黃酮類化合物ppt課件

1、黃酮類化合物黃酮類化合物Flavonoids第一節(jié)第一節(jié) 概述概述第二節(jié)第二節(jié) 理化性質(zhì)及顯色反應(yīng)理化性質(zhì)及顯色反應(yīng)第三節(jié)第三節(jié) 提取與分離提取與分離第四節(jié)第四節(jié) 檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定黃酮黃酮大多呈黃色或淡黃色，且分子中大多呈黃色或淡黃色，且分子中多含酮基。多含酮基。1814年年 發(fā)現(xiàn)第一個(gè)黃酮類化合物發(fā)現(xiàn)第一個(gè)黃酮類化合物白楊素白楊素19世紀(jì)末世紀(jì)末 德國(guó)人德國(guó)人Von Gerichten，Von Koslaneeki和英國(guó)人和英國(guó)人G.Perius 開始研開始研究，但進(jìn)展較慢。究，但進(jìn)展較慢。1951年年 僅有僅有104種除黃酮苷）種除黃酮苷）1974年年 1674種其中苷種其中苷

2、902個(gè)，苷元個(gè)，苷元772個(gè)）個(gè)）1993年年 超過超過4000個(gè)個(gè)2019年年 10000多個(gè)多個(gè)（一含義p 經(jīng)典：經(jīng)典：2-苯基色原酮；苯基色原酮；p 廣義：泛指兩個(gè)苯環(huán)廣義：泛指兩個(gè)苯環(huán)A與與B環(huán)通過三個(gè)碳原子相環(huán)通過三個(gè)碳原子相互聯(lián)結(jié)而成的一系列化合物互聯(lián)結(jié)而成的一系列化合物, 具有具有C6-C3-C6的基本骨的基本骨架。架。OO12345678123456ABO12345678123456ABC（二生物合成COOHNH2COCoAPALCoACOOC0AOOOHcinnamic acid-4-hydroxylaseCH2COC0ACOOHCHSHOOHOOHOHHOOHOOHiso

3、meraseOBA B B環(huán)來(lái)自桂皮酰輔酶環(huán)來(lái)自桂皮酰輔酶A A或羥基桂皮酰輔酶或羥基桂皮酰輔酶A A A A環(huán)來(lái)自環(huán)來(lái)自3 3個(gè)分子的丙二酰輔酶?jìng)€(gè)分子的丙二酰輔酶A A（三分布及存在形式p分布廣泛，主要存在于豆科、蕓香科的植物中。分布廣泛，主要存在于豆科、蕓香科的植物中。 p黃酮類多與糖成結(jié)合成苷，可成黃酮類多與糖成結(jié)合成苷，可成O-O-苷，也有苷，也有C-C-苷；苷；p在植物體內(nèi)的分布以花、果、葉等部位為多；在植物體內(nèi)的分布以花、果、葉等部位為多；（四結(jié)構(gòu)類型 1.結(jié)構(gòu)分類依據(jù)p 中央三碳鏈氧化程度中央三碳鏈氧化程度p B B環(huán)連接位置環(huán)連接位置p 三碳鏈?zhǔn)欠癯森h(huán)三碳鏈?zhǔn)欠癯森h(huán) OO123

4、45678123456ABCOO12345678123456ABCOOOHOHHOOH黃酮類黃酮類 Flavones Flavones常見取代基常見取代基A A環(huán)：環(huán)：5 5，7-OH7-OHB B環(huán)：環(huán)：33， 4-OH 4-OH木樨草素木樨草素白楊素白楊素2-2-苯基色原酮苯基色原酮2.主要骨架類型OO12345678123456ABOHC黃酮醇類黃酮醇類 Flavonol Flavonol3-OH3-OH蘆丁蘆丁槲皮素槲皮素OOOHOHHOOHOglc 6 1 rhaOO12345678123456ABOHCOOROOHOOHCH3OO12345678123456ABC二氫黃酮類二氫黃酮

5、類 Flavanones Flavanones二氫黃酮醇類二氫黃酮醇類 Flavanonols Flavanonols黃酮黃酮2 2，3-3-單鍵單鍵黃酮醇黃酮醇2 2，3-3-單鍵單鍵OOOHOHOHOHOH 橙皮素 R=H 橙皮苷 R=蕓香糖基 二氫槲皮素 OO12345678123456ABCOOOHHOglcOO12345678123456ABC 異黃酮類 Isoflavones 二氫異黃酮類 Isoflavonones3-3-苯基色原酮苯基色原酮OOOHHO葛根素葛根素C-C-苷）苷）大豆素大豆素OOHOHOHO+2345623456 查耳酮類 Chalcones 三碳鏈不成環(huán)三碳鏈

