生物安全實(shí)驗室操作技術(shù)規(guī)范

1、發(fā)展概況和我國現(xiàn)狀發(fā)展概況和我國現(xiàn)狀 國際概況 20世紀(jì)5060年代 1983年WHO第一版實(shí)驗室生物安全手冊（Laboratory Biosafety Manual） 1993年WHO發(fā)表了第二版實(shí)驗室生物安全手冊(Laboratory Biosafety Manual ，2nd edition) 2002年WHO又發(fā)表了實(shí)驗室生物安全手冊第二版的網(wǎng)絡(luò)修訂版 2004年正式發(fā)布了第三版。 關(guān)于實(shí)驗室生物安全規(guī)范化管理，美國、歐洲、加拿大等國家做得都比較好。 在1993年由美國疾病預(yù)防控制中心/國立衛(wèi)生研究院（CDC/NIH）發(fā)布了Biosafety in the Microbiologica

2、l and Biomedical Laboratories Manual,3th edition CDC/NIH 1999年發(fā)布了第四版，目前已被國際公認(rèn)為“金標(biāo)準(zhǔn)”。國內(nèi)概況（1）：起步 進(jìn)口少數(shù)BSL-3實(shí)驗室 20世紀(jì)80年代我國自己研制第一個國產(chǎn)三級生物安全防護(hù)水平（biosafety level 3, BSL-3）實(shí)驗室誕生 我國也建造了一批此種防護(hù)水平或接近BSL-3水平的生物安全實(shí)驗室。 2002年頒布了微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗室生物安全通用準(zhǔn)則（WS 2332002），這是一個開創(chuàng)性工作。 2003年獸醫(yī)實(shí)驗室生物安全通用標(biāo)準(zhǔn)并已頒布實(shí)施。國內(nèi)概況（2）：SARSSARS期間期間

3、2003年5月6日科技部、衛(wèi)生部、國家食品藥品監(jiān)督管理局和國家環(huán)境保護(hù)總局聯(lián)合發(fā)布了關(guān)于印發(fā)傳染性非典型肺炎病毒研究實(shí)驗室暫行管理辦法的通知。其內(nèi)容包括傳染性非典型肺炎病毒研究實(shí)驗室暫行管理辦法和傳染性非典型肺炎病毒的毒種保存、使用和感染動物模型的暫行管理辦法。國內(nèi)概況（國內(nèi)概況（3 3）：國家標(biāo)準(zhǔn)）：國家標(biāo)準(zhǔn) 2003年8月開始起草，實(shí)驗室生物安全通用要求GB19489-2004。2004年5月中華人民共和國質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局和中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會正式頒布了該標(biāo)準(zhǔn)。 2004年9月1日中華人民共和國建設(shè)部與國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局又聯(lián)合發(fā)布了生物安全實(shí)驗室建設(shè)技術(shù)規(guī)范(GB503

4、46-2004）國內(nèi)概況（4） 病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例 2004年11月12日，由溫家寶總理簽發(fā)中華人民共和國國務(wù)院令(第424號)公布施行病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例（簡稱條例）。該條例規(guī)定了在病原微生物實(shí)驗活動中保護(hù)實(shí)驗人員和公眾健康的宗旨，從而使我國病原微生物實(shí)驗室的管理工作步入法制化管理軌道。不言而喻，條例對我國防生物威脅和處理突發(fā)衛(wèi)生事件的建設(shè)具有現(xiàn)實(shí)的和深遠(yuǎn)的意義。臨床檢驗相關(guān)生物危險等級分布臨床檢驗相關(guān)生物危險等級分布0 02020404060608080100100120120140140160160180180200200病毒病毒

5、細(xì)菌細(xì)菌真菌真菌寄生蟲寄生蟲一級一級二級二級三級三級四級四級病原微生物實(shí)驗室的有關(guān)概念病原微生物實(shí)驗室的有關(guān)概念一、生物學(xué)相關(guān)概念一、生物學(xué)相關(guān)概念1.生物因子（劑）(bio-agents):具有一定生物活性的制劑2.微生物（microbes,microorganisms）:微生物是指活的生物因子，包括能夠復(fù)制或基因物質(zhì)傳遞的細(xì)胞或非細(xì)胞的微小生物實(shí)體，其中包括致病和非致病的微生物。主要指細(xì)菌（螺旋體、立克次體、衣原體）、真菌、病毒和某些寄生蟲。3.病原體（pathogens）:病原體是能致病的生物因子，包括能夠引發(fā)人和動物、植物傳染病的生物因子，主要指致病微生物。生物學(xué)相關(guān)概念生物學(xué)相關(guān)概念

