藥物分析中藥制劑分析

第十四章中藥制劑分析 第十四章內(nèi)容 一 定義中藥制劑是根據(jù)藥典 制劑規(guī)范和其它規(guī)定的處方 將中藥的原料藥物加工制成具有一定規(guī)格 可以直接用于防病 治病的藥品 第一節(jié)概述 注意 中藥制劑必須是以中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論和用藥原則為指導(dǎo)制成的單方或復(fù)方制劑 中藥的成方制劑又稱為中成藥 同物異名同名異物 二 中藥制劑分析的特點(diǎn) 同物異名現(xiàn)象嚴(yán)重 重樓為百合科ParispolyphyllaSmith 的根莖又名七葉一枝花 蚤休 草河車拳參為蓼科PolygonumbistraL 的根莖又名草河車 生長環(huán)境 采收季節(jié)及部位差異 GAP中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 不同部位人參皂苷的含量 重量比 總皂苷含量 周皮6 92 60 韌皮46 63 04 木質(zhì)部46 50 31 五倍子鞣質(zhì) 70 槐米蘆丁 20 長春花長春新堿 百萬分之一 美登木美登木堿 千萬分之一 各種有效成分含量相差懸殊 3 中藥藥效的發(fā)揮是多種成分協(xié)同作用的結(jié)果 因此應(yīng)從整體上來控制中藥的質(zhì)量 成分復(fù)雜且大多數(shù)有效成分尚不十分清楚 例 三黃瀉心湯干浸膏 有效成分與濃縮干燥方法的關(guān)系 大黃酸葡萄糖苷41 151 696 8 小檗堿34 537 594 5 黃連堿6 312 093 7 黃岑苷77 477 698 5 丸 散 片 錠 合 酒 酊 膏 露 茶 栓 顆粒 糖漿等 劑型繁多 輔料干擾大 針對(duì)不同的劑型 采用相應(yīng)的方法進(jìn)行分離純化后測定 蠟丸蜂蠟蜜丸蜂蜜糊劑糯米粉 黃米粉曲劑發(fā)酵膠劑豆油 黃酒 冰糖 中國藥典 2000年版 一部 二十六種 丸劑膠劑膏藥顆粒劑滴眼劑散劑合劑露劑糖漿劑軟膏劑片劑酒劑茶劑滴丸劑注射劑錠劑酊劑搽劑膠囊劑滴鼻劑栓劑巴布膏劑橡膠膏劑氣霧劑噴霧劑煎膏劑 膏滋 流浸膏劑與浸膏劑 用藥材提取物制備的液體制劑 合劑 糖漿劑 酒劑 茶劑 酊劑滴鼻劑 滴眼劑 露劑 搽劑等 無植物組織與細(xì)胞 故無顯微鑒別 合劑系指藥材用水或其他溶劑 采用適宜方法提取 經(jīng)濃縮制成的內(nèi)服液體制劑 酒劑 酊劑 藥材用蒸餾酒提取制成的澄清液體制劑 藥物用規(guī)定濃度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液體制劑 一般檢查項(xiàng)目 軟膏 常用基質(zhì)油脂性 水溶性乳劑型 乳膏劑 藥物 藥材細(xì)粉 藥材提取物與適量基質(zhì)混合制成的半固體外用制劑 藥材提取液的濃縮液 煎膏劑 膏滋 流浸膏劑與浸膏劑 半流體或固體 無植物組織與細(xì)胞 故無顯微鑒別 藥材用水煎煮 去渣濃縮后 加煉蜜或糖制成的半流體制劑 應(yīng)無焦臭 異味 無糖結(jié)晶析出 藥材用適宜的溶劑提取 蒸去部分或全部溶劑 調(diào)整濃度至規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)而制成的制劑 1ml流浸膏 1g原藥材1g浸膏 2 5g原藥材 生產(chǎn)提取溶劑大多為水或稀醇 檢測時(shí)一般需經(jīng)有機(jī)提取后分析 對(duì)于流浸膏 有的測總固體量以控制其質(zhì)量 有效成分不明或無定量方法的 可測一定溶劑的浸出物含量 有效成分明確且有適當(dāng)方法 測定有效成分的含量 藥材提取物 藥材粉末加賦形劑 制備而成 丸劑 膠劑 顆粒劑 散劑 片劑 膠囊劑 錠劑 膠劑 茶劑 栓劑 