6、不成環(huán)編號(hào)不同編號(hào)不同OHOOOHOHOHOglcOHOOHOHOHglcOOHOOOOHOglcSO2新紅花苷(無(wú)色) 紅花苷(黃色) 醌式紅花苷(紅色)與二氫黃酮為異構(gòu)體與二氫黃酮為異構(gòu)體HHOCHOHOOHOH1234567123456OCHOHOOHR1OHR2OH+HOH 橙酮類橙酮類 Aurones Aurones三碳鏈成五元環(huán)三碳鏈成五元環(huán)硫磺菊素矢車菊元 R1=OH R2=H 飛燕草苷元 R1=R2=OH天竺葵苷元 R1=R2=HO12345678123456ABCOH 花色素類花色素類 Anthocyanidins Anthocyanidins1 1位氧鹽位氧鹽 4 4位無(wú)羰

7、基位無(wú)羰基 黃烷黃烷-3-3-醇類醇類 Flavan-3-olsFlavan-3-olsO12345678123456ABOHCO12345678123456ABOHCOH 黃烷黃烷-3,4-3,4-二醇類二醇類 Flavan-3,4-diols Flavan-3,4-diolsOHOHOOHOHOHHHOOHOHOHOHOHR1R2 無(wú)色矢車菊素 R1=OH R2=H無(wú)色飛燕草素 R1=R2=OH 無(wú)色天竺葵素 R1=R2=H （+）兒茶素 黃烷醇類黃烷醇類 Flavanols Flavanols3-OH3-OH3,4-OH3,4-OH花色素花色素1 1、2-2-，3 3、4-4-單鍵單鍵O

8、O12345678123456ABCOO12345678123456ABOHCOO12345678123456ABC黃酮類黃酮類 Flavones Flavones黃酮醇類黃酮醇類 Flavonol Flavonol二氫黃酮類二氫黃酮類 Flavanones Flavanones二氫黃酮醇類二氫黃酮醇類FlavanonolsFlavanonolsOO12345678123456ABOHC小結(jié)：小結(jié)：O12345678123456ABOHCO12345678123456ABOHCOHOO12345678123456ABC 黃烷黃烷-3-3-醇類醇類 Flavan-3-ols Flavan-3-o

9、ls 黃烷黃烷-3,4-3,4-二醇類二醇類 Flavan-3,4- Flavan-3,4-diolsdiols 異黃酮類異黃酮類IsoflavonesIsoflavones 二氫異黃酮類二氫異黃酮類IsoflavononesIsoflavonones OO12345678123456ABCO12345678123456ABCOHOHABOOCHO(11)(11)花色素類花色素類 AnthocyanidinsAnthocyanidins 查耳酮類查耳酮類 Chalcones Chalcones 二氫查耳酮類二氫查耳酮類 DihydrohalconesDihydrohalcones(12) 橙酮

10、類 AuronesOOHABOOACBp 雙苯吡酮類雙苯吡酮類p Xanthones Xanthonesp 高異黃酮類高異黃酮類p Homoisoflavones HomoisoflavonesOOp 雙黃酮類雙黃酮類 biflavonoids biflavonoids p 2 2分子黃酮分子黃酮p 2 2分子二氫黃酮分子二氫黃酮p 1 1分子黃酮分子黃酮 + 1 + 1分子二氫黃酮分子二氫黃酮通過通過C-O-CC-O-C、C-CC-C相連相連OOOCH3OHH3COOHOOOHHOOH銀杏雙黃酮素銀杏雙黃酮素p 黃酮木脂素黃酮木脂素 Flavonolignan Flavonolignan p

11、 1 1分子黃酮分子黃酮 + 1 + 1分子木脂素分子木脂素p 生物堿型黃酮生物堿型黃酮 p 黃酮骨架上連有含氮部分，如榕堿、異榕堿。黃酮骨架上連有含氮部分，如榕堿、異榕堿。OOHOOHOHOOOHOCH3CH2OH水飛薊素水飛薊素3.代表化合物舉例OOOHOHHOOHOHOOOHOHHOOHOOOHOHHOOHOglc 6 1 rhaOOHOHHOOHOHH木樨草素木樨草素槲皮素槲皮素蘆丁蘆?。? +）- -兒茶素兒茶素OOOHHOglcOOOHHO大豆素大豆素葛根素葛根素（五生物活性 對(duì)心血管系統(tǒng)的作用：對(duì)心血管系統(tǒng)的作用： 降低毛細(xì)血管脆性及異常通透性：蘆丁、橙皮苷降低毛細(xì)血管脆性及異常

