RET原癌基因的研究進(jìn)展

RET原癌基因的研究進(jìn)展〔〕:

摘要：RET基因是一個在轉(zhuǎn)化中發(fā)生重排的原癌基因，它編碼細(xì)胞膜受體酪氨酸激酶。近些年隨著對酪氨酸激酶家族的深化研究，發(fā)現(xiàn)RET基因在多種惡性腫瘤中存在高表達(dá)和/或基因重排現(xiàn)象，且RET的表達(dá)與這些惡性腫瘤的發(fā)生、開展關(guān)系親密。RET的表達(dá)與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)，與患者的預(yù)后呈負(fù)相關(guān)，在惡性腫瘤治療方面RET可以作為新的治療靶點。本文就近幾年來對RET原癌基因的研究進(jìn)展進(jìn)展綜述。

關(guān)鍵詞：RET基因；惡性腫瘤；交融突變；靶向治療

本文引用格式：程前,王勇.RET原癌基因的研究進(jìn)展[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2022,19(96):92-93.

0引言

RET屬于原癌基因，它編碼的蛋白質(zhì)RET蛋白是一種跨膜蛋白，該蛋白質(zhì)屬于受體酪氨酸激酶家族。酪氨酸激酶家族是涉及幾乎所有癌癥類型的信號分子家族，同時也是癌癥靶向治療藥物研發(fā)的根底。酪氨酸激酶家族成員的基因突變是許多不同種類癌癥發(fā)生開展的主要驅(qū)動因素。當(dāng)RET基因發(fā)生突變并被激活時，可能會編碼出異常的蛋白質(zhì)，而異常的RET基因會傳遞異常信號，并造成在細(xì)胞生長、生存、侵襲、轉(zhuǎn)移等多方面的影響。持續(xù)的異常信號傳遞可能造成細(xì)胞的過度增殖，因此導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生和開展。

近些年隨著對酪氨酸激酶家族的深化研究，發(fā)現(xiàn)RET基因在多種惡性腫瘤中存在高表達(dá)和/或基因重排現(xiàn)象，且RET的表達(dá)與這些惡性腫瘤的發(fā)生、開展關(guān)系親密。本文就近些年關(guān)于RET與癌癥之間關(guān)系的研究進(jìn)展進(jìn)展綜述。

1RET基因及酪氨酸激酶家族的生物學(xué)特性

1.1RET基因的生物學(xué)特性

RET蛋白是一種受體酪氨酸激酶(RTK)，RET基因的18個酪氨酸殘基中至少有14個可以磷酸化，RET磷酸位點對鄰近元素催化核的變構(gòu)存在著影響，其自磷酸化是RTK在細(xì)胞內(nèi)以時間和空間的調(diào)控方式通過細(xì)胞外信號在細(xì)胞內(nèi)傳遞信息的最重要途徑之一，它可以從細(xì)胞外(配體可用區(qū))和細(xì)胞內(nèi)(催化區(qū))來嚴(yán)格控制酪氨酸激酶域的活性。在RET催化域V804M和M918T突變體自磷酸化過程研究中發(fā)現(xiàn)，這兩種致癌突變體的自體磷酸化動力學(xué)速度比野生型(WT)蛋白較快，與野生型相比，RET側(cè)部元素的早期磷酸化位點Y1062和Y687表現(xiàn)出更快的磷酸化動力學(xué)速度，其速度變化與兩種突變體的酶活性升高呈一致性。由此可以推測，致癌的RETV804M和M918T催化域突變體均增強(qiáng)了自磷酸化的過程。有研究者還發(fā)現(xiàn)，RETM918T在特定位點表現(xiàn)出一定程度的磷酸化，這種現(xiàn)象說明該突變體可能抑制順式調(diào)控抑制機(jī)制或利用反式調(diào)控機(jī)制完成其生物學(xué)活性，胚胎發(fā)育過程中它對神經(jīng)系統(tǒng)、腎、內(nèi)分泌型器官、精子等的生長、發(fā)育發(fā)揮著關(guān)鍵的作用，對成體的影響那么主要表如今神經(jīng)系統(tǒng)。RET基因信號通路通過促進(jìn)突觸形成、信號傳遞、神經(jīng)重塑三方面來維持神經(jīng)功能【1】。

1.2惡性腫瘤發(fā)生與RET基因信號轉(zhuǎn)導(dǎo)

