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1、機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】 家兔 2機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】2機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【實(shí)驗(yàn)器材】兔手術(shù)臺(tái)、BL-420生物信息采集系統(tǒng)、Y型氣管插管、動(dòng)脈夾、動(dòng)脈插管、靜脈插管、注射器、紗布、棉線、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用手術(shù)器械一套、橡皮管、三通管、1%肝素、25%烏拉坦、生理鹽水3機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【實(shí)驗(yàn)器材】兔手術(shù)臺(tái)、BL-420生物信息采集系統(tǒng)、Y型氣管【實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理】通過(guò)腸系膜上動(dòng)脈結(jié)扎,即SMAO(Superior Mesentery Artery Occlusion)來(lái)阻斷部分腸的血液供應(yīng)一段時(shí)間后再恢復(fù)血流灌注,以復(fù)
2、制腸缺血/再灌注損傷的動(dòng)物模型,探討缺血/再灌注損傷的發(fā)生機(jī)制4機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理】通過(guò)腸系膜上動(dòng)脈結(jié)扎,即SMAO(Super組:持續(xù)缺血組 夾閉腸系膜上動(dòng)脈1h組:再灌損傷組 夾閉腸系膜上動(dòng)脈30min,再恢復(fù)血流30min 【實(shí)驗(yàn)分組】5機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷組:持續(xù)缺血組 【實(shí)驗(yàn)分組】5機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】1. 稱重2. 全麻(耳緣靜脈注射25%烏拉坦4ml/kg) 注意:從耳緣靜脈的遠(yuǎn)心端開(kāi)始注射,排盡氣泡,速度不宜太快 麻醉效果:角膜反射 基本消失,鉗夾家兔 舌頭無(wú)回收,四肢松軟6機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】1
3、. 稱重6機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷培訓(xùn)課件4.頸部正中切口行動(dòng)脈插管切口范圍:頸部正中,甲狀軟骨下緣胸骨上切跡,長(zhǎng)約5cm分離左側(cè)頸總動(dòng)脈:胸骨舌骨肌與胸鎖乳突肌之間深面的頸動(dòng)脈鞘內(nèi),與 氣管平行,顏色鮮紅、 較細(xì)、觸之有搏動(dòng)感, 長(zhǎng)約2-3cm,穿線備用8機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷4.頸部正中切口行動(dòng)脈插管分離左側(cè)頸總動(dòng)脈:胸骨舌骨肌與胸鎖注意:(1)鈍性分離 (2)辨清頸A鞘內(nèi)的血管神經(jīng)血管插管先結(jié)扎遠(yuǎn)心端,后夾閉近心端,剪口部位盡量靠近遠(yuǎn)心端,成45度角朝向近心端剪一小口,約為管徑的1/3-1/2,插管方向朝向近心端,插入1-1.5cm9機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺
4、血再灌注損傷注意:(1)鈍性分離先結(jié)扎遠(yuǎn)心端,后夾閉近心端,剪口部位盡量【插管的注意事項(xiàng)】插管內(nèi)事先應(yīng)加入少量肝素以防凝血;排凈氣泡,記錄前應(yīng)關(guān)閉三通管插管易滑脫,應(yīng)雙線固定,結(jié)扎牢靠勿使插管尖端與血管壁形成角度,避免刺破血管10機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【插管的注意事項(xiàng)】插管內(nèi)事先應(yīng)加入少量肝素以防凝血;排凈氣泡 5.腹部正中切口: 腹正中線自劍突下1.5cm起向下做5cm切口 6.尋找腸系膜上動(dòng)脈: 將家兔腹腔內(nèi)臟左移,找到齊右腎門(mén)對(duì)側(cè)垂直向腹主動(dòng)脈分出的腸系膜上動(dòng)脈,穿雙線備用,注意避免損傷其他血管(缺血再灌注夾閉時(shí)注意墊橡皮管) 7.記錄一段正常血壓曲線 8.復(fù)制腸缺血-再灌注模型,
5、輕輕提起腸系膜上動(dòng)脈的穿線,用動(dòng)脈夾夾閉,同時(shí)觀察各項(xiàng)生理指標(biāo)變化。 9.分組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)并記錄各項(xiàng)指標(biāo)。(組:夾閉腸系膜上動(dòng)脈1h 組:夾閉腸系膜上動(dòng)脈30min,再恢復(fù)血流30min)11機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷 5.腹部正中切口:11機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷腸系膜上動(dòng)脈示意圖12機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷腸系膜上動(dòng)脈示意圖12機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷13機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷13機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷14機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷14機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷1. 移動(dòng)內(nèi)臟時(shí),動(dòng)作要輕柔2. 分離腸系膜上A時(shí)需小心細(xì)致,不要使用銳利器械,以免損傷血管造成大出血3
6、. 腸系膜上A夾閉要徹底,缺血再灌注組結(jié)扎時(shí)注意墊橡皮管,恢復(fù)血流灌流(復(fù)流)要完全【注意事項(xiàng)】15機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷1. 移動(dòng)內(nèi)臟時(shí),動(dòng)作要輕柔【注意事項(xiàng)】15機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺【結(jié)果分析】 峰表示:結(jié)扎腸系膜上A 血管床容量 有效循環(huán)血量相對(duì)BP 壓力感受器 (+) 減壓反射BP 峰表示:松開(kāi)腸系膜上A 血管床容量有效循環(huán)血量相對(duì) BP升壓反射(再灌注損傷還未來(lái)得及發(fā)生)有時(shí)峰不出現(xiàn),BP直到死亡 血壓持續(xù)下降,有再灌注損傷16機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【結(jié)果分析】 峰表示:結(jié)扎腸系膜上A 血管床容量 有組:結(jié)扎BP BP趨于平穩(wěn)(相似于結(jié) 扎前),腸壁粉紅暗紅(淤血)腫脹(水腫
7、),無(wú)出血點(diǎn)組:結(jié)扎 BPBP趨于平穩(wěn)(機(jī)體自身調(diào)節(jié)) 再灌BP,腸壁暗紅、水腫、出血點(diǎn)BP低于正常1/2時(shí)休克 、組比較說(shuō)明:缺血損傷與 是不同的 損傷過(guò)程, 損傷過(guò)程,后者損傷更嚴(yán)重17機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷組:結(jié)扎BP BP趨于平穩(wěn)(相似于結(jié) 扎前),腸壁【典型結(jié)果】18機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【典型結(jié)果】18機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【結(jié)果不明顯可能存在的問(wèn)題】(1)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中是否發(fā)生了大血?(2)缺血是否完全?(3)再灌注是否通暢?(4)記錄結(jié)果時(shí)基線是否改變?(5)個(gè)體差異 19機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【結(jié)果不明顯可能存在的問(wèn)題】(1)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中是否發(fā)生了大血?【I/R的發(fā)生機(jī)制】(1)活性氧的作用 ) (2)鈣超載 ) (3)白細(xì)胞的作用 )(4)高能磷酸化合物生成障礙 )20機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【I/R的發(fā)生機(jī)制】(1)活性氧的作用 ) 20機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔(1)盡早恢復(fù)血流灌流,縮短缺血時(shí)間(2)再灌注時(shí)遵循低溫、低壓、低鈣的原則(3)清除
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