6、 4、生物戰(zhàn)劑、生物戰(zhàn)劑 (agent of bio-war): 5、生物氣溶膠生物氣溶膠 (bioaerosol) ： 氣溶膠是指懸浮于氣體介氣溶膠是指懸浮于氣體介 質(zhì)中粒徑一般為質(zhì)中粒徑一般為 0.001-100m的固態(tài)或液態(tài)微小粒子的固態(tài)或液態(tài)微小粒子 形成的相對穩(wěn)定的分散體系。形成的相對穩(wěn)定的分散體系。分散相含有生物因子的分散相含有生物因子的 氣溶膠氣溶膠。 6. 生物戰(zhàn)劑氣溶膠生物戰(zhàn)劑氣溶膠 (bio-agent aerosol)：分散相含有生分散相含有生 物戰(zhàn)劑的氣溶膠。物戰(zhàn)劑的氣溶膠。氣溶膠噴灑是國外生物戰(zhàn)釋放生物戰(zhàn)氣溶膠噴灑是國外生物戰(zhàn)釋放生物戰(zhàn) 劑的主要方式。劑的主要方式。生

7、物學(xué)相關(guān)概念 7.生物危害 (bio-hazard)和生物危險 (bio-risk)：生物危害是由生物因子形成的傷害。生物危險 (bio-risk)是生物因子將要或可能形成的危害，是傷害概率和嚴(yán)重性的綜合。 8.危險廢物（hazardous waste）：即有潛在危險的廢物，即可燃、易燃、腐蝕、有毒、傳染、放射或其他破壞作用的廢物 病原微生物實(shí)驗室的有關(guān)概念病原微生物實(shí)驗室的有關(guān)概念二、生物威脅概念二、生物威脅概念 1生物威脅 (bio-threat)：是指生物因子形成的使人憂慮的、可能發(fā)生的嚴(yán)重危害。 2生物戰(zhàn)（bio-war）：是指用生物戰(zhàn)劑進(jìn)行的戰(zhàn)爭。 目前世界發(fā)達(dá)國家的生物武器相當(dāng)先進(jìn)

8、，武器化能力很強(qiáng)；一些第三世界國家也掌握了生物武器，被稱為窮人的原子彈；一旦發(fā)生造成的災(zāi)難不可設(shè)想國內(nèi)外有關(guān)專家認(rèn)為發(fā)生生物戰(zhàn)的潛在危機(jī)正在增加，令人憂慮病原微生物實(shí)驗室的有關(guān)概念病原微生物實(shí)驗室的有關(guān)概念二、生物威脅概念二、生物威脅概念 3生物恐怖（bio-terror）：生物恐怖是遇到生物因子形成的危險和邪惡產(chǎn)生的極度恐懼。生物恐怖的特點(diǎn)是具有想象或未來時間較長的憂慮或恐懼。生物恐怖活動可利用的病原體種類很多、攻擊面寬、實(shí)施手段多種多樣、突然發(fā)生、真真假假難以預(yù)料和防護(hù)。二、生物威脅概念二、生物威脅概念 4基因武器（gene weapon）： 指用基因工程研制的生物武器。 現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)

9、展一方面為人類造福，另一方面也會被人利用發(fā)展武器?，F(xiàn)代生物技術(shù)能改變生物戰(zhàn)劑的攻擊性能，改變其抗原性使之難以診斷；增強(qiáng)其致病性以加強(qiáng)殺傷力；增強(qiáng)其存活力以延遲攻擊時間和擴(kuò)大攻擊面積；增強(qiáng)其抗藥性造成治療困難；改變其基因特性形成基因武器。專家推測，基因武器能夠進(jìn)行對人種的特異性攻擊。二、生物威脅概念二、生物威脅概念 5實(shí)驗室相關(guān)感染 (laboratory-associated infection)：由于從事實(shí)驗活動而發(fā)生的與操作的生物因子相關(guān)的感染。在研究病原微生物中存在某種風(fēng)險，如果在管理和操作病原體中一旦有所疏漏或錯誤就會發(fā)生實(shí)驗室感染，造成威脅，進(jìn)而可能造成病原體擴(kuò)散或傳染病的流行。 6

10、醫(yī)院感染 (hospital-acquired infection)：醫(yī)院感染也叫醫(yī)院獲得性感染或院內(nèi)感染, 指在醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的一切感染。二、生物威脅概念二、生物威脅概念 7.人畜共患病 (zoonosis): 人和動物間相互傳播的傳染病。人的傳染病常常由動物傳播, 可通過接觸經(jīng)皮膚和粘膜感染, 也可經(jīng)消化道進(jìn)入體內(nèi), 更可通過氣溶膠經(jīng)呼吸道感染。 8外來病 (exotic disease)：國外存在和流行的，國內(nèi)尚未證實(shí)存在或已被消滅的傳染病。 9傳染病 （communicable disease）: 是指由各病原體引起的一組具有傳染性的疾病。已有的一些烈性傳染病還沒有有效的預(yù)防和控制，已經(jīng)控