RET基因激活胞外環(huán)路磷酸化過程，有助于細(xì)胞內(nèi)所有RET受體酪氨酸激酶的激活。整體細(xì)胞效應(yīng)與個體酪氨酸激酶活動并非一致，因此整體細(xì)胞效應(yīng)不會影響受體激酶活性,但下游信號通路的改變及細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的效應(yīng)會對RET磷酸化和激酶的活性產(chǎn)生影響。目前研究已證實許多腫瘤的發(fā)生都依賴于酪氨酸激酶受體的激活。最早的研究發(fā)現(xiàn)，RET與甲狀腺乳頭狀癌和髓樣癌的形成有關(guān)，近些年隨著對RET關(guān)聯(lián)蛋白激活下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的機(jī)制越來越明晰，該信號在惡性腫瘤發(fā)生中的調(diào)控作用越來越研究者們重視【2】。目前較為清楚的是Eph/Ephrin信號通路，其在胚胎發(fā)育過程中調(diào)節(jié)多種生理過程，尤其是在細(xì)胞形成、增殖、遷移和軸突引導(dǎo)中起著關(guān)鍵性作用。如EphrinA(EphA)配體可以使EphA受體在細(xì)胞與細(xì)胞連接處激活，并且誘導(dǎo)RET受體酪氨酸激酶產(chǎn)生一種反向信號【3】。在過去的20多年里，對RET基因表達(dá)、信號傳導(dǎo)和細(xì)胞生物學(xué)的深化研究為RET在惡性腫瘤發(fā)活力制的研究及臨床診斷及藥物治療方面提供了新的思路。

2RET基因在惡性腫瘤中的表達(dá)及臨床病理特征

2.1RET基因與多發(fā)性內(nèi)分泌腫瘤〔MEN2〕

MEN2是一種顯性遺傳的影響神經(jīng)內(nèi)分泌的癌癥綜合征，是RET原癌基因轉(zhuǎn)錄過程中發(fā)生突變引起的。MEN2A患者受RET基因C634Y、C634R位點突變影響，MEN2B患者受到RET基因M918T位點突變的影響。而C634R突變那么可以增強(qiáng)RET蛋白的表達(dá)，改變基因突變的位置。研究發(fā)現(xiàn)，單獨使用GDNF〔glialcellline-derivedneurotrophicfactor，GDNF〕處理可以進(jìn)步RETM918T位點磷酸化程度，并且影響AKT/ERK1/2通路，但是不能導(dǎo)致WT或C614R突變【4】。根據(jù)RET基因突變類型的不同組織起源，將腫瘤分為三種不同的臨床亞型，即MEN2A型、MEN2B型、家族性MTC(FMTC)。

2.1.1MEN2A型

此型以甲狀腺髓樣癌(medullarycarcinoma,MTC)為特征性病變，是一種以鈣蛋白分泌旁腺細(xì)胞病變?yōu)樘卣鞯膼盒阅[瘤。嗜鉻細(xì)胞瘤(pheochromocytoma,PC)，是一種腎上腺嗜鉻細(xì)胞病變和甲狀旁腺功能亢進(jìn)為特征的一種腫瘤。MTC是MEN2A所有患者的共同特征(100%)，而PC那么僅見于50%，15-30%的患者見于HPT〔Hyperparathyroidism，HPT〕。

2.1.2MEN2B型

此型患者表現(xiàn)出更為復(fù)雜的臨床表現(xiàn)，包括舌唇眼瞼神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤、腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤、增厚的角膜神經(jīng)以及馬凡諾綜合征等。MEN2B的共同特征是100%的患者患MTC，約50%的患者患PC，極少有患者表現(xiàn)出HPT。

2.1.3家族性MTC

FMTC的特點是在受影響的家庭有4個或4個以上成員患病時，會表現(xiàn)出MTC，因此被稱為家族性MTC。也有學(xué)者認(rèn)為FMTC不應(yīng)該被歸為一種"獨立";的疾病，它應(yīng)該屬于MEN2A位點突變的一種類型。

2.2RET基因與肺癌

在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、甲狀腺乳頭狀癌和骨髓單核細(xì)胞白血病中，均被發(fā)現(xiàn)有RET基因重排的現(xiàn)象。在NSCLC中已發(fā)現(xiàn)了幾種RET結(jié)合物，包括KIF5B-RET、CCDC6-RET、NCOA4-RET和trim33-RET【5】。研究發(fā)現(xiàn)約1-2%的肺腺癌中也報道了有RET基因的交融，在腺癌中其可能成為是一個可操控的靶點，新型KIF13A-RET交融物中包含完好的RET激酶構(gòu)造域，KIF13A的外顯子1-18和RET的外顯子12-20，并且發(fā)現(xiàn)與吸煙無相關(guān)性【6】。NSCLC早期和中期患者RET陽性表達(dá)率較相對較低，其表達(dá)率與腫瘤分化程度有關(guān)，RET陽性表達(dá)成為NSCLC患者中相對獨立的因素，說明RET基因可以成為個性化治療NSCLC的新靶點【7】。