12、通透性：蘆丁、橙皮苷 擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，治療冠心病：擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，治療冠心病： 葛根素葛根素 降壓降壓 抑制血小板聚集及血栓形成抑制血小板聚集及血栓形成 抗肝臟毒作用：水飛薊素、（抗肝臟毒作用：水飛薊素、（+ +）- -兒茶素兒茶素 抗炎作用：二氫槲皮素抗炎作用：二氫槲皮素 雌激素樣作用：大豆素、染料木素等雌激素樣作用：大豆素、染料木素等 抗菌、抗病毒作用：木樨草素、黃芩苷、黃芩素抗菌、抗病毒作用：木樨草素、黃芩苷、黃芩素 槲皮素、山萘素、二氫槲皮素槲皮素、山萘素、二氫槲皮素 瀉下作用：營(yíng)石苷瀉下作用：營(yíng)石苷 A A 解痙作用：異甘草素、大豆素解痙作用：異甘草素、大豆素第一節(jié)第一節(jié) 概述概述第二節(jié)

13、第二節(jié) 理化性質(zhì)及顯色反應(yīng)理化性質(zhì)及顯色反應(yīng)第三節(jié)第三節(jié) 提取與分離提取與分離第四節(jié)第四節(jié) 檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定1.1.物態(tài)：多為結(jié)晶性固體，少為無(wú)定形粉末；物態(tài)：多為結(jié)晶性固體，少為無(wú)定形粉末；2.2.光學(xué)活性：光學(xué)活性： 苷元：二氫黃酮醇）、黃烷醇，具手性碳，有光學(xué)活性；苷元：二氫黃酮醇）、黃烷醇，具手性碳，有光學(xué)活性； 苷：糖的引入，均有光學(xué)活性。苷：糖的引入，均有光學(xué)活性。一、性狀OOOHOOHOHOO3.3.顏色：與分子中是否存在交叉共軛體系及助色團(tuán)的類顏色：與分子中是否存在交叉共軛體系及助色團(tuán)的類型、數(shù)目和取代位置有關(guān)。型、數(shù)目和取代位置有關(guān)。交叉共軛體系的存在與否；交叉共

14、軛體系的存在與否；色原酮：無(wú)色色原酮：無(wú)色OO異黃酮：微黃色異黃酮：微黃色OOOH二氫黃酮醇）：無(wú)色二氫黃酮醇）：無(wú)色OOOH黃酮醇）、查耳酮：灰黃黃酮醇）、查耳酮：灰黃- -黃色黃色助色團(tuán)的引入，顏色加深，助色團(tuán)的引入，顏色加深，7,47,4引入助色團(tuán)，引入助色團(tuán)，對(duì)顏色影響較大；對(duì)顏色影響較大； 花色素的顏色與花色素的顏色與pHpH值有關(guān)；值有關(guān)；OOOHHOOH74紅紅-紫紫-藍(lán)藍(lán)二、 溶解性 H2O MeOH EtOH Et2O CHCl3游離黃酮游離黃酮 - + + + +黃酮苷黃酮苷 +（熱）（熱） + + - -p與分子存在狀態(tài)有關(guān)；與分子存在狀態(tài)有關(guān)；OOOHp 游離苷元的溶解

15、性與分子結(jié)構(gòu)的平面性有關(guān)：平面性越游離苷元的溶解性與分子結(jié)構(gòu)的平面性有關(guān)：平面性越強(qiáng)，水溶性越差。強(qiáng)，水溶性越差。黃酮醇）、查耳酮黃酮醇）、查耳酮 二氫黃酮、二氫黃酮醇二氫黃酮、二氫黃酮醇 花色素花色素 7-O- 7-O-苷苷三、 酸性與堿性 1、酸性O(shè)OOHOHp 酸性的來(lái)源：酚羥基酸性的來(lái)源：酚羥基p 影響酸性強(qiáng)弱的因素：酚羥基的數(shù)目及位置影響酸性強(qiáng)弱的因素：酚羥基的數(shù)目及位置p 7,4- 7,4-二二OH 7-OHOH 7-OH或或4-OH 4-OH 一般一般Ar-OH 5-OHAr-OH 5-OHp 5% NaHCO3 5% Na2CO3 0.2% NaOH 4% 5% NaHCO3

16、5% Na2CO3 0.2% NaOH 4% NaOH NaOH OOOHHOOH74 PH PH梯度萃取梯度萃取 2、弱堿性p堿性的來(lái)源：堿性的來(lái)源：- -吡喃酮環(huán)上吡喃酮環(huán)上1 1位氧上孤對(duì)電子位氧上孤對(duì)電子OOH黃酮類黃酮類濃濃H2SO4 / H2SO4 / 濃濃HClHCl鹽鹽H2OH2O分解分解黃酮類黃酮類四、 顯色反應(yīng) （一還原反應(yīng)（一還原反應(yīng)（二金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)（二金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)（三硼酸顯色反應(yīng)（三硼酸顯色反應(yīng)（四堿性試劑顯色反應(yīng)（四堿性試劑顯色反應(yīng)（一還原反應(yīng) 1. 1. 鹽酸鹽酸- -鎂粉或鋅粉反響：鎂粉或鋅粉反響： 黃酮醇）、二氫黃酮醇）黃酮醇）、二氫黃酮醇）多數(shù)

