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茶多酚的含量的測(cè)定及初探【摘要】利用酒石酸亞鐵比色法測(cè)定九種茶葉中茶多酚的含量及茶湯自身的PH值隨時(shí)間變化而變化的過(guò)程,并利用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)的方差分析方法來(lái)解釋出現(xiàn)的不同結(jié)果.【關(guān)鍵詞】茶多酚 含量測(cè)定 酒石酸鐵比色法 單因素完全隨機(jī)試驗(yàn) 方差分析方法 Determination of tea polyphenols and PreliminaryAbstract:Tartrate ferrous colorimetric determination of the content of nine kinds of tea polyphenols and tea PH value changes over time and change, and the use of analysis of variance single factor completely randomized trial to explain the different results0 引言 茶多酚又叫茶單寧、茶鞣質(zhì),是茶葉中的主要生理活性物質(zhì),是決定茶湯滋味、顏色的主體成分,占茶葉干重的18%-36%,它的藥用價(jià)值很高,具有抗氧化、抗腫瘤、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抑菌、降血糖、降血脂、抗突變、清除自由基等藥理作用。茶多酚作為一類新型無(wú)毒的天然抗氧化劑,1990年被列為食品添加劑(GB12493-90),并被廣泛使用,是一種極具開(kāi)發(fā)價(jià)值的天然產(chǎn)物。目前國(guó)內(nèi)外茶多酚粗品的提取方法主要有:溶劑萃取法、離子沉淀法、樹(shù)脂吸附分離法、超臨界流體萃取法、超聲波浸提方法、微波浸提法等。其測(cè)定方法主要有滴定法、酒石酸鐵比色法、紫外分光光度法等。本文采用沸水提取法,并用酒石酸亞鐵作顯色劑,分光光度法測(cè)定茶多酚的含量。1試驗(yàn)1.1 主要儀器UV-2012C型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì);DK-S26型電熱恒溫水浴鍋(上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司);SHB-III循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司) ; ALC-210.3型電子天平; PH計(jì)PB-10 ; 高速萬(wàn)能粉碎機(jī) ;材料與設(shè)備:1.2 材料:1.2.1 茶葉磨碎試樣;1.2.2 酒石酸亞鐵溶液:稱取1 g FeSO47H2O 和5 g KNaC2H4O64H2O,混合并用蒸餾水溶解后移入1L容量瓶中,稀釋至刻度,搖勻即可1.2.3 pH 值為7. 5 的磷酸鹽緩沖液: ( 1) 1/15 mol /L 的磷酸氫二鈉溶液 準(zhǔn)確稱取23.872 g Na2HPO412H2O 加入蒸餾水溶解,移至1L容量瓶中,稀釋至刻度,搖勻,此溶液稱為A 液; ( 2)1/15 mol /L 的KH2PO4溶液 準(zhǔn)確稱取經(jīng)烘箱烘2h后的磷酸二氫鉀9.078g,用蒸餾水溶解,移至1L 容量瓶中,稀釋至刻度,搖勻,此溶液稱為B 液; ( 3) 取A 液85 mL,B 液15 mL 混勻,即為pH 值為7. 5的緩沖液水為去離子水(一) 茶湯制備:準(zhǔn)確稱取磨碎試樣3g,家450ml沸水,在沸水浴中浸提45min,每隔10min搖瓶一次,過(guò)濾.洗滌濾渣,濾液合并于500ml容量瓶中,加水定容至刻度,搖勻.(二) 測(cè)定:準(zhǔn)確吸取茶湯1ml,注入25ml容量瓶中,加水4ml,酒石酸鐵溶液5ml,用緩沖液定容至刻度,混勻,用10mm比色皿,以試劑空白作參比,于波長(zhǎng)540nm處測(cè)吸光度,用以下公式計(jì)算:茶多酚(%)=E*3.913/1000*(L1(L2*M*m)*1002 結(jié)果與討論第一天數(shù)據(jù)指標(biāo)品種紅1 紅2紅3 綠1 綠2 綠3 黑1 黑2黑3phabsmg茶多酚含量%5.790 5.680 5.430 6.670 6.180 5.990 6.720 6.540 7.130 0.247 0.126 0.128 0.380 0.270 0.348 0.127 0.127 0.100 3.001 3.007 3.004 3.000 3.012 3.010 3.006 3.010 3.002 16.103 8.198 8.337 24.782 17.538 22.620 8.266 8.255 6.517 第二天數(shù)據(jù)指標(biāo)品種紅1 紅2紅3 綠1 綠2 綠3 黑1 黑2黑3phabsmg茶多酚含量%6.010 5.510 5.750 5.800 5.650 5.600 5.980 5.850 6.000 0.245 0.128 0.120 0.367 0.273 0.340 0.121 0.128 0.105 3.001 3.007 3.004 3.000 3.012 3.010 3.006 3.010 3.002 15.973 8.328 7.816 23.935 17.733 22.100 7.875 8.320 6.843 第三天數(shù)據(jù)指標(biāo)品種紅1 紅2紅3 綠1 綠2 綠3 黑1 黑2黑3phabsmg茶多酚含量%5.220 4.990 5.330 5.470 5.150 5.540 5.850 5.480 5.870 0.235 0.118 0.121 0.356 0.279 0.322 0.114 0.119 0.100 3.001 3.007 3.004 3.000 3.012 3.010 3.006 3.010 3.002 15.321 7.678 7.881 23.217 18.123 20.930 7.420 7.735 6.517 第四天數(shù)據(jù)指標(biāo)品種紅1 紅2紅3 綠1 綠2 綠3 