11、制的一些傳染病有死灰復(fù)燃的勢頭，新的傳染病不斷出現(xiàn)，是我們面臨挑戰(zhàn)。二、生物威脅概念二、生物威脅概念 10突發(fā)公共衛(wèi)生事件 (emergent events of health)：（簡稱突發(fā)事件），是指突然發(fā)生，造成或者可能造成社會公眾健康嚴(yán)重?fù)p害的重大傳染病疫情、群體性不明原因疾病、重大食物和職業(yè)中毒以及其他嚴(yán)重影響公眾健康的事件。突發(fā)公共衛(wèi)生事件的危害性和破壞性是多方面的，不僅危害公眾身體健康和生命安全、造成公眾心理恐懼，甚至導(dǎo)致社會混亂、經(jīng)濟(jì)衰退，威脅國家安全。二、生物威脅概念二、生物威脅概念 11食源性傳染病 （food borne infectious ： 指通過飲食媒介經(jīng)消化道感染

12、的疾病。第53屆世界衛(wèi)生大會上，世界衛(wèi)生組織將食品安全列為重要議題，并指出食源性疾病與食品污染是不斷擴(kuò)大的公共衛(wèi)生問題。在過去的20年里，食源性疾病的發(fā)生率明顯上升。在發(fā)達(dá)國家，估計每年有13以上的人群感染食源性疾病。美國每年約有7000萬8000萬人患食源性疾病，其中32.5萬人入院治療，5000人死亡。國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較 病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例按危害程度按危害程度將病原微生物分為四類：將病原微生物分為四類： 第四類危險程度最低，第四類危險程度最低， 第一類危險程度最高，第一類危險程度最高， 第一類、第二

13、類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物生物 實(shí)驗室生物安全通用要求實(shí)驗室生物安全通用要求（GB 19489-2004GB 19489-2004）對）對微生物的危害進(jìn)行分類，評價標(biāo)準(zhǔn)和等級劃分與微生物的危害進(jìn)行分類，評價標(biāo)準(zhǔn)和等級劃分與WHOWHO生生物安全手冊物安全手冊第三版（第三版（20042004）基本一致，）基本一致， 但危害程度由但危害程度由4 4級至級至1 1級遞減級遞減國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較不同標(biāo)準(zhǔn)微生物危害等級劃分與標(biāo)準(zhǔn)不同標(biāo)準(zhǔn)微生物危害等級劃分與標(biāo)準(zhǔn)病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例實(shí)驗室生物安全

14、 通 用 要 求 (GB19489-2004)WHO生物安全手冊（第三版，2004）四四類類在通常情況下在通常情況下不會引起人類不會引起人類或者動物疾病或者動物疾病的微生物。的微生物。 級級（ 低 個 體 危害 ， 低 群 體危 害 ） 不 會導(dǎo) 致 健 康 工作 者 和 動 物致病的細(xì)菌、真 菌 、 病 毒和 寄 生 蟲 等生物因子。級級（ 無或極低的個體和群體危險）不太可能引起人或動物致病的微生物。國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較三三類類能夠引起人類或能夠引起人類或者動物疾病，者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險有限傳播風(fēng)險有限

15、，實(shí)驗室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治具備有效治療和預(yù)防療和預(yù)防措施的微生物。 級 (中等個體危害，有限群體危害)能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會引起嚴(yán)重危害的病原微生物。實(shí)驗室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險有限。級（ 個體危險中等，群體危險低）病原微生物能夠?qū)θ嘶騽游镏虏?，但對?shí)驗室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴(yán)重危害。實(shí)驗室暴露也許會引起嚴(yán)重感染，但對感染有有效的預(yù)防和治療措施，并且疾病傳播的危險有限。管理條例管理條例通用要求通用要求 WHOWHO安全手冊安全手冊國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較國內(nèi)外病原微生物危害程

16、度分類比較 二二類類能夠引起人類或者動物嚴(yán)重疾病，比較容比較容易直接或者間易直接或者間接在人與人、接在人與人、動物與人、動動物與人、動物與動物間傳物與動物間傳播播的微生物。級（高個體危害，低群體危害）能引起人類或動物嚴(yán)重疾病，或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，但通常不能因偶然接觸而在個體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原微生物。級（ 個體危險高，群體危險低）病原微生物通常能引起人或動物的嚴(yán)重疾病，但一般不會發(fā)生感染個體向其他個體的傳播，并且對感染有有效的預(yù)防和治療措施。管理條例管理條例通用要求通用要求 WHOWHO安全手冊安全手冊國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較一一

