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文檔簡介

1、最新資料推薦選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)專題一1、發(fā)酵:利用微生物或其他生物的細(xì)胞在有氧或無氧條件下繁殖或積累其代謝產(chǎn)物的過程。類型:(1)根據(jù)是否需要氧氣分為:需氧發(fā)酵和厭氧發(fā)酵。(2)根據(jù)產(chǎn)生的產(chǎn)物可分為:酒精發(fā)酵、乳酸發(fā)酵、醋酸發(fā)酵等酵母菌是兼性厭氧微生物。在有氧條件下,酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,大量繁殖C6H12Q + 6Q- 6CO+ 6H2。在無氧條件下,酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵C6H12。6-2GH5。出2CQ酵母菌有氧呼吸時,產(chǎn)生能量多,可大量繁殖;無氧呼吸時,產(chǎn)生能量少,僅能滿足自身代謝, 基本不繁殖;所以利用酵母菌進(jìn)行工業(yè)生產(chǎn)時先進(jìn)行通氣再密封。2、20 c左右最適宜酵母菌繁殖酒精發(fā)

2、酵時一般將溫度控制在18 C-25 c3、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。4、醋酸菌是一種好氧細(xì)菌。當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源 時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。C2H5。出QfCHCOOHH2。5、醋酸菌最適生長溫度為3035 c。 6、酒精檢驗:果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生,可以用重銘酸鉀來檢驗。在酸性條件下,重銘酸鉀與酒精反應(yīng)呈

3、現(xiàn)灰綠色克,口筮 帚- .'1 ' '',I - .hi 料口a,二:;J7、裝置各部位的作用充氣口:在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進(jìn)行充氣。排氣口:排出酒精發(fā)酵時產(chǎn)生的CO2。出料口:是用來取樣的。與瓶身相連的長而彎曲的膠管:加水后防止空氣中微生物的污染。該裝置的使用方法:使用該裝置制酒時,應(yīng)該關(guān)閉充氣口;留 1/3的空間的目的是 防止發(fā)酵時汁液益出。制醋時,應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入氧氣(無菌空氣)8、過程:桃選新鮮的水果(如葡萄)"沖洗一榨汁一酒精發(fā)酵.醋酸果酒果醋9、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一

4、種絲狀真菌。10、原理:毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂 _ 肪水解為甘油和脂肪酸。一11、制作泡菜所用微生物是乳酸菌,乳酸菌是厭氧細(xì)菌。在無氧條件下,將葡萄糖分解為乳酸 。常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用"產(chǎn)酸奶。12、亞硝酸鹽檢測:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-奈基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。專題二1、培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為 液體培養(yǎng)基 和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊月近一制成瓊脂 固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特征可

5、以判斷是哪一種菌。2、按照培養(yǎng)基的 用途,可將培養(yǎng)基分為 選擇培養(yǎng)基 和鑒別培養(yǎng)基。在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱做選擇培養(yǎng)基 。鑒別培養(yǎng)基 是根據(jù)微生物的特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品(如剛果紅)配制而成的,用以鑒別不同類別的微生物。3、培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括 水、碳源、氮源和無機(jī)鹽 。4、培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。5、無菌技術(shù):獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,要注意以下幾個方面(選修一教材P15)6、消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部介微牛物(不包括芽狗和狗子

6、)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法還有化學(xué)藥劑消毒(如酒精、氯氣、石炭酸等)、紫外線消毒。7、滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽抱和抱子。滅菌方法有灼燒滅魚、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。8、微生物接種的方法最常用的是 平板劃線法 和稀釋涂布平板法。9、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收一。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后,才能被植物利

7、用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素,是因為他們能合成月尿酶。一io、纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即 G酶、Cxii而B萄糖甘酶,前兩種酶使 纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長提供營養(yǎng)。11、分離分解纖維素的微生物的實驗流程土壤取樣一選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定)一梯度稀釋一將樣品涂布到鑒別(剛果紅)纖維素分解菌的培養(yǎng)基上一挑選產(chǎn)生透明圈的菌落12、剛果紅(選修一 P28)專題三1、植物組織培養(yǎng)原理:植物細(xì)胞的全能性2、凝膠電泳法:13由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程,稱為

