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LOGO高效液相色譜培訓糸列液相色譜柱的應用目錄、液相色譜分離原理、液相色譜柱的結構液相色譜柱的選擇色譜柱的使用國分析條件的影響色譜柱的維護HPLC分離原理樣品組分在流動相和固定相之間進行分配,由于不同組分在流動相和固定相之間的交互作用能力(吸附分配離子交換分子尺寸等)不同,使得不同組分在色譜柱上的移動速率不一樣,從而產生色譜分離。(必要條件)分配過程XmYmKD4=[YS]/[YIKD=distributioncoefficient.KDiKDthereforecompoundXelutesfirst分配系數(shù)-KKK=常數(shù)(T恒定)Cm=組分在流動相中的濃度Cs=組分在固定相中的濃度容量因子k是指在一定條件下,組分在兩相間達到分配平衡時的質量比。在實際工作中,常應用另一表征色譜分配平衡過程的重要參數(shù)容量因子(capacityfactor),也稱分配比(partitionratio),以k表示。k=Ms/Mms為組分在固定相中的質量,Mm為組分在流動相中的質量k由保留時間計算出容量因子,即可由實驗測定容量因子k色譜理論:塔板理論柱分離效能指標LEtR=554()=16(x)¥1有繳5542本B16Yuzwb日效有效色譜理論:速率理論-影響柱效的因素速率理論是荷蘭學者范·弟姆特于1956年提出的,表述了影響柱效的因素及提高柱效的多種途徑,其核心是速率方程(也稱范·弟姆特方程式)。速率方程H=A+B/u+CuH:理論塔板高度流動相的線速度c色譜理論:速率理論影響柱效的因素H=A+B/u+CUB/u+Cu1--B色譜理論:分離度分離度:兩個相鄰組分的保留值之差與其平均峰寬之比R=2(Ta2Tp1)/w2+W1)計算表明1:R<0.8時,兩組分不能完全分離2:R=1時,兩組分峰重疊約2%3:R=1.5時,兩

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