17、類類能夠引起人類或者動物非常嚴(yán)重疾病嚴(yán)重疾病的微生物，以及我以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消者已經(jīng)宣布消滅的微生物滅的微生物。 級(高個體危害，高群體危害)能引起人類或動物非常嚴(yán)重的疾病，一般不能治愈，容容易直接或間接易直接或間接或因偶然接觸或因偶然接觸在人與人，或在人與人，或動物與人，或動物與人，或人與動物，或人與動物，或動物與動物間動物與動物間傳播傳播的病原微生物。級（個體和群體的危險均高）病原微生物通常能引起人或動物的嚴(yán)重疾病，并且很容很容易發(fā)生個體之易發(fā)生個體之間的直接或間間的直接或間接傳播接傳播，對感染一般沒有有效的預(yù)防和治療措施。管理條例管理條例通用要求通用要求 WHOW

18、HO安全手冊安全手冊 我國對具體病原微生物的分類詳見衛(wèi)生部頒布的人間傳染的病原微生物名錄。該名錄除對病原微生物的危害分類標(biāo)準(zhǔn)除進(jìn)行危害程度分類外，還規(guī)定了其不同實(shí)驗操作的防護(hù)水平以及運(yùn)輸?shù)陌b要求。 四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（1 1） 1生物安全防護(hù) (bio-safety containment)：是指避免生物危險因子，特別是偶然的和有意利用的生物因子，對生物體包括實(shí)驗室工作者在內(nèi)的傷害和對環(huán)境的污染的意識和措施。實(shí)驗室生物安全防護(hù)分為 一級防護(hù)（屏障）(primary barriers) 二級防護(hù)（屏障）(secondary barriers)。四、生物安全防護(hù)相

19、關(guān)概念（四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（2 2） 2一級防護(hù)：包括兩方面內(nèi)容：（1）生物安全柜 (biological safety cabinet, BSC)和類似的設(shè)備等，分成三個級別；（2）個人防護(hù)裝備 (personal protective equipment, PPE)，也分成三個級別。 3. 二級防護(hù): 是指實(shí)驗室屏障設(shè)施，其建設(shè)有4 種不同的結(jié)構(gòu)。 各種一級防護(hù)和二級防護(hù)的組合構(gòu)成不同防護(hù)水平級別的實(shí)驗室（BSL-14）。四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（3 3） 4.生物安全防護(hù)實(shí)驗室 (biosafety containment for laboratories

20、): 指能夠避免或控制被操作的有害生物因子危險的實(shí)驗室。 措施：通過規(guī)范的實(shí)驗室設(shè)計和精心施工、正確的實(shí)驗設(shè)備的配置、適合的個人防護(hù)裝備的使用、嚴(yán)格管理、翔實(shí)的操作規(guī)程（SOP) 實(shí)現(xiàn)其功能。 建造具有BSL-1和BSL-2的實(shí)驗室稱為基礎(chǔ)實(shí)驗室；具有BSL-3防護(hù)水平的實(shí)驗室被稱為生物安全防護(hù)實(shí)驗室；達(dá)到BSL-4水平的稱為高度生物防護(hù)實(shí)驗室。四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（4 4） 5生物安全柜 ( bio- safety cabinet , BSCs)：是直接操作危險性微生物時所用的箱形安全設(shè)備，是生物安全實(shí)驗室必備的裝備，保護(hù)使用者和環(huán)境，保護(hù)樣品。 按防護(hù)水平生物

21、安全柜分為I級、II級、III級, II級的又分為4種類型 (Class IIA1、Class IIA2、Class IIB1和Class IIB2)。四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（5 5） 6安全罩 (safety hood)：即覆蓋在生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗室工作臺或儀器設(shè)備上的內(nèi)部空氣壓力低于環(huán)境壓力的經(jīng)HEPA濾器過濾的排風(fēng)罩，以減少對實(shí)驗室工作者和環(huán)境的危害。 7圍場操作（enclose）：是指操作有害生物因子時，用物理防護(hù)設(shè)備把病原微生物局限在一定的空間內(nèi)，避免生物因子對人體的暴露和污染環(huán)境。四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（6 6） 8氣鎖（airlo