2.3甲狀腺癌

甲狀腺乳頭狀癌(PTC)和甲狀腺髓樣癌(MTC)以RET基因重排和點突變?yōu)椴∽兲卣鳌８缓涟彼岬闹貜?fù)序列和免疫球蛋白樣構(gòu)造域1(LRIG1)是多種酪氨酸激酶受體的抑制因子。不同癌癥類型的RET-LRIG1表達(dá)程度與患者存活率之間關(guān)系親密[8]。在甲狀腺乳頭狀癌(PTC)和髓質(zhì)癌(MTC)亞群中，激活受體酪氨酸激酶導(dǎo)致RET基因突變已被確認(rèn)為是驅(qū)動正常組織癌變的關(guān)鍵因素。從基因和藥理兩方面證實了RET致癌基因和編碼的構(gòu)造活性癌蛋白能成為潛在治療靶點[9]。研究證實BRAFV600E突變和RET/PTC易位重排可促進(jìn)惡性腫瘤的進(jìn)展,包括炎癥介質(zhì)的表達(dá)和淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，從而加速患者PTC開展的進(jìn)程。此外，RET突變也是鑒高度侵襲性散發(fā)型MTC的可靠生物分子標(biāo)志物，因此它可以幫助臨床醫(yī)生更好地評估患者的預(yù)后[10]。

2.4神經(jīng)母細(xì)胞瘤

在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中，RET轉(zhuǎn)錄下降先于RET蛋白下降。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，在神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中，當(dāng)ALK激活或抑制時，ETV5在蛋白和mRNA程度上都受到影響，而這種影響先于RET對它的調(diào)節(jié)。Chip-seq分析證實，ETV5與RET啟動子結(jié)合，激活了啟動子上游的增強(qiáng)子，因此ETV5驅(qū)動了RET基因的轉(zhuǎn)錄。在MYCN和alkf1178l驅(qū)動的小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤實驗中，結(jié)合使用RET抑制劑和ALK抑制劑比單一用藥更能有效的抑制腫瘤的生長速度。這些結(jié)果可以推測出ERK-ETV5-RET通路成為激活A(yù)LK下游神經(jīng)母細(xì)胞瘤腫瘤發(fā)生的關(guān)鍵[11]。NB〔neuroblastomacells，NB〕細(xì)胞增殖需要RET，因此RET高表達(dá)會導(dǎo)致NB患者預(yù)后不良。小分子抑制劑雷格列尼regorafenib〔BAY73-4506〕可阻斷NB細(xì)胞中的膠質(zhì)細(xì)胞衍生出神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)繼而誘導(dǎo)RET的信號通路，還可以抑制NB在體內(nèi)外的生長。RET是NB潛在的治療靶點，因此使用新型RET抑制劑如regorafenib可以改善患者的預(yù)后[12]。

2.5嗜鉻細(xì)胞瘤及先天性巨結(jié)腸

研究中發(fā)現(xiàn)，25%的嗜鉻細(xì)胞瘤或副神經(jīng)節(jié)瘤患者存在錯義或無意義的生殖系基因變異，包括c.SDHB基因136C>T(p.R46X)變異、RET基因的1901G>A(C634Y)變異、c.2071G>A(p.G691S)和c.RET基因的2712C>G(p.S904S)變異。前兩種變異已經(jīng)被證實具有致病性，這些變異存在于嗜鉻細(xì)胞瘤和/或副神經(jīng)節(jié)瘤患者中，因此對嗜鉻細(xì)胞瘤和/或副神經(jīng)節(jié)瘤患者進(jìn)展c.SDHB和RET基因檢測顯得較為重要[13]。先天性巨結(jié)腸病(Hirschsprungdisease,HSCR)是一種復(fù)雜的腸神經(jīng)系統(tǒng)遺傳疾病，最常見的發(fā)病原因是腸道細(xì)胞完全喪失神經(jīng)元、神經(jīng)節(jié)。而80%以上的致病發(fā)生在RET基因突變上。通過免疫熒光染色和PCR擴(kuò)增RET基因，發(fā)現(xiàn)生成的iPSCs表達(dá)了OCT4、SSEA4、SOX2、tra1-60和NANOG多種標(biāo)記物，研究還發(fā)現(xiàn)hscrp-pscs陽性的細(xì)胞體外培養(yǎng)可以分化為三胚層細(xì)胞，證實RET基因突變可引起HSCR[14]。

3RET基因的抑制劑

在臨床治療中，患者耐藥越來越容易發(fā)生，而且某些藥物具有很明顯的非靶向毒性，因此我們必須考慮尋找新的的治療方案(例如使用抑制劑個性化治療變構(gòu)區(qū)域)，這種思路適用于RET激酶域交融和/或RET陽性人類癌癥(如肺癌、甲狀腺癌、結(jié)腸癌等)治療的研究。