17、呈橙紅多數(shù)呈橙紅紫紅色紫紅色 少數(shù)呈紫色少數(shù)呈紫色藍(lán)色藍(lán)色 查耳酮、橙酮、兒茶素類及異黃酮類查耳酮、橙酮、兒茶素類及異黃酮類 陰性陰性反應(yīng)反應(yīng)2. 2. 四氫硼鈉反應(yīng)：四氫硼鈉反應(yīng)： 二氫黃酮醇類二氫黃酮醇類紅色紫色紅色紫色 （二金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)p 反應(yīng)官能團(tuán)：反應(yīng)官能團(tuán)：3-OH3-OH，4-C=O4-C=Op 5-OH 5-OH，4-C=O4-C=Op 鄰二酚羥基鄰二酚羥基OOOHOHOHOH1.1.鋁鹽反應(yīng)鋁鹽反應(yīng) 三氯化鋁反應(yīng)三氯化鋁反應(yīng) 與與1%AlCl31%AlCl3反應(yīng)顯反應(yīng)顯 黃色，黃色，UVUV下有熒光；下有熒光； 2. 2.鉛鹽反應(yīng)鉛鹽反應(yīng) 醋酸鉛反應(yīng)醋酸鉛反應(yīng)與與1%

18、1%醋酸鉛或堿式醋酸鉛，可生成醋酸鉛或堿式醋酸鉛，可生成 黃紅色沉淀黃紅色沉淀醋酸鉛：鄰二酚羥基、或醋酸鉛：鄰二酚羥基、或3-OH3-OH，4-C=O4-C=O、 5-OH 5-OH，4-C=O 4-C=O 堿式醋酸鉛：一般酚羥基類堿式醋酸鉛：一般酚羥基類 OOOZrHOOHOHOHOClH2O 3-OH,4-C=O 3-OH,4-C=O 5-OH,4-C=O 5-OH,4-C=O+ 2%ZrOCl2+ 2%ZrOCl2H+H+ 穩(wěn)定，不褪色穩(wěn)定，不褪色 不穩(wěn)定分解，不穩(wěn)定分解，顯著褪色顯著褪色二氫黃酮醇）二氫黃酮醇） 天藍(lán)色熒光天藍(lán)色熒光其他黃酮類其他黃酮類 黃色橙黃褐色黃色橙黃褐色 4.4

19、.鎂鹽反應(yīng)鎂鹽反應(yīng) 醋酸鎂反應(yīng)醋酸鎂反應(yīng) 紙上進(jìn)行，紫外燈下觀察紙上進(jìn)行，紫外燈下觀察OSrO+H2OOHOHSr+2HO- 4. 4. 三氯化鐵反應(yīng)三氯化鐵反應(yīng)SrCl2SrCl2OH-OH-酚羥基酚羥基FeCl3FeCl3（三硼酸顯色反應(yīng)OOHOBOOOOOH+H+H3BOH3BO4 4亮黃色5-OH5-OH黃酮黃酮2-OH2-OH查耳酮查耳酮OOOHOHO（四堿性試劑顯色反應(yīng)p黃酮醇類黃酮醇類p 二氫黃酮類二氫黃酮類OH-OH-顯橙黃色顯橙黃色OH-OH-呈黃色呈黃色空氣空氣棕色棕色OOOHOHOHOOHOCH3OCH3OHOHHOHO-H+p具鄰二酚羥基或具鄰二酚羥基或3，4-二羥基黃

20、酮二羥基黃酮OH-OH-顯黃深紅綠棕色顯黃深紅綠棕色用化學(xué)方法鑒別用化學(xué)方法鑒別A-DA-D第一節(jié)第一節(jié) 概述概述第二節(jié)第二節(jié) 理化性質(zhì)及顯色反應(yīng)理化性質(zhì)及顯色反應(yīng)第三節(jié)第三節(jié) 提取與分離提取與分離第四節(jié)第四節(jié) 檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定一、提取粗提物的精制1 1、溶劑萃取法：、溶劑萃取法： 石油醚處理除去醇提物中的脂溶性雜質(zhì)：石油醚處理除去醇提物中的脂溶性雜質(zhì)： 水醇法除去水提液中的水溶性雜質(zhì)。水醇法除去水提液中的水溶性雜質(zhì)。2 2、堿提酸沉法：注意堿度、酸度應(yīng)適宜，如蘆丁的提?。?、堿提酸沉法：注意堿度、酸度應(yīng)適宜，如蘆丁的提?。? 3、炭粉吸附法：用于黃酮苷的精制、炭粉吸附法：用于黃酮苷