有植物組織與細(xì)胞 可做顯微鑒別 指藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜的黏合劑或其他輔料制成球形或類球形制劑 分為蜜丸 水丸 水蜜丸 糊丸 濃縮丸 蠟丸 微丸等 裝量差異 按一次劑量分裝的 水分 重量差異 按丸或重量 溶散時(shí)限微生物限度 檢查項(xiàng)目 大蜜丸 小蜜丸 濃縮蜜丸 15 0 水蜜丸 濃縮水蜜丸 12 0 水丸 糊丸 濃縮水丸 9 0 高低 一種或多種藥材混合制成的粉末狀制劑 分內(nèi)服和外用散劑 取供試品適量置光滑紙上 平鋪約5cm2 將其表面壓平 在亮處觀察 應(yīng)呈現(xiàn)均勻的色澤 無花紋 色斑 藥材提取物與適宜輔料或藥材細(xì)粉制成的顆粒狀制劑 分為可溶性顆粒劑 混懸性顆粒劑 泡騰性顆粒劑 粒度 藥材提取物加藥材細(xì)粉或藥材細(xì)粉與適宜輔料混勻壓制而成的園片狀或異形片狀的制劑 分為浸膏片 半浸膏片和全粉片 硬膠囊劑軟膠囊劑腸溶膠囊劑 第二節(jié)中藥制劑分析的一般程序 提取純化 利用溶質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中溶解度的不同 使物質(zhì)從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中 將測定組分提取出來的方法 用于皂苷類 正丁醇 氯仿 乙醚 石油醚 醋酸乙酯 1 萃取溶劑的選擇 用于生物堿類 用于黃酮類 用于揮發(fā)油 2 水相pH的選擇 酸性成分比其pKa低1 2個(gè)pH單位 比其pKa高1 2個(gè)pH單位堿性成分 3 儀器和提取次數(shù) 4 酒劑和酊劑 先揮去乙醇 5 防止和消除乳化 分液漏斗 鑒別 1次 含量測定 3 4次 樣品置溶劑里 室溫下浸泡一段時(shí)間的提取方法 親脂性 親水性 石油醚苯氯仿乙醚乙酸乙酯丙酮乙醇甲醇水 樣品置有機(jī)溶劑中加熱回流的提取方法 通過更換溶劑 使提取更完全 樣品置有機(jī)溶劑中加熱 蒸發(fā)的溶劑經(jīng)冷凝流回樣品管的提取方法 適用于具揮發(fā)性的可隨水蒸氣蒸出的組分的測定 麻黃堿 檳榔堿 丹皮酚 揮發(fā)油 超聲波振蕩器 超聲波清洗器 簡便省時(shí)提取率高 利用超聲波的助溶作用進(jìn)行提取 原理超聲波在液體中以疏密相間的形式向物體輻射 出現(xiàn) 空化 現(xiàn)象 氣泡的形成 產(chǎn)生及破裂現(xiàn)象 形成超過1000個(gè)大氣壓的沖擊力 SFE法 當(dāng)壓力和溫度超過氣體的臨界點(diǎn)時(shí)所形成的單一相態(tài) 氣體 超臨界流體 氣體 T 壓力 T 壓力 SFE工藝流程 超臨界流體萃取與化學(xué)法萃取相比有以下突出的優(yōu)點(diǎn) 1 它具有與液體相似的密度 因而具有與液體相似的較強(qiáng)的溶解能力 2 溶質(zhì)在流體中的擴(kuò)散系數(shù)與氣體相似 具有傳質(zhì)快 提取時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn) 3 超臨界流體的表面張力為零 易滲透到樣品中 帶走測定組分 4 超臨界流體在通常狀態(tài)下為氣體 萃取后溶劑可立即變成氣體而逸出 易達(dá)到濃集的目的 6 CO2價(jià)格便宜 純度高 容易取得 且在生產(chǎn)過程中循環(huán)使用 從而降低成本 5 CO2是一種不活潑的氣體 萃取過程不發(fā)生化學(xué)反應(yīng) 且屬于不燃性氣體 無味 無臭 無毒 故安全性好 7 該技術(shù)易與其他儀器聯(lián)用實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化 1 萃取法 利用藥物與雜質(zhì)溶解性能的不同進(jìn)行分離 