3.1RET抑制劑blul-667

研究結(jié)果說明，RET抑制劑blul-667平安且耐受性良好，在RET重排的甲狀腺髓質(zhì)癌或非小細(xì)胞肺癌患者中使用后獲得了良好的效果。人體組織內(nèi)，blu-667在不抑制VEGFR2的情況下，通過多種方式作用于重排的RET基因并阻礙其開展，因此能有效的抑制非小細(xì)胞肺癌和甲狀腺癌的轉(zhuǎn)移和生長。實驗結(jié)果說明blul-667能很好地抑制RET信號通路，并在無明顯超靶細(xì)胞毒性的條件下使RET突變型NSCLC和MTC患者獲得較好的臨床治療效果，這一結(jié)果為選擇性RET靶向治療提供了臨床證據(jù)。Blu-667還可以誘導(dǎo)有RET基因突變和交融的腫瘤模型的腫瘤回歸。同時blu-667也減弱了RET的信號，并在有RET基因改變的腫瘤患者中產(chǎn)生持久的治療作用[15]?？ò吞鼓帷睠abozantinib〕是一種受體酪氨酸激酶抑制劑(TKI)，對包括MET、RET、AXL、VEGFR2、FLT3和c-Kit在內(nèi)的一系列靶點均有作用[16]。小分子酪氨酸激酶抑制劑，包括索拉非尼、舒尼替尼、莫迪沙尼和萬得他尼等等，這些藥物中的大多數(shù)被稱為RET抑制劑，它們是多激酶抑制劑，具有抑制酪氨酸激酶受體(比方血管內(nèi)皮生長因子受體)的抗血管生成作用，在治療其他腫瘤性疾病方面也已經(jīng)獲得了不錯的療效[17]。

3.2RETI型抑制劑

I型抑制劑是一類抑制劑的統(tǒng)稱。RET基因重排在多發(fā)性內(nèi)分泌腫瘤(MEN2A,MEN2B)、非小細(xì)胞肺腺癌、甲狀腺髓樣癌中已有報道，其中僅在甲狀腺乳頭狀癌中，就有十多種RET的交融種類被發(fā)現(xiàn)，最常見的是CCDC6-RET和NCOA4-RET。在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中發(fā)現(xiàn)的RET重排蛋白中，最多見的是KIF5B-RET型。FDA批準(zhǔn)了幾種靶向RET的藥物用于治療癌癥，包括卡波贊替尼(cabozantinib)和萬得他尼(vandetanib)治療甲狀腺髓樣癌；倫瓦替尼(lenvatinib)和索拉非尼(sorafenib)治療分化型甲狀腺癌。所有這些拮抗劑都能與RET的活性構(gòu)象結(jié)合，因此被歸類為I型抑制劑。目前，美國每年估計有1萬例新發(fā)的帶有RET突變或RET重排蛋白的腫瘤病例，證明針對RET基因來研制腫瘤的特異性拮抗劑具有應(yīng)用價值[18]。

3.3RET與ShcD免疫沉淀抑制下游通路

在GDNF的治療中，通過ShcD與SK-N-AS與神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的RET結(jié)合，發(fā)生免疫沉淀反響。ShcD-RET的表達(dá)促進(jìn)了ShcD和RET在體內(nèi)的結(jié)合，導(dǎo)致下游ERK和AKT通路的抑制[19]。轉(zhuǎn)染過程中重新排列的酪氨酸激酶受體是激活多種癌癥的致癌因子，包括非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、髓狀甲狀腺癌(MTC)和甲狀腺乳頭狀癌。因此，結(jié)合EGFR和RET抑制osimertinib/blu667可能是這類患者有效的治療策略[20]。

4結(jié)語

綜上所述，隨著對RET基因的不斷研究，越來越多的證據(jù)證明RET的表達(dá)和重排與惡性腫瘤的發(fā)生和開展有著親密的關(guān)系。RET的表達(dá)和變異不僅在惡性腫瘤的發(fā)生過程中起到了促進(jìn)作用，還加速了轉(zhuǎn)移的速度。因此，深化研究RET的突變和表達(dá)與惡性腫瘤的關(guān)系，并努力控制或者打破兩者之間的關(guān)系，能為臨床治療提供新的思路。如今雖然報道以RET為靶點治療惡性腫瘤獲得了一些臨床效果，但在這方面的研究和技術(shù)還缺少很多資料，離廣泛的臨床應(yīng)用還有較大的差距。因此尋找一種敏感、平安的特異的RET抑制劑來改善RET基因突變腫瘤患者的預(yù)后，為癌癥的精準(zhǔn)治療和個體化治療的施行需要進(jìn)展更深化的研究。

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