范氏中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維測(cè)定的實(shí)驗(yàn)方案1(修改).doc

飼料中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）和木質(zhì)素（ADL）的測(cè)定實(shí)驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)原理纖維分析法測(cè)定中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）。植物性飼料經(jīng)中性洗滌劑煮沸處理，不溶解的殘?jiān)鼮橹行韵礈炖w維，主要為細(xì)胞壁成分，其中包括半纖維素、纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。中性洗滌纖維經(jīng)酸性洗滌劑處理，剩余的殘?jiān)鼮樗嵝韵礈炖w維，其中包括纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。 2 所需試劑 十二烷基硫酸鈉溶液（中性洗滌劑）、乙二胺四乙酸二鈉（EDTA，化學(xué)純）、四硼酸鈉（Na2B4O7.10H2O）、磷酸氫二鈉、乙二醇乙醚、十六烷基三甲基溴化銨、硫酸、丙酮，無(wú)水亞硫酸鈉，十氫化萘 ，95%乙醇3 所需儀器分析天平：感量0.0001 g、容量瓶、錐形瓶、滴定管、移液管、洗瓶、洗耳球、滴管、量筒。 粗纖維測(cè)定儀（SLQ-6）、古氏坩堝、干燥器（以氯化鈣或變色硅膠為干燥劑）、酸度計(jì)4 試劑的配制4.1 30g/L十二烷基硫酸鈉（中性洗滌劑）溶液。稱取18.61g乙二胺四乙酸二鈉（EDTA，化學(xué)純）和6.81g四硼酸鈉（Na2B4O7.10H2O）和10mL已二醇乙醚同放入1000mL燒杯中，加入少量水加熱溶解后，再加入30g十二烷基硫酸鈉。稱取11.9644g磷酸氫二鈉（含12水），置于另一燒杯中，加入少量水，微微加熱溶解后傾入第一個(gè)燒杯，稀釋至1000mL。此溶液PH在6.9-7.1 .4.2 20g/L十六烷三甲基溴化銨（酸性洗滌劑）溶液。稱取20g十六烷三甲基溴化銨，溶于1000mL已經(jīng)標(biāo)定過(guò)的0.5mol/L硫酸溶液中，攪動(dòng)溶解，必要時(shí)過(guò)濾。4.3 0.5 mol/L硫酸溶液。稱取49g（27.87mL）濃硫酸，慢慢加入已有500mL水的燒杯中，冷卻后注入1000mL容量瓶中，定容，標(biāo)定。（4.3.1標(biāo)定硫酸的方法：稱量1.6g在270-300灼燒至恒重的基準(zhǔn)無(wú)水碳酸鈉，稱準(zhǔn)至0.0001g。溶解50mL水中，加入10滴溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，用配制好的硫酸溶液滴定至溶液有綠色變?yōu)榘导t色，煮沸2min，冷卻后繼續(xù)滴定至溶液再呈暗紅色。同時(shí)做空白試驗(yàn)。4.3.2標(biāo)定硫酸過(guò)程中的主要影響因素 ）4.5 72%硫酸。取734.69mL濃硫酸，倒入200mL水中，冷卻后稀釋至1000mL。4.6其他試劑。丙酮，無(wú)水硫酸鈉，十氫化萘，95%的硫酸5操作步驟5.1 NDF的測(cè)定 5.1.1 準(zhǔn)確稱取40目篩飼料樣品0.5-1.0g（m）,置粗纖維測(cè)定儀（SLQ-6）坩堝中，加入中性洗滌劑溶液100ml和2ml十氫化萘即萘烷和0.5g無(wú)水亞硫酸鈉。5.1.2 打開冷凝裝置，立即置于電爐上煮沸（5-10min）,并微沸1h.5.1.3 煮沸完畢，冷卻10min，抽濾，并用沸水沖洗三次，再抽濾，再用95%的乙醇20mL沖洗一次，抽濾，再用20ml丙酮沖洗，抽濾。 5.1.4 取下坩堝，放置通風(fēng)櫥中揮發(fā)完殘余有機(jī)溶劑后，105烘干，稱至恒重（m2）5.2ADF的測(cè)定 5.2.1 準(zhǔn)確稱取樣品，0.5-1.0g（m）,置坩堝中，加入酸性洗滌劑溶液100ml和數(shù)滴十氫化萘。5.2.2 打開冷凝裝置，立即置于電爐上煮沸（5-10min）,并微沸1h.5.2.3用已知質(zhì)量的玻璃坩堝（m3）,在抽濾瓶上抽濾殘?jiān)?，并用沸水洗滌殘?jiān)?，抽濾反復(fù)3次，并用（藍(lán)色）石蕊試紙檢測(cè)濾液是否呈現(xiàn)中性，然后用少量丙酮洗滌殘?jiān)?，反?fù)沖洗至濾液無(wú)色為止，抽凈全部丙酮。 5.2.4取下坩堝，放置通風(fēng)櫥中揮發(fā)完殘余有機(jī)溶劑后，105烘干，稱至恒重（m2） 5.3ADL的測(cè)定將酸性洗滌纖維加入72%硫酸，使得酸性洗滌纖維被淹沒，每隔1h攪拌一次，在20消化3h后過(guò)濾，并沖洗至中性。將坩堝放置105的烘箱中烘2h后m4,將殘?jiān)娓刹⒆茻曳趾螅?00馬沸爐中灼燒2h或坩堝中無(wú)炭粒為止，取出玻璃坩堝，放入干燥器中冷卻至恒重）即可得出酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分m5的含量。