22、ck）和緩沖間（buffer room）：氣鎖是設(shè)置在氣壓不同的鄰近二區(qū)之間的氣壓可調(diào)節(jié)的密閉小室，作為二區(qū)的過渡通道。 緩沖間 是設(shè)在生物安全實(shí)驗室的清潔區(qū)與半污染區(qū)之間，或半污染區(qū)與污染區(qū)之間的類似于氣鎖的密閉小室，小室的兩門互鎖。四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（7 7） 9個人防護(hù)裝備：用于防止人員受到化學(xué)和生物等有害因子傷害的器材和裝備。其根本目的是屏蔽生物因子,不與人體發(fā)生直接接觸。我國在傳染病和微生物實(shí)驗室把個人防護(hù)分為三級。 10實(shí)驗室分區(qū) (laboratory area)：我國把BSL-3和BSL-4實(shí)驗室平面布局明確分為：“三區(qū)二緩”的結(jié)構(gòu)?！叭齾^(qū)”是指

23、把實(shí)驗室分成污染 (C)、潛在(半)污染 (B)、清潔 (A)三個功能區(qū)。四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（8 8） （1）清潔區(qū)：是指在正常情況下不可能有實(shí)驗因子的污染的區(qū)域。 （2）半污染區(qū)：是指在正常情況下只有輕微污染可能的區(qū)域。此區(qū)的功能是大量的準(zhǔn)備工作, 例如培養(yǎng)基、細(xì)胞、制劑的配制、低溫冰箱的放置等。在此工作的人員要做好個人防護(hù), 如穿上一層防護(hù)服、戴口罩和手套等。 （3）污染區(qū)：是指操作實(shí)驗因子的地方 (BSL-3中心實(shí)驗室), 在操作過程中一定會有污染的區(qū)域, 有潛在嚴(yán)重污染的可能。四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（9 9） （4）緩沖間：是

24、指在A和B之間, B和C之間的區(qū)域（小室）。緩沖間有送、排風(fēng)進(jìn)行凈化換氣, 以保證在人員出入時污染空氣不會直接向清潔區(qū)擴(kuò)散或分割到清潔區(qū)。其功能包括空氣隔離、更衣?lián)Q鞋、去污染消毒淋浴。 （5）傳遞窗：在BSL-3的A和B, B和C之間各設(shè)一個物流通道, 以便傳遞實(shí)驗物資。它也是2門連鎖, 并可進(jìn)行消毒。操作者操作者操作對象操作對象環(huán)境環(huán)境容器中的病原體容器中的病原體泄漏泄漏預(yù)防接種預(yù)防接種感染途徑感染途徑/ /感染劑量感染劑量傳播傳播個人防護(hù)裝備個人防護(hù)裝備易感宿主易感宿主規(guī)程規(guī)程/ /設(shè)備設(shè)備潛伏期潛伏期醫(yī)學(xué)監(jiān)測醫(yī)學(xué)監(jiān)測規(guī)程規(guī)程/ /設(shè)備設(shè)備 Laboratory Biosafety Man

25、ual, 3rd edition - lab commissioning and certification - lab biosecurity conceptsBiosafety:To promote the use of safe practices in the handling of pathogenic microorganismsin the laboratory during transportation in field investigations in manufacturing facilities in health-care facilitiesLaboratory

26、Biosafety Manual1st edition1983199320032004WHO Laboratory Biosafety Manual- translated into F, S, P, Ch, Ru- available on web, CD-Rom, hard copies 另外，一些在自然環(huán)境中可以繁殖的微生物，一旦進(jìn)入實(shí)驗室的空調(diào)或通風(fēng)系統(tǒng)，污染了空調(diào)的冷卻水，則可以形成更廣泛的微生物氣溶膠污染。除了實(shí)驗室操作可以產(chǎn)生微生物氣溶膠外，患有呼吸道傳染病或皮毛上染有病原微生物的實(shí)驗動物也可以產(chǎn)生微生物氣溶膠。微生物氣溶膠在一個實(shí)驗室內(nèi)產(chǎn)生后，還可以通過氣流轉(zhuǎn)移到同一建筑物的其

27、他地方，甚至污染整個建筑物的空氣。 生物安全防護(hù)水平（生物安全防護(hù)水平（BSLBSL）由一級防護(hù)屏障（安全設(shè)備）和二級防由一級防護(hù)屏障（安全設(shè)備）和二級防護(hù)屏障（實(shí)驗室設(shè)施）組合構(gòu)成四級生物安護(hù)屏障（實(shí)驗室設(shè)施）組合構(gòu)成四級生物安全水平全水平 。 一級生物安全防護(hù)水平（一級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL1 1）二級生物安全防護(hù)水平（二級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL2 2）三級生物安全防護(hù)水平（三級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL3 3）四級生物安全防護(hù)水平（四級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL4 4）一級生物安全防護(hù)水平（一級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL1 1）MBSL1適合于已知其特征的、在

