禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗接種的操作方法對免疫效果的影響.docx

1、禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗接利S11操作方法對免疫效果的影響李惠蘭'，李鳳元'，吳洪濤'，李樹博2（1.遼寧省重大動物疫病應急中心，遼寧沈陽110161;2.遼寧省動物疫病預防控制中心，遼寧沈陽110164）中圖分類號S852.5%文獻標識碼B文章編號1672-9692（2010）09-0070-03：摘要用禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗（H5亞型）對20日齡非免疫海蘭褐蛋雞雛接種，試:5驗1組用25ml滅菌生理鹽水稀釋500羽/瓶疫苗，采用翅內側三角區(qū)翼膜垂直刺穿的方法接種；試§§驗2組用10ml滅菌生理鹽水稀釋500羽/瓶疫苗，采用離翅根最近的關

2、節(jié)部位內側斜刺的方法接-:種；試驗3組用試驗2組同濃度稀釋的疫苗，以試驗1組相同的部位和接種方法接種；試驗4組以試驗t01組相同濃度的稀釋疫苗，以試驗2組相同的部位和接種方法接種.結果：試驗1組和試驗3組接種2；14d后，用HI方法檢測禽流感抗體，100%達2，2，;試臉2組和試驗4組，接種14d后，抗體檢測100%J5小于2。說明禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗接種操作的方法對免疫效果有顯著的影響。5J關鍵詞禽疽苗;接種操作；免疫效果I疫苗的免疫效果受多種因素的影響，如疫苗質量、疫苗的保存與運輸、疫苗的接種方法、被免疫動物的營養(yǎng)與健康狀況、飼養(yǎng)環(huán)境因素等都會影響疫苗的免疫效果。禽流感重組雞痘病毒

3、載體活疫苗的接種方法對免疫效果有顯著的影響。本試驗就該疫苗接種的操作方法對疫苗免疫效果的影響進行了探索。1試驗材料1.1試驗動物20日齡非免疫海蘭褐蛋雞雛90只，購自八家子養(yǎng)雞場。1.2疫苗禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗（H5亞型），批號20050619o1.3診斷液禽流感H5抗原，禽流感H5陽性血清，禽流感H5陰性血清，批號20050120,購自哈爾濱獸醫(yī)研究所。1.4試驗器材疫苗接種針為標準的雙鋒接種針，試驗GB/T18936-2003高致病性禽流感診斷技術HI方法所需器材。2試驗方法2.1試驗分組將20日齡非免疫海蘭褐蛋雞雛90只隨機分為6組，其中，試驗組4組，每組20只，分別標記為試驗1

4、組、試驗2組、試驗3組和試驗4組；對照組2組，每組5只，分別標記為對照1組和對照2組。2.2疫苗稀釋疫苗A稀釋液：疫苗稀釋按疫苗使用說明書標準操作，用滅菌生理鹽水25ml,稀釋500羽/瓶的疫苗1瓶，待用。疫苗B稀釋液：疫苗稀釋濃度大于疫苗使用說明書規(guī)定的標準濃度，用火菌生理鹽水10ml稀釋500羽/瓶的疫苗1瓶，待用。2.3接種方法試驗1組：用雙鋒接種針蘸取疫苗A稀釋液，在雞翅膀內側三角區(qū)翼膜的無羽毛無血管部位垂宜刺穿翼膜1次，進針深度以接種針凹槽透過翼膜對而皮膚為準。試驗2組：用與試驗1組同型號的雙鋒接種針，懿取疫苗B稀釋液，在雞翅膀離翅根最近的關節(jié)部位內側，接種針朝雞體方向成45度角斜刺

5、1次，接種針的凹槽向上，進針深度以接種針的凹槽進入皮膚為準。收稿日期2010-07-16試驗3組：用雙鋒接種針醮取疫苗B稀釋液，接種方法與部位同試驗1組。試驗4組：用雙鋒接種針醮取疫苗A稀釋液，接種方法與部位同試驗2組。對照組：用同型號雙鋒接種針蘸取滅菌生理鹽水，對照1組接種方法同試驗1組，對照2組接種方法同試驗2組。2.4樣品采集及采樣時間于接種前采集全血分離血清檢測母源抗體。接種徐7d和14d分別采集全血，分離血清檢測禽流感H5免疫抗體。2.5檢測方法GBff18936-2003致病性禽流感診斷技術HI方法。3試驗結果禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗不同接種操作方法免疫效果檢測結果見表lo表1

6、禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗不同接種操作方法免疫效果檢測結果組別免疫后夭數檢測只數<1皿2!Log22Log23Log24Ix)g25Log26Log27Ix)g2抗體滴度2'%試驗1組免疫前20200.免疫后7d20200免疫后14d20144362100試驗2組免疫前20200免疫后7d20200免疫后14d20200試驗3組免疫前20200免疫后7d20200免疫后14d2023456100試驗4組免疫前20200免疫后7d20200免疫后14d20200對照1組免疫前550免疫后7d550免疫后14d550對照2組免疫而550免疫后7d550免疫后14<15504小

