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1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上金-F14A-FABP 羊抗鼠IgG 雙抗體夾心法原理以FABP為例(檢測(cè)抗原)金-F14A-羊抗鼠IgG樣品(血清)含F(xiàn)ABP蛋白陽性反應(yīng)金-F14A-FABP金-F14A-FABP-F14A金標(biāo)記F14A抗體顯示紅色顯示紅色陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)金-F14A-羊抗鼠IgG不顯色顯示紅色金標(biāo)記F14A抗體 Y1=F14A(標(biāo)記了膠體金) Y2=F104B(固定在NC膜上即T線) Y3=羊抗鼠IgG(固定在NC膜上即C線)此方法較常用,主要用于較大分子量的蛋白(抗原)的檢測(cè)。要求兩株抗體針對(duì)一個(gè)抗原的不同位點(diǎn)才可以。也有個(gè)別的檢測(cè)項(xiàng)目是雙抗原夾心檢測(cè)抗體的,原理類似。 競(jìng)爭(zhēng)
2、法原理以嗎啡為例(檢測(cè)抗原) 陽性反應(yīng)金-嗎啡抗體-嗎啡顯示紅色不顯色嗎啡-BSA金-嗎啡抗體-嗎啡 羊抗鼠金標(biāo)記嗎啡抗體樣品(尿液)含嗎啡陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)陰性尿液抗體-嗎啡 羊抗鼠金-嗎啡抗體-羊抗鼠金標(biāo)記嗎啡抗體顯示紅色顯示紅色Y1=膠體金標(biāo)記的嗎啡單抗Y2=嗎啡-BSA偶聯(lián)物Y3=羊抗鼠 此方法主要用于小分子抗原(毒品、農(nóng)藥、肽鏈等)的檢測(cè)。由于抗原分子量小不能直接固定于NC膜上,常常用化學(xué)方法把小分子偶聯(lián)到BSA等大分子物質(zhì)上再固定于NC膜上。此結(jié)果與雙抗原夾心法相反,陰性CT兩條都是紅線,陽性只有C線一條紅線。 間接法原理顯示紅色顯示紅色以HIV為例(檢測(cè)抗體)不顯色顯示紅色 此方法主要用于血清中抗體檢測(cè),純化或者重組的抗原固定于NC膜上,標(biāo)記多為蛋白A(ProteinA或叫SPA,抗體Fc端結(jié)合而與其它蛋白質(zhì)不結(jié)合)。此方法要求膠體金過量,一般來說樣品再加入前需要稀釋
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