VP-GY-0330-A(1車間)環(huán)境消毒再驗證方案

1、文件編號：VP-GY-0330版本號：A頁碼：18 of 37文件題目：一車間環(huán)境消毒方法及效果再驗證方案 文件名稱一車間環(huán)境消毒方法及效果再驗證方案文件編號VP-GY-0330版本號A版所屬部門小容量注射劑車間（一車間） 驗證類型周期驗證2015年7月文件審核及批準：部門姓名簽名日期起草人驗證部審核人驗證部審核人小容量注射劑車間審核人化驗室QA審核質(zhì)量保障部批準人質(zhì)量負責人備注目 錄1. 目的-32. 范圍-3 3. 驗證小組成員與職責-34. 概述-45. 前提條件-136. 再確認-157. 附錄-368. 驗證總結(jié)-371.目的確認小容量注射劑車間（一車間）潔凈區(qū)環(huán)境在現(xiàn)有規(guī)定的消毒方

2、法下，能降低或減少微生物數(shù)量，使之達到安全或本廠規(guī)程的安全水平，保持潔凈區(qū)相應的級別。2.范圍適用于小容量注射劑車間（一車間）潔凈區(qū)消毒的周期性再驗證。驗證地點為：小容量注射劑車間（一車間）潔凈區(qū)3.驗證小組成員與職責驗證職務姓名所在部門職務本驗證工作中職責組長質(zhì)量保障部副廠長負責驗證方案和報告的審核與批準，保證驗證正常運行提供必要的資源。組員質(zhì)量保障部副經(jīng)理（QA）負責驗證方案和報告的審核，協(xié)調(diào)安排驗證過程中QA相關(guān)工作。組員小容量注射劑車間主任負責驗證方案和報告的審核，協(xié)調(diào)安排驗證過程中生產(chǎn)的執(zhí)行。組員驗證部經(jīng)理驗證方案和報告的審核，組織驗證實施組員驗證部職員制定驗證方案，人員培訓，驗證報

3、告整理；現(xiàn)場臭氧濃度監(jiān)測組員 質(zhì)量保障部現(xiàn)場QA現(xiàn)場操作監(jiān)督；挑戰(zhàn)性測試時測試皿放置、取樣及送樣組員化驗室QC測試用菌液、培養(yǎng)皿制備；試驗菌片轉(zhuǎn)移及培養(yǎng)檢測組員 小容量注射劑車間職員潔凈區(qū)空間環(huán)境消毒操作及記錄填寫組員小容量注射劑車間職員潔凈區(qū)表面擦拭消毒操作及記錄填寫4.概述本驗證方案中所述環(huán)境消毒方法分為空間環(huán)境消毒和表面擦拭消毒。4.1.潔凈區(qū)空間環(huán)境消毒 小容量注射劑車間（一車間）潔凈區(qū)空間環(huán)境消毒方法為周期性（每月）的甲醛薰蒸和生產(chǎn)期間（每天）在生產(chǎn)結(jié)束后進行臭氧消毒。4.1.1.甲醛薰蒸消毒法甲醛其水溶液俗稱福爾馬林（formalin）。殺菌性能的原因主要是構(gòu)成生物體（包括細菌）本

4、身的蛋白質(zhì)上的氨基能跟甲醛發(fā)生反應。由于其有特殊的刺激氣味，對人眼、鼻等有刺激作用,且有一定毒性，故僅作為周期性的空間環(huán)境消毒劑。參考藥品生產(chǎn)驗證指南2003，規(guī)定使用量見下表：空調(diào)區(qū)域潔凈級別甲醛含量使用量（ml）加水量（ml）JK2-1機組灌封A/B36%50001250JK2-2機組洗瓶D3000750JK2-3機組配料C40001000消毒流程（空調(diào)機組為消毒模式，內(nèi)置自動程序）：流程操作空調(diào)消毒模式運行參數(shù)氣化甲醛溶液加入氣化罐，蒸氣電磁閥設3小時，開啟氣化罐與空調(diào)機組管閥，經(jīng)風管送入各潔凈室。新風閥開度0，風機頻率30Hz（JK2-3風速頻率32Hz），回風閥開度50。熏蒸甲醛蒸氣

5、全部進入潔凈區(qū)后，關(guān)閉空調(diào)機組風機。悶熏7小時。置換開啟空調(diào)機組，置換不少于2小時。新風閥開度100，風速正常，排風機開，回風閥關(guān)至最小。結(jié)束空調(diào)機組轉(zhuǎn)為正常模式消毒周期：每月。環(huán)境殘留接受限度：0.08mg/m3注：甲醛濃度換算1ppm1.3mg/m34.1.2.臭氧消毒法臭氧是一種廣譜高效滅菌劑，具有強烈殺菌消毒作用。在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧（O2）和單個氧原子（O），后者具有很強的活性，對細菌有極強的氧化作用，臭氧氧化分解了細菌內(nèi)部葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會自行重新結(jié)合成為氧分子（O2），不存在任何有毒殘留物，為無污染消毒劑。參考