21、的精制 黃酮甲醇液黃酮甲醇液活性炭活性炭吸苷炭吸苷炭沸水沸水沸甲醇沸甲醇7%7%酚酚/ /水水15%15%酚酚/ /醇醇洗脫洗脫二、分別二、分別（一柱色譜法（一柱色譜法（二（二pHpH梯度萃取法梯度萃取法（一柱色譜法（一柱色譜法1.1.硅膠柱色譜：硅膠柱色譜：適于：異黃酮、二氫黃酮醇）、高度甲基化的黃適于：異黃酮、二氫黃酮醇）、高度甲基化的黃酮醇等極性較小的化合物。酮醇等極性較小的化合物。2.2.聚酰胺柱色譜：聚酰胺柱色譜： 原理：黃酮化合物分子中的酚羥基與聚酰胺原理：黃酮化合物分子中的酚羥基與聚酰胺中的酰胺羰基形成氫鍵締合。中的酰胺羰基形成氫鍵締合。 影響吸附力的因素：影響吸附力的因素：1.

22、1.形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目：數(shù)目越多，吸附越強(qiáng)。形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目：數(shù)目越多，吸附越強(qiáng)。2.2.形成氫鍵的基團(tuán)所處的位置：形成氫鍵的基團(tuán)所處的位置： 處于易形成分子內(nèi)氫鍵者，吸附減弱。處于易形成分子內(nèi)氫鍵者，吸附減弱。3.3.分子中芳香化程度：芳香化程度越高，吸附增強(qiáng)。分子中芳香化程度：芳香化程度越高，吸附增強(qiáng)。OHHOOHOHOHOHOHOHOHOHOHOH如：u各種溶劑在聚酰胺柱上的洗脫能力：各種溶劑在聚酰胺柱上的洗脫能力：u水水 甲醇甲醇 丙酮丙酮 氫氧化鈉水溶液氫氧化鈉水溶液 甲酰胺甲酰胺 二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺 尿素水溶液尿素水溶液 弱弱強(qiáng)強(qiáng)常用溶劑：水、含水醇、醇常用溶劑：水、含水醇

23、、醇黃酮類在聚酰胺柱上的洗脫規(guī)律：黃酮類在聚酰胺柱上的洗脫規(guī)律： 苷元相同時(shí)，三糖苷苷元相同時(shí)，三糖苷二糖苷二糖苷單糖苷單糖苷苷苷元；元； Ar-OH Ar-OH數(shù)目數(shù)目，洗脫速度，洗脫速度； Ar-OH Ar-OH數(shù)目相同時(shí)，其位置影響洗脫順序：數(shù)目相同時(shí)，其位置影響洗脫順序： 易形成分子內(nèi)氫鍵者，易洗脫；易形成分子內(nèi)氫鍵者，易洗脫； OOHOOHOOOHHOOOOHOHOH OOO HO HO HH OOO HO H 不同類型黃酮，異黃酮不同類型黃酮，異黃酮二氫黃酮醇二氫黃酮醇黃酮黃酮黃黃酮醇；酮醇； 芳香化程度高，難洗脫；芳香化程度高，難洗脫；OH OOO HO HO HH OOO HO

24、 HOOHOOHOHOHOOHOOHOHOHOCH3OOHOOHOHOHOHOOHOOHOHOHHOOOOOHOHOHrha-glcABCDE聚酰胺聚酰胺TLC RfTLC Rf值：值：聚酰胺柱色譜聚酰胺柱色譜 洗脫順序：洗脫順序：E B A C DE B A C DE B A C DE B A C D3.3.葡聚糖凝膠柱色譜：葡聚糖凝膠柱色譜： 常用凝膠型號(hào)：常用凝膠型號(hào)：Sephadex GSephadex G Sephadex LH-20 Sephadex LH-20 雙重分離原理：分離游離黃酮雙重分離原理：分離游離黃酮吸附原理吸附原理 （游離（游離Ar-OHAr-OH的數(shù)目）的數(shù)目）

25、分離黃酮苷分離黃酮苷分子篩原理分子篩原理 （二（二pH梯度萃取法梯度萃取法7,4-7,4-二二OH 7-OHOH 7-OH或或4-OH 4-OH 一般一般Ar-OH 5-OHAr-OH 5-OH5% NaHCO3 5% Na2CO3 0.2% NaOH 4% NaOH5% NaHCO3 5% Na2CO3 0.2% NaOH 4% NaOH l 用于分離酸度不同的黃酮苷元用于分離酸度不同的黃酮苷元第一節(jié)第一節(jié) 概述概述第二節(jié)第二節(jié) 理化性質(zhì)及顯色反應(yīng)理化性質(zhì)及顯色反應(yīng)第三節(jié)第三節(jié) 提取與分離提取與分離第四節(jié)第四節(jié) 檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定第四節(jié) 檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定色譜法、化學(xué)法、波譜法的綜合運(yùn)