1 保留測定組分在柱上 洗去雜質(zhì) 再用適當(dāng)溶劑洗下組分 2 保留雜質(zhì)于柱上 鑒定有臨床療效的已知成分 黃連小檗堿 抗菌消炎 麻黃麻黃堿 支氣管哮喘 烏頭烏頭堿 毒性 洋地黃強(qiáng)心苷 強(qiáng)心 延胡索延胡索乙素 鎮(zhèn)痛 含生藥粉制劑 丸劑 片劑 膠囊劑 散劑 快速 簡便 覆蓋面大 1 水牛角濃縮粉 2 麝香 3 珍珠 4 朱砂 5 雄黃 6 黃連 7 梔子 8 郁金 9 黃芩 安宮牛黃丸 抗干擾能力差 顯色 熒光 TLC法 應(yīng)用最多 Rf 顏色 熒光 GC法 適用于含揮發(fā)性成分的藥物 HPLC法 常與含量測定同時(shí)進(jìn)行 陰 陽對(duì)照法 陽性對(duì)照將要鑒別的藥材按制劑工藝處理 再按鑒別方法提取的溶液 陰性對(duì)照把制劑中要鑒別的藥材除去 用剩下的各味藥按制劑工藝處理 再按鑒別方法提取的溶液 OOOOOOOOOO 例 陽性對(duì)照 陰性對(duì)照 樣品 大補(bǔ)陰丸黃柏的TLC法鑒別 例 薄層板的選擇 硅膠G板 可加0 3 0 5 CMC Na 多用 氧化鋁板 常用于生物堿類藥物 聚酰胺板 常用于黃酮類及酚類藥物 纖維素板 常用于氨基酸類藥物 定義 中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后 采用一定的分析手段 得到的能夠標(biāo)定該中藥材或中藥制劑特性的共有峰的圖譜 四 中藥鑒別新技術(shù) 中藥指紋圖譜 2 色譜指紋圖譜的基本屬性 模糊性強(qiáng)調(diào)分析 比較指紋圖譜的相似性 而不是完全相同 是一種綜合的 量化的色譜鑒別手段 整體性將指紋圖譜作為一個(gè)整體來分析和比較它的綜合特征以達(dá)到鑒別的目的 色譜指紋圖譜在中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)中能夠盡可能多地反應(yīng)中藥的全貌 不需要清楚每一個(gè)組分的化學(xué)結(jié)構(gòu) 不需要對(duì)每一個(gè)組分都進(jìn)行定量 只要求不同批號(hào)的同一種藥品的指紋圖譜保持一致 3 指紋圖譜的應(yīng)用 雅蓮 云蓮 味蓮 雅蓮 云蓮 I III II 訶子 小訶子 大訶子 絨毛訶子 人參須根 人參主根 不同產(chǎn)地高良姜的氣相指紋圖譜 指紋圖譜研究過程中的注意事項(xiàng) 1 在藥效學(xué)指導(dǎo)下進(jìn)行研究 保證指紋圖譜反映的化學(xué)成分包括中藥材中有效部位所含的絕大部分成分或有效成分的全部 2 樣品的預(yù)處理過程及測定方法應(yīng)簡便 經(jīng)濟(jì) 易行 且專屬性 準(zhǔn)確度與重現(xiàn)性好 水分總灰分和酸不溶性灰分重金屬砷鹽殘留農(nóng)藥 主要項(xiàng)目 雜質(zhì)來源及檢查意義 水分 結(jié)塊 霉變或有效成分水解 灰分 控制藥物本身及泥土 沙石等無機(jī)雜質(zhì) 砷鹽 劇毒 常由除草劑 殺蟲劑或化肥引入 重金屬 環(huán)境污染和使用農(nóng)藥引入 殘留農(nóng)藥 有毒 烘干法 不含或少含揮發(fā)性成分 甲苯法 含揮發(fā)性成分 減壓干燥法 含揮發(fā)性成分貴重藥 GC法 酸不溶性灰分的測定 總灰分的測定 干法破壞 ChP 濕法破壞 USP 堿融法破壞濕法破壞 中國藥典中藥制劑含量測定所占比例版本 19771 4819855 3119908 73199512 81200062 09 HPLC36 TLCS24 GC3 測定項(xiàng)目的選定原則 1首選君藥及貴重藥 劇毒藥建立含量測定方法2其次考慮臣藥及其他味藥3有效成分明確的 可選有效成分4成分類別清楚的 可測某一類總成分的含量 