幾種藥劑防治煙草黑脛病的藥效比較

幾種藥劑防治煙草黑脛病的藥效比較

黑脛骨病是指葉片工業(yè)中的一種毀滅性土壤傳播疾病。它屬于螺菌病，在世界范圍內(nèi)廣泛分布。如果這種疾病發(fā)生在短時(shí)間內(nèi)，所有植物都會(huì)死亡，嚴(yán)重的情況下，田里的植物會(huì)死亡。煙草黑脛病在煙草苗期、旺長期、成株期均有危害。近年來,我國許多省(市)煙草生產(chǎn)地均受到煙草黑脛病的嚴(yán)重危害,且危害程度逐年加重,平均發(fā)病率為10%~20%,發(fā)病率高的田塊達(dá)75%,嚴(yán)重的甚至絕收,造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。生產(chǎn)中通常采用抗病品種、栽培防治等措施來延緩并降低其危害,但優(yōu)質(zhì)抗病品種匱乏、抗性容易喪失的問題一直存在。煙草黑脛病以卵孢子在土壤中越冬,作為田間發(fā)病的初侵染源,病原菌的游動(dòng)孢子形成速度快、數(shù)量多,侵染煙株后潛育期短、發(fā)病快,在一個(gè)生長季節(jié)可以發(fā)生多次再侵染,生產(chǎn)中以農(nóng)藥防治作為主要手段?！吧谰惫研鄹咕?Pythiumoligandrum)是一種重要的重寄生菌,自被發(fā)現(xiàn)對植物病原菌有抑制作用以來倍受關(guān)注［1］,其能有效抑制20多種病原真菌的生長、繁殖,預(yù)防和治療相應(yīng)病害［2］。寡雄腐霉菌分泌物對9種植物病原菌真菌菌絲生長有抑制作用,抑菌譜廣,抑菌效果顯著［3］。目前,我國煙草黑脛病的治療主要依靠甲霜靈,然而因長期使用導(dǎo)致病原菌對其產(chǎn)生抗藥性,防治效果已明顯下降［4］,亟需選擇出合適的取代或輪換藥劑。精甲霜靈·代森錳鋅是近年來甲霜靈的替代農(nóng)藥。烯酰嗎啉是由美國氰胺公司研制的一種肉桂酸衍生物,是防治疫霉屬病害的高效內(nèi)吸性殺菌劑,具有保護(hù)、治療和抗孢子產(chǎn)生的作用［4］,其對農(nóng)作物上產(chǎn)生的霜霉病、疫霉病有特效,可有效地防治馬鈴薯、番茄晚疫病以及黃瓜、葡萄霜霉病和辣椒疫病等卵菌綱病害。烯酰嗎啉是繼甲霜靈之后防治卵菌綱病害的又一理想殺菌劑。該研究以寡雄腐霉菌、烯酰嗎啉和精甲霜靈·代森錳鋅為試驗(yàn)藥劑,比較其對煙草黑脛病的防治效果。1田間藥物試驗(yàn)1.1.1供試煙株。煙草黑脛病感病品種小黃金,由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所保存。1.1.2供試菌株。菌株分離自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所即墨實(shí)驗(yàn)基地?zé)煵莶≈?經(jīng)鑒定確定為煙草黑脛病菌(0號(hào)小種),將該菌種置于燕麥培養(yǎng)基中培養(yǎng)保存(28℃,4d)。燕麥培養(yǎng)基配制:將30g燕麥于1000ml蒸餾水中煮沸,過濾,加入18g瓊脂,于120℃滅菌20min,備用。1.1.3供試藥劑。68%精甲霜·錳鋅水分散粒劑(瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司);50%烯酰嗎啉可濕性粉劑(巴斯夫歐洲公司);100萬孢子/g寡雄腐霉菌可濕性粉劑(捷克生物制劑股份有限公司)。1.2研究方法1.2.1供試藥劑對病原菌菌絲生長的影響。在預(yù)備試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選擇各藥劑對病菌菌絲生長抑制率在10%~90%范圍內(nèi)的5個(gè)濃度(濃度設(shè)置見表1)。將各藥劑分別用無菌水或有機(jī)溶劑配成一定濃度的母液,按照體積比1∶100的比例分別加入到已融化的培養(yǎng)基中,充分混勻后分別倒入4個(gè)滅菌的培養(yǎng)皿(Φ=90mm)中,制成系列濃度的含藥培養(yǎng)基,以加入等體積的無菌水或有機(jī)溶劑的平板為對照。用打孔器(Φ=5mm)截取在培養(yǎng)基上培養(yǎng)的待用病菌菌餅,菌絲面朝下接種于已經(jīng)凝固的含藥培養(yǎng)基中央,置于25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)黑暗培養(yǎng),3d后采用十字交叉法用直尺測量供試病菌在不同濃度含藥培養(yǎng)基上的菌落直徑,求其平均值,與對照比較計(jì)算各藥劑處理對菌落擴(kuò)展的生長抑制率,分析比較供試藥劑對供試病菌菌絲生長的影響。