26、用。色譜法、化學(xué)法、波譜法的綜合運(yùn)用。 一、色譜法一、色譜法 二、二、UVUV 三、三、1H-NMR1H-NMR 四、四、13C-NMR13C-NMR 五、五、MSMS一、色譜法在黃酮類結(jié)構(gòu)確定中的應(yīng)用一、色譜法在黃酮類結(jié)構(gòu)確定中的應(yīng)用（一）（一） PC PC 雙向色譜雙向色譜: : 用于分離黃酮類及其苷的混合物用于分離黃酮類及其苷的混合物 第一向：醇性展開劑第一向：醇性展開劑 n-BuOH-HAc-H2O(4:1:5 n-BuOH-HAc-H2O(4:1:5上層，上層，BAW)BAW)、水飽和的、水飽和的n-BuOHn-BuOH； 第二向：水或水性展開劑第二向：水或水性展開劑 2% 2%6%

27、 HAc6% HAc、 3%NaCl 3%NaCl 檢檢 視：視：UV / UV / 氨熏變色氨熏變色/ 2%AlCl3/ 2%AlCl3運(yùn)用：不同結(jié)構(gòu)類型黃酮，在不同展開系統(tǒng)中運(yùn)用：不同結(jié)構(gòu)類型黃酮，在不同展開系統(tǒng)中RfRf值不同。值不同。 醇性展開劑醇性展開劑BAW BAW 苷元苷元 單糖苷單糖苷 雙糖苷雙糖苷 水性展開劑水性展開劑2%-6%HAc2%-6%HAc、3%NaCl 3%NaCl 苷元苷元 單糖苷單糖苷 雙糖雙糖苷苷（二硅膠（二硅膠TLC TLC 弱極性的黃酮弱極性的黃酮 黃酮苷元展開系統(tǒng)：黃酮苷元展開系統(tǒng)： 甲苯甲苯- -甲酸甲酯甲酸甲酯- -甲酸甲酸5 5：4 4：1 1）

28、常用常用 苯苯- -甲醇甲醇 （9595：5 5） 苯苯- -甲醇甲醇- -醋酸醋酸3535：5 5：5 5） 氯仿氯仿- -甲醇甲醇8585：1515， 70 70：5 5） 甲苯甲苯- -氯仿氯仿- -丙酮丙酮4040：2525：3535） 丁醇丁醇- -吡啶吡啶- -甲酸甲酸 （4040：1010：2 2） 黃酮衍生物甲醚化或乙?；归_系統(tǒng)黃酮衍生物甲醚化或乙?；归_系統(tǒng) 苯苯- -丙酮丙酮9 9：1 1） 苯苯- -乙酸乙酯乙酸乙酯7575：2525） （三聚酰胺（三聚酰胺TLC TLC 含游離酚羥基的黃酮及其苷類含游離酚羥基的黃酮及其苷類 常用展開劑：乙醇常用展開劑：乙醇- -水水3

29、:23:2） 水水- -乙醇乙醇- -乙酰丙酮乙酰丙酮4:2:1 4:2:1 ） 水水- -乙醇乙醇- -甲酸甲酸- -乙酰丙酮乙酰丙酮5:1.5:1:0.55:1.5:1:0.5） 水飽和的正丁醇水飽和的正丁醇- -醋酸醋酸100:1100:1，100:2100:2） 丙酮丙酮- -水水1:11:1） 丙酮丙酮-95%-95%乙醇乙醇- -水水2:1:22:1:2） 95% 95%乙醇乙醇- -醋酸醋酸100:2100:2） 苯苯- -甲醇甲醇- -丁酮丁酮60:20:2060:20:20） 一、色譜法一、色譜法 二、二、UVUV 三、三、1H-NMR1H-NMR 四、四、13C-NMR13

30、C-NMR 五、五、MSMS二、二、UVUV在黃酮類化合物鑒定中的應(yīng)用在黃酮類化合物鑒定中的應(yīng)用（一黃酮類在甲醇中的（一黃酮類在甲醇中的UVUV特點(diǎn)特點(diǎn)（二診斷試劑位移及其在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的意義（二診斷試劑位移及其在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的意義OOROOROOR-+- 苯甲?；郊柞；?flavone (R=H) 桂皮?；鹌；?（benzoyl） flavonol(R=OH) （cinnamoyl） 帶帶II, 220 280nm 帶帶I, 300 400nm （一黃酮類在甲醇中的（一黃酮類在甲醇中的UVUV特點(diǎn)特點(diǎn) 共性共性1.1.黃酮及黃酮醇類黃酮及黃酮醇類 共性：帶共性：帶、帶、帶（24028024

31、0280均均較強(qiáng)較強(qiáng) 區(qū)別：帶區(qū)別：帶位置不同位置不同 黃酮：黃酮：304350nm304350nm 黃酮醇黃酮醇3-OH3-OH游離）：游離）：352385nm352385nm 黃酮醇黃酮醇3-OH3-OH取代）：取代）：328357nm328357nmOOHOOHOHOHOOHOOHOHOHOH w母核氧取代，相應(yīng)吸收帶紅移母核氧取代，相應(yīng)吸收帶紅移w 帶帶 母核氧取代母核氧取代，紅移，紅移w 帶帶 A A環(huán)氧取代環(huán)氧取代，紅移，紅移OO2.2.查耳酮及橙酮類查耳酮及橙酮類w共性：帶共性：帶很強(qiáng)，為主峰很強(qiáng)，為主峰w 帶帶 （220270220270較弱，為次強(qiáng)峰較弱，為次強(qiáng)峰w區(qū)別：帶區(qū)

32、別：帶峰位不同峰位不同w 查耳酮：查耳酮：340340390nm390nmw 橙酮：橙酮： 370 370430nm430nmw OHOHOOHOHOOCHOHOH3.3.異黃酮、二氫黃酮醇類異黃酮、二氫黃酮醇類w共性：帶共性：帶為主峰為主峰w 帶帶很弱，為主峰的肩很弱，為主峰的肩峰峰w區(qū)別：帶區(qū)別：帶峰位不同峰位不同w 異黃酮：異黃酮： 245270nm 245270nmw 二氫黃酮醇）：二氫黃酮醇）： 270295nm 270295nm OOOOHOOHHO、均較強(qiáng)均較強(qiáng)：黃酮：黃酮： 304350nm 304350nm 黃酮醇：黃酮醇：352385nm 352385nm 主峰，主峰，為次

33、強(qiáng)為次強(qiáng)：查耳酮：查耳酮：340340390nm390nm 橙酮：橙酮： 370 370430nm430nm為主峰，為主峰，為肩峰為肩峰： 異黃酮：異黃酮： 245270nm 245270nm 二氫黃酮醇）：二氫黃酮醇）：270295nm 270295nm 小結(jié)：在小結(jié)：在MeOHMeOH中的中的UVUV特點(diǎn)特點(diǎn) 確定黃酮類化合物的骨架類型確定黃酮類化合物的骨架類型（二診斷試劑位移及其在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的意義（二診斷試劑位移及其在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的意義常用診斷試劑：常用診斷試劑： NaOMe NaOMe NaOAc NaOAc NaOAc/H3BO4 NaOAc/H3BO4 AlCl3 AlCl3及及Al

34、Cl3/HClAlCl3/HCl1.NaOMe1.NaOMer 堿性強(qiáng)，解離所有堿性強(qiáng)，解離所有Ar-OHAr-OHr 帶帶， +4060 nm +4060 nm，強(qiáng)度不降，強(qiáng)度不降 示有示有4 4-OH-OH； r 帶帶， +5060 nm +5060 nm，強(qiáng)度下降，強(qiáng)度下降 示有示有3-OH, 3-OH, 但但無(wú)無(wú)4 4-OH-OH；r 帶帶、 吸收譜隨著時(shí)間延長(zhǎng)而衰退吸收譜隨著時(shí)間延長(zhǎng)而衰退示有示有3 3，4-4-二二OHOH或或3 3，33，44，- -三三OHOH等。等。200 300 400 500MeOH -MeOH -NaOMe -NaOMe -OOOHHOOHOHOglc

35、61rha+50nm,+50nm,強(qiáng)度增加不降）強(qiáng)度增加不降）有有4 4-OH -OH OOOHOOHOCH3OHrha200 300 400 500MeOH -MeOH -NaOMe -NaOMe -+50nm+50nm，強(qiáng)度降低，強(qiáng)度降低有有3-OH3-OH，無(wú)，無(wú)4 4-OH -OH 2.NaOAc2.NaOAc未熔融）未熔融）200 300 400 500r 堿性較弱，使酸性強(qiáng)的堿性較弱，使酸性強(qiáng)的Ar-OHAr-OH解離解離r 帶帶，+520nm +520nm 示有示有7-OH7-OHMeOH -MeOH -NaOAc -NaOAc -OOOHHOOHOHOglc 61rha+12n

36、m+12nm3. NaOAc/H3BO43. NaOAc/H3BO4r帶帶 ，+5+510nm A10nm A環(huán)有鄰二環(huán)有鄰二Ar-OHAr-OHr帶帶，+12+1230nm B30nm B環(huán)有鄰二環(huán)有鄰二Ar-OHAr-OH4. AlCl34. AlCl3及及AlCl3/HClAlCl3/HCl3-OH,4-C=O3-OH,4-C=O5-OH,4-C=O5-OH,4-C=O鄰二鄰二Ar-OHAr-OHAlCl3AlCl3HClHCl 不分解不分解 不分解不分解 分解分解穩(wěn)定性穩(wěn)定性AlCl3/HCl AlCl3 MeOHAlCl3/HCl AlCl3 MeOH判斷鄰二判斷鄰二Ar-OHAr-

