常用培養(yǎng)基的制備

1、常用培養(yǎng)基的制備 常用培育基的制備 技能訓(xùn)練3 常用培育基的制備 常用培育基的制備 實(shí)訓(xùn)目標(biāo)熟識培育基制備的基本程序 會制備常用的培育基 常用培育基的制備 儀器材料高壓蒸氣滅菌器、電熱干燥箱、電爐、天平、 量筒、漏斗、試管、培育皿、燒杯、三角燒瓶、 養(yǎng)分瓊脂培育基(或伊紅美蘭瓊脂培育基、三 糖鐵瓊脂培育基、ss瓊脂培育基、麥康凱瓊脂 培育基)等 常用培育基的制備 方法步驟 (一)養(yǎng)分瓊脂培育基 (二)血液瓊脂培育基 (三)肉湯培育基 (四)半固體培育基 常用培育基的制備 (一)養(yǎng)分瓊脂培育基計(jì)算 稱量 溶化 倒平板或倒試管 滅菌 無菌檢驗(yàn) 備用 常用培育基的制備 1.計(jì)算：依據(jù)養(yǎng)分瓊脂培育基的

2、說明書了解養(yǎng)分瓊脂粉與水的比 例，一般是1000 ml蒸餾水中應(yīng)加養(yǎng)分瓊脂粉31.3g,再依據(jù) 培育基的需要量確定養(yǎng)分瓊脂粉的用量。 養(yǎng)分瓊脂粉的量=31.315n/1000 (g) 其中： 15代表一個平板需要養(yǎng)分瓊脂約15 ml; n代表要做的培育基平板的數(shù)量 常用培育基的制備 2.稱量：用一般天平精確稱量出養(yǎng)分瓊脂粉的量，用量筒量出相 應(yīng)的 蒸餾水的量，要盡量精確。 常用培育基的制備 3.溶化：將養(yǎng)分瓊脂粉和蒸餾水倒入搪瓷缸中，于電爐上加熱溶 化，邊加熱邊攪拌，沸騰時(shí)馬上從電爐上拿下，等泡沫 消逝后再放在電爐上加熱，留意不能讓瓊脂溢出，煮沸 23次。 常用培育基的制備 4.倒平板或倒試管

3、分裝：若做平板培育基應(yīng)倒于培育皿中，每板約15ml左右， 以剛好掩蓋平皿底為易。 若做斜面培育基應(yīng)倒入試管中，量為試管的1/3 常用培育基的制備 5.滅菌：用高壓滅菌器滅菌將平板培育基整齊地平放入 高壓滅菌器的內(nèi)筒中，將試 管口蓋上棉塞或橡膠塞，用 紙包扎好，直立放入內(nèi)筒中， 在121.3滅菌20-30min。 滅菌完畢后，將平板培育基 拿出平放于桌面，凝固前勿 動；將試管培育基擺成斜面， 凝固前勿動。 常用培育基的制備 6.無菌檢驗(yàn)： 隨機(jī)抽取幾個平板或試管培育基于溫箱中培育24小 時(shí)，若無菌 生長則為合格。 常用培育基的制備 7.備用：中 保 存 備 用 。 冰 箱 ， 在 基 和 0 試

4、 4 管 養(yǎng) 培 板 入 平 放 的 基 格 養(yǎng) 合 培 將 常用培育基的制備 (二)血液瓊脂培育基將滅菌的養(yǎng)分瓊脂冷至4550,以無菌操 作，加入5%10%的無菌血液(或脫纖維 血),然后傾注平皿或分裝試管制成斜面。 常用培育基的制備 (三)肉湯培育基1.成分 牛肉膏35g,蛋白胨10g,氯化鈉5g,蒸餾水 1000ml。 2.制法 將牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉加蒸餾水后，加熱 溶解。矯正ph至7.47.6,過濾分裝。置高壓蒸氣滅 菌器內(nèi)，121.3滅菌20min即成。 3.用途 可供一般細(xì)菌生長，同時(shí)也是制作一般培育基 的基礎(chǔ)原料。供養(yǎng)分要求較高的細(xì)菌分別培育，亦可 供溶血性的觀看和保存菌種。 常用培育基的制備 (四)半固體培育基 肉湯培育基中加入0.3%0.5%瓊脂粉制成， 用于菌