28、健康成人中不引起疾病的、對實(shí)驗室工作人員和環(huán)境危害性最小的生物因子（對應(yīng)于我國的第四類危害的微生物）的工作。M許多通常與人類疾病不相關(guān)的病原微生物是條件致病性的，在特定情況下，可以在兒童、老年人、免疫缺陷的和免疫抑制的個體中引起感染。M對于在體內(nèi)已經(jīng)繁殖多代的疫苗株不要簡單地認(rèn)為是無毒的。一級生物安全防護(hù)水平（一級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL1 1）M枯草桿菌、格氏阿米巴原蟲和感染性犬肝炎病毒是符合這些標(biāo)準(zhǔn)微生物的代表。MBSL1不需要特殊的一級和二級屏障、除需要洗手池外，依靠標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作即可獲得基本的防護(hù)水平。BSLBSL1 1 實(shí)驗室實(shí)驗室二級生物安全防護(hù)水平（二級生物安全防護(hù)水平（

29、BSLBSL2 2） 二級生物安全防護(hù)水平是指實(shí)驗室的操作、安全設(shè)備、和設(shè)施適用于操作我國的第三類（少量二類）危害的致病微生物。二級生物安全防護(hù)水平是適合于從未知病原的人身上取血、體液和組織。二級生物安全防護(hù)水平（二級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL2 2） 接觸這些致病微生物的工作人員的主要危害是與感染性材料的偶然的皮膚或粘膜破損、或吞食感染性食物。必須強(qiáng)調(diào)對污染的針頭或利器的使用要非常謹(jǐn)慎。對未知是通過氣溶膠途徑傳播的微生物、具有可以增加工作人員暴露的可能氣溶膠或高度飛濺物的程序，二級生物安全防護(hù)水平微生物操作必需在一級生物安全防護(hù)水平的基礎(chǔ)之上，增加生物安全柜、高壓滅菌器、安全離心機(jī)罩帽、

30、防濺罩或面罩等。 BSLBSL2 2實(shí)驗室實(shí)驗室BSLBSL1 1實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求 BSL1實(shí)驗室對高壓滅菌器、離心機(jī)安全罩沒有要求；生物安全柜要求型生物安全柜。 BSLBSL1 1實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求M防護(hù)服M實(shí)驗室外套 M手套BSLBSL1 1實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求M另外另外, ,個人防護(hù)設(shè)個人防護(hù)設(shè)備可能也需要備可能也需要M面部防護(hù)面部防護(hù)M眼睛防護(hù)眼睛防護(hù)BSLBSL2 2實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求生物安全柜 各實(shí)驗室根據(jù)實(shí)際情況選用合適的級A1型或B1型生物安全柜。生物安全柜應(yīng)安裝在BSL2實(shí)驗室內(nèi)氣流流動小

31、，人員走動少，離門和中央空調(diào)送風(fēng)口較遠(yuǎn)的地方。生物安全柜的周圍應(yīng)有一定的空間，與墻壁至少保持30cm的距離，便于清潔環(huán)境衛(wèi)生。 BSLBSL2 2實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求高壓滅菌器高壓滅菌器 高壓滅菌器應(yīng)選擇立式或臺式不排氣（產(chǎn)生的蒸汽被回收）的，放置在BSL2實(shí)驗室內(nèi)，或門外。離心機(jī)安全罩離心機(jī)安全罩 不需要離心機(jī)安全罩。洗眼器洗眼器 應(yīng)根據(jù)實(shí)驗室的實(shí)驗活動內(nèi)容，確定是否需要安裝洗眼器。如果需要洗眼器，則應(yīng)安裝在BSL2實(shí)驗室內(nèi)靠近出口的地方。 嚴(yán)禁用口吸移液管, 嚴(yán)禁將實(shí)驗材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。所有的實(shí)驗操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進(jìn)行。應(yīng)限制使用注射針

32、頭和注射器。除了進(jìn)行腸道外注射或抽取實(shí)驗動物體液外，注射針頭和注射器不能用于移液或用作其他用途。實(shí)驗室應(yīng)制訂并執(zhí)行處理溢出物的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時，必須向?qū)嶒炇邑?fù)責(zé)人報告。實(shí)驗室應(yīng)如實(shí)記錄有關(guān)暴露和處理的情況，保存相關(guān)記錄。污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學(xué)或物理學(xué)方法）。根據(jù)所處理的微生物因子的危險度評估結(jié)果準(zhǔn)備專門的污水處理系統(tǒng)。只有保證在實(shí)驗室內(nèi)沒有受到污染的文件紙張才能帶出實(shí)驗室實(shí)驗室應(yīng)保持清潔整齊，嚴(yán)禁擺放和實(shí)驗無關(guān)的物品。每天工作結(jié)束后應(yīng)清除工作臺面的污染。若發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出應(yīng)立即清除污染。所有受到污染的材料

