補(bǔ)腎醒腦方對(duì)實(shí)驗(yàn)性血管性癡呆大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響

1、補(bǔ)腎醒腦方對(duì)實(shí)驗(yàn)性血管性癡呆大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響         11-05-12 15:11:00     編輯：studa20                   作者：鄭攀,封銀曼,鄭宏,楊新年,夏寒星   【摘要】  目的 觀察補(bǔ)腎醒腦方對(duì)血管性癡

2、呆(VD)大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響,探討其病理機(jī)制。方法 采用反復(fù)夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈伴低血壓造成擬VD大鼠模型,通過(guò)原位末端標(biāo)記(TUNEL)法檢測(cè)腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果 補(bǔ)腎醒腦高、低劑量組可抑制缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。結(jié)論 補(bǔ)腎醒腦方能抑制腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡,緩解興奮性毒性損傷,保護(hù)大腦神經(jīng)細(xì)胞,這可能是補(bǔ)腎醒腦方治療VD的作用機(jī)制之一。 【關(guān)鍵詞】  補(bǔ)腎醒腦方；血管性癡呆；原位末端標(biāo)記；細(xì)胞凋亡；大鼠    Abstract：Objective To study the pathology mechanism of vascular dement

3、ia (VD) rats and study the effect of Bushenxingnao (BSXN) prescription on cerebral neurocyte apoptosis. Method Experimental VD model rats were caused by clipping two side of total artery in neck repeatedly and to examine cerebral neurocyte apoptosis with TUNEL. Results Both the high and low dose BSX

4、N abated excitatory toxic infury and inhibit neurocyte apoptosis after ischemia-refusion. Conclusion BSXN prescription can repress cerebral neurocyte apoptosis, to abate its excitatory nerotoxicity, to protect cerebral neurocyte, which may be one of the mechanisms of to treating the lesion. 

5、60;  Key words：Bushenxingnao prescription；vascular dementia；situ nick-end labeling；apoptosis；rat 血管性癡呆(vascular dementia,VD)是一系列腦血管因素導(dǎo)致腦組織損害而產(chǎn)生的癡呆癥狀的總稱,是在智能獲得充分發(fā)展后,由于中風(fēng)的損害造成退化的結(jié)果。筆者采用具有益氣補(bǔ)腎、祛瘀化痰、醒腦開竅作用的補(bǔ)腎醒腦方,觀察該藥對(duì)反復(fù)夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈伴低血壓所致癡呆模型大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響,旨在揭示補(bǔ)腎醒腦方治療VD的腦保護(hù)機(jī)制。1  實(shí)驗(yàn)材料1.1  動(dòng)物

6、    健康成年雄性Wistar大鼠100只,普通級(jí),體重(215±15)g,河南醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.2  藥物及試劑    補(bǔ)腎醒腦方(人參9 g,熟地黃12 g,制首烏12 g,女貞子12 g,赤芍9 g,丹參9 g,川芎9 g,遠(yuǎn)志6 g,石菖蒲6 g,天麻6 g),方中藥物均一次性購(gòu)于河南省藥材公司,并經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院中藥教研室鑒定為正品。制備：用藥物總體積的5倍量水浸泡2 h,煎沸后改文火煎,煎煮1 h后倒出藥液；繼用藥物體積3倍量水,先后再煎2次,合并3次濾液。濾過(guò),濾液用文火分別濃縮至(含原藥

7、材)濃度為高劑量(3 g/mL)、低劑量(1.5 g/mL)的濃縮液。無(wú)菌條件裝瓶,置4 冰箱保存?zhèn)溆?。喜得?zhèn),天津華津制藥廠與北京諾華制藥有限公司合作生產(chǎn),批號(hào)030212,用生理鹽水配制成0.03 mg/mL的藥液備用。硝普鈉粉針劑,50 mg/支,北京雙鶴現(xiàn)代醫(yī)藥技術(shù)有限公司生產(chǎn),批號(hào)0302162,用5%葡萄糖注射液配制成0.25 mg/mL的藥液,黑紙包裹避光保存?zhèn)溆?。水合氯?上海五聯(lián)化工廠生產(chǎn),批號(hào)20020418,用生理鹽水配制成100 mg/mL的藥液備用；亞硝酸鈉,天津市四通化工廠生產(chǎn),批號(hào)20020710；無(wú)水乙醇,鄭州化學(xué)試劑二廠生產(chǎn),批號(hào)030812；多聚甲醛,天津市

8、博迪化工有限公司生產(chǎn),批號(hào)2001920；原位末端標(biāo)記檢測(cè)凋亡試劑盒(TUNEL),法國(guó)博士德公司產(chǎn)品。1.3 儀器    輪轉(zhuǎn)式切片機(jī),德國(guó)Leitz 2145；BX60研究用萬(wàn)能顯微鏡,日本OLYMPUS公司。2  實(shí)驗(yàn)方法2.1  動(dòng)物分組動(dòng)物購(gòu)入后隨機(jī)分為5組：模型組(MX組)、假手術(shù)組(JS組)、喜德鎮(zhèn)組(XD組)及補(bǔ)腎醒腦高(BH組)、補(bǔ)腎醒腦低劑量組(BS)。每組按1、24 h分別再分2組,每組10只,每籠5只喂養(yǎng)。大鼠自由覓食飲水,在室溫2225 、相對(duì)濕度40%50%的環(huán)境中喂養(yǎng)3 d,待大鼠適應(yīng)環(huán)境后開始實(shí)驗(yàn)。2.2  給藥JS、MX組：生理鹽水ig,1 mL/100 g,1次/d；XD組：喜德鎮(zhèn)ig,1 mL/100 g,1次/d(0.6 mg/kg,相當(dāng)于正常成人用量的20倍)；BH組：補(bǔ)腎醒腦方(3 g/mL)ig,1次/d(30 g/kg,相當(dāng)于正常成人用量的20倍)；BS組：補(bǔ)腎醒腦方(1.5 g/mL)ig,1次/d(15 g/kg,相當(dāng)于正常成人用量的10倍)。2.3  造模灌胃第7日給藥后1 h,將大鼠用10%水合氯醛(350 mg/kg,腹腔注射)麻醉后仰臥固定在手術(shù)臺(tái)上,常規(guī)消毒,頸正中切口,分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈,