確度愈高。 第十頁，共49頁?！緶蚀_度】第十頁，共49頁。3減少誤差的措施 糾正系統(tǒng)誤差 a校準儀器和量具 b作陰性、陽性對照 c用多種方法相互比較 d用參照標準樣本檢驗第十一頁，共49頁。3減少誤差的措施第十一頁，共49頁。 減少偶然誤差 a

6、精心操作，嚴格執(zhí)行操作規(guī)程 b固定使用已校正的儀器 c重復測定取均值等 消除過失誤差 a作好原始記錄 b建立核對檢查制度 c制訂統(tǒng)一的操作規(guī)程，人人遵守第十二頁，共49頁。 減少偶然誤差第十二頁，共49頁。三、臨床化學檢驗一 常用的檢驗工程 蛋白質 葡萄糖 脂類 無機離子 有機物：BUN，尿酸，肌肝、肌酸 微量元素：Cu、Fe、Mn、Zn、Se、Co、Mo 血氣分析與酸堿平衡等第十三頁，共49頁。三、臨床化學檢驗第十三頁，共49頁。二 各項檢驗 【蛋白質】 1.研究進展迅速 蛋白質的合成、降解、轉換更新和代謝調節(jié) 蛋白質生理功能的進一步研究 蛋白質的遺傳變異，通過它了解遺傳特征 以新技術對血漿

7、蛋白質進展微量和特異檢測分析 在進化與個體發(fā)育的研究中，發(fā)現(xiàn)不少正常胎兒 期蛋白可以在惡性腫瘤患者重新出現(xiàn) 蛋白質實際用于組織與細胞培養(yǎng) 在腫瘤的發(fā)病學研究中廣泛涉及血漿蛋白質第十四頁，共49頁。二 各項檢驗第十四頁，共49頁。2.蛋白質的功能 可概括為： 營養(yǎng)作用 維持血漿膠體滲透壓 維持血漿正常pH值 運輸作用 免疫與防御功能 催化作用 代謝調控 凝血、抗凝血及纖溶作用等第十五頁，共49頁。2.蛋白質的功能 第十五頁，共49頁。 鹽析法：白蛋白和球蛋白 電泳法：白蛋白、1、2、球蛋白 第十六頁，共49頁。第十六頁，共49頁。 凱氏定氮法參考標準方法 消化用濃硫酸將蛋白質消化為硫酸銨耗時 蒸

8、餾用堿性溶液堿化消化液并蒸餾揮發(fā)； 吸收用酸性溶液硼酸吸收氣態(tài)氨使H+ 滴定用已標定的無機酸滴定，計算總氮量 定蛋白總氮量-非蛋白氮6.25 = 蛋白含量第十七頁，共49頁。第十七頁，共49頁。 雙縮脲比色法血漿總蛋白測定推薦方法 原理 蛋白質中的肽鍵-CONH-在堿性條件下與Cu2+絡合成紫紅色化合物，產生的顏色在一定范圍內與蛋白質含量成正比。此反響和二分子尿素縮合后的產物雙縮脲 H2N-CO-NH-CO-NH2與堿性銅溶液作用形成紫紅色化合物的反響相似，故稱為雙縮脲反響。 此方法簡便、準確、重復性好，但靈敏度較其它方法稍差，是目前臨床上最常規(guī)的方法。第十八頁，共49頁。 雙縮脲比色法血漿總

9、蛋白測定推薦方法第十八頁，共49頁 紫外分光光度法 原理 蛋白質分子中的酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸可使蛋白質溶液在280nm處有一吸收峰?？捎糜跍y定蛋白質，但需防止核酸干擾。 優(yōu)點 敏感而簡便，可保存蛋白生物活性。需紫外分光光度計 及石英比色皿。缺點 各種蛋白質中芳香族氨基酸含量和比例不同；在280nm測 定易受游離色aa和酪aa以及尿酸和膽紅素的干擾；導致 準確性和特異性受影響。第十九頁，共49頁。 紫外分光光度法 第十九頁，共49頁。 折光測定法原理 溶解在溶液中的固體可增加溶液的光折射率，在固定波長和溫度下，光折射率和血清中蛋白質含量成正比。優(yōu)點 簡便、快速，易掌握，重復性較好，適合臨

