淺析中原地區(qū)微生物修復(fù)石油污染土壤的實驗研究

1、淺析中原地區(qū)微生物修復(fù)石油污染土壤的實驗研究關(guān)鍵詞：石油殘留污染；土壤；微生物修復(fù)experientalstudyfirbialreediatinfrilntainatedsilinentralplainszhangsheng,henli,lizheng-hng,zhangui-yun,yini-ying,heze,sunzhen-hua,alin-na,ningzhu,zhangfa-angtheinstitutefhydrgelgyandenvirnentalgelgy,ags，shijiazhuang050061，hinakeyrds:ilresidualntainatin;sil;ir

2、bialreediatin我國中原地區(qū)由于石油資源的長期大量開采利用，產(chǎn)生了一些環(huán)境問題。尤其是落地原油的污染已影響土壤的質(zhì)量平安,特別是開采早期行成的石油污染，在土壤中經(jīng)長期的自然降解許多易揮發(fā)和易降解的組分均已降解，土壤中殘留的難降解石油組分仍大量存在，且危害性更大，土壤石油污染的防治研究工作已受到人們的廣泛重視。jrgensen的試驗顯示,經(jīng)生物堆埋,石油污染的土壤中石油可降低71%1。微生物修復(fù)技術(shù)主要機理是石油烴直接參與了微生物的生化反響,通過代謝作用降解土壤中的污染物2。土壤微生物修復(fù)技術(shù)的開發(fā)與研究已受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注3-16。目前能降解石油中各種烴類的微生物共有約100余

3、屬200多種，它們分屬于細菌、放線菌、霉菌、酵母以及藻類16。本文利用優(yōu)化土著微生物菌群輔以物理和化學(xué)方法相結(jié)合的綜合修復(fù)技術(shù)，對土壤中長期殘留石油污染進展降解模擬實驗，獲得了一些效果。該方法具有處理方法簡單、費用低、修復(fù)效果好、對環(huán)境影響孝無二次污染、可原位治理等優(yōu)點。因此，本研究為該技術(shù)的應(yīng)用提供了技術(shù)支撐，具有重要的實際意義。1實驗材料和方法1.1實驗材料化學(xué)試劑：gs.47h.2、nh.4n.3、al.2、fel.3、kh.2p.4、k.2hp.4、kl、nh.4.2s.4、a.3、nal、可溶性淀粉、蔗糖、乳酸、鹽酸、酵母膏、牛肉膏、乙酸鈉、瓊脂、液體石蠟、石油醚、三氯甲烷等均為分析

4、純。其它實驗材料：新穎馬鈴薯、濮陽徐鎮(zhèn)鎮(zhèn)石油殘留污染土樣等等。添加劑：牛糞晾干粉碎過2篩在121滅菌30in。實驗用玻璃器皿：150l、250l具塞三角瓶，125l、1000l磨口細口試劑瓶，各種不同類型的細菌培養(yǎng)試管、培養(yǎng)皿、橡膠塞等。主要儀器：qzd-1型電磁振蕩器、kq218超聲波清洗器、生物恒溫培養(yǎng)箱、高速離心機、高壓蒸汽滅菌器、無菌實驗室、生化培養(yǎng)箱、hz150l恒溫搖床培養(yǎng)箱、奧林巴斯生物顯微鏡、752n紫外可見光柵分光光度計、電熱枯燥箱及各種化學(xué)分析用玻璃儀器。1.2測試方法石油分析測試方法：為紫外分光光度法。1.3實驗步驟1.3.1石油降解菌的別離與優(yōu)選自然界的物質(zhì)循環(huán)微生物細

5、菌的生化作用是非常重要的一環(huán)，碳的循環(huán)也不例外。許多細菌就是碳循環(huán)的主要驅(qū)動因子之一，機理就是在細菌的作用下，將碳氫化合物降解為.2和h.2的整個過程，也是自然界對石油污染的自凈功能的生態(tài)效應(yīng)，對土壤和地下水環(huán)境保護具有一定的實際意義。據(jù)此用細菌的選擇性培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基，對中原油田濮陽徐鎮(zhèn)鎮(zhèn)一廢棄采油井石油殘留污染土壤的樣品進展菌種、菌群的培養(yǎng)別離，選擇優(yōu)化出實驗用降解土壤殘油的菌種、菌群。本次實驗選擇優(yōu)化出的細菌初步鑒定主要為：假單胞菌屬、微球菌屬、放線菌屬、真菌類毛霉、曲霉等菌群。1.3.2土壤殘油污染降解實驗步驟根據(jù)上述實驗選出的降解殘油污染的優(yōu)勢菌群，利用不同的培養(yǎng)基對所選出的各類菌

6、群進展放大培養(yǎng)。各類菌群培養(yǎng)35d后進展混合培養(yǎng)，繼續(xù)培養(yǎng)57d后作為相應(yīng)的石油烴降解實驗。進展模擬不同含量條件下土壤殘油污染的微生物修復(fù)實驗。實驗裝置為250l具塞三角瓶。2實驗結(jié)果與討論不同土壤殘油含量降解野外實驗，是在2022年4月16日至6月12日進展。考慮研究區(qū)地表土壤春、夏、秋溫度一般在2030左右，選擇了30溫度進展實驗。實驗結(jié)果見天然土壤中含有豐富的微生物,具有潛在的降解石油污染物的才能。且可降解石油的細菌在多年連續(xù)的污油中不斷馴化,具有較強的降解石油污染物的潛力。采用投加從原來土著體系中挑選出的微生物進展生物強化，能抑制其他外源菌所面臨的存活力較弱、與土著微生物之間可能存在競

7、爭關(guān)系等一系列問題，且這種生物強化技術(shù)操作簡便，實用性強，在生物修復(fù)方面具有較廣闊的應(yīng)用前景。石油是由上千種化學(xué)性質(zhì)不同的物質(zhì)組成的復(fù)雜混合物，用單種微生物細菌很難將其徹底降解，目前在石油污染的生物處理上，越來越多的國內(nèi)外學(xué)者采用細菌菌群進展生物處理。如何能消除菌群種間的抑制作用，構(gòu)建出優(yōu)勢混合菌群是目前菌群研究所要解決的一個問題，也是本實驗研究的目的之一。本次實驗通過對石油殘油污染土壤微生物修復(fù)方法的模擬實驗研究，利用優(yōu)化原位土著微生物菌群輔以物理和化學(xué)方法相結(jié)合的修復(fù)技術(shù)，進展了實驗溫度、水、氧氣、營養(yǎng)元素等的調(diào)控，對土壤中殘油的降解實驗，實驗驗證了微生物修復(fù)技術(shù)在土壤石油殘油污染降解的有

8、效性和應(yīng)用的可行性。為野外原位試驗提供了經(jīng)歷，奠定了根底，積累了技術(shù)。3結(jié)論參考文獻:1jrgensenks,puustinenj,surttia.bireediatinfpetrleuhydrarbnntainatedsilbypstinginbipilesj.envirnentalpllutin,2000,107(2):245-254.2debntja.slvent-tlerantbateriainbiatalysisj.trendsbitehnl,1998,16:493-499.3sanjeeishra,jeevanjyt.insitubireediatinptentialfanilysludge-degradingbaterialnsrtiuj.urrentirbilgy,2001,43:328-3354jselrgalleg,jrgelred,ju