33、、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須先清除污染。感染性材料的包裝和運(yùn)輸應(yīng)遵循國家和或國際的相關(guān)規(guī)定。如果窗戶可以打開，則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動物進(jìn)入的紗窗。（五）（五） 生物安全管理生物安全管理的指導(dǎo)原則的指導(dǎo)原則三級生物安全防護(hù)水平（三級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL3 3） 三級生物安全防護(hù)水平是指實(shí)驗室的操作、安全設(shè)備、和設(shè)施適用于操作我國第二類（個別第一類）病原微生物。這些致病微生物對工作人員的主要危害是與自身接種(自傷)、吞服、和暴露于感染性氣溶膠。三級生物安全防護(hù)水平（三級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL3 3） 三級生物安全防護(hù)水平有嚴(yán)格的一級防護(hù)屏障和二級防護(hù)屏障的要求，以防止相

34、鄰區(qū)域的工作人員、社會和環(huán)境暴露于可能的感染性氣溶膠。例如，所有實(shí)驗室操作應(yīng)該在生物安全柜或其它密閉容器中操作，諸如氣密型氣溶膠發(fā)生柜。這一水平的二級屏障包括實(shí)驗室的控制入口和為減小感染性氣溶膠從實(shí)驗室釋放的特殊通風(fēng)系統(tǒng)。 BSLBSL3 3實(shí)驗室實(shí)驗室BSLBSL3 3實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求 生物安全柜生物安全柜 BSL3實(shí)驗室必須安裝和使用生物安全柜，應(yīng)根據(jù)病原微生物試驗活動的內(nèi)容的不同，選擇不同型別的生物安全柜。級A2型、B1型生物安全柜，B2型生物安全柜也可以使用，但因換氣量太大，對實(shí)驗室負(fù)壓和氣流的影響比較大，一般不需要使用級B2生物安全柜；少數(shù)特殊操作（如感染的中

35、型和大型動物解剖）可以使用級B2生物安全柜。另外，BSL3實(shí)驗室內(nèi)安裝級生物安全柜時，要充分考慮實(shí)驗室和生物安全柜的氣流平衡和回流的問題。生物安全柜排風(fēng)口與排風(fēng)管道之間可以通過硬連接，也可以通過套管結(jié)構(gòu)連接，無論是那一種連接方式，排風(fēng)管道中都應(yīng)有止回閥，且排風(fēng)管道中還應(yīng)有一道HEPA過濾器。 BSLBSL3 3安全設(shè)備安全設(shè)備( (一級屏障一級屏障) )M在在BSL-1 and 2安全設(shè)備的基礎(chǔ)上，安全設(shè)備的基礎(chǔ)上，加加:M呼吸道保護(hù)呼吸道保護(hù)BSLBSL3 3實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求 高壓滅菌器高壓滅菌器 在BSL3實(shí)驗室的半污染區(qū)和清潔區(qū)之間，宜安裝雙扉生物安全型高壓滅菌器

36、，即高壓滅菌器跨墻安裝，雙門互鎖結(jié)構(gòu)，且對高壓產(chǎn)生的蒸汽具有回收再高壓的性能。高壓滅菌器的安裝，必須確保高壓滅菌器與墻體之間的密封，不能夠有一點(diǎn)泄漏。污染區(qū)內(nèi)應(yīng)設(shè)置不排蒸汽的高壓蒸汽滅菌器或其他消毒裝置。 BSLBSL3 3實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求 離心機(jī)安全罩 是否需要離心機(jī)安全罩，取決于離心機(jī)的類型。如果是傳統(tǒng)型的離心機(jī)，最好安裝離心機(jī)安全罩；如果離心機(jī)是新式生物安全型的，即負(fù)壓離心機(jī)或有離心杯帽的離心機(jī)，則不需要離心機(jī)安全罩。離心機(jī)和安全罩宜靠近排風(fēng)口。 BSLBSL3 3實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求 洗手裝置洗手裝置應(yīng)在污染區(qū)和半污染區(qū)出口處設(shè)洗手裝置。洗手

37、裝置的供水應(yīng)為非手動開關(guān)。供水管應(yīng)安裝防回流裝置。不得在實(shí)驗室內(nèi)安設(shè)地漏。下水道應(yīng)與建筑物的下水管線完全隔離，且有明顯標(biāo)識。下水應(yīng)直接通往獨(dú)立的液體消毒系統(tǒng)集中收集，經(jīng)有效消毒后處置。四級生物安全防護(hù)水平（四級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL4 4） 四級生物安全防護(hù)水平是指實(shí)驗室的操作、安全設(shè)備、和設(shè)施適用于操作我國第一類病原微生物。另外，與四級生物安全防護(hù)水平的微生物具有相近的或一致的抗原關(guān)系的微生物也應(yīng)該在該防護(hù)水平進(jìn)行研究。 四級生物安全防護(hù)水平（四級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL4 4） 四級生物安全防護(hù)水平的微生物對工作人員的主要危害是呼吸道暴露于感染性氣溶膠、粘膜暴露于感染性飛沫、