8、植物細(xì)胞的脫分化,或者叫做去分化 。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官,這個過程叫做再分化。再分化形成的試管苗,移栽到地里,可以發(fā)育成 完整的植物體。2、植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是 MS培養(yǎng)基,其中含有的大量元素,微量元素,有機(jī)物等。在配制好的 MS培養(yǎng)基中,常常需要添加 植物激素。接種前培養(yǎng)基需要用高壓蒸汽滅菌,外植體需要消毒(常用酒精 和氯化汞)消毒時既要考慮藥劑的消毒效果,又要考慮植物的耐受性。3、植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素 是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長素存在的情 況下,細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn) 加強(qiáng)趨勢。使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先生長素, 后細(xì)胞

9、分裂素有利于分裂但不分化先細(xì)胞分裂素, 后生長素細(xì)胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高一生長素/細(xì)胞分裂素比值與結(jié)果比值高時促根分化, 抑制牙形成比值低時促芽分化, 抑制根形成比值適中廠促進(jìn)愈傷組織生長4、進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng),每日用日光燈照射12h 。5、被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小徇子四分體時期、單核期(花藥離體培養(yǎng)選擇該時期)和雙核期等階段。6、通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株(即單倍體植株)一般有兩種途徑,這兩種途徑之間并沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比 (見第3條表格)。7、不同植物的誘導(dǎo)成功率很不相同。親本的生理狀況: 花期早期時的花藥比后期的更容易產(chǎn)?;ǚ壑仓?詵擇月季

10、的初花期。合適的花粉發(fā)育時期:一般來說,在 單核期靠邊期,花藥培養(yǎng)成功率最高。花蕾:選擇完全未開放的花蕾8、選擇花藥時,一般要通過 鏡檢來確定其中的花粉是否處于 單核期。確定花粉發(fā)育時期的最常用的方法是醋酸洋紅法,花粉細(xì)胞核染百足。某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色,需采用焙花青-銘磯法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色9、培養(yǎng)過程不需要光照,幼小植株形成后才需要光照。專題四1、果膠是植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分之一,不溶于水,在果汁加工中不僅會影響出汁率還會 使果汁渾濁。2、果膠酶是一類酶的總稱,包括多聚半乳糖醛酸酶,果膠分解酶和果膠酯酶等。果膠酶能夠分解果膠,瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層使榨取

11、果汁變得更容易,也使得渾濁的果汁變得澄清 。3、酶的活性與影響酶活性的因素(參考必修一P78-85注意實驗設(shè)計的一般原則,注意自變量、因變量、無關(guān)變量。選修一 P43-44)4、探討加酶洗衣粉的洗劑效果(1)加酶洗衣粉是指含有 酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素也,其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。(2)加酶洗衣粉可以降低表面活性劑和三聚磷酸鈉的用量,使洗滌劑朝低磷無磷方向發(fā)展,減少對環(huán)境的污染。4、酵母細(xì)胞的固定化(1)使用固定化酶技術(shù),將這種酶固定在一種顆粒狀的載體上,再將這些酶顆粒裝到一個反應(yīng)柱內(nèi),柱子底端裝上分布著許多小孔的篩板

12、。酶顆粒無法通過篩板的小孔,而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年, 大大降低了生產(chǎn)成本,提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。(2)固定化酶和固定化細(xì)胞 是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定 ,而細(xì)胞多采用包埋法固定化。固定化酶優(yōu)點: 酶能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,還可以被反復(fù)利用。固定化細(xì)胞優(yōu)點: 成本更低,操作更容易,可以催化一系列的化學(xué)反應(yīng)。專題五提取生物大分子的基本思路:是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大 分子。一、DNA的粗提取1、原理:(1)思路:DNA與RNA蛋白