37、OH的有無(wú)、位置的有無(wú)、位置判斷分子中判斷分子中3-OH,5-OH3-OH,5-OH的有無(wú)的有無(wú)3-OH,4-C=O3-OH,4-C=O5-OH,4-C=O5-OH,4-C=O鄰二鄰二Ar-OHAr-OHAlCl3AlCl3HClHCl 不分解不分解 不分解不分解 分解分解穩(wěn)定性穩(wěn)定性AlCl3/HCl AlCl3/HCl AlCl3 AlCl3 無(wú)鄰二無(wú)鄰二Ar-OHAr-OHAlCl3/HCl AlCl3 AlCl3/HCl AlCl3 有鄰二有鄰二Ar-OHAr-OH帶帶紫移紫移 - 3040nm B - 3040nm B環(huán)有環(huán)有帶帶紫移紫移 - 5065nm A - 5065nm A、

38、B B環(huán)上均可能有環(huán)上均可能有OOOHHOOHOHOglc 61rhaAlClAlCl3 3 AlCl3/HCl AlCl3/HCl -43nm-43nmB B環(huán)有鄰二環(huán)有鄰二Ar-OHAr-OH3-OH,4-C=O3-OH,4-C=O5-OH,4-C=O5-OH,4-C=O鄰二鄰二Ar-OHAr-OHAlCl3AlCl3HClHCl 不分解不分解 不分解不分解 分解分解穩(wěn)定性穩(wěn)定性AlCl3/HCl AlCl3/HCl MeOH MeOH 無(wú)無(wú)3-OH3-OH，無(wú)，無(wú)5-OH5-OHAlCl3/HCl MeOH AlCl3/HCl MeOH 可能有可能有3-OH3-OH、5-OH5-OH 帶

39、帶 + 3555nm + 3555nm 只有只有5-OH5-OH + 5060nm + 5060nm 可能有可能有3-OH3-OH或或3 3，5-5-二二OHOH診斷試劑診斷試劑 位移規(guī)律位移規(guī)律 歸歸 屬屬 NaOMe NaOMe 帶帶I I紅移紅移4060 nm4060 nm，強(qiáng)度不降，強(qiáng)度不降 示有示有4-OH 4-OH 帶帶I I紅移紅移5060 nm5060 nm，強(qiáng)度下降，強(qiáng)度下降 示有示有3-OH3-OH、但無(wú)、但無(wú)4-OH4-OH NaOAc NaOAc （未熔融）（未熔融） 帶帶IIII紅移紅移520nm 520nm 示有示有7-OH7-OH NaOAc / H3BO3 Na

40、OAc / H3BO3 帶帶I I紅移紅移1230nm 1230nm 示示B B環(huán)有鄰二酚羥基環(huán)有鄰二酚羥基 帶帶IIII紅移紅移510nm 510nm 示示A A環(huán)有鄰二酚羥基環(huán)有鄰二酚羥基 小結(jié)：診斷試劑位移小結(jié)：診斷試劑位移 黃酮類化合物的取代式樣黃酮類化合物的取代式樣 AlCl3/HCl AlCl3/HCl譜圖譜圖 = MeOH = MeOH譜圖譜圖 示無(wú)示無(wú)3-3-及及5-OH5-OH AlCl3/HCl AlCl3/HCl譜圖譜圖 MeOH MeOH譜圖譜圖 示可能有示可能有3-3-及及/ /或或5-OH5-OH 帶帶I I紅移紅移3555 nm 3555 nm 示只有示只有5-O

41、H5-OH 紅移紅移5060 nm 5060 nm 示可能有示可能有3-OH3-OH或或3 3，5-5-二二OH OH 診斷試劑診斷試劑 位移規(guī)律位移規(guī)律 歸歸 屬屬AlCl3/HClAlCl3/HCl譜圖譜圖 = AlCl3 = AlCl3譜圖譜圖 示無(wú)鄰二酚羥基示無(wú)鄰二酚羥基AlCl3/HClAlCl3/HCl譜圖譜圖 AlCl3 AlCl3譜圖譜圖 示有鄰二酚羥基示有鄰二酚羥基 帶帶紫移紫移3040 nm 3040 nm 示示B B環(huán)有鄰二酚羥基環(huán)有鄰二酚羥基 帶帶IIII紫移紫移5065 nm 5065 nm 示示A A、B B環(huán)上均可能有鄰二酚羥基環(huán)上均可能有鄰二酚羥基小結(jié)：診斷試劑位移小結(jié)：診斷試劑位移 黃酮類化合物的取代式樣黃酮類化合物的取代式樣例：從天然藥物柴胡中分離得到山柰苷，經(jīng)酸水解后用例：從天然藥物柴胡中分離得到山柰苷，經(jīng)酸水解后用PC檢出有鼠