6、中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T 3672012（醫(yī)療機構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范）“C.7.2.1空氣消毒 采用20mg/ m3濃度臭氧，作用30分鐘，對自然菌殺滅率90%以上，消毒后通風30分鐘以上人員方可進入”“C.7.2.2物體表面消毒 相對濕度70%，采用60 mg/ m3濃度的臭氧，作用60120分鐘”，“有人情況下室內(nèi)允許臭氧濃度0.16mg/m3.”。設定本廠臭氧消毒參數(shù)如下表示：臭氧發(fā)生器安裝位置所屬區(qū)域潔凈級別臭氧濃度消毒時間初始電流DFY-K120BJK2-2送風段洗瓶區(qū)D級10m31.5小時2.6ADFY-K120BJK2-3送風段配料區(qū)C級30m32小時3.4ADFY-K80B

7、JK2-1送風段灌封區(qū)A/B級40m32小時4.6A消毒時空調(diào)機組運行模式（值班模式）參數(shù)：機組風速（m/s）風機頻率（Hz）新風閥開度（%）回風閥開度（%）JK2-138.510050JK2-23010050JK2-33010050消毒周期：每天生產(chǎn)結(jié)束后。環(huán)境殘留按受限度：0.16mg/m3。注：臭氧濃度換算1ppm2mg/m3。4.2.潔凈區(qū)環(huán)境表面消毒環(huán)境表面消毒：采用消毒劑對潔凈區(qū)表面包括墻面、地面、天頂、門、設備外表面等進行人工擦拭方法。消毒周期：周期對象消毒劑每日生產(chǎn)結(jié)束后臺面、門窗、墻面、地面、用具、附屬裝置、設備操作臺面及外表面。3%過氧化氫、75%乙醇每生產(chǎn)周期（2周）結(jié)束

8、后日清潔對象；天頂、探頭、報警器、燈罩、層流罩消毒劑配制（10000ml配制量）及使用周期：消毒劑名稱配制使用3%過氧化氫35%過氧化氫860ml，加注射用水至10000ml。每月輪換交替使用75%乙醇95%乙醇7895ml，加注射用水至10000ml。4.3.參考資料中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T 3672012（醫(yī)療機構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范）國家食品藥品監(jiān)督管理局認證管理中心藥品GMP指南 2011 藥品生產(chǎn)驗證指南 2003GB/T18883-2002室內(nèi)空氣質(zhì)量標準5.前提條件5.1.文件確認檢查與確認驗證該系統(tǒng)所需的相應的操作規(guī)程是否已經(jīng)具備，且經(jīng)審核批準后按要求發(fā)放。文件確認表文件編號

9、文件名稱存放地點檢查情況SOP-ZL-1001環(huán)境監(jiān)測管理規(guī)程質(zhì)量、崗位SOP-ZL-1003沉降菌測試標準操作規(guī)程質(zhì)量、崗位SMP-ZL-0017注射劑車間環(huán)境監(jiān)測管理程序質(zhì)量、崗位SOP-XR-0004潔凈室環(huán)境消毒（一車間）標準操作規(guī)程質(zhì)量、崗位SOP-XR-0003空調(diào)凈化系統(tǒng)標準操作規(guī)程（一車間）質(zhì)量、崗位SOP-GY-5024潔凈區(qū)清潔衛(wèi)生標準操作規(guī)程質(zhì)量、崗位SOP-GY-5018消毒液配制標準操作規(guī)程質(zhì)量、崗位確認人/日期：5.2.相關(guān)消毒設備設施確認檢查以下與消毒相關(guān)的設備設施，應已驗證合格或處于完好狀態(tài)編號名稱是否符合？VP-GY-0222一車間空調(diào)凈化系統(tǒng)再驗證（JK2-

10、1）是 否VP-GY-0223一車間空調(diào)凈化系統(tǒng)再驗證（JK2-2）是 否VP-GY-0224一車間空調(diào)凈化系統(tǒng)再驗證（JK2-3）是 否確認人/日期：5.3.驗證培訓確認確保驗證相關(guān)人員了解驗證方案，按照驗證方案經(jīng)行實施，并加強對驗證相關(guān)文件了解。培訓日期培訓內(nèi)容培訓人被培訓人VP-GY-0330(A)一車間環(huán)境消毒方法及效果再驗證方案楊光遠驗證小組成員審核人/日期：驗證培訓簽到記錄見附件一。5.4.檢測儀器設備確認確認驗證用檢測儀器均校驗合格且在校驗合格有效期內(nèi)。名稱型號用途校驗單位校驗結(jié)果有效期至固定式氣體檢測變送器MIC-500臭氧濃度檢測氣體檢測儀（甲醛）GT-901環(huán)境甲醛殘留檢測