5檢測成分應(yīng)歸屬某單一藥味6檢測成分應(yīng)與中醫(yī)用藥的功能主治相近7確無法含量測定的 可測定浸出物含量 重量分析法容量分析法 特點(diǎn)A 準(zhǔn)確度 精密度高B 抗干擾能力差 UV法比色法 特點(diǎn)A 靈敏度高B 簡便 快速C 精密度稍低D 干擾多 蘆丁 黃芩苷 小檗堿 丹皮酚 測定薄層板上斑點(diǎn)對(duì)單色光的吸收或反射的強(qiáng)度而進(jìn)行定量的方法 特點(diǎn)A 分離效果好B 適用于無法用UV HPLC法測定的組分C 準(zhǔn)確度 精密度低于HPLC 2000年版中國藥典 2000年版 薄層掃描法品種 品種數(shù)量TLCS數(shù)量占總數(shù) 534 藥材 203 74458 成藥 326 99978 總數(shù) 5210 73 1 薄層色譜條件 分離好不拖尾 2 檢測方法 吸收測定法熒光測定法 反射法透射法 3 掃描方式 單波長雙波長 線性掃描法鋸齒掃描法 外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法 4 散射參數(shù)SX 薄層板的散射使 Kubelka Munk方程 1 薄層板均勻 平整 2 點(diǎn)樣量準(zhǔn)確 4 顯色劑均勻 適當(dāng) 5 保護(hù)斑點(diǎn)用相同大小潔凈玻璃蓋住薄層板 并用透明膠紙封住邊緣 以起固定和隔絕空氣作用 3 斑點(diǎn)應(yīng)完全分離 不拖尾 外標(biāo)法 兩點(diǎn)校正法 RP HPLC PIC 反離子氫氧化四丁基銨 色譜柱ODS RP PIC 反離子烷基磺酸鹽無機(jī)陰離子 外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法 離子對(duì)色譜法 PIC 極性流動(dòng)相中加入離子對(duì)試劑 與被分析離子生成中性離子對(duì) 從而增加在非極性固定相中的溶解度 使分配系數(shù)增大 2000年版中國藥典 2000年版 HPLC法品種 品種數(shù)量HPLC數(shù)量占總數(shù) 534 藥材 5410 11458 成藥 4810 48978 總數(shù) 10220 59 應(yīng)用實(shí)例 小青龍合劑 處方 麻黃125g桂枝125g白芍125g干姜125五味子125g細(xì)辛62g甘草 蜜炙 法半夏188gNOTES 合劑是在傳統(tǒng)湯劑基礎(chǔ)上改進(jìn)后的一種新劑型 生物堿 桂皮醛 芍藥甙 揮發(fā)油 三萜皂甙 應(yīng)用實(shí)例 小青龍合劑 制法 以上八味 細(xì)辛 桂枝提取揮發(fā)油 蒸餾后的水溶液另器收集 藥渣與白芍 麻黃 五味子 甘草加水煎煮至味盡 合并煎液 濾過 濾液和蒸餾后的水溶液合并 濃縮至約1000ml 法半夏 甘姜照流浸膏劑項(xiàng)下滲漉法 用70 乙醇作溶劑 浸漬24小時(shí)后進(jìn)行滲漉 漉液濃縮 與上述藥液合并 靜置 濾過 濾液濃縮至1000ml 加入苯甲酸鈉3g與細(xì)辛 桂枝揮發(fā)油 攪勻 即得 性狀 本品為棕黑色的液體 氣微香 味甜 微辛 功能與主治 解表化飲 止咳平喘 用于風(fēng)寒水飲 惡寒發(fā)熱 無汗 喘咳痰稀 用法與用量 口服 一次10 20ml 一日3次 用時(shí)搖勻 方藥分析 君麻黃 發(fā)汗為君臣桂枝 解表為臣佐甘草 恐發(fā)汗太過 佐以甘草緩之使白芍 干姜 細(xì)辛 法半夏 五味子 幾藥合力共為使 可外發(fā)汗 內(nèi)行水 散表里之邪 漢代張仲景 傷寒論 小青龍湯近代由重慶桐君閣中藥廠該湯劑為合劑本方治療傷寒表不解 心下有水氣 干嘔 發(fā)熱而咳 近代也用于慢性支氣管炎 支氣管哮喘 肺氣腫 均見咳 喘 痰白清稀者 供試品溶液與陰性對(duì)照液的制備 