13、質(zhì)和脂質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA除其它雜(2) DNA勺溶解性:DN府口蛋白質(zhì)等其它成分在不同的NaCl溶液中溶解度不同,利用這一特點,選用適當(dāng)?shù)臐舛染湍苁?DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。(3) DNA寸酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理(選修一P54)2、DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNAJf二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色。3、過程(選修一教材 P55-P56)二、多聚鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增 DN*段1. PCR全稱為多聚鏈?zhǔn)椒磻?yīng),它是指一種體外迅速擴(kuò)增 DN*段的技術(shù) 的實驗技術(shù)。2. PCR擴(kuò)增是在PCR自動擴(kuò)增儀中進(jìn)行的,具體反應(yīng)過程包括3個反應(yīng)步驟即 變也 復(fù)必 和延

14、伸。3. PCR體外擴(kuò)增 DNA的過程類似細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制的過程,兩者都需要 DNA模板,引物,四種脫氧核昔 St, DNA聚合酶 都需要能量,所不同的是體內(nèi)解鏈?zhǔn)强?DNA聚合酶,體外解鏈?zhǔn)强?查住,引物是一小段 DNA< RNA它能與DNA#鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對三、血紅蛋白的提取和分離蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別,由 此提取和分離各種蛋白質(zhì)。1、凝膠色譜法(分配色譜法):(1)原理:是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法,所用的凝膠實際上是一些微小的多孔性 球體,分子質(zhì)量 大的蛋白質(zhì)分子通過 多孔凝膠顆粒的間隙,路程短

15、,流動快:分子量 小的蛋白質(zhì)分子穿 過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長,流動慢 。相對分子質(zhì)量不的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。(2)分離過程:混合物上柱一洗脫一大分子流動快、小分子流動慢一收集大分子一收集小分子(3)作用: 分離蛋白質(zhì),測定生物大分子分子量,蛋白質(zhì)的脫鹽等。(1)原理:許多重要的生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸等,具有可解離的基團(tuán),在一定的PH下,這些基團(tuán)會帶上正電或負(fù)電。在電場的作用下這此帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動。電泳利用了待分離樣品中不同蛋白質(zhì)所 帶電荷性質(zhì)、電量、形狀和大小 不同,在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同,導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運動方向和運動速度不同。(2)

16、分離方法: 瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳( SDS)。(3)分離過程:在二一pH下,使蛋白質(zhì)基團(tuán)帶上正電或負(fù)電;加入帶負(fù)電荷多的SDS,形成“蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物”,使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小。專題六1、植物芳香油的提取方法有蒸儲、壓榨和萃取。2、水蒸氣蒸儲法是植物芳香油提取的常用方法。它的原理是利用水蒸汽將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來 形成油水混合物,冷卻后,混合物又會重新分出油層和水層。可分為水中蒸物、水上蒸一、水氣蒸會。 有些原料不適宜于水中蒸儲,如柑橘、檸檬等易焦糊,有效成分容易水解。通常用壓榨法。萃取法是將 粉碎、干燥 的植物原料用 有機(jī)溶劑 浸泡,使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中

17、的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑 后,只需蒸發(fā)出有機(jī)溶劑,就可以獲得純凈的植物芳香油。有機(jī)溶劑必須事先精制,除去雜質(zhì),否則會影響芳香油的品質(zhì)3、玫瑰精油的提取過程:玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,能隨水蒸汽一同蒸儲,可用水汽蒸儲法和萃取法提取。用于提煉玫瑰精油的玫瑰花要在花開的盛花期采收,在此階段花朵 含油最高。過慮玫 瑰 相 油加入NaCl :使油水混合物中油和水的分離,可用分液漏斗分離油層和水層。無水NaSO4:吸收油層中殘留的水分。4、橘皮精油的提?。洪倨ぞ偷闹饕煞质菣幟氏?,由于橘皮精油的有效成分在用水蒸汽蒸儲時會發(fā)生部分水解,使用水中蒸儲法又會產(chǎn)生原料含糊的問題,所以一般用壓柞法。操作流程見(選修一 P74)石灰水:能夠破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止壓榨時滑脫,提高出油率。5、胡蘿卜素的提取見(選修一 P77-79)胡蘿卜素化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,不溶于水,微溶于酒精 易溶于石油醍等有機(jī) 溶劑,因此可用萃取法提取。萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量,同量受到原料顆粒的大小,緊密程度、含水量、 萃取的溫度和時間等 的影響

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