10、床缺點： 準確性較差。第二十頁，共49頁。 折光測定法第二十頁，共49頁。 自動生化分析儀測定 第二十一頁，共49頁。 自動生化分析儀測定 第二十一頁，共49頁。 TP：少見，屬相對性 常見于脫水、休克、某些腫瘤等 TP：肝臟疾病、腎臟疾病、腸道吸收不良 A ：少見屬相對性 常見于脫水、休克 A ：肝炎、肝硬化、慢性胃腸疾病 某些寄生蟲感染、長期饑餓或營養(yǎng)不良第二十二頁，共49頁。第二十二頁，共49頁。 G：慢性肝炎、肝硬化 G：飼喂初乳缺乏、免疫缺陷病 A/G倒置 是肝功能損害的一個重要指標 第二十三頁，共49頁。 第二十三頁，共49頁。 【葡萄糖】 BGBlood Glucos 一、血糖的

11、來源、去路和調節(jié) 血 糖： 指血液中的葡萄糖 血糖水平： 即血糖濃度 牛：3 4mmol/L第二十四頁，共49頁。 【葡萄糖】 BGBlood Glucos第二十第二十五頁，共49頁。第二十五頁，共49頁。3.糖的生理功能 氧化供能：分解代謝提供機體 75% 能量 機體組成成分之一 糖占機體干重的2%；形成糖原儲存；形成糖蛋白和蛋 白多糖激素、酶、受體等；神經組織和細胞膜的 重要組分 轉變作用 其它糖及糖衍生物核糖、脫氧核糖、氨基多糖 等；非糖物質脂肪、氨基酸核酸 糖代謝紊亂 供能障礙 一系列代謝變化第二十六頁，共49頁。3.糖的生理功能 第二十六頁，共49頁。 保證重要組織器官的能量供給，特

12、別是某些依賴葡萄糖供能的組織器官 腦組織不能利用脂酸，主要依賴葡萄糖供能 紅細胞沒有線粒體，完全通過糖酵解獲能 骨髓和神經組織代謝活潑，經常利用葡萄糖供能第二十七頁，共49頁。第二十七頁，共49頁。 肝臟調節(jié) 轉運調控 肝細胞膜 G 載體可允許 G 快速轉運，到達平衡時，肝內外 G 濃 度幾乎相等 酶的雙向調控 通過神經-激素的作用，使肝細胞內各種糖代謝的酶活性改變 葡萄糖-6-磷酸酶，可促進肝糖原水解， 補充和升高血糖 促進組織攝取葡萄糖，促進肝糖原合成、抑制肝糖原分解、抑制糖 異生而降糖第二十八頁，共49頁。第二十八頁，共49頁。 神經調節(jié) 主要通過下丘腦和自主神經交感和副交感直接作用 于

13、肝臟獲調節(jié)激素的分泌而影響血糖 激素調節(jié) 降糖激素：胰島素 胰島素樣生長因子 升糖激素：胰高血糖素 腎上腺素 生長激素 皮質醇 甲狀腺激素第二十九頁，共49頁。 神經調節(jié)第二十九頁，共49頁。 高血糖癥：空腹血漿血糖FPG7.3mmol/L130mg/dl 高糖飲食； 見于糖尿?。粌确置谙?生理性：情緒緊張； 病理性： 功能亢進；顱內壓升高 腎上腺分泌 刺激血糖中樞； 脫水。 尿糖： 假設血糖濃度高于腎糖閾值9.0mmol/L，即超過了腎 小球濾過率，出現(xiàn)尿糖。第三十頁，共49頁。第三十頁，共49頁。 糖尿病diabetes mellitus,DM 定 義： 是一種慢性、復雜的代謝紊亂性疾病，

14、系胰島素 相對或絕對缺乏，或利用缺陷引起臨床特征：血糖持續(xù)升高，甚至出現(xiàn)糖尿。 “三多一少：多尿、多飲、多食、體重減輕發(fā)病機制 胰腺細胞的自身免疫性損傷 機體對胰島素的作用產生抵抗第三十一頁，共49頁。 糖尿病diabetes mellitus,DM 第三十 低血糖癥： 是指血糖濃度低于2.2 mmol/L 時臨床出 現(xiàn)一系列因血糖濃度過低引起的癥候群 原因： 來源 去路 激素效應：升血糖激素缺乏，降血糖激素過剩 肝臟疾病：肝功能嚴重損傷 長期饑餓或劇烈運動：代謝加強，血糖消耗過多第三十二頁，共49頁。 第三十二頁，共49頁。 酮體形成過多引起血中含量增高，稱為酮血癥 酮體：乙酰乙酸20、-羥