取合劑10ml 石油醚分3次萃取 合并石油醚萃取液 油層 濃縮至1ml 為供試品溶液A 水層 用Na2CO3調(diào)PH11 12 用氯仿萃取 合并氯仿萃取液 回收氯仿至干 殘?jiān)?ml甲醇溶解 為供試品溶液B NOTES 陰性對(duì)照液如上法同步進(jìn)行 1 桂皮醛的鑒別取供試品液A 陰性對(duì)照液 桂皮醛對(duì)照液 1ug ml 15ul 點(diǎn)于同一硅膠G板上 環(huán)己烷 乙酸乙酯 17 3 展開 晾干 噴2 4 二硝基苯肼乙醇T S 供試品A與對(duì)照品在相應(yīng)位置上顯相同的橙色斑點(diǎn) 而陰性對(duì)照液無此斑點(diǎn) 2 細(xì)辛揮發(fā)油的鑒別取供試品液A 陰性對(duì)照液 細(xì)辛揮發(fā)油對(duì)照液 1 10乙醚液 5ul 點(diǎn)于同一硅膠G板上 環(huán)己烷展開 晾干 噴10 香草醛濃硫酸T S 加熱至顯色 供試品A與對(duì)照品在相應(yīng)位置上顯相同的粉紅色斑點(diǎn) 而陰性對(duì)照液無此斑點(diǎn) 3 麻黃堿的鑒別取供試品液B 陰性對(duì)照液 麻黃堿對(duì)照品液 1mg ml 各5ul 點(diǎn)于同一硅膠G 氯仿 甲醇 濃氨水 20 5 0 5 展開 晾干 噴茚三酮T S 加熱至斑點(diǎn)顯色 供試品B與對(duì)照品在相應(yīng)位置上顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn) 而陰性對(duì)照液無此斑點(diǎn) 取合劑5ml 上聚酰胺柱 DW洗脫 洗脫液水浴濃縮至干 用1ml甲醇溶解 為供試品溶液C 聚酰胺柱再用95 乙醇洗脫 棄取洗脫液 用3M氨乙醇液洗脫 收集洗脫液水浴蒸干 1ml甲醇溶解 為供試品溶液D 4 芍藥甙的鑒別取供試品液C 陰性對(duì)照液 芍藥甙對(duì)照液 1mg ml 10ul 點(diǎn)于同一硅膠G板上 氯仿 乙酸乙酯 甲醇 冰醋酸 甲酸 8 1 2 0 04 展開 晾干 噴10 硫酸乙醇液 加熱至顯色 供試品C與對(duì)照品在相應(yīng)位置上顯相同的紫色斑點(diǎn) 而陰性對(duì)照液無此斑點(diǎn) 5 甘草酸的鑒別取供試品液D 陰性對(duì)照液 甘草酸銨對(duì)照液 2mg ml 2ul 點(diǎn)于同一硅膠G板上 乙酸乙酯 甲酸 冰醋酸 蒸餾水 30 2 2 4 展開 晾干 噴10 硫酸乙醇液 加熱至顯色 UV燈365nm觀察 供試品D與對(duì)照品在相應(yīng)位置上顯相同的紫色斑點(diǎn) 而陰性對(duì)照液無此斑點(diǎn) 含量測定 HPLC法測定芍藥甙的含量儀器與色譜條件BECKMAN332型高效液相色譜儀163型可變波長紫外檢測儀 220nm427型記錄及數(shù)據(jù)處理儀色譜柱為YWGC18流動(dòng)相乙腈 水 15 85 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精密稱取芍藥甙5 08mg 溶于水至50ml量瓶中 定容 分別吸取0 50 1 00 1 50 2 00ml于10ml量瓶中定容 回收率測定精密吸取除去白芍制成的合劑 即陰性對(duì)照液 0 3ml與適量芍藥甙對(duì)照品液 通過0 5g聚酰胺柱 用水洗脫至50ml量瓶中至刻度 依前述條件測定 平均回收率為99 42 RSD為0 23 n 3 樣品測定取自制小青龍合劑搖勻 用濾紙過濾 精密吸取0 3ml濾液通過聚酰胺柱 以不同回收率測定條件進(jìn)行測定 分析實(shí)例 萬氏牛黃清心丸 處方 牛黃10g朱砂60g黃連200g黃芩120g梔子120g郁金80g 分析實(shí)例 萬氏牛黃清心丸 制法 以上六味 除牛黃外 朱砂水飛或粉碎成極細(xì)粉 其余黃連等四味粉碎成細(xì)粉 將牛黃研細(xì) 與上述粉末配研 過篩 混勻 每100g粉末加煉蜜100 200g制成大蜜丸 即得 古方為糊丸 亦有水丸 性狀 本品為紅棕色至棕褐色的大蜜丸 氣特異 味甜 微澀 苦 功能主治 清熱解毒 鎮(zhèn)驚安神 用于熱邪內(nèi)閉 煩躁不安 神昏譫語 小兒高熱驚厥 方藥分析 本方來源于明 痘疹世醫(yī) 心法 本方為清心開竅劑 主治熱邪內(nèi)陷心包所致竅閉神昏癥 方中牛黃 清心解毒 豁痰開竅為君藥 黃連 黃芩 梔子清熱瀉火 為臣藥 朱砂清心 重鎮(zhèn)安神 郁金行氣開竅共為佐使藥 合用以奏透邪瀉熱 開竅安神之效 方藥分析 牛黃 清熱解毒藥 主含膽酸類成分 黃連 清熱燥濕藥 主要為小檗堿 黃芩 清熱燥濕藥 主要為黃酮類 梔子 清熱瀉火藥 主含梔子甙 朱砂 安神藥 主含硫化汞 HgS 郁金 活血去瘀藥 主含揮發(fā)油 鑒別 顯微鑒別郁金 糊化淀粉團(tuán)塊幾乎無色 梔子 種皮石細(xì)胞 黃芩 纖維淡黃色 梭形 厚壁 孔溝細(xì) 黃連 纖維鮮黃色 壁稍厚 紋孔明顯 朱砂 不規(guī)則塊狀物或顆粒狀物 暗紅棕色 鮮紅色或棕黃色 郁金 糊化淀粉團(tuán)塊梔子 種皮石細(xì)胞黃芩 纖維黃連 纖維朱砂 不規(guī)則塊狀物或顆粒狀物 暗紅棕色 鮮紅色或棕黃色 化學(xué)鑒別 1 朱砂的鑒別取本品3g 加水適量 研勻 反復(fù)洗去懸浮物 可得少量朱紅色沉淀 取出 加入鹽酸1ml及銅片少量 加熱煮沸 銅片由黃色變?yōu)殂y白色 HgS 2HCl Cu CuCl2 Hg H2SNOTES 在酸性條件下 朱砂與銅片發(fā)生置換反應(yīng)析出金屬汞 在銅片表面形成銀白色汞齊 2 人工牛黃的鑒別取本品 剪碎 加硅藻土0 6g 研勻 加氯仿10ml 冰醋酸0 5ml 加熱回流30min 放冷 濾過 濾液蒸干 殘?jiān)右掖?ml使溶解 濾過 濾液作為供試品溶液 膽酸和豬去氧膽酸加乙醇制成1ml含1mg的混合溶液 作為對(duì)照品溶液 TLC法CMC Na 硅膠G展開劑醋酸乙酯 正己烷 醋酸 甲醇 32 6 1 1 顯色劑10 磷鉬酸乙醇液 1100C 10min 人工牛黃 供試品 牛黃空白 豬去氧膽酸 膽酸 3 黃芩的鑒別供試品溶液的制備 取本品3g 剪碎 加硅藻土0 5g 研勻 加甲醇20ml 加熱回流1hr 放冷 濾過 濾液作為供試品溶液 對(duì)照品溶液的制備 黃芩甙對(duì)照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液 作為對(duì)照品溶液 TLC法CMC Na 硅膠G 4 醋酸鈉 展開劑醋酸乙酯 丁酮 甲酸 水 5 3 1 1 顯色劑2 三氯化鐵乙醇液 使斑點(diǎn)更為集中 OH與Fe 3絡(luò)合 黃芩甙 供試品 黃芩空白 4 梔子的鑒別供試品溶液的制備 取本品3g 加乙醚15ml 研磨 棄去乙醚 殘?jiān)鼡]干乙醚 加醋酸乙酯30ml 加熱回流1hr 放冷 濾過 濾液蒸干 殘?jiān)蛹状?ml溶解 濾過 濾液作為供試品溶液 對(duì)照品溶液的制備 梔子甙對(duì)照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液 作為對(duì)照品溶液 TLC法CMC Na 硅膠G展開劑醋酸乙酯 丙酮 甲酸 水 10 7 2 0 5 顯色劑10 硫酸乙醇1050C 10min 梔子甙 供試品 梔子空白 5 黃連的鑒別供試品溶液的制備 取含量測定項(xiàng)下剩余的鹽酸 甲醇提取液4ml 水浴蒸干 殘?jiān)蛹状既芙?使成1ml作為供試品溶液 對(duì)照藥材溶液的制備 黃連對(duì)照藥材50mg 加甲醇10ml 回流加熱15min 濾過 濾液蒸干 殘?jiān)蛹状?ml使溶解 作為對(duì)照藥材