采用回歸分析法對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,將菌絲生長抑制率換算成幾率值,以各藥劑濃度對數(shù)值為橫坐標(biāo),抑制幾率為縱坐標(biāo),用直線回歸分析法計(jì)算出EC50。1.2.2田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)。試驗(yàn)選在湖南郴州桂陽方元基地進(jìn)行,選擇每年煙草黑脛病發(fā)病較重且均一的地塊。各藥劑處理設(shè)3個(gè)濃度,設(shè)空白對照,藥劑施用劑量見表2。于煙草黑脛病始發(fā)時(shí)進(jìn)行灌根處理,于黑脛病發(fā)病初期和第1次施藥后7d各施藥1次,50ml/株。小區(qū)面積30m2,隨機(jī)排列,重復(fù)4次。1.2.3調(diào)查方法。于第1次藥后第14、28天調(diào)查。每小區(qū)采用五點(diǎn)取樣法調(diào)查,共調(diào)查20株,記錄調(diào)查總株數(shù)和各級病株數(shù),計(jì)算病情指數(shù)和防治效果。調(diào)查發(fā)病分級標(biāo)準(zhǔn)參考《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥田間藥效實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)則(二)GB/T23222-2008》(表3)。1.2.4數(shù)據(jù)處理。采用DPS軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,防治效果采用新復(fù)極差測驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,并進(jìn)行差異顯著性分析。2生物農(nóng)藥寡雄腐霉菌對煙草黑測定結(jié)果的影響2.1供試藥劑對煙草黑脛病病菌菌絲生長的影響用生長速率法測定了烯酰嗎啉和寡雄腐酶菌對煙草黑脛病病原菌菌絲生長的抑制作用結(jié)果。在含不同濃度藥液的供試培養(yǎng)基上生長的煙草黑脛病菌絲受到不同程度的抑制,直線回歸分析結(jié)果見表4,藥液處理濃度和對菌絲生長的抑制率呈線性關(guān)系,寡雄腐酶菌EC50為0.113μg/ml;烯酰嗎啉EC50為0.713μg/ml。2.2田間試驗(yàn)結(jié)果由表5可見,藥后14d烯酰嗎啉204g/hm2(有效成分含量)對煙草黑脛病防治效果為50.53%,其他各處理防治效果均在60%以上。其中,精甲霜·錳鋅1224g/hm2(有效成分含量)和寡雄腐霉菌300g/hm2(有效成分含量)的防治效果分別為79.58%和79.54%。藥后28d,各藥劑防治效果均有所下降,其中防治效果較好的藥劑為精甲霜·錳鋅。生物農(nóng)藥寡雄腐霉菌也能顯著降低煙草黑脛病的發(fā)病率和病情指數(shù),顯示出良好的防治效果。寡雄腐霉菌對煙草黑脛病的防效可達(dá)60%以上,與化學(xué)農(nóng)藥精甲霜·錳鋅防效在5%顯著水平差異不顯著。3聯(lián)合防治的原則(1)生物農(nóng)藥寡雄腐霉菌能顯著降低煙草黑脛病的發(fā)病率和病情指數(shù),顯示出良好的防治效果(64.07%),與精甲霜·錳鋅(65.35%)差異不顯著,且略高于烯酰嗎啉(63.85%)。生產(chǎn)中可選擇寡雄腐霉菌菌敏感性較弱的化學(xué)農(nóng)藥進(jìn)行聯(lián)合防治,以達(dá)到更好的防治效果［5］。(2)由于甲霜靈、代森錳鋅及其混劑應(yīng)用時(shí)間較長,加之無節(jié)制的大量、連續(xù)應(yīng)用,田間煙草黑脛病菌已對其產(chǎn)生了不同程度的抗藥性［6］。目前,我國煙草生產(chǎn)上尚未使用烯酰嗎啉,故煙草黑脛病菌還未對其產(chǎn)生抗性。烯酰嗎啉是內(nèi)吸性殺菌劑,雖然作用方式獨(dú)特,但仍不可避免因其作用位點(diǎn)單一而易使病原菌產(chǎn)生抗藥性。長期使用對病原菌的作用位點(diǎn)單一的化學(xué)藥劑,易使病原菌產(chǎn)生抗藥性。延緩病原菌產(chǎn)生抗藥性的有效措施之一就是確定殺菌劑的作用機(jī)理,并將作用機(jī)制不同