11、確認人/日期：檢驗儀器計量證書見附件二。結(jié)論：上述前提條件均已完成，可以實施本次驗證？是 否簽名/日期6. 驗證內(nèi)容6.1.臭氧消毒測試確認目的：確認采用的規(guī)定臭氧消毒方法，能殺滅微生物至安全水平，使?jié)崈羰椅⑸锼椒弦?guī)定。檢測工具：MIC-500系列固定式氣體檢測變送器金黃色葡萄球菌菌液（50100CFU/ml）、90mm培養(yǎng)碟臭氧消毒流程：1、空調(diào)機組轉(zhuǎn)換成值班模式；2、分別設定并檢查一車間各個潔凈區(qū)域的消毒時間，開啟臭氧發(fā)生器。JK2-2送風段洗瓶區(qū)1.5小時JK2-3送風段配料區(qū)2小時JK2-1送風段灌封區(qū)2小時確認方法：1、臭氧消毒濃度及殘留監(jiān)測將MIC-500系列固定式氣體檢測變

12、送器放置在“最差條件”的潔凈室（JK2-1為器具存放室/211309；JK2-2為清洗器具室/210608；JK2-3為洗衣室/211016）進行臭氧濃度測試，通過數(shù)據(jù)連接線將潔凈區(qū)外的控制系統(tǒng)（電腦）與臭氧檢測儀進行連接，開始監(jiān)測。并在臭氧消毒程序完成2小時后，再次監(jiān)測臭氧濃度，以確認臭氧殘留。2、挑戰(zhàn)性試驗2.1、試驗用測試皿制備：2.1.1、配制金黃色葡萄球菌菌液，要求濃度為50100CFU/ml；2.1.2、吸取1ml菌液，滴入90mm培養(yǎng)碟，制成挑戰(zhàn)用測試平皿；2.2、將挑戰(zhàn)用測試平皿放入測試房間，每個測試房間放置2個。測試房間與“6.1”項“采樣點布置表”同。2.3、臭氧消毒結(jié)束后

13、，人員按照更衣要求，進入潔凈區(qū)，蓋上培養(yǎng)皿蓋后取出培養(yǎng)皿并對每個培養(yǎng)皿標注房間名稱及日期，交由QC澆注15ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，再倒置放在3035的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時。同時另取2個無菌培養(yǎng)皿和2個未經(jīng)臭氧消毒程序的挑戰(zhàn)用測試平皿作為空白和陽性對照。一同培養(yǎng)后檢查菌落生長情況。計算臭氧的殺滅率。殺滅率=（陽性對照菌落數(shù)挑戰(zhàn)后菌落數(shù)）/陽性對照菌落數(shù)×100%接受標準：1、 臭氧消毒程序中，達到規(guī)定的臭氧濃度持續(xù)時間應不少于60分鐘：JK2-1（灌封區(qū)）濃度40mg/m3；JK2-2(洗瓶區(qū))濃度10mg/m3；JK2-3（配料區(qū)）濃度30mg/m3。2、臭氧消毒結(jié)束2小時后，臭氧殘留限

14、度0.16mg/m3。3、檢查挑戰(zhàn)性測試平皿菌落數(shù)，臭氧殺滅率不小于90%。（注：臭氧濃度換算1ppm2mg/m3）測試結(jié)果：臭氧消毒效果確認項目接受標準檢查結(jié)果是否接受？JK2-1JK2-2JK2-3臭氧消毒流程與規(guī)定一致。是否臭氧濃度和持續(xù)時間JK2-1：40mg/m3，60分鐘JK2-2：10mg/m3 60分鐘JK2-3：30mg/m3 60分鐘 是否臭氧殘留檢測殘留濃度0.16mg/m3是否挑戰(zhàn)性測試臭氧殺滅率不小于90%是否確認人/日期：附件三：臭氧消毒記錄（表1）；臭氧濃度監(jiān)測記錄（表2）；挑戰(zhàn)性測試記錄（表3）；小結(jié)與評價：分析人/日期： 6.2.潔凈區(qū)表面微生物監(jiān)測確認目的：