15、丁酸78、丙 酮2 原因： 糖尿病 糖攝入缺乏 糖原儲存過多 堿中毒代償性第三十三頁，共49頁。第三十三頁，共49頁。 酮體的生成 糖代謝障礙 脂肪酸分解 第三十四頁，共49頁。 酮體的生成第三十四頁，共49頁。三. 體液葡萄糖的測定方法 Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的復原性 Cu2+ Cu+；特異性差 鄰甲苯胺法、聯(lián)苯胺法、氨基聯(lián)苯法等 鄰甲苯胺 + Glu 葡萄糖基胺 希夫氏堿藍綠色 影響因素多第三十五頁，共49頁。三. 體液葡萄糖的測定方法第三十五頁，共49頁。3.葡萄糖氧化酶法(GOD 操作簡單，特異性較高 是血糖測定的首選方法 第三十六頁，共49頁。3.葡萄糖氧化酶法(GOD第

16、三十六頁，共49頁。 反響機體對Glu的利用情況：了解機體胰島的功能，了解肝臟糖原分解和糖元異生情況。BS： 糖尿病 用胰島素過量 牛生產癱瘓 反芻獸氨中毒 綿羊腸毒血癥 BS： 腎皮質功能不全 胰島素分泌過多 肝功能不全 牛的酮病 新生幼畜低血糖等 第三十七頁，共49頁。第三十七頁，共49頁。 【血漿脂類】 血 脂 膽固醇、膽固醇脂、甘油三脂、磷脂等 化學方法 酶法測定 自動生化分析儀 第三十八頁，共49頁。 【血漿脂類】第三十八頁，共49頁。2. 臨床應用 動物原發(fā)性血脂癥較少 主要是了解繼發(fā)性疾病 如： 內分泌障礙 肝臟疾病 胰腺疾病 腎臟病等第三十九頁，共49頁。2. 臨床應用第三十九

17、頁，共49頁。 【血中有機物】 包括尿素痰 BUN、尿酸、肌酸、肌肝等 1.測定方法： 半定量試紙法 色譜試紙法 定量比色法 自動生化分析儀測定第四十頁，共49頁。 【血中有機物】 第四十頁，共49頁。 2. 臨床應用 診斷泌尿系統(tǒng)疾病 腎功能障礙時肌肝 腎炎時尿酸 鑒別肝臟疾病 肝病、肝硬化等，BUN 判斷疾病的預后 肌肝50 mg/L， 嚴重腎損傷，預后不良 肌肝100mg/L， 動物即可死亡第四十一頁，共49頁。 2. 臨床應用第四十一頁，共49頁。【血清無機離子測定】 包括K、Na、Ca、Pi、Cl、Mg等 火焰光度法、離子選擇電極法、化學法、原 子吸收分光光度法 了解機體離子的代謝狀

18、況第四十二頁，共49頁?！狙鍩o機離子測定】第四十二頁，共49頁?！疚⒘吭販y定】 包括Cu、Fe、Mn、Zn、Se、Co、Mo等 原子吸收分光光度法、極譜儀法 微量元素與生長發(fā)育的關系 Cu、Fe、Mn、Zn、Co、I 能促進生長 缺乏其中一種，可引起發(fā)育停滯 給發(fā)育不良的動物補 Mn、Co，可加速生長，增加體重第四十三頁，共49頁?！疚⒘吭販y定】第四十三頁，共49頁。 微量元素能影響內分泌 鉛、鎘、汞過多會干擾內分泌的功能 缺Fe： 出現(xiàn)糖尿病 生殖器官發(fā)育不全 性功能紊化 缺Mn： 胰島數(shù)目少 Glu利用減低 精子數(shù)目 缺Zn： 性功能減退 睪丸縮小 精子生成停頓第四十四頁，共49頁。 微量元素能影響內分泌第四十四頁，共49頁。 微量元素與疾病 缺Se： 人的克山病 動物白肌病 幼畜腹瀉 缺Zn： 影響組織的愈合 Cu、Fe、