實(shí)驗(yàn)一-紫外分光光度法測(cè)定維生素C片中的VC含量

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上實(shí)驗(yàn)一 紫外分光光度法測(cè)定維生素C片中的VC含量一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解紫外分光光度計(jì)的主要結(jié)構(gòu)及工作原理。2、掌握紫外分光光度計(jì)的操作方法及紫外定性定量分析方法3掌握紫外分光光度法測(cè)定水中維生素C含量的原理與分析條件的選擇。二 、實(shí)驗(yàn)原理 維生素C是人體重要的維生素之一，它影響膠元蛋白的形成，參與人體多種氧化-還原反應(yīng),并且有解毒作用。人體不能自身制造Vc，所以人體必須不斷地從食物中攝入Vc，通常還需儲(chǔ)藏能維持一個(gè)月左右的Vc。缺乏時(shí)會(huì)產(chǎn)生壞血病，故又稱(chēng)抗壞血酸。 維生素C屬水溶性維生素，分子式C6H8O6。分子結(jié)構(gòu)中具有二烯醇結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)如下：它易溶于水，微溶于乙醇，

2、不溶于氯仿或乙醚。分子中的二烯醇基具極強(qiáng)的還原性，性質(zhì)活潑，易被氧化為二酮基而成為脫氫抗壞血酸。維生素 C分子結(jié)構(gòu)中有共軛雙鍵，固在紫外光區(qū)有較強(qiáng)的吸收。根據(jù)維生素C 在稀鹽酸溶液中，Vc吸收曲線(xiàn)比較穩(wěn)定，在最大吸收波長(zhǎng)處，其吸收值A(chǔ)的大小與維生素C的濃度c的大小成正比，符合郎伯比爾定律：A=bc其中A為吸收度；c為試樣中維生素C的濃度，mol·L-1；b為吸收池厚度，cm；為摩爾吸收系數(shù)，L·mol-1·cm-1。若在最大吸收波長(zhǎng)下，首先繪制出維生素C在最大吸收波長(zhǎng)下的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，然后在相同條件下測(cè)定出吸光度A，由測(cè)得的吸光度A在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查得濃度,換算為藥品中含

3、量(mg/片)。三、實(shí)驗(yàn)儀器與試劑1儀器 TU1810型紫外分光光度計(jì)。電子天平1臺(tái)，研缽1個(gè)，50mL容量瓶7只和500mL容量瓶1只 , 10mL移液管2支，100 mL、1000 mL燒杯2只。2試劑 維生素C標(biāo)準(zhǔn)品(抗壞血酸)，市售維生素C含片（100mg/片），冰醋酸，蒸餾水。四、實(shí)驗(yàn)步驟1. 配制維生素C標(biāo)準(zhǔn)貯備液500mL(濃度約為1.5×10-4mol/L):稱(chēng)取約0.0132g維生素C標(biāo)準(zhǔn)品于100mL的燒杯中，用超聲波助溶后定容于500mL容量瓶中，搖勻，配成貯備液。2. 配制標(biāo)準(zhǔn)系列：分別吸取上述貯備液1.00、2.00、4.00、8.00、16.00mL于50

4、mL容量瓶中，用蒸餾水定容。3. 確定最大吸收以蒸餾水為參比，在320220nm范圍內(nèi)測(cè)出維生素C的吸收光譜，并確定最大吸收波長(zhǎng)。4. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)以蒸餾水為參比，用上述標(biāo)準(zhǔn)系列溶液在 處分別測(cè)出吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。5樣品測(cè)定取3片Vc片劑研細(xì),準(zhǔn)確稱(chēng)取0.02g于100mL燒杯中,以去離子水稀釋至500mL。移取樣品溶液5.00mL于50mL容量瓶中,定容。在處測(cè)吸光度。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論1. 繪制吸收曲線(xiàn)，確定最大吸收波長(zhǎng)。 2. 以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖。 3. 在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的縱坐標(biāo)上找到試液的吸光度，然后在橫坐標(biāo)處查得相應(yīng)VC的濃度。 4. 計(jì)算維生素片劑中VC的含量。六、注意事項(xiàng)1. 維生素C會(huì)緩慢氧化成脫氫抗血酸，所以每次實(shí)驗(yàn)時(shí)必須配制新鮮溶液，并滴加幾滴醋酸。 2. 使用石英比色皿。 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，先關(guān)氘燈，再關(guān)主