黑1 黑2黑3phabsmg茶多酚含量%5.590 5.270 5.280 5.370 5.060 5.260 5.560 5.540 5.860 0.230 0.118 0.116 0.339 0.250 0.301 0.106 0.119 0.097 3.001 3.007 3.004 3.000 3.012 3.010 3.006 3.010 3.002 14.995 7.678 7.555 22.108 16.239 19.565 6.899 7.735 6.322 第五天數(shù)據(jù)指標(biāo)品種紅1 紅2紅3 綠1 綠2 綠3 黑1 黑2黑3phabsmg茶多酚含量%5.780 5.370 5.420 5.940 5.190 5.850 5.750 6.070 6.060 0.235 0.121 0.116 0.335 0.274 0.314 0.105 0.129 0.097 3.001 3.007 3.004 3.000 3.012 3.010 3.006 3.010 3.002 15.321 7.873 7.555 21.848 17.798 20.410 6.834 8.385 6.322 單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)分析因素重復(fù) 1 2 3 4 5 和Ti 平均值xA1A2A3A4A5A6A7A8A916.103 15.973 15.321 14.995 15.321 77.712 15.542 8.198 8.328 7.678 7.678 7.873 39.755 7.951 8.337 7.816 7.881 7.555 7.555 39.143 7.829 24.782 23.935 23.217 22.108 21.848 115.890 23.178 17.538 17.733 18.123 16.239 17.798 87.432 17.486 22.620 22.100 20.930 19.565 20.410 105.625 21.125 8.266 7.875 7.420 6.899 6.834 37.295 7.459 8.255 8.320 7.735 7.735 8.385 40.430 8.086 6.517 6.843 6.517 6.322 6.322 32.521 6.504 總和 1086.563 115.161 單因素完全隨機(jī)等重復(fù)試驗(yàn)方差分析表變異來(lái)源自由度DFSSMSFFa (8,36)處理間(A)81725.521215.690427.956*Fa0.01 (8,36)=5.16試驗(yàn)誤差(e)3618.1460.504Fa 0.05 (8,36)=3.06總變異441743.667由上表可知茶葉品種對(duì)茶多酚含量的影響極顯著,故需進(jìn)行多重比較。用q法進(jìn)行多重比較,相應(yīng)的LSR值:P23456789q0.052.873.463.824.074.274.434.564.67q0.013.854.414.754.995.185.345.475.58LSR0.050.3380.4080.4510.4800.5040.5230.5380.551LSR0.010.4540.5200.5390.5890.6110.6300.6450.658均值多重比較結(jié)果處理Ai均數(shù)xi差異顯著性(q法)a=0.05a=0.01A423.178aAA621.125 b BA517.486 c CA115.542 d DA88.086 e EA27.951 e EA37.829 ef EA77.459 f FA96.504 g G說(shuō)明: A1-大紅袍 A2-祁門紅紅茶類 A3-滇紅 A4-碧螺春 A5-鐵觀音 綠茶類 A6-漢中綠茶 A7-特級(jí)糯米 A8-果樹(shù)大葉黑茶類 A9-普洱3 結(jié)論由上述數(shù)據(jù)可分析得出:1.綠茶類中的茶多酚含量極顯著高于紅茶類和黑茶類。2.上述三種不同綠茶品種間的茶多酚含量差異極顯著。3.普洱茶在這九種茶葉中的茶多酚含量最少。參考文獻(xiàn):1孫秋香,肖婷.茶葉中茶多酚的提取、測(cè)定及應(yīng)用J.湖北第二師范學(xué)院院報(bào),2009,26(8):47-57.2汪多仁,茶多酚的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用進(jìn)展J.飲料工業(yè),2011,14(1):11-14.3劉蒙佳,陳錦屏.茶多酚提取方法的研究進(jìn)展J.陜西師范大學(xué)食品工程系,2006,6(7):70-72.4郁軍.茶多酚的提取純化工藝研究進(jìn)展J.工藝工程;2010年10期:50-51.5黃麗鳳,劉友平,黎代余.茶多酚提取物的質(zhì)量評(píng)價(jià)J.食品安全與檢測(cè),2010,35(4):262-268.6嚴(yán)志慧,方義,張錫友,胡春學(xué),劉黎.茶多酚提取與分離純化研究進(jìn)展J.陜西農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(6):86-91.7申弈.茶多酚提取與含量測(cè)定方法的比較.創(chuàng)新技術(shù),2009(2):4-5.8堯渝,江和源,袁新躍.茶多酚的提取制備技術(shù)J.中國(guó)茶葉專題綜述,2009(2):11-13.9李明元,李鑫,白德飛,呂鑫,左霞.茶葉生產(chǎn)廢料中茶多酚提取工藝研究J.西華大學(xué)學(xué)報(bào),2010,29(2):202-204.10斯琴格日樂(lè),恩德.茶葉有效成分茶多酚的提取工藝研究J.河南理工大學(xué)學(xué)報(bào),2011,30(5):625-628.11何健,印偉.茶葉中茶多酚的提取工藝及其含量測(cè)定J.2011,20(13):31-32.12徐衛(wèi)華.茶葉中提取茶多酚的研究J.科學(xué)技術(shù),2011,137.13劉萍.紅茶和綠茶中茶多酚提取工藝研究J.天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,17(4):39-43.1
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