6 計(jì)算 W(NDF)：=(m2-m1)/m W(ADF) =(m3-m2)/mW(ADL) =(m4-m5)/m 七、試劑總用量預(yù)算表用量試劑乙二胺四乙酸二鈉（EDTA，化學(xué)純）18.61*50=930.5g四硼酸鈉（Na2B4O7.10H2O）6.81*50=304.5g十二烷基硫酸鈉溶液30*500=15000g無(wú)水磷酸氫二鈉4.65*50=232.5g十六烷三甲基溴化銨20*50=1000g94.766%硫酸28*50=1400mL72%硫酸734.69*50=36734.5mL總硫酸38134.5mL十氫化萘(2+2)*500=2500mL無(wú)水亞硫酸鈉0.5*500=250g丙酮(20+20)*500=2000mL基準(zhǔn)無(wú)水碳酸鈉1.6*20=32g中性洗滌纖維 50000mL酸性洗滌纖維50000mL已二醇乙醚500mL參考文獻(xiàn)1 王佩之,許冠南.一種有待開發(fā)的稀有蔬菜四棱豆J.中國(guó)蔬菜,1991,(3):3032.2 陳東明,艾辛,全妙華,等.四棱豆在湖南懷化地區(qū)的引種試J.作物研究,2005,19(1):3537.3 傅翠真,王佩之.四棱豆的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及利用前景J.作物雜志,1994,(5):3738.4 韋武青,宋春,馬志虎.四棱豆J.上海蔬菜,2004,(2):21.5 張麗琴.綠色金子四棱豆J.當(dāng)代蔬菜,2005,(11):39. 6 吳曉杰.不同處理方式對(duì)青貯飼料質(zhì)量影響的試驗(yàn)研究D.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.7 黎英華.鄂爾多斯高原主要飼用豆科植物青貯特性的研究D.呼和浩特:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),2010.8 劉向陽(yáng),閻巧娟,韓魯佳,等.氨化秸稈飼料的質(zhì)量評(píng)定J.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2002,7(6):4953.9 薛艷林,玉柱,白春生,等.萎蔫處理對(duì)苜蓿草渣青貯品質(zhì)的影響A.中國(guó)草學(xué)會(huì)飼料生產(chǎn)委 員會(huì)第15次飼草生產(chǎn)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集C,2009:350354.10 楊富裕,周禾,韓建國(guó),等.添加甲酸+甲醛對(duì)草木樨青貯品質(zhì)的影響J.草業(yè)學(xué)報(bào),2004,13(1 ):7478.11 楊杰,顧洪如,翟頻,等.凋萎程度與復(fù)合添加劑處理對(duì)多花黑麥草青貯品質(zhì)的影響J.江蘇 農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2008,24(2):185189.12 郭庭雙.秸桿畜牧業(yè)M.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1994:4398.13 郭玉琴,何欣,孫曉利.不同含水率對(duì)苜蓿青貯營(yíng)養(yǎng)成分的影響J.當(dāng)代畜牧,2005,(12):38 39.14 余汝華.玉米秸稈青貯前后營(yíng)養(yǎng)成分變化規(guī)律的研究D.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.15 Boever J L,Brbanader D L,Smet A M,et al.Evaluation of physieal stueture of maize silage J. Dairy Sic ,1993,(76):16241634.16 王秀奇,秦淑媛,高天慧,等.基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)(第二版)M.北京:高等教育出版社,1999:113122.17 張麗英.飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)(第2版)M.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,1998: 4659.18 王開強(qiáng),林宏鳳,郭龍文.椰子果皮粗灰分、鈣、總磷的測(cè)定J.瓊州大學(xué)學(xué)報(bào),2004, 11(5):3133.19 梁祖鐸.飼料生產(chǎn)學(xué)M.北京:農(nóng)業(yè)出版社,1979:67.20 余汝華.玉米秸稈青貯前后營(yíng)養(yǎng)成分變化規(guī)律的研究D.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.21 楊斌; 殷引; 張浩博; 佘永楨; 沈軼 洗滌劑法測(cè)定煙草及煙草制品中中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸性洗滌木質(zhì)素的研究M 中國(guó)煙草學(xué)報(bào), 201222 蘇玲玲; 申煜; 張志軍 ;纖維袋法測(cè)定餅粕類飼料原料中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量的研究 飼料博覽 201323 苗志國(guó),侯先志,敖長(zhǎng)金,吳庶青.營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)償初期蘇尼特母羊?qū)DF、ADF消化能力的研究J.中國(guó)飼料.2005(21)24. 朱青;徐奇友.