38、和自身接種。所有操作可能具有感染性的診斷材料、分離培養(yǎng)物、以及自然或?qū)嶒灨腥镜膭游飼r，實(shí)驗室工作人員、社會和環(huán)境均可造成高度危險的感染。 四級生物安全防護(hù)水平（四級生物安全防護(hù)水平（BSLBSL4 4） III級生物安全柜或全身正壓防護(hù)服能夠把實(shí)驗室工作人員與氣溶膠的化感染性材料完全隔離開。四級生物安全防護(hù)水平設(shè)施一般是獨(dú)立建筑物或具有復(fù)雜的、特殊的通風(fēng)系統(tǒng)和防止活的微生物釋放到環(huán)境中的污物處理系統(tǒng)與其它建筑完全隔離。 BSLBSL4 4實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求生物安全柜生物安全柜BSL4實(shí)驗室必須安裝和使用生物安全柜，應(yīng)根據(jù)病原微生物試驗活動的內(nèi)容的不同，可以選擇級B型和級兩

39、種不同型別的生物安全柜。在正壓防護(hù)服型BSL4實(shí)驗室內(nèi)，可以選擇級生物安全柜；在生物安全柜型BSL4實(shí)驗室中，選擇級生物安全柜；在混合型BSL4實(shí)驗室中，應(yīng)選擇級生物安全柜。 BSLBSL4 4實(shí)驗室安全設(shè)備的要求實(shí)驗室安全設(shè)備的要求 高壓滅菌器高壓滅菌器 根據(jù)實(shí)驗室生物安全通用要求GB194892004的要求，應(yīng)在半污染區(qū)和清潔區(qū)墻上、半污染區(qū)和污染區(qū)墻上設(shè)置不排蒸汽的雙扉高壓滅菌器和浸泡消毒渡槽或熏蒸消毒室或帶有消毒裝置的通風(fēng)互鎖傳遞窗，以便傳遞或消毒不能從更衣室攜帶進(jìn)出的材料、物品和器材。高壓滅菌器的安裝，必須確保高壓滅菌器與墻體之間的密封，不能夠有一點(diǎn)泄漏。污染區(qū)和半污染區(qū)墻上設(shè)置不排

40、蒸汽的雙扉高壓滅菌器應(yīng)與級生物安全柜直接相連。生物安全柜特征比較生物安全柜特征比較柜柜 子子類類 型型面速度面速度（英尺（英尺/分）分）氣流方式氣流方式應(yīng)應(yīng) 用用非揮發(fā)性化學(xué)毒非揮發(fā)性化學(xué)毒物物/放射性物質(zhì)放射性物質(zhì)揮發(fā)性化學(xué)毒揮發(fā)性化學(xué)毒物物/放射性物質(zhì)放射性物質(zhì)級級7575前面進(jìn)，后面出，頂部前面進(jìn)，后面出，頂部通過通過HEPAHEPA過濾器過濾器能能能能1 1級級A1A1型型757570%70%通過通過HEPAHEPA在工作區(qū)在工作區(qū)內(nèi)循環(huán)，內(nèi)循環(huán)，3030通過通過HEPAHEPA排出到實(shí)驗室內(nèi)。排出到實(shí)驗室內(nèi)。能（微量）能（微量）不能不能A2A2型型100100同同A,A,但箱內(nèi)呈負(fù)壓

41、和但箱內(nèi)呈負(fù)壓和管道排氣管道排氣能能能（微量）能（微量）2 2B1B1型型10010030%30%通過通過HEPAHEPA在工作區(qū)在工作區(qū)內(nèi)循環(huán)，內(nèi)循環(huán)，7070通過通過HEPAHEPA和嚴(yán)格的管道排出和嚴(yán)格的管道排出能能能（微量）能（微量）2 2B2B2型型100100無循環(huán)，全部通過無循環(huán)，全部通過HEPAHEPA和嚴(yán)格的管道排出和嚴(yán)格的管道排出能能能（少量）能（少量）安裝上要求有一特殊管道通到室外、有一道活性炭過濾器、防爆的發(fā)動機(jī)及其它電路組成。級柜如果操作揮發(fā)性化學(xué)物，則不能將廢氣排到室內(nèi)?；瘜W(xué)濃度不能超過最低爆炸濃度。生物安全柜的選擇保護(hù)類型保護(hù)類型生物安全柜的選擇生物安全柜的選擇個體防護(hù)，針對危險度13 級微生物級、級、級生物安全柜個體防護(hù)