15、確認潔凈區(qū)在采用擦試消毒和臭氧消毒后，其表面微生物水平符合規(guī)定。測試工具：55mm接觸碟潔凈區(qū)擦試消毒流程：按SOP-GY-5024 潔凈區(qū)清潔衛(wèi)生標準操作規(guī)程進行，按下表要求用潔凈抹布沾取消毒劑人工操作：對象消毒劑臺面、門窗、墻面、地面、用具、附屬裝置、設備操作臺面及外表面。3%過氧化氫、75%乙醇測試方法：1、采樣時間：按本車間實際生產(chǎn)情況是在生產(chǎn)結(jié)束后進行人工擦試清潔消毒，并在人工清潔后進行臭氧消毒。第二天進入下一輪生產(chǎn)周期。據(jù)此，模擬實際生產(chǎn)情況，在臭氧環(huán)境消毒后第二天進行采樣。2、用Rodac直接接觸法取樣，取樣時，將取樣部位直接與接觸碟接觸10秒鐘左右，確保全部瓊脂表面與取樣點表面

16、充分接觸。并做好采樣編號標記及記錄好培養(yǎng)基批號，同時取2個空白平板做陰性對照。采集完畢后，放培養(yǎng)箱中，30-35培養(yǎng)48小時，取出后計算菌落數(shù)。3、采樣點選?。涸趯嶋H生產(chǎn)中，易于接觸且接觸頻率高的點或區(qū)域相對風險較高，故驗證中遵循上述原則，設置取樣點位置如下：區(qū)域潔凈級別主操作間/房號采樣位置采樣數(shù)量（個）JK2-2洗瓶區(qū)D級洗瓶室/210610門把手（內(nèi)外各一）2洗瓶機（3臺）操作臺面、觸摸屏3+3遂道干燥滅菌機觸摸屏3電話機、墻壁1+1JK2-3配料區(qū)C級稀配室/211013 門把手（內(nèi)外各一）2配制罐外壁1電話機、墻壁1+1JK2-1灌封區(qū)B級灌封室/211308門把手（內(nèi)外各一）2電話

17、機、墻壁1+1灌封機觸摸屏、隔離門3+3按受標準：表面微生物平均值應符合下表規(guī)定：潔凈級別A級B級C級D級接觸（55mm） cfu /碟<152550測試結(jié)果：潔凈區(qū)表面微生物監(jiān)測確認區(qū)域潔凈級別平均值（cfu /碟）是否接受？JK2-2洗瓶區(qū)D級是否JK2-3配料區(qū)C級是否JK2-1灌封區(qū)B級是否匯總?cè)?日期：附件三：潔凈區(qū)微生物監(jiān)測記錄（表4）小結(jié)與評價：分析人/日期：6.3. 甲醛消毒方法及效果測試確認目的：確認采用的規(guī)定甲醛消毒方法，能殺滅微生物至安全水平。測試工具：枯草黑色變種芽孢生物指示劑(ATCC9372)菌片、90mm培養(yǎng)碟子、甲醛檢測儀消毒流程：按SOP-XR-0004

18、潔凈室環(huán)境消毒（一車間）標準操作規(guī)程進行消毒流程如下：1、打開氣化罐，加放規(guī)定量的甲醛和注射用水，關(guān)閉氣化罐；2、開啟蒸氣電磁閥并設置3小時，打開氣化罐至空調(diào)機組的氣化管閥（頂閥）；3、切換空調(diào)機組為消毒模式；4、加熱氣化3小時后，關(guān)閉空調(diào)，悶熏7小時。5、置換新風循環(huán)通風2小時。確認方法：1、生物挑戰(zhàn)性測試1.1、消毒開始前，取枯草黑色變種芽孢生物指示劑(ATCC9372)菌片，將菌片取出，置于培養(yǎng)皿內(nèi)，每個培養(yǎng)皿內(nèi)放置1片，然后將培養(yǎng)皿放置于潔凈室地面中央。按每個系統(tǒng)放置不少于3個，其中1個放置于系統(tǒng)末端所在房間（注：送風管末端，消毒時間相對較短，換氣次數(shù)小，屬最差條件），另2個放置主要操作房間。建立采樣點布置表如下：采樣點布置表車間區(qū)域潔凈級別采樣房間/房號采樣說明1車間JK2-2洗瓶區(qū)D級清洗器具/210608系統(tǒng)末端（最差條件）洗瓶/210610主要操作室走廊/210606主要操作室JK2-3配料區(qū)C級洗衣/211016系統(tǒng)末端（最差條件）稀配/211013主要操作室濃配/211012主要操作室JK2-1灌封區(qū)A/B級器具存放/211309系統(tǒng)末端（最差條件）灌封/211308主要操作室手消毒/211307主要操作室1.2、消毒完成后蓋好蓋子取出，以無菌技術(shù)接種于培養(yǎng)液內(nèi)，37培養(yǎng)48小時，并設