RNA的結(jié)構(gòu)-課件PPT

1、第四章 RNA的結(jié)構(gòu)1957年由Crick提出NHNHOOOHHO HHO HO HHH O C H2H O C H2OHHO HHHO HHD-核糖 D-2-脫氧核糖NHNHOO調(diào)節(jié)蛋白與乳糖操縱子的結(jié)合模型 5端有甲基化的“帽子”結(jié)構(gòu)動(dòng)物細(xì)胞核糖體rRNA有四類：5SrRNA，5.8SrRNA，18SrRNA，28SrRNA。許多rRNA的一級結(jié)構(gòu)及由一級結(jié)構(gòu)推導(dǎo)出來的二級結(jié)構(gòu)都已闡明，但是對許多rRNA的功能迄今仍不十分清楚。T. Cech S. Altman 先是GTP進(jìn)入G結(jié)合位點(diǎn)，左邊外顯子的3端通過和引導(dǎo)序列的互補(bǔ)配對進(jìn)入底物位點(diǎn)。GTP的3-OH作用左邊外顯子和內(nèi)含子交界處的磷

2、酸二酯鍵，本身結(jié)合到內(nèi)含子的5末端，被切下的5外顯子仍保持在底物位點(diǎn)上，并未游離。第二步內(nèi)含子的G414（即3交界序列上的G）又進(jìn)入了G-結(jié)合位點(diǎn)，切下的外顯子的3-OH又對G-結(jié)合位點(diǎn)上的G與3外顯子之間的磷酸二酯鍵發(fā)動(dòng)親核進(jìn)攻，切開磷酸二酯鍵，而其3-OH和3外顯子的P重新形成磷酸二酯鍵而連接起來，這樣就完成內(nèi)含子的剪接。內(nèi)含子成為線形的413nt的RNA分子。第三步，內(nèi)含子5端和引導(dǎo)序列相鄰的序列通過引導(dǎo)序列互補(bǔ)配對，進(jìn)入底物位點(diǎn)。仍然留在G結(jié)合位點(diǎn)上的G414其3-OH再作用底物位點(diǎn)上的序列，切下19nt的內(nèi)含子5端，并和余下內(nèi)含子的5-P形成二酯鍵，形成414nt的環(huán)狀內(nèi)含子。II型

3、內(nèi)含子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) NoImageII型內(nèi)含子的剪切機(jī)制 核mRNA剪切過程 圖13-31 U1和內(nèi)含子5的互補(bǔ)對剪切是重要的 Ribozyme有兩種合成途徑，即體外合成和體內(nèi)合成，相應(yīng)的，Ribozyme進(jìn)入細(xì)胞的方式也有兩種：2.1 體外合成Ribozyme然后導(dǎo)入細(xì)胞體外合成Ribozyme有兩種方法：一是用DNA/RNA合成儀直接合成；二是先合成雙鏈或單鏈模版，然后用T7RNA聚合酶合成Ribozyme。合成的Ribozyme如何被有效的導(dǎo)入細(xì)胞是一個(gè)一直探討的問題。由于天然存在的受體只能運(yùn)輸小于20個(gè)核苷酸的片段，而通常的Ribozyme分子約為50個(gè)核苷酸，所以這個(gè)途徑只適用于將催化分子分成兩段合成，每段都小于20個(gè)核苷酸，導(dǎo)入細(xì)胞后，再分別與底物結(jié)合形成所需要的二級結(jié)構(gòu)，顯然，這種途徑有很大的局限性。（1）HIV2021/8/26123NoImage 剛才的發(fā)言，如剛才的發(fā)言，如有不當(dāng)之處