7、結與討論4.1試驗表明，禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗無論是標準濃度還是高于標準濃度稀釋，采用翼膜直刺的接種方法禽流感抗體均高于翅關節(jié)內側皮下斜刺的接種方法。不同的接種操作方法對免疫效果有顯著的影響。試驗1組、試多3組免疫接種后14d抗體滴度100%在222，而試驗2組、試驗4組免疫接種后14d抗體滴度100%小于21另據2005年黑山禽流感疫情期間全省13市用禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗對肉雞進行緊急免疫時監(jiān)測抗體的結果，免疫接種后14d檢測1679只，33%抗體滴度小于67%抗體滴度在之間，從另一側面證明了免疫接種不同操作方法對免疫效果有顯著影響。4.2本試驗使用的禽流感重組雞痘病毒載體活疫

8、苗，疫苗抗原載體是禽痘病毒。載體禽痘病毒在免疫消體內增殖的程度與免疫雞的禽流感抗體滴度的高低呈正相關性。試驗1組、試驗3組在翅膀內側三角區(qū)翼膜刺穿1次，此接種部位是雙面皮膚，兩層皮膚間無肌肉等組織。而試驗2組、試驗4組在翅關節(jié)內側斜刺1次，這兩組的接種部位是一層皮膚，皮下是肌肉、骨或關節(jié)韌帶等組織。本試驗中，4個試驗組均用相同刺種針接種1次，試驗1組、試驗3組被接種的皮膚細胞是試驗2組、試驗4組被接種的皮膚細胞的2倍。雞體上禽痘病毒的敏感細胞是皮膚細胞和氣管黏膜細胞。禽痘病毒一般經損傷的皮膚和黏膜而感染。禽痘病毒的傳播方式是細胞間傳播，禽痘病毒在敏感細胞內增殖后，不釋放出來，通過細胞間橋直接傳

9、播給相鄰敏感細胞。試驗1組、試驗3組的接種方式更符合禽痘病毒的傳播方式，疫苗接種采用了疫苗載體病毒自然感染的方式。試驗1組、試驗3組接種操作的方法，被接種的疫苗敏感細胞是試驗2組、試驗4組接種方法被接種的疫苗敏感細胞的2倍。4.3試驗2組接種的疫苗抗原稀釋濃度高于試驗1組1.5倍，而試驗2組在接種后14d抗體滴度低于2試驗1組組接種后14d抗體滴度100%達222?？赡茉蚴窃囼?組在關節(jié)部位用接種針斜刺接種，此部位皮下是肌肉、骨或關節(jié)韌帶等組織，肌肉、骨或關節(jié)韌帶等組織細胞不是疫苗載體禽痘病毒的敏感細胞，疫苗載體不能很好增殖，疫苗抗原就不能得到有效表達。4.4試驗2組、試驗4組禽流感抗體均低

10、于試驗1組和試驗3組，可能原因是試驗2組、試驗4組接種時將疫苗接種到皮下其他組織，導致疫苗直接接種到敏感細胞皮膚細胞的量不足：另一方面，如操作中進針深度不夠，使疫苗不能有效接種到組織內，疫苗抗原同樣不能很好表達。導致試驗2組、試驗4組的試驗雞實際疫苗接種量不如試驗1組、試驗3組確實有效。而疫苗的實際接種量直接影響免疫效果。說明只有接種操作方法正確，才能保證接種效果。綜上所述，疫苗接種操作方式、方法的正確性，對免疫效果有顯著影響，應引起養(yǎng)殖者高度重視。弛羔羊痢疾的診療體會2010年3月，法庫縣大孤家子張某飼養(yǎng)的絨山羊出生24d,出現精神萎頓、低頭拱背等癥狀，病羊與母羊分開，不食,喜臥，排惡臭黃色

11、或帶血的稀便，隨后昏迷死亡。通過流行病學調查、臨床癥狀和病理剖檢變化，確診為羔羊痢疾。經過采取綜合防制措施，病情得到控制。1臨床癥狀發(fā)病均為出生后24d的羔羊，超過1周的沒有發(fā)病。病羊拒食、喜臥、排出黃色稀薄如水的糞便，有的還帶有出血和黏液，下痢次數頻繁，糞便惡臭，糞色灰白，黃色或暗紅，羔羊時時弓背，體重減輕，體況愈來愈差，最后倒地死亡。2剖檢變化剖檢時可見尸體脫水現象嚴重，肛門周圍被稀糞污染。真胃內有未消化的凝乳塊，小腸出血性腸炎。胃、腸黏液充血和出血，腸黏膜壞死及潰瘍，潰瘍灶大小、多少不一。腸腔內充滿血樣內容物，腸系膜淋巴結腫脹充血或見有出血，心包積液，心內膜有出血點，肺有充血斑或淤血。23預防在常發(fā)地區(qū)，應定期注射羔羊痢I疾苗或“羊快疫、猝狙、腸毒血癥、羔羊痢I疾四聯(lián)苗”。平時加強母羊飼養(yǎng)管理，抓膘保§膘，使所產羔羊體格健狀，抵抗力增強。做j好消毒，用2%的火堿對圈舍周圍消毒，用百$毒殺和碘酚對羊舍消毒。合理哺乳，避免羔I羊饑飽不均，并注意羔羊冬季保暖工作。羔I羊出生后12h內，灌服土霉素0.15-0.2g,1I次/d,連服3d,有一定預防本病的效